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DB21/T 遼寧省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布2009-12-01實施2009-10-23發(fā)布黃瓜綠斑駁花葉病毒防控技術(shù)規(guī)程DB21/T 1749.22009DB21遼寧省地方標準ICS備案號:IDB21/T 1749.22009前 言本標準附錄A為規(guī)范性附錄本標準由遼寧省農(nóng)村經(jīng)濟委員會提出并歸口。本標準起草單位:遼寧省植物保護站。本標準主要起草人:王文航、蔡明、宋雅坤、徐秀德、吳元華、劉大軍。I黃瓜綠斑駁花葉病毒防控技術(shù)規(guī)程1 范圍本標準規(guī)定了黃瓜綠斑駁花葉病毒(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)診斷、疫情報告、劃定區(qū)域、疫情處置、預(yù)防控制、防治效果評估的操作程序與技術(shù)標準。本標準適用于由黃瓜綠斑駁花葉病毒引致的西瓜病毒病的防控。2 術(shù)語和定義下列述語和定義適用于本標準。2.1地區(qū)area官方界定的一個國家,一個國家的一部分,或若干國家的全部或部分。2.2發(fā)生happen官方報道在一個地區(qū)存在著土生或傳入的有害生物,和/或官方未報道在一個地區(qū)存在的有害生物已經(jīng)被根除。2.3非疫區(qū)non-epidemic area科學(xué)證據(jù)表明,某種特定有害生物沒有發(fā)生并且官方能適時保持此狀況的地區(qū)。2.4有害生物pest任何對植物或植物產(chǎn)品有害的植物、動物或病原物的種、株(品)系或生物型。2.5監(jiān)測surveillance證實植物檢疫狀況的官方過程。2.6黃瓜綠斑駁花葉病毒疫情監(jiān)測(Surveillance for CGMMV)在發(fā)現(xiàn)或未發(fā)現(xiàn)黃瓜綠斑駁花葉病毒的地區(qū),為監(jiān)測疫情發(fā)生及消長動態(tài)情況而持續(xù)開展的檢疫行動。2.7調(diào)查investigation在一個地區(qū)內(nèi)為確定有害生物的種群特征或存在品種情況而在一定時期內(nèi)采取的有計劃行動。2.8寄主范圍host range在自然條件下能夠維持某種有害生物的植物品種。2.9監(jiān)測點surveillance site為掌握目標有害生物動態(tài)而設(shè)立的監(jiān)測地點。2.10緩沖區(qū)buffer area特定有害生物未發(fā)生或發(fā)生率低并加以官方防治、包圍非疫區(qū)且已經(jīng)為防止該有害生物的擴散而采取植物檢疫措施的地區(qū)。2.11突發(fā)break out一種被隔離的有害生物種群新近被發(fā)現(xiàn)并預(yù)期在近期內(nèi)將生存下去。2.12植物檢疫措施plant quarantine measure旨在防止檢疫性有害生物傳入和/或擴散的所有法律、法規(guī)或官方程序。2.13根除eradication應(yīng)用植物檢疫措施將一種有害生物從一個地區(qū)徹底消滅。2.14檢疫處理quarantine treatment旨在殺滅、鏟除有害生物或使其喪失繁殖傳播能力的官方許可的做法。3 疫情診斷3.1 田間性狀診斷3.1.1 葉片癥狀在植株的幼葉出現(xiàn)不規(guī)則的褪綠色或淡黃色,呈斑駁花葉狀,使綠色部分隆起葉面凸凹不平,葉緣向上翻卷,葉片略變窄細。葉片老化后癥狀逐漸不明顯,與健葉無大區(qū)別。3.1.2 果實癥狀病果表面出現(xiàn)濃綠色略圓的斑紋,有時可見壞死斑。果梗偶見褐色壞死條紋。果肉周邊近果皮部呈黃色水漬狀,種子周圍的果肉呈紫紅色或暗紅色水漬狀,果肉內(nèi)出現(xiàn)塊狀黃色纖維,逐漸成為空洞;成熟果果肉全變成暗紅色,內(nèi)有大量空洞呈絲瓜瓤狀,軟化,腐爛異味。3.2 實驗室檢測3.2.1 血清學(xué)技術(shù)(ELISA)檢測為陽性。3.2.2 分子生物學(xué)技術(shù)(RT-PCR)檢測為陽性。3.3 結(jié)果判定3.3.1 疑似結(jié)果 符合3.1.1和3.1.2,判定為疑似黃瓜綠斑駁花葉病毒病。3.3.2 確診符合本規(guī)程3.1.1和3.1.2,且符合本規(guī)程3.2.1或3.2.2之一的,判定為黃瓜綠斑駁花葉病毒病。4 疫情報告4.1 任何單位和個人發(fā)現(xiàn)黃瓜綠斑駁花葉病毒疑似疫情,應(yīng)及時向當?shù)刂参餀z疫機構(gòu)報告。4.2 當?shù)刂参餀z疫機構(gòu)在接到報告或了解疑似疫情后,應(yīng)立即派員到現(xiàn)場進行初步調(diào)查核實,符合本規(guī)程3.1.1和3.1.2規(guī)定的,判定為疑似疫情。4.3 判定為疑似疫情時,應(yīng)采集樣品進行實驗室診斷,符合本規(guī)程3.2.1或3.2.2之一的,判定為黃瓜綠斑駁花葉病毒。4.4 確認為黃瓜綠斑駁花葉病毒疫情時,應(yīng)及時將情況逐級報至省級植物檢疫機構(gòu)和農(nóng)業(yè)行政管理部門。省級農(nóng)業(yè)行政管理部門根據(jù)確診結(jié)果,按規(guī)定公布疫情。5 劃定區(qū)域5.1 劃定疫區(qū)發(fā)現(xiàn)新疫情后,各級農(nóng)業(yè)行政主管部門應(yīng)組織其所屬的植物檢疫機構(gòu),查清疫情發(fā)生范圍和危害程度,由省級農(nóng)業(yè)行政主管部門提出劃定疫區(qū)方案,報省級人民政府批準實施,并報農(nóng)業(yè)部備案。劃定發(fā)生區(qū)若遇河流和公路,應(yīng)以河流和公路為界,其他可根據(jù)當?shù)鼐唧w情況作適當?shù)恼{(diào)整。5.2 劃定不同類型的疫情發(fā)生區(qū)5.2.1 疫情發(fā)生點是指疫情發(fā)生所在的地點,發(fā)生范圍在一個田塊、一個大棚或一個自然村屯。5.2.2 局部疫情發(fā)生區(qū)是指疫情小范圍發(fā)生危害嚴重地區(qū),發(fā)生范圍在3個發(fā)生點以上,或以發(fā)生點為中心,邊緣向外延30Km范圍內(nèi)的區(qū)域。5.2.3 大范圍疫情發(fā)生區(qū)是指疫情大范圍發(fā)生危害嚴重地區(qū),發(fā)生范圍在5個發(fā)生點以上,或以發(fā)生點為中心,邊緣向外延100Km范圍內(nèi)的區(qū)域。6 疫情處置6.1 疑似疫情處置對瓜類發(fā)病點實施檢疫監(jiān)管,禁止瓜類種苗及其產(chǎn)品和有關(guān)生產(chǎn)資料調(diào)出,并對其棚內(nèi)環(huán)境實施嚴格的土壤和衛(wèi)生消毒處理。對瓜類果實和藤蔓等發(fā)病植株進行燒毀、深埋處理。6.2 確認疫情處置6.2.1 疫區(qū)采取封鎖措施由農(nóng)業(yè)行政管理部門向當?shù)乜h級以上人民政府申請發(fā)布封鎖令,對疫區(qū)(點)實施封鎖,在疫區(qū)周圍設(shè)置警示標志;在出入疫區(qū)的交通路口設(shè)置植物檢疫消毒站,對出入車輛和有關(guān)物品進行消毒;禁止植物及其植物產(chǎn)品運出疫區(qū)。必要時,經(jīng)省級人民政府批準,可設(shè)立臨時監(jiān)督檢查站,執(zhí)行監(jiān)督檢查任務(wù)。6.2.2 疫情發(fā)生點采取嚴格的根除措施對疫情發(fā)生點采取嚴格的檢疫根除措施,包括銷毀發(fā)病的瓜類植物及產(chǎn)品;嚴格禁止帶毒種苗調(diào)入調(diào)出;對被污染的土壤、物品、運輸工具、農(nóng)具、舊薄膜、繩子等進行徹底消毒。6.2.3 局部發(fā)生區(qū)采取嚴格檢疫監(jiān)管措施 6.2.3.1 產(chǎn)地檢疫重點對瓜類種苗繁育基地和瓜類集中種植區(qū)進行嚴格的產(chǎn)地檢疫,嚴防帶毒種苗生產(chǎn),做到及早發(fā)現(xiàn),及時處理。6.2.3.2 調(diào)運檢疫禁止從發(fā)病區(qū)調(diào)出瓜類種子和秧苗;瓜類產(chǎn)品外運時,嚴禁以葉片、藤蔓作鋪墊物和填充物,并經(jīng)植保檢疫部門檢疫合格后,簽發(fā)植物檢疫證書,方可外運;對調(diào)入的葫蘆科種子要進行復(fù)檢,發(fā)現(xiàn)疫情,及時處理。6.2.3.3 市場檢疫對發(fā)生區(qū)調(diào)入的瓜類種子、秧苗、果實等要進行復(fù)檢,嚴禁帶毒種子銷售,防止疫情擴散。6.2.3.4 引進種子檢疫嚴禁從疫區(qū)引進葫蘆科種子。從非疫區(qū)引進葫蘆科種子時,須經(jīng)植物檢疫機構(gòu)審批,限制引進數(shù)量,并要求不帶“黃瓜綠斑駁花葉病毒”,入境后須在指定地點隔離試種,跟蹤進行檢疫監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)疫情及時處理。6.2.4 大范圍疫情發(fā)生區(qū)采取綜合防控技術(shù)措施6.2.4.1 檢疫防控技術(shù)按本規(guī)程6.2.3執(zhí)行。6.2.4.2 種子處理對葫蘆科作物及其砧木種子(含水量4%以下)置于72恒溫下處理72h,檢查發(fā)芽率后浸種催芽或直接播種?;蛴脺販N,在播種前3d,將種子浸入5560的溫水攪拌浸種15min30min,用清水沖凈種皮粘液后晾干催芽?;蛴?0%磷酸三鈉溶液浸種20min30min,撈出后洗凈催芽。6.2.4.3 輪作倒茬種植葫蘆科作物要與非葫蘆科植物實行輪作倒茬3Y以上。6.2.4.4 農(nóng)事操作在嫁接、移栽、綁蔓、整枝、打杈等農(nóng)事操作過程中,對手和工具用脫脂奶粉磷酸三鈉、75%酒精或肥皂水消毒,防止人為交叉感染和傳播病毒。 6.2.4.5 田間管理科學(xué)合理施肥和灌水,避免大水漫灌和氮肥過量,防止病毒傳播,發(fā)現(xiàn)病株應(yīng)拔除,帶到田外焚燒或深埋處理。及時清除病植株、果實、莖葉及殘枝落葉,于田外進行深埋或集中焚燒處理。6.2.4.6 選用抗病品種禁止從發(fā)病區(qū)引種和發(fā)病地采種,選用抗病品種和高溫消毒的種子。6.2.4.7 土壤消毒對育苗地和已發(fā)病的地塊做好棚室的土壤消毒處理,可供選擇藥劑種類有:溴甲烷、氯化苦、熟石灰、石灰氮、硝石灰等。保護地育苗棚用溴甲烷土壤消毒處理,用藥量為30g/m240g/m2,棚室保持密封熏蒸48h72h,通風2d3d后,揭開薄膜14d以上,無味時,再播種或移栽定植;保護地在7月8月份高溫強光照射時,用麥秸500 kg1000kg/667m2,切成4cm6cm撒于地面,再均勻撒施石灰氮80kg100 kg或生石灰100kg200 kg或硝石灰100kg150kg,深翻、鋪膜、灌水、密封15d20d,再播種或移栽瓜苗。6.2.4.8藥劑防治在葫蘆科作物嫁接、移栽、整枝等農(nóng)事操作前,向作物葉面噴灑脫脂奶粉磷酸三鈉,以預(yù)防人為操作的傳播。定植后或發(fā)病初期噴施抗病毒藥劑進行預(yù)防和防治,目前尚無特效藥劑,可選擇低毒、低殘留農(nóng)藥,禁止使用劇毒、高毒農(nóng)藥。6.2.5解除封鎖在一年內(nèi)經(jīng)過連續(xù)多次監(jiān)測和普查,未發(fā)現(xiàn)新的疫情;在當?shù)刂参餀z疫機構(gòu)的監(jiān)督指導(dǎo)下,對土壤和物品實施消毒。經(jīng)當?shù)刂参餀z疫機構(gòu)審查合格,由當?shù)剞r(nóng)業(yè)行政管理部門提出申請,由原發(fā)布封鎖令的人民政府宣布解除封鎖。7 預(yù)防控制7.1 監(jiān)測主體縣級以上植物檢疫機構(gòu)。7.2 監(jiān)測方法7.2.1 訪問調(diào)查向瓜農(nóng)、農(nóng)資經(jīng)銷商、農(nóng)技人員等相關(guān)人員詢問有關(guān)瓜類壞瓤子和花葉情況,初步了解疫情可能發(fā)生地點、時間、危害情況。對詢問過程發(fā)現(xiàn)的黃瓜綠斑駁花葉病毒病可疑性地區(qū),進行深入重點調(diào)查。7.2.2 田間踏查 在瓜類作物生長期進行田間踏查2次3次,代表面積占種植面積的50%以上。符合本規(guī)程3.1.1和3.1.2為疑似癥狀。7.2.3 定點調(diào)查在訪問調(diào)查和田間踏查基礎(chǔ)上,符合本規(guī)程3.1.1和3.1.2可疑疫情進行定點調(diào)查。采用5點取樣法,每點隨機調(diào)查10株,統(tǒng)計發(fā)病株率。符合本規(guī)程3.2.1和3.2.2判定該病毒病。7.3 監(jiān)測范圍對所有葫蘆科作物和該病毒的寄主植物等,以及傳入的高風險區(qū)域的葫蘆科作物進行重點監(jiān)測。7.4 監(jiān)測預(yù)警各級植物檢疫機構(gòu)對監(jiān)測結(jié)果及相關(guān)信息進行風險分析,做好預(yù)警預(yù)報。7.5 監(jiān)測結(jié)果處理按照全國重大植物疫情監(jiān)測辦法的有關(guān)規(guī)定,將監(jiān)測結(jié)果逐級匯總上報至農(nóng)業(yè)部植物檢疫機構(gòu)。8 防治效果評估8.1 葉片癥狀分級標準(以株為單位) 0級:無任何癥狀; 1級:心葉明脈,輕微花葉,發(fā)病面積占整個植株面積的5%以下; 3級:心葉及少數(shù)葉片花葉,發(fā)病面積占整個植株面積的6%15%; 5級:多數(shù)葉片花葉,少數(shù)葉片皺縮、畸形,植株輕微矮化,發(fā)病面積占整個植株面積的16%30%; 7級:多數(shù)葉片嚴重花葉,多數(shù)葉片皺縮、畸形,植株矮化,或葉柄有褐色壞死斑點,發(fā)病面積占整個植株面積的31%50%; 9級:嚴重發(fā)病,葉片嚴重畸形,植株嚴重矮化,莖部有褐色條斑,發(fā)病面積占整個植株面積的51%以上。8.2 根據(jù)葉片癥狀計算病情指數(shù)及防治效果病情指數(shù)按式(1)計算,防治效果按式(2)計算。(1)式中:病情指數(shù);各級病株數(shù);該病級數(shù);調(diào)查總株數(shù);最高級數(shù)。(%)100(2)式中:防治效果;對照病情指數(shù);處理病情指數(shù)。8.3 根據(jù)果實癥狀和發(fā)病率,計算防治效果果實發(fā)病率按式(3)計算,防治效果按式(4)計算。Q(%)100(3)式中: 果實發(fā)病率;發(fā)病瓜數(shù)量;調(diào)查瓜數(shù)量。 (%)100(4)式中: 防治效果;對照區(qū)果實發(fā)病率;處理區(qū)果實發(fā)病率。9 記錄及存檔黃瓜綠斑駁花葉病毒病田間調(diào)查記錄表見附錄A(表A.1),藥劑防治效果調(diào)查表見附錄A(表A.2)。 附錄A(規(guī)范性附錄)表A.1黃瓜
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