細(xì)菌標(biāo)本的收集、轉(zhuǎn)運(yùn)和處理.pptVIP

細(xì)菌標(biāo)本的收集、轉(zhuǎn)運(yùn)和處理,第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院檢驗(yàn)科,概述 目的 按照正確的說明采集和穩(wěn)妥地運(yùn)轉(zhuǎn)標(biāo)本以保證結(jié)果的正確。 質(zhì)量差的標(biāo)本：誤診、錯(cuò)誤的抗生素治療 實(shí)驗(yàn)室責(zé)任 1.提供標(biāo)本采集和運(yùn)轉(zhuǎn)手冊(cè)(正確的說明) 2.與臨床醫(yī)生交流：正確地選擇微生物試驗(yàn)，解釋結(jié)果 3.檢驗(yàn)醫(yī)師：查房、會(huì)診、選擇試驗(yàn)、解釋結(jié)果,標(biāo)本采集 細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)在疾病發(fā)作之后，抗生素開始治療之前盡可能快地進(jìn)行收集。需要采第二份標(biāo)本是因?yàn)榈谝环輼?biāo)本質(zhì)量差或運(yùn)轉(zhuǎn)條件不適當(dāng)，但對(duì)診斷一種急性傳染病來講，其它情況很少要求第二份標(biāo)本。例外的情況包括多次收集血標(biāo)本培養(yǎng)和診斷苛養(yǎng)菌或最初沒有懷疑的不常見的病原菌。,標(biāo)本的選擇和收集的一般原則 1選擇合適的解剖部位收集標(biāo)本。 2避免固有菌群污染。正常菌群的細(xì)菌生長(zhǎng)和報(bào)告會(huì)使 醫(yī)生和保健機(jī)構(gòu)錯(cuò)誤地認(rèn)為它們引起感染的發(fā)生。另 外，正常菌群的過度生長(zhǎng)會(huì)掩蓋真正的病原。 3抽吸及抽吸后用無菌鹽水沖洗和組織活檢是懷疑厭氧 菌感染時(shí)正確的標(biāo)本采集方法(表2)。用拭子采集標(biāo)本 最少考慮，因?yàn)槭米尤訕?biāo)本量相對(duì)較少且容易被鄰 近的正常菌群污染。培養(yǎng)厭氧菌的標(biāo)本應(yīng)儲(chǔ)存于室 溫，不能放冰箱，因?yàn)檠踺^容易擴(kuò)散到冷的標(biāo)本中去。,一、標(biāo)本的選擇和收集,4收集足夠量的標(biāo)本，使所要求的所有試驗(yàn)都能滿意 地完成。標(biāo)本量不足可產(chǎn)生假陰性結(jié)果。 5每份標(biāo)本都要標(biāo)明患者姓名、識(shí)別號(hào)碼、標(biāo)本來 源、采集日期和時(shí)間、采集者的姓名。 6盛標(biāo)本的容器要有助于病原菌的存活，無泄漏，在 運(yùn)送和處理期間安全。,表1 用于細(xì)菌培養(yǎng)的常見臨床標(biāo)本的選擇,表2 厭氧培養(yǎng)各種臨床標(biāo)本的適應(yīng)性,aIUD intrauterine device 子宮內(nèi)裝置,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,AFB：抗酸桿菌；BAP：血瓊脂平板；BHI：心腦浸液；CHOC：巧克力瓊脂；CSF：腦脊液；CVP：中心靜脈壓；EtOH：乙醇；I.V：靜脈內(nèi)；PVA：聚乙烯乙醇固定液；RT：室溫,表3 細(xì)菌標(biāo)本收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏指南,二、標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn),用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)立即轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。過度延長(zhǎng)或?qū)?biāo)本暴露于極端溫度會(huì)危及結(jié)果，必須避免。轉(zhuǎn)運(yùn)一般原則如下： 1標(biāo)本必須及時(shí)送至實(shí)驗(yàn)室。如果運(yùn)送時(shí)間大于2h， 需用特殊運(yùn)送培養(yǎng)基或要求冷藏溫度(表3)。 2細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本儲(chǔ)存不要超過24h，即使合適的運(yùn)送培 基或冷藏溫度。,3用于細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)的臨床標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)最合適的時(shí)間取決于獲得的 材料的體積。小體積的液體(1ml)或組織(1cm3)應(yīng)在15 30min內(nèi)提交，以避免蒸發(fā)、干燥或暴露于周圍條件下。大體 積和在運(yùn)送培基內(nèi)的標(biāo)本可儲(chǔ)存長(zhǎng)至24h。 4對(duì)周圍條件特別敏感的細(xì)菌包括志賀菌、淋病奈瑟菌、腦膜 炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和厭氧菌。通過培養(yǎng) 進(jìn)行志賀菌的可靠檢測(cè)要求及時(shí)進(jìn)行。流感嗜血桿菌對(duì)低溫 敏感。決不能冷凍腦脊液、生殖器、眼或中耳標(biāo)本。 5從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)臨床標(biāo)本和傳染性物質(zhì)， 不管距離遠(yuǎn)近，都要嚴(yán)格注意標(biāo)本包裝和標(biāo)記說明。運(yùn)送期 間，被運(yùn)送的物質(zhì)必需適當(dāng)?shù)貥?biāo)記、包裝和保護(hù)。 特殊標(biāo)本運(yùn)送指南見表3。,三、不常見細(xì)菌標(biāo)本,某些引起傳染病的細(xì)菌很少碰到，要求特殊運(yùn)送條件或運(yùn)送培養(yǎng)基。在許多情況下，這些標(biāo)本需要送到參考實(shí)驗(yàn)室，則需要相對(duì)長(zhǎng)的時(shí)間。表4列出了這些標(biāo)本和這些細(xì)菌的轉(zhuǎn)運(yùn)條件。,表4 不常見菌的標(biāo)本處理,AO吖啶橙;SPS：多聚茴者腦黃酸鈉,四、標(biāo)本的處理(檢測(cè)),細(xì)菌標(biāo)本的檢測(cè)包括：染色，培養(yǎng)，免疫學(xué)方法檢測(cè)抗原和分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)核酸序列。推薦方法見表5.,(一)常見細(xì)菌標(biāo)本革蘭染色和接種培養(yǎng)基的建議 見表5,表5 細(xì)菌學(xué)標(biāo)本革蘭染色和接種培養(yǎng)基的建議,表5 細(xì)菌學(xué)標(biāo)本革蘭染色和接種培養(yǎng)基的建議,B：血液瓊脂平板；C：巧克力瓊脂平板；Mac：麥康凱瓊脂；Th：巰基乙酸培養(yǎng)基；Ca：彎曲菌瓊脂；HE：Hektoen氏培養(yǎng)基；EB：增菌肉湯；SSA：A型鏈球菌選擇性瓊脂平板；TM：Thayer-Martin;BCYE：平衡活性炭酵母抽提物；TCBS：硫代硫酸-檸檬酸-膽鹽蔗糖瓊脂；CIN：cefsulodin-irgasan-novobiocin;BBA：布魯氏菌血瓊脂；LKV：含卡那霉素和萬古霉素的可溶羊血；BBE：擬桿菌膽汁七葉苷(bacteroides bile esculin)；CAN：厭氧性多粘菌素E-萘啶酸；CCFA：環(huán)絲氨酸-頭孢噻吩-果糖瓊脂；CAPD：慢性非臥床腹膜透析體液 如果標(biāo)本采集正確，根據(jù)需要進(jìn)行厭氧培養(yǎng)。,表5 細(xì)菌學(xué)標(biāo)本革蘭染色和接種培養(yǎng)基的建議,革蘭染色無論何時(shí)都推薦： 快速染色結(jié)果對(duì)病人防治是需要的； 細(xì)胞組成分析用于決定標(biāo)本是否適當(dāng)； 結(jié)果有助于解釋培養(yǎng)結(jié)果。 厭氧菌培養(yǎng)應(yīng)僅僅包括規(guī)定好的合適的標(biāo)本來源(表2)和無氧容器運(yùn)轉(zhuǎn)并沒有被皮膚粘膜正常菌群污染的標(biāo)本。,(二)標(biāo)本處理一般原則,1安全 2及時(shí)送往實(shí)驗(yàn)室，要求見表3 3標(biāo)本標(biāo)記和試驗(yàn)醫(yī)囑要求 (1)記錄標(biāo)本到達(dá)實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間 (2)記錄標(biāo)本接種的時(shí)間 (3)接受標(biāo)本時(shí)仔細(xì)檢查標(biāo)本和申請(qǐng)；,標(biāo)本標(biāo)簽上必須有病人的姓名和標(biāo)本來源，申請(qǐng)單上必須有：病人姓名、年齡、性別、鑒定身份的號(hào)碼(如社會(huì)保險(xiǎn)號(hào)或唯一的掛號(hào)號(hào)碼、賬單)、病房、醫(yī)生辦公室地址；下醫(yī)囑的醫(yī)生姓名、標(biāo)本來源、標(biāo)本采集日期和時(shí)間；檢查項(xiàng)目。 如果上述資料不完整，實(shí)驗(yàn)室人員必須打電話問清楚，如果一個(gè)標(biāo)本沒有標(biāo)記或沒有提供姓名，則必須重新送一份標(biāo)本。只有另一份標(biāo)本不能得到，如外科手術(shù)取的標(biāo)本，才允許重新標(biāo)記標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)室操作人員必須清楚地記錄這些例外，每一步必須驗(yàn)證和文字證明以及應(yīng)負(fù)責(zé)任的人員。當(dāng)有例外發(fā)生時(shí)，必須在報(bào)告單下注明，以便醫(yī)生解釋結(jié)果時(shí)避免潛在的錯(cuò)誤。,(三)標(biāo)本拒絕接收 (1)標(biāo)本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)容器和條件不當(dāng)可使標(biāo)本變 為不可接受的，需重新采集。要求見表3。 (2)由于標(biāo)本質(zhì)量不符合要求，拒絕接收(見表6)。,表6 保證細(xì)菌常規(guī)培養(yǎng)質(zhì)量要求的標(biāo)本篩選,LE：白細(xì)胞；SEC：鱗狀上皮細(xì)胞,(3)盡量使標(biāo)本的量滿足所有試驗(yàn)要求。如果標(biāo)本體積(量)被方 法或感染的身體部位等限制，小體積的液體標(biāo)本可加 1 2ml滅菌鹽水或營(yíng)養(yǎng)肉湯，加到剛好足夠滿足所有試驗(yàn)所要 求的液標(biāo)本量是很重要的。 (4)應(yīng)對(duì)標(biāo)本時(shí)行肉眼檢查 首先對(duì)臨床標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞組成的肉眼檢查，感染導(dǎo)致產(chǎn) 生膿(多形核白細(xì)胞)、血、壞死組織和粘液(粘膜標(biāo)本)。 一般說來，肉眼檢查應(yīng)鑒別黃色到褐色的膿，紅色到鐵 銹色的血，清亮到粘稠的粘液，和棕色到淡黑色表示壞 死的組織。制備涂片和接種培養(yǎng)基應(yīng)取自這些區(qū)域。,涂片的理想顯微檢查，用10物鏡，應(yīng)檢查出許多多形核細(xì) 胞，而檢查到少數(shù)或檢查不到表示皮膚或皮膚粘膜正常菌群污 染的鱗狀上皮細(xì)胞。壞死組織染色涂片上也可表現(xiàn)許多彈性纖 維。雖然彈性纖維出現(xiàn)在未感染的外科傷口和來自水腫組織的 標(biāo)本，但它們也可在已壞死的組織。 下呼吸道標(biāo)本往往顯示肺泡巨噬細(xì)胞和Curschmanns螺旋物 (粘蛋白狀的原纖維，見于支氣管哮喘患者痰內(nèi))，表明標(biāo)本來 源于氣道的遠(yuǎn)端。Curschmanns螺旋物是細(xì)支氣管的管型， 見于由哮喘或吸煙引起的慢性肺病患者。,有豐富的鱗狀上皮細(xì)胞，表明正常菌群污染的標(biāo)本， 應(yīng)拒收。 被病人貼身的醫(yī)護(hù)人員拒絕的標(biāo)本，解釋拒絕的理 由，并要求更換成可接受質(zhì)量的標(biāo)本，應(yīng)及時(shí)通知并 采集替換標(biāo)本，特別是在已經(jīng)開始抗微生物治療的情 況。 標(biāo)本拒絕的標(biāo)準(zhǔn)在變?yōu)橐?guī)定之前應(yīng)由相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室和醫(yī) 護(hù)人員代表復(fù)審。,五、培養(yǎng)解釋,根據(jù)每種分離菌的量、相關(guān)性培養(yǎng)物革蘭染色涂片結(jié)果和來自不同部位標(biāo)本的常見污染菌和病原菌的識(shí)別來區(qū)別正常污染菌群和可能病原菌。 標(biāo)本來自容易污染的部位(如痰、尿和表面?zhèn)?，可能的病原菌的數(shù)量應(yīng)超出固有菌群，經(jīng)革蘭染色直接能看到。 標(biāo)本來自可能無菌部位(如CSF、關(guān)節(jié)液、其它體液和組織)，可能病原菌可以任何數(shù)量出現(xiàn)，染色涂片看到或看不到。 保留培養(yǎng)平板1周是有用辦法，它可以留給醫(yī)生根據(jù)臨床指征要求進(jìn)一步鑒定或藥敏試驗(yàn)的機(jī)會(huì)。,六、微生物學(xué)的應(yīng)急價(jià)值,雖然培養(yǎng)需要數(shù)天或數(shù)周才出現(xiàn)陽性，但涂片染色結(jié)果、抗原或抗酸測(cè)定結(jié)果和來自無菌部位標(biāo)本的培養(yǎng)結(jié)果可能會(huì)有所需的重要信息。 需要立即通知醫(yī)護(hù)人員的例子：血培養(yǎng)、CSF革蘭染色或培養(yǎng)陽性結(jié)果、傷口標(biāo)本中A組鏈球菌的檢測(cè)結(jié)果、革蘭染色表明的氣性壞疽或其它系統(tǒng)毒素血癥、瘧疾陽性涂片等。 白天交班時(shí)通知(不必晚上或半夜通知)的例子：抗酸染色陽性、新的或非常規(guī)的藥敏試驗(yàn)、有高度意義或不常見的菌如軍團(tuán)菌、李斯特菌、或布氏菌的檢測(cè)結(jié)果。 應(yīng)急報(bào)告的內(nèi)容需實(shí)驗(yàn)室與臨床醫(yī)護(hù)人員商量 。,七、血液和血管內(nèi)導(dǎo)管標(biāo)本,(一)菌血癥和膿毒血癥 菌血癥：血中存在細(xì)菌 繼發(fā)性菌血癥：從原發(fā)灶擴(kuò)散入血 原發(fā)性菌血癥：找不到原發(fā)灶 膿毒血癥：帶有癥狀和體征的菌血癥，如發(fā)熱、寒顫和 心跳加快 膿毒性休克：膿毒癥引起的低血壓，嚴(yán)重的膿毒癥特征 為膿毒性休克伴有器官系統(tǒng)衰竭，死亡率 高達(dá)20%40% (二)造成菌血癥的細(xì)菌 種類繁多，主要有鏈球菌/腸球菌、葡萄球菌或腸桿菌等。,污染菌主要有凝固酶陰性的葡球菌、棒狀桿菌、芽胞桿菌屬和丙酸桿菌。 鑒別病原菌和污染菌非常重要。一般講，上述污染菌中一次培養(yǎng)陽性代表污染，多次不同時(shí)間采集的標(biāo)本生長(zhǎng)出同一種菌很可能是致病菌。 污染可通過靜脈穿刺皮膚防腐而控制，23%是滿意的。污染率應(yīng)研究和通過教育糾正。,(三)采集時(shí)間、方法和量 1. 采集時(shí)間 盡量在使用抗生素前采集，如已用抗菌藥物；則在下次用藥前采集。對(duì)間隙性寒戰(zhàn)或發(fā)熱者應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.5-1h采集，或寒戰(zhàn)或發(fā)熱后1h采集。 2.采集方法和量 所以，檢測(cè)菌血癥要求多個(gè)血培養(yǎng)，每個(gè)培養(yǎng)的血量要大。對(duì)成人的規(guī)則，24h內(nèi)需23次分開的血培養(yǎng)，每次至少接種20ml血。對(duì)兒科，除血量外，其它推薦要求相似。見表3和7。,表3 血標(biāo)本的采集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏,表7 兒科細(xì)菌血培養(yǎng)推薦血液體積,血液體積計(jì)算按新生兒約85ml/kg，其它病人73ml/kg，從1個(gè)80kg成人采集2個(gè)20ml血標(biāo)本(總量40ml)大約是病人總血量的0.7%。,(四)接種方法 最好的方法是靜脈采集的血直接接種到血培養(yǎng)瓶，比先放入試管再送到實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)種到培養(yǎng)瓶好。直接接種培養(yǎng)瓶可使細(xì)菌馬上開始生長(zhǎng)，減少細(xì)菌暴露于抗凝劑的量，也減少健康醫(yī)護(hù)人員被針刺意外事故的機(jī)會(huì)。所有血培養(yǎng)系統(tǒng)中使用的抗凝劑是多聚茴香腦黃酸鈉(SPS)，已知它對(duì)腦膜炎球菌，淋球菌、厭氧消化鏈球菌、念珠狀鏈桿菌和陰道加德納菌有抑制作用。直接接種到血培養(yǎng)瓶可減少暴露于轉(zhuǎn)運(yùn)試管中SPS的量。,(五)直接鏡檢 靜脈血標(biāo)本(或血液淺黃色上層)涂片革蘭染色鏡檢偶兒可查到下列病人血液中細(xì)菌：腦膜炎、肺鏈球菌感染、或由其它細(xì)菌引起的嚴(yán)重膿毒癥。 雖有不少報(bào)導(dǎo)直接應(yīng)用，但血中細(xì)菌濃度很高，大約10000個(gè)/ml血。這一條不能做為常規(guī)應(yīng)用。,(六)其它幾個(gè)相關(guān)問題 1細(xì)菌不生長(zhǎng) 某些菌如軍團(tuán)菌、分枝桿菌、腦膜炎球菌，某些株和淋病奈瑟菌在常規(guī)商品培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，可考慮換其它方法，如溶解離心法。有的菌要需要長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)，有的需要加入抗生素或抑制物的吸附劑。 2染色報(bào)告 血培養(yǎng)瓶培養(yǎng)陽性最初靠肉湯涂片染色鏡檢評(píng)價(jià)。染色報(bào)告要包括革蘭染色反應(yīng)和細(xì)菌形態(tài)描述。如果能作出初步性鑒定，可加在報(bào)告上。如“革蘭陽性球菌，建議考慮葡萄球菌”，如果革蘭染色不能識(shí)別，吖啶橙染色可能更敏感。 陽性血培養(yǎng)瓶的標(biāo)本以涂片革蘭染色看到的菌為基礎(chǔ)進(jìn)行傳代培養(yǎng)。,由于有510%菌血癥是多種細(xì)菌的，推薦方法為根據(jù)染色顯示，加哥倫比亞-多粘菌素-萘啶酮酸(CNA)或別的G-菌抑制劑瓊脂培基培養(yǎng)分離G+菌，或加入MacConkey培基或有關(guān)的選擇培基上培養(yǎng)G-菌。 3如果在G染色涂片中看見厭氧菌的形態(tài)或僅在厭氧培養(yǎng)瓶中發(fā)現(xiàn)，則應(yīng)用厭氧培基和條件。,4. 關(guān)于厭氧培養(yǎng) 厭氧菌在血液中占百分比小，過去幾年研究有下降趨勢(shì)。但并非所有醫(yī)院都如此，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自己的資料來決定是否將厭氧培養(yǎng)做為常規(guī)的一部分。 5. 血管導(dǎo)管頭培養(yǎng) 血管導(dǎo)管頭培養(yǎng)是檢查菌血癥是否來源于導(dǎo)管，要與血培養(yǎng)配對(duì)進(jìn)行。常用方法是半定量方法，即將導(dǎo)管遠(yuǎn)端5cm一段在血瓊脂平板上滾動(dòng)4次，然后丟掉。培養(yǎng)長(zhǎng)出15個(gè)菌落認(rèn)為是有意義的，如果血培養(yǎng)獲得同樣的分離菌，表明導(dǎo)管頭很可能是菌血癥的來源。還有定量方法。,八、下呼吸道標(biāo)本,(一)標(biāo)本采集 下呼吸道標(biāo)本用于檢測(cè)氣道疾病(氣管和支氣管)、肺炎、肺膿腫和膿胸的病原體。常見標(biāo)本有痰、氣管內(nèi)吸出物(插管病人)、支氣管刷出物、洗液或支氣管鏡收集的肺泡灌洗液和胸膜液。標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送往實(shí)驗(yàn)室。標(biāo)本采集見表3。,表3 下呼吸道標(biāo)本的采集、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏,(二)標(biāo)本和篩選 病原菌存在于含多形核白細(xì)胞的標(biāo)本中，量比污染的呼吸道菌群大，病原菌常常存在于多形核白細(xì)胞內(nèi)。篩選的方法有多種，最簡(jiǎn)單的是僅僅評(píng)估鱗狀上皮細(xì)胞，見表6。 用于檢測(cè)支原體肺炎、軍團(tuán)菌屬、二相真菌和結(jié)核分枝桿菌不應(yīng)進(jìn)行篩選。 表6 下呼吸道標(biāo)本的篩選,表6 下呼吸道標(biāo)本的篩選,(三)涂片革蘭染色 鏡檢看炎癥細(xì)胞：細(xì)菌和病理指標(biāo)，如粘液、壞死組織、細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌、塵細(xì)胞和curschmann螺旋。氣管、支氣管膿池及肺膿腔內(nèi)細(xì)胞壞死或碎片。吞噬細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌濃度較細(xì)胞外附近部位的細(xì)菌濃度大，借此可將其與“躺在”多形白細(xì)胞上的細(xì)菌區(qū)別開來。塵細(xì)胞(胞漿內(nèi)空泡、核偏于周邊)較難看到，它和上述螺旋表明涂片的區(qū)域來自肺泡和氣管遠(yuǎn)端。,(四)污染呼吸道菌群與吸入性肺炎和呼吸道菌的區(qū)別 在意識(shí)喪失、吞咽和呼吸肌麻痹或喉部插管等情況下，吞入大量咽部?jī)?nèi)容物可引起由混合呼吸道菌群造成的氣道感染、膿腫或膿胸。 吸入性肺炎病人痰革蘭染色對(duì)診斷有很大啟示。涂片顯示許多多形核白細(xì)胞和許多混合呼吸道菌群形態(tài)類型，特別是提示鏈球菌和厭氧菌者。,(五)下呼吸道細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果解釋,表10 下呼吸道細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果解釋,(六)支氣管鏡檢查收集的標(biāo)本 支氣管刷標(biāo)本和支氣管肺泡灌洗液就應(yīng)進(jìn)行定量培養(yǎng)以估計(jì)可能獲得病原菌的意義。 支氣管刷標(biāo)本約0.010.001ml分泌物，放入1ml無抑菌劑的無菌鹽水，應(yīng)即送往實(shí)驗(yàn)室?；煨蠼臃N0.01ml，1000CFU/ml的可能病原菌菌落計(jì)數(shù)(對(duì)應(yīng)于106CFU/ml原標(biāo)本)可能與疾病相關(guān)。 肺泡灌洗液 涂片染色如果鱗狀細(xì)胞1%所有細(xì)胞，則嚴(yán)重污染，可錯(cuò)誤地抬高可能病原菌計(jì)數(shù)。細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌可能是病原菌。 0.01或0.001ml整倍數(shù)支氣管肺泡灌洗液接種瓊脂培基，100000菌/ml提示可能為病原菌。10000100000菌/ml代表“灰色”帶。,九、尿標(biāo)本,(一)尿標(biāo)本的采集 見表3,尿標(biāo)本應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室，不應(yīng)超過2h。冷藏不能超過24h。含硼酸的運(yùn)送試管室溫24h可起到穩(wěn)定細(xì)菌數(shù)的作用。 第一次空腹尿是最好的，因大多數(shù)病例細(xì)菌已在膀胱內(nèi)增殖了數(shù)小時(shí)。 清潔尿道周圍區(qū)域，并未顯示出現(xiàn)進(jìn)尿培養(yǎng)的質(zhì)量，因而不推薦。,(二)尿標(biāo)本的篩選 尿培養(yǎng)為最普通的試驗(yàn)，但大多為陰性，即檢測(cè)不到病原菌，故采用篩選方法。 1顯微鏡檢查 每個(gè)油浸鏡視野(100物鏡)中有2個(gè)或以上相同形態(tài)類型的菌，對(duì)應(yīng)于培養(yǎng)中100000或更多。革蘭染色鏡檢經(jīng)濟(jì)、迅速，但花費(fèi)勞力和要求訓(xùn)練有素的技術(shù)人員。 2浸漬試紙條檢測(cè)白細(xì)胞酯酶和亞硝酸鹽 該試驗(yàn)是基于中性粒細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞酯酶和細(xì)菌產(chǎn)生硝酸鹽還原酶。該法快速、廉價(jià)和操作簡(jiǎn)單，但某些