白細(xì)胞疾病檢驗(yàn)的應(yīng)用.ppt

詳解白細(xì)胞疾病檢驗(yàn)的應(yīng)用,醫(yī)學(xué)百事通,第一節(jié) 白血病概述,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,白血病(leukemia)是造血干細(xì)胞克隆性疾病，是具有高度異質(zhì)性的惡性血液病，其特點(diǎn)為白血病細(xì)胞異常增生、分化成熟障礙，并伴有凋亡減少,編輯制作 莫武寧,我國白血病的發(fā)病率為2.67/10萬人，急性白血病多于慢性白血病，在全國各年齡惡性腫瘤死亡率中白血病占第6位（男性）和第8位（女性），在兒童和35歲以下的人群中占第1位。 白血病的病因尚不完全清楚，許多因素與其發(fā)病有關(guān)。,發(fā)病情況,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,細(xì)胞成熟障礙阻滯階段,阻滯發(fā)生在較早階段 急性白血病，6月,阻滯發(fā)生在較晚階段 慢性白血病，12個(gè)月,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,白血病分類,臨床表現(xiàn),RBC生成減少 正常造血功能受抑制 PLT生成減少 WBC細(xì)胞功能異常 胸骨壓痛及肝、脾、淋巴結(jié)腫大,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,貧血,出血,感染,浸潤,白血病細(xì)胞在骨髓中大量 積聚、骨髓腔內(nèi)壓力增高 竇樣隙屏障被破壞，白血病 細(xì)胞繼續(xù)保持分裂的能力,臨床表現(xiàn),胸骨壓痛,肝、脾、淋巴結(jié)腫大,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,外周血可見幼稚細(xì)胞 浸潤,細(xì)胞學(xué)診斷要點(diǎn),第十二章 第一節(jié) 白血病概述,6.白血病細(xì)胞浸潤,5.骨髓中其他系細(xì)胞受抑,4.細(xì)胞分裂異常,3.細(xì)胞形態(tài)畸形,2.細(xì)胞成熟障礙,1.某系細(xì)胞異常增生,細(xì)胞學(xué)診斷要點(diǎn),1976年法（F）、美（A）、英（B）三國協(xié)作組提出一個(gè)急性白血病FAB的形態(tài)學(xué)分型方案及診斷標(biāo)準(zhǔn)，將急性白血病分為急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病兩大類及其亞型，1985年進(jìn)行修改。此分型方案得到了廣泛的應(yīng)用。,急性白血病分型,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,FAB分型,FAB分型,近年來，在FAB形態(tài)學(xué)分型的基礎(chǔ)上開展免疫學(xué)及染色體的研究工作，組成了一個(gè)白血病的MIC研究協(xié)作組（Morphological Immunological Cytogenetical Study Group），并分別于1985年、1986年、1987年提出了急性淋巴細(xì)胞白血病、急性髓細(xì)胞白血病的MIC分型。,急性白血病分型,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,隨著分子生物學(xué)技術(shù)的崛起和發(fā)展，尤其對染色體易位形成融合基因的檢出更反映急性白血病的生物學(xué)本質(zhì)，提出了白血病的MICM（Morphological，Immunological，Cytogenetics，Molecular biology）分型方案。,急性白血病分型,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,醫(yī)學(xué)百事通，私人醫(yī)生,MICM分型，使白血病的診斷從細(xì)胞水平上升到分子水平，這不僅對識別白血病的本質(zhì)、研究白血病發(fā)病機(jī)制和生物學(xué)特性有重要意義，而且對指導(dǎo)臨床治療和判斷預(yù)后亦具有實(shí)用價(jià)值?；诿庖弑硇?、細(xì)胞遺傳學(xué)特征及特殊基因表達(dá)的分型方法，已越來越多地被用于制定最佳治療方案，始于治療前的全面診斷及評估。,急性白血病分型,第十二章 第一節(jié) 白血病概述,2019年3月里昂會(huì)議上，國際血液學(xué)及血液病理學(xué)專家推出一個(gè)造血和淋巴組織腫瘤WHO新分型方案的建議。該分型應(yīng)用了MICM分型技術(shù)，結(jié)合臨床綜合進(jìn)行分型，力求反映疾病的本質(zhì)，成為國際上一種新的分型診斷標(biāo)準(zhǔn)。,急性白血病分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,WHO分型,第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病的正確分型對白血病的診斷、治療方案的制訂、療效與預(yù)后的判斷十分重要。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷迄今仍是急性白血病診斷、分型的最主要依據(jù)，特別是原始細(xì)胞的數(shù)量和形態(tài)，F(xiàn)AB分型提出以原始細(xì)胞30為急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)。以原始細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征，將急性白血病分為急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）、急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）或稱急性非淋巴細(xì)胞白血?。ˋNLL）兩大類及其亞型，以后進(jìn)行了多次修改補(bǔ)充，由于分型標(biāo)準(zhǔn)明確，目前已被廣泛采用。,急性白血病分型-FAB分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-FAB分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-FAB分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-FAB分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,醫(yī)學(xué)百事通，私人醫(yī)生,急性白血病分型-FAB分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,原始細(xì)胞：指不包括原始紅細(xì)胞及小巨核細(xì)胞。原始細(xì)胞包括型和型，型為典型原始細(xì)胞，型胞質(zhì)可出現(xiàn)少許細(xì)小嗜天青顆粒。核質(zhì)比例稍低，其他同型原始細(xì)胞。 NEC：非紅系細(xì)胞計(jì)數(shù)，是指不包括漿細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、組織嗜堿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及所有有核紅細(xì)胞的骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)。 ANC：指所有有核細(xì)胞中的比例。,急性白血病分型-FAB分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-FAB分型,我國分型 1980年，以FAB分型標(biāo)準(zhǔn)為模板，結(jié)合我國的特點(diǎn)制定了我國急性白血病的分型標(biāo)準(zhǔn)。1986年天津會(huì)議上又進(jìn)行修改，并將我國首次提出的亞急性粒細(xì)胞白血病列為原粒細(xì)胞部分成熟型(M2b），已為國外一些學(xué)者認(rèn)可并應(yīng)用。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-FAB分型,FAB分型標(biāo)準(zhǔn)明確，國內(nèi)外分型基本統(tǒng)一，對急性白血病的診斷、治療、預(yù)后及生物學(xué)特性的研究起到重要作用，是目前應(yīng)用最多和最廣的分型及診斷方法，也是今后診斷白血病不可缺少的基本方法之一。但形態(tài)學(xué)診斷存在主觀性，加上白血病細(xì)胞的異質(zhì)性和多態(tài)性，判斷符合率低（6477）。細(xì)胞化學(xué)染色補(bǔ)充了單憑形態(tài)學(xué)對細(xì)胞辨認(rèn)的不足，對ALL和AML的鑒別、尤其對AML亞型之間的鑒別診斷較形態(tài)學(xué)更為可靠。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-FAB分型,免疫學(xué)分型是利用了造血細(xì)胞分化為成熟細(xì)胞過程中會(huì)出現(xiàn)一系列的免疫表型的變化。白血病是造血細(xì)胞的某一克隆被阻滯在某一分化階段上并異常增殖的結(jié)果，故白血病細(xì)胞往往停滯在細(xì)胞分化的某一抗原表達(dá)階段，因此可以利用單克隆抗體檢測相應(yīng)白細(xì)胞表面抗原或胞質(zhì)內(nèi)的分化抗原進(jìn)行白血病類型的鑒別、細(xì)胞發(fā)育階段的鑒別，從而指導(dǎo)治療，判斷預(yù)后。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-免疫學(xué)分型,近年來采用急性白血病的一線單抗來篩選急性髓系白血病及T、B淋巴系白血病，用二線單抗進(jìn)一步確定系內(nèi)亞型。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-免疫學(xué)分型,注：*胞質(zhì)表達(dá) *胞核表達(dá),第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-免疫學(xué)分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-免疫學(xué)分型,AML的免疫學(xué)分型 髓系相關(guān)抗原的表達(dá)反映了細(xì)胞的起源。目前，已初步建立了FAB（M0-M7）與免疫學(xué)的聯(lián)系，并在以下方面達(dá)成共識，即，CD34抗原表達(dá)與低分化形式的AML相關(guān)，在CD34為造血干細(xì)胞標(biāo)志M0、M1和M5a型中往往有較高表達(dá)率，而白血病細(xì)胞較成熟的亞型M2b、M3及M5b則極少表達(dá)或不表達(dá)。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-免疫學(xué)分型,CD13、CD15和CD33與分化程度相對較高 的AML相關(guān)，50%M3可陽性。 CD14與單核細(xì)胞白血病相關(guān)(M4、M5） 抗髓過氧化物酶（MPO）單抗為AML所特有，比CD33、CD13更敏感。 新發(fā)現(xiàn)單抗 CD117對髓系的特異性比CD13和 CD33更好，且有較高的敏感性。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-免疫學(xué)分型,抗血型糖蛋白 A或H單抗被認(rèn)為是鑒定M6 的敏感而特異的單抗。 抗血小板GPba（CD41a）、（CD41b)、a（CD61）、b（CD42b） 的單抗被認(rèn)為是鑒定M7的敏感而特異的 單抗。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-免疫學(xué)分型,急性髓細(xì)胞白血病FAB分型與免疫標(biāo)志,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,免疫學(xué)分型與FAB分型相比，不僅更客觀、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，還可鑒別白血病細(xì)胞的起源、分化階段及基因克隆的特點(diǎn)，提高了白血病的診斷，可將99的AML與ALL鑒別開；可明確對ALL進(jìn)行免疫分型；可確定形態(tài)學(xué)不能或很難區(qū)分的白血病類型及亞型，如 M0、M7、混合細(xì)胞白血病。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,免疫學(xué)分型與FAB分型,免疫表型補(bǔ)充了形態(tài)學(xué)的不足，提高了分型的正確性，已成為白血病診斷、治療及基礎(chǔ)研究的重要手段，但尚不能取代形態(tài)學(xué)分型。由于白血病細(xì)胞具有“異質(zhì)性”和“非同步性”，且常伴有抗原表達(dá)紊亂現(xiàn)象，有時(shí)免疫分型的分化抗原在單抗表達(dá)上會(huì)出現(xiàn)一些差異，故免疫標(biāo)記診斷需要綜合分析。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,免疫學(xué)分型與FAB分型,特異性染色體的異常是惡性血液病發(fā)生過程中的重要環(huán)節(jié)，更代表疾病的本質(zhì)，細(xì)胞染色體分析已成為研究和診斷白血病的重要方法之一。近年來，細(xì)胞培養(yǎng)和染色體分帶技術(shù)的研究，特別是采用FISH技術(shù)、多元FISH和多色頻譜核型（SKY）檢測技術(shù)，克隆性染色體異常的檢出率明顯增高，染色體異常表現(xiàn)與某些急性白血病之間的關(guān)系愈來愈清楚。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-細(xì)胞遺傳學(xué)分型,AML核型異常檢出率達(dá)93，AML核型異?？煞譃閮深?，一類是平衡型畸變，是和FAB亞型相關(guān)的特異性染色體結(jié)構(gòu)重排，主要是相互易位或倒位，其結(jié)果產(chǎn)生融合基因，約占60；另一類是和FAB亞型不相關(guān)的異常，多數(shù)為數(shù)目異常的不平衡畸變，表現(xiàn)為染色體整條或部分增加或丟失，最多見是+8，其次為-5/del（5q），-7/del（7q）和+21。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-細(xì)胞遺傳學(xué)分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性髓細(xì)胞白血病的MIC分型,大約90以上ALL可檢出克隆性核型異常，其中66為特異性染色體重排，并和其免疫學(xué)亞型相關(guān)。數(shù)目異常以超二倍體、亞二倍體及假二倍體常見。有22及14號染色體異常的男性可有XXY，少數(shù)可出現(xiàn)單倍體。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-細(xì)胞遺傳學(xué)分型,細(xì)胞遺傳學(xué)的改變往往與預(yù)后有關(guān)： 預(yù)后較好的有 t(8;21)、inv(6)、t(15;17)。 特征性的染色體5q、7q缺失或單倍體，3號染色體的易位或倒位，t(6;9)，t(9;22)及染色體11q23異常，均提示AML病人化療后的預(yù)后特別差。 兒童AML，t(1;22)預(yù)后很差。 白血病細(xì)胞對化療的反應(yīng)與細(xì)胞核型有關(guān)，特異性染色體異?？勺鳛楸O(jiān)察病情緩解和復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-細(xì)胞遺傳學(xué)分型,白血病的這些特異性染色體易位在分子水平的改變，表現(xiàn)為與白血病發(fā)病機(jī)制有關(guān)的基因重排及各種融合基因的形成，在病程中比較穩(wěn)定，是可靠的分子標(biāo)志。ALL為單克隆淋巴細(xì)胞的惡性增殖，產(chǎn)生大量單一和特定的DNA重排片段，故可顯示與胚系帶位置不同的獨(dú)特的重排帶型，成為該惡性克隆的分子基因標(biāo)志。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,特異性IgH及輕鏈基因重排可作為B系A(chǔ)LL的特異性克隆標(biāo)志，并可對B系A(chǔ)LL進(jìn)行分型，如早B前體-ALL型的嬰幼兒白血病中，染色體11q23上存在一個(gè)與白血病發(fā)生相關(guān)的重要基因HRX又稱MLL基因，故11q23染色體易位引起MLL基因重排；前B-ALL有IgH蛋白表達(dá)，并有t（1;19）所致的PBX-E2A融合基因；而B-ALL則有IgH和輕鏈在細(xì)胞膜表面的表達(dá)。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,T細(xì)胞受體（TCR）和基因重排見于所有T系A(chǔ)LL及半數(shù)B系A(chǔ)LL。TCR基因重排或缺失見于80的T系A(chǔ)LL?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn) TCR和Ig基因重排有交叉，但典型的AML發(fā)生重排者甚少。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,AML-M3型，90以上患者可見到t(15;17) (q22;q12)的特異性染色體異常，17q上的維甲酸受體（RAR）基因和15q上的早幼粒細(xì)胞白血?。╬romyeloblastic leukemia，PML）基因發(fā)生互相易位，形成PML- RAR及RAR-PML兩種融合基因，是M3型的特異性分子基因標(biāo)志，不但有助于M3確診，且便于及早采用維甲酸治療。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,也有少數(shù)核型正常，未檢出 t（15;17）而發(fā)現(xiàn)有PML-RAR融合基因，提示融合基因檢測更敏感，更具特異性。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,約90AML-M2b有t（8;21）（q22;q22），易位導(dǎo)致21q的急性粒細(xì)胞白血病基因(AML1)重排和8q上的MTG8（ETO）基因融合形成AML1-MTG8融合基因，故AML1基因重排是M2b型的基因標(biāo)志，以此可與形態(tài)學(xué)上易混淆的M4Eo相區(qū)別，這種白血病細(xì)胞有一定分化能力，對化療反應(yīng)較好。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,細(xì)胞遺傳學(xué)/分子生物學(xué)異?？赡軐Π籽∥ｋU(xiǎn)程度及預(yù)后的評估提供重要信息，如 ALL中已證實(shí)t（9;22）/ BCR-ABL和t（4;11）/ ALL-AF4預(yù)后較差。表達(dá)P-糖蛋白（MDR1基因產(chǎn)物）、 Bcl-2癌蛋白預(yù)后差。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,髓過氧化物酶基因（MPO）位于17號染色體（17q22）。MPO基因表達(dá)在大多數(shù)髓系白血病能測到，在AML-M2、M3表達(dá)最高，在AML-M0、M5 及ALL中不表達(dá)，可作為急性白血病分類中的一個(gè)有用指標(biāo)，且在髓細(xì)胞分化早期出現(xiàn)，便于確定白血病的類型。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,利用多種特異性基因標(biāo)記有助于白血病及白血病分型的診斷，并與白血病的發(fā)病及病程進(jìn)展有關(guān)，具有重要的臨床意義。分子生物學(xué)研究進(jìn)一步揭示異常染色體斷裂點(diǎn)涉及到已知的或新的原癌基因，從而肯定了染色體異常在腫瘤發(fā)病機(jī)制中舉足輕重的地位。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,基因診斷及分型是更新、更敏感及特異的白血病診斷分型手段，可利用多種特異性基因標(biāo)記檢測白血病、白血病的亞型及微量殘留白血病。由于基因診斷技術(shù)的進(jìn)展，尤其是PCR技術(shù)的問世，有力地促進(jìn)了臨床基因診斷技術(shù)的發(fā)展，使白血病的基因診斷方法更為準(zhǔn)確、靈敏、快速、簡便、易于臨床應(yīng)用及推廣。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,總之，對異質(zhì)性很強(qiáng)的白血病診斷及分型已發(fā)展到多學(xué)科、多手段、多參數(shù)的綜合判斷的新水平，MIC加分子生物學(xué)（MICM）診斷代表了當(dāng)今乃至今后的發(fā)展方向，得到了國際廣泛的接受，并為研究誘導(dǎo)分化或基因移植治療白血病奠定了基礎(chǔ)。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-分子生物學(xué)分型,2019年，WHO建議將骨髓原始細(xì)胞數(shù)20作為診斷急性白血病的標(biāo)準(zhǔn)，并且將骨髓原始細(xì)胞20、但伴有重現(xiàn)性遺傳學(xué)異常者均診斷為急性白血病。新分型方案結(jié)合臨床、結(jié)合染色體核型改變及其受累基因的異常表達(dá)，將急性白血病分類與發(fā)病機(jī)制、靶基因治療相結(jié)合，具有重要的臨床和研究價(jià)值。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-WHO分型,新方案比FAB分型更為全面、合理，對治療的選擇與預(yù)后判斷有更大的指導(dǎo)意義。開展新方案每例白血病均要進(jìn)行遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢驗(yàn)，全面普及有一定難度，此外還有些看法，專家們尚未統(tǒng)一，值得進(jìn)一步商榷。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病分型-WHO分型,急性髓細(xì)胞白血病和相關(guān)髓系腫瘤 （2019 WHO分型）,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性髓細(xì)胞白血病和相關(guān)髓系腫瘤 （2019 WHO分型）,急性白血病的診斷,急性白血病的診斷是以形態(tài)學(xué)診斷為基礎(chǔ)，結(jié)合免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢驗(yàn)的MICM綜合性診斷方法。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,臨床表現(xiàn) 起病多急驟，常見癥狀為發(fā)熱，進(jìn)行性貧血、出血和多種浸潤表現(xiàn)，多見骨關(guān)節(jié)疼痛，較明顯的肝、脾、淋巴結(jié)腫大，甚至中樞神經(jīng)系統(tǒng)浸潤的表現(xiàn)。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病的診斷,形態(tài)學(xué)診斷： 血象 大多數(shù)患者的白細(xì)胞數(shù)增多，甚至可高達(dá)100 109L，亦出現(xiàn)較多的原始及幼稚細(xì)胞；部分患者白細(xì)胞數(shù)正?；驕p少，未發(fā)現(xiàn)幼稚細(xì)胞可稱為“非白血性白血病”。紅細(xì)胞和血小板進(jìn)行性減少。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病的診斷,骨髓象 是診斷本病的主要依據(jù)。 骨髓增生明顯活躍或極度活躍，原始細(xì)胞30（ANC），多伴有惡性腫瘤細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征，細(xì)胞大小相差較大，胞質(zhì)量少，胞核大，形態(tài)不規(guī)則，常有扭曲、折疊、切跡、分葉或雙核等。核染色質(zhì)粗糙，核仁明顯、數(shù)目多，核漿發(fā)育不平衡，胞核發(fā)育往往落后于胞質(zhì)。胞質(zhì)內(nèi)易見空泡，出現(xiàn)Auer小體小體有助于AML的診斷。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病的診斷,急性白血病的診斷,少數(shù)病例骨髓增生低下，但白血病性原始細(xì)胞仍30，可診斷為低增生性急性白血病。細(xì)胞化學(xué)染色有助鑒別各種類型的白血病。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病的診斷,醫(yī)學(xué)百事通，私人醫(yī)生,骨髓象骨髓細(xì)胞增生降低 骨髓活檢 骨髓細(xì)胞增生活躍以上 淋系增生(ANC) 髓系增生(ANC） 原始細(xì)胞30 幼紅細(xì)胞50 幼紅細(xì)胞50% ALL L1,L2,L3 原始C(ANC） 原始C(NEC） 原始細(xì)胞 原始細(xì)胞 原始細(xì)胞 原始細(xì)胞 30% 30% 30% 30% AML MDS AMLM6 M0,M1M5,M7 (%NEC),第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病的診斷,超微結(jié)構(gòu) 必要時(shí)用電鏡、電鏡細(xì)胞化學(xué)觀察血細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)、識別血細(xì)胞類型，對診斷和鑒別各型白血病有很大價(jià)值。 免疫學(xué)檢驗(yàn) 免疫標(biāo)記診斷及鑒別T系-ALL、B系-ALL和AML，并可進(jìn)一步鑒別亞型。 遺傳及分子生物學(xué)檢驗(yàn) 某些類型的急性白血病亞型之間與免疫表型、染色體核型及分子基因標(biāo)志的關(guān)系密切，有助于類型診斷和鑒別診斷。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病的診斷,急性白血病療效觀察,l.緩解標(biāo)準(zhǔn) （1）完全緩解（CR） 骨髓象：原粒細(xì)胞型型（原單幼單或原 淋十幼淋）5，紅及巨核系正常； M2b： 原粒型型5，中性中幼粒細(xì)胞 比例在正常范圍； M3型：原粒早幼粒5； M4型：原粒I型型、原單幼稚單核5； M6型：原粒型型5，原紅幼紅以 及紅系細(xì)胞比例基本正常； M7型：粒、紅兩系比例正常，原巨及幼巨核細(xì) 胞基本消失。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,l.緩解標(biāo)準(zhǔn) （1）完全緩解（CR）： 血象：男性血紅蛋白100g/L，女性及兒童血紅蛋 白90/L，中性粒細(xì)胞絕對值1.5109/L， 血小板100 109/L，外周血分類中無白血 病細(xì)胞。 臨床：無白血病浸潤所致的癥狀和體征，生活 正?；蚪咏！?第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病療效觀察,（2）部分緩解（partial remission，PR）： 骨髓：原粒細(xì)胞I型II型（原單幼單或原淋 幼淋）520； 或臨床、血象二項(xiàng)中有一項(xiàng)未達(dá)完全緩解標(biāo)準(zhǔn)。 （3）未緩解（non-remission，NR）： 骨髓象、血象及臨床3項(xiàng)均未達(dá)上述標(biāo)準(zhǔn)者。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病療效觀察,2.復(fù)發(fā)標(biāo)準(zhǔn) 有下列三者之一者稱為復(fù)發(fā)(relapse) 骨髓原粒細(xì)胞I型II型（原單幼單或原淋 幼淋）5且20%，經(jīng)過有效抗白血病治 療一個(gè)療程仍未達(dá)骨髓完全緩解者； 骨髓原粒細(xì)胞III型（原單幼單或原淋幼 淋）20者； 骨髓外白血病細(xì)胞浸潤者。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病療效觀察,3.持續(xù)完全緩解（continual CR，CCR）指從治療 后CR之日起計(jì)算，其間無白血病復(fù)發(fā)達(dá)3-5年者。 4.長期存活 白血病自確診之日起，存活時(shí)間（包 括無病或帶病生存）達(dá)5年或5年以上者。 5.臨床治愈 指停止化學(xué)治療5年或無病生存 （disease free survived, DFS）達(dá)10年者。,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,急性白血病療效觀察,微量殘留白血?。╩inimal residual disease leukemia,MRD）是指白血病患者經(jīng)過化療或骨髓移殖，按目前所確定的療效標(biāo)準(zhǔn)取得完全緩解后，體內(nèi)殘存微量白血病細(xì)胞的狀態(tài)。 一般說來，癥狀出現(xiàn)時(shí)體內(nèi)約有白血病細(xì)胞101213，達(dá)到完全緩解后估計(jì)體內(nèi)還可能有1068個(gè)白血病細(xì)胞存在，這些細(xì)胞是白血病復(fù)發(fā)的根源。,急性白血病微量殘留白血病的檢測,第十二章 第二節(jié) 急性白血病分型及診斷,常用MRD的檢測方法,急性白血病微量殘留白血病的檢測,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL），簡稱急淋，是由于原始及幼稚淋巴細(xì)胞在造血組織異常增殖的造血系統(tǒng)惡性克隆性疾病。本病可發(fā)生在任何年齡，但多見于兒童及青壯年，是小兒時(shí)期最常見的白血病 臨床上起病急驟，發(fā)熱、貧血、皮膚黏膜及內(nèi)臟出血，全身淋巴結(jié)無痛性腫大，肝、脾腫大，并發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血?。–NSL）的發(fā)病率較高,概述,1.血象 （1）紅細(xì)胞及血紅蛋白低于正常 （2）白細(xì)胞多增高，少數(shù)可高達(dá)100109L。分類中原始及幼稚淋巴細(xì)胞增多，可達(dá)90 （3）血小板計(jì)數(shù)低于正常 2.骨髓象 增生極度活躍或明顯活躍，少數(shù)病例呈增生活躍，以原始和幼稚淋巴細(xì)胞為主，30，可高達(dá)5090。,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,白血病細(xì)胞形態(tài)異常，如胞核形態(tài)不規(guī)則，可有凹陷、折疊、切跡及裂痕，核染色質(zhì)呈泥漿狀或咖啡色顆粒狀，核仁大，胞質(zhì)內(nèi)有空泡。退化細(xì)胞明顯增多，藍(lán)細(xì)胞（涂抹細(xì)胞）多見，這是急淋的特征之一。,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,目前國際通用FAB形態(tài)學(xué)分型，即按照白血病細(xì)胞大小、核漿比例、核仁清楚與否及胞漿嗜堿程度將急淋分為L1、L2、L3三種亞型,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,3.細(xì)胞化學(xué)染色 （1）過氧化物酶（POX）與蘇丹黑（SBB）染色：各階段淋巴細(xì)胞均陰性，陽性的原始細(xì)胞3，可能是殘存的正常原始粒細(xì)胞 （2）糖原（PAS）染色：約2080的原淋巴細(xì)胞呈陽性反應(yīng),第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,急性淋巴細(xì)胞白血病的POX染色,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,急性淋巴細(xì)胞白血病PAS染色,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,4.免疫學(xué)檢驗(yàn) 首先用TdT及第一線單抗診斷T或B系急淋與AML相鑒別，再用二線單抗確定ALL各亞型。 大約有1015的兒童ALL和2530成人ALL其白血病細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)髓系抗原，常見CD13或CD33,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,5.遺傳學(xué)及分子生物學(xué)檢驗(yàn) 大約7090的急淋有克隆性核型異常，其中66為特異性染色體重排。 染色體易位t（9;22）（q34;q11）稱Ph染色體，見于25的兒童急淋和1533的成人急淋。易位形成bcr-abl融合基因與慢粒的融合基因不同，臨床特點(diǎn)為白細(xì)胞顯著增高，生存期短。,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,ALL實(shí)驗(yàn)室檢查,1.急性淋巴細(xì)胞白血病的診斷 具有急性白血病的臨床表現(xiàn)及骨髓象特征 骨髓中原淋巴細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞30、伴有形 態(tài)學(xué)異常 TdT及單克隆抗體診斷T或B細(xì)胞系急淋（與AML相 鑒別），進(jìn)一步分亞型 與免疫學(xué)亞型相關(guān)的特異性結(jié)構(gòu)重排及其分子生 物學(xué)異常，對診斷、判斷預(yù)后和微量殘留病的檢 測有重要意義,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,ALL診斷標(biāo)準(zhǔn),2.中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病(CNSL)的診斷 CNSL是AL的并發(fā)癥。腦膜與腦實(shí)質(zhì)白血病在CNSL中占首位，故臨床上常以腦膜刺激癥狀和顱內(nèi)壓增高為常見，表現(xiàn)為頭痛、惡心、嘔吐、抽搐、頸項(xiàng)強(qiáng)直或嗜睡、譫妄、昏迷等,脊髓損害表現(xiàn)為高位截癱或骶髓浸潤致大小便失禁等。腦脊液的改變是診斷 CNSL的重要依據(jù),第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,CNSL診斷標(biāo)準(zhǔn),中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病診斷標(biāo)準(zhǔn) 1.有中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和體征（尤其是顱內(nèi)壓增高的癥狀和體征） 2.有腦脊液的改變 （1）壓力增高，1.96kpa(200mmH2O)，或60滴分 （2）白細(xì)胞數(shù)0.01109L （3）涂片見到白血病細(xì)胞 （4）蛋白450mg/L，潘氏試驗(yàn)陽性 3.排除其他原因的中樞神經(jīng)系統(tǒng)或腦脊液有相似改變的疾病,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,診斷標(biāo)準(zhǔn),注： 1.符合3加2中任何一項(xiàng)者，為可疑中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病（CNSL）；符合3加2中涂片見到白血病細(xì)胞或任何兩項(xiàng)者可診斷為CNSL 2.無癥狀但有腦脊液改變，可診斷為CNSL。但如只有單項(xiàng)腦脊液壓力增高，暫不確定CNSL的診斷。若腦脊液壓力持續(xù)增高，而經(jīng)抗CNSL治療壓力下降恢復(fù)正常者可診斷為CNSL，應(yīng)嚴(yán)密進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察 3.有癥狀而無腦脊液改變者，如有腦神經(jīng)、脊髓或神經(jīng)根受累的癥狀和體征，可排除其他原因所致，且經(jīng)抗CNSL治療癥狀有明顯改善者，可診斷為CNSL,第十二章 第三節(jié) 急性淋巴細(xì)胞白血病,CNSL診斷標(biāo)準(zhǔn),第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性髓性白血?。ˋML）是由于髓系造血干/祖細(xì)胞的惡性變并在造血組織中異常增殖所致的惡性血液病。目前，仍以FAB協(xié)作組的診斷標(biāo)準(zhǔn)對其進(jìn)行診斷與分型，將AML分為M0M7 8個(gè)亞型，并規(guī)定骨髓中原始細(xì)胞必須大于非紅系細(xì)胞的30%。,概述,急性髓細(xì)胞白血病微分化型是1991年FAB協(xié)作組將此型定為M0，特點(diǎn)為細(xì)胞形態(tài)學(xué)不能分型；常規(guī)細(xì)胞化學(xué)染色陰性；無Auer小體；免疫表型有髓系分化抗原，而不表達(dá)T和B細(xì)胞系分化抗原；超微結(jié)構(gòu)髓過氧化物酶（MPO）陽性,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性髓細(xì)胞白血病微分化型（M0）,1.血象 白細(xì)胞可低可高，外周血原始 細(xì)胞百分?jǐn)?shù)較低。血小板減少,貧血。 2.骨髓象 骨髓有核細(xì)胞增生程度較輕， 原始細(xì)胞30，細(xì)胞形態(tài)較小，亦可 較大，核圓，染色質(zhì)細(xì)致，核仁明顯， 胞質(zhì)少，嗜堿性，無顆粒，亦可透明， 無Auer小體，光鏡下類似L2型細(xì)胞,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M0實(shí)驗(yàn)室檢查,3.細(xì)胞化學(xué)染色 POX及SB染色為陰性 或陽性率3。PAS呈陰性或弱陽性 4.超微結(jié)構(gòu)檢驗(yàn) MPO陽性 5.遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢驗(yàn) 6.免疫學(xué)檢查 免疫表型表達(dá)為髓系分化抗原CD13、CD33、CD14、CD15、CD11b中至少有一種陽性, cMPO多陽性。不表達(dá)B系特異性抗原（D10、CD19、CD24、CD22）和T系特異性抗原（CD2、CD3、CD5），可表達(dá)無系列特異性未成熟標(biāo)志CD34、TdT、HLA-DR,M0實(shí)驗(yàn)室檢查,符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn) 異常增生細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上呈原始細(xì)胞特征：胞漿大多 透亮或中度嗜堿，無嗜天青顆粒及Auer小體 細(xì)胞化學(xué)：POX及SBB染色陽性率3%； 免疫學(xué)檢驗(yàn)：髓系標(biāo)志CD33和（或）CD13可陽性, cMPO多陽性；淋系抗原陰性，分別有CD7、TdT陽性； 電鏡：髓過氧化酶陽性,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M0診斷標(biāo)準(zhǔn),急性粒細(xì)胞白血病簡稱急粒，按FAB和我國分類的意見，分為兩個(gè)亞型，即未成熟型 M1和部分成熟型M2。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性粒細(xì)胞白血病未成熟型（M1）,臨床上除了有急性白血病的共同表現(xiàn)外，尚有以下特點(diǎn) 大部分病例起病急驟 肝、脾及淋巴結(jié)腫大 綠色瘤（chloroma）常見于此型，典型表現(xiàn)為骨膜下綠色腫瘤，多見于兒童及青年人,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,臨床表現(xiàn),1.血象 貧血顯著，白細(xì)胞總數(shù)升高。血片 中以原始粒細(xì)胞為主，可高達(dá)90以上。 血小板中度到重度減少。 2.骨髓象 骨髓增生極度活躍或明顯活躍。 骨髓中原始粒細(xì)胞90（NEC），可見 小原粒細(xì)胞。在少數(shù)病例白血病細(xì)胞內(nèi)可 見Auer小體。 3.細(xì)胞化學(xué)染色 POX染色及SBB染色至少有 3原粒細(xì)胞陽性。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M1實(shí)驗(yàn)室檢查,M1實(shí)驗(yàn)室檢查,4.免疫學(xué)檢驗(yàn) 本型往往顯示HLA-DR、MPO、 CD34、CD33及CD13陽性 5.遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢驗(yàn) 核型異常，Ph染 色體t（9;22）形成bcr-abl融合基因，約見 于3的AML。大多為M1型，治療效果差。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M1實(shí)驗(yàn)室檢查,符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn) 骨髓中原始粒細(xì)胞（I型+II型）90（NEC），并伴形態(tài)學(xué)異常 POX或SBB（+）的原始細(xì)胞3 進(jìn)一步依免疫表型特點(diǎn)與ALL鑒別,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M1診斷標(biāo)準(zhǔn),1.血象 貧血顯著，白細(xì)胞中度升高和M1相似， 以原始粒細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞為主。血小板中 度到重度減少 2.骨髓象 骨髓增生極度活躍或明顯活躍，骨髓 中原始粒細(xì)胞占3089（NEC），約50 病例的白血病細(xì)胞內(nèi)可見Auer小體,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性粒細(xì)胞白血病部分成熟型（M2a）,M2a實(shí)驗(yàn)室檢查,M2a實(shí)驗(yàn)室檢查,3.細(xì)胞化學(xué)染色 （1）POX與SBB染色：均呈陽性反應(yīng)。 （2）PAS染色：多數(shù)原粒呈陰性反應(yīng)。 （3）中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)：活性明顯 降低，甚至消失。 （4）特異性和非特異性酯酶染色：AS-D-NCE 呈陽性反應(yīng)；-NAE可呈弱陽性反應(yīng)， 且不被氟化鈉抑制。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M2a實(shí)驗(yàn)室檢查,急性粒細(xì)胞白血?。∕2a)的POX染色,M2a實(shí)驗(yàn)室檢查,4.免疫學(xué)檢驗(yàn) 粒系抗體均可陽性 5.遺傳學(xué)及分子生物學(xué)檢驗(yàn) 特異性染色體重排t（6；9）約見于1的 AML,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M2a實(shí)驗(yàn)室檢查,符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn) 骨髓中原始粒細(xì)胞3089（NEC）并伴有形態(tài)學(xué)異常 可進(jìn)一步以免疫表型特點(diǎn)與ALL鑒別,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M2a診斷標(biāo)準(zhǔn),急性粒細(xì)胞白血病部分成熟型，曾稱為亞急性粒細(xì)胞白血病，簡稱亞急粒，是我國提出的一種急粒亞型。 骨髓中以異常中性中幼粒細(xì)胞增生為主，與其他類型AML相比，髓外浸潤發(fā)生率高，治療反應(yīng)較好，完全緩解率高，緩解期長。其特異性遺傳標(biāo)志為t（8；21）染色體易位，AML1基因重排可作為M2b基因的標(biāo)志,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性粒細(xì)胞白血病部分成熟型（M2b）,1.血象 多數(shù)病例為全血細(xì)胞減少，易被誤診為再生障礙性貧血。血紅蛋白及紅細(xì)胞數(shù)均降低。白細(xì)胞數(shù)大多正常或低于正常，分類可見異常中性中幼粒細(xì)胞增多,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M2b實(shí)驗(yàn)室檢查,2.骨髓象 骨髓增生明顯活躍或增生活躍。原始粒細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞明顯增多，以異常中性中幼粒細(xì)胞為主30（NEC），異常中性中幼粒細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)是胞核與胞質(zhì)發(fā)育極不平衡，核染色質(zhì)細(xì)致疏松，核仁大而明顯，胞質(zhì)豐富，含多量細(xì)小粉紅色中性顆粒，呈彌散分布，常見空泡和雙層胞質(zhì)，內(nèi)胞質(zhì)量多，呈粉紅色，Auer小體常見,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M2b實(shí)驗(yàn)室檢查,M2b實(shí)驗(yàn)室檢查,3.細(xì)胞化學(xué)染色 POX及SBB染色呈陽性或強(qiáng)陽性反應(yīng) AS-D-NCE染色陽性 NAP染色其活性明顯減低 4.免疫學(xué)檢驗(yàn) 表達(dá)HLA-DR、MPO、 CD13、CD33和CD57。白血病分化 阻滯階段較M2a晚 5.遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢驗(yàn) t（8;21）（q22;q22）易位是M2b的染色體重排，其檢出率高達(dá)90，t（8;21）染色體易位導(dǎo)致AML1基因重排，形成AML1-ETO融合基因,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M2b實(shí)驗(yàn)室檢查,符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)； 原始細(xì)胞明顯增多，但可30，以 異常的中性中幼粒細(xì)胞增生為主30 （NEC） t（8；21）（q22；q22）或AML1基因重 排可作為診斷本病的分子標(biāo)志,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M2b診斷標(biāo)準(zhǔn),急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋPL）是一種特殊類型的急性白血病，臨床上廣泛而嚴(yán)重的出血常是本病的特點(diǎn)，以皮膚粘膜最明顯，其次為胃腸道、泌尿道、呼吸道及陰道出血，顱內(nèi)出血最為嚴(yán)重，是致死的原因之一。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性早幼粒細(xì)胞白血病(M3),概述,出血除血小板減少和功能異常外，主要是本病易并發(fā)彌散性血管內(nèi)凝血（DIC），亦可發(fā)生原發(fā)性纖溶亢進(jìn)。染色體 t（l5；17）形成的PMLRAR融合基因是本病最特異的基因標(biāo)志。此類白血病細(xì)胞可被全反式維甲酸（ATRA）誘導(dǎo)分化成熟,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,概述,急性早幼粒細(xì)胞白血病(M3),1.血象 血紅蛋白及紅細(xì)胞數(shù)呈輕度到中度減少。白細(xì)胞計(jì)數(shù)大多病例在15109/L以下，減少者可表現(xiàn)為全血細(xì)胞減少。分類以異常早幼粒細(xì)胞為主，可高達(dá)90，Aure小體易見。血小板中度到重度減少 2.骨髓象 多數(shù)病例骨髓增生極度活躍。分類以顆粒增多的早幼粒細(xì)胞為主，占3090（NEC）。各階段幼紅細(xì)胞和巨核細(xì)胞均明顯減少。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M3實(shí)驗(yàn)室檢查,顆粒增多的早幼粒細(xì)胞形態(tài)異常，這種細(xì)胞大小不一，一般直徑為1530m，外形常呈橢圓形或不規(guī)則。胞質(zhì)含短而粗的Aure小體，幾條、十幾條或幾十條，可呈束狀交叉排列，酷似柴捆樣，故有人稱之為“柴捆細(xì)胞”。按胞質(zhì)顆粒的不同又分為兩個(gè)亞型。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M3實(shí)驗(yàn)室檢查,（1）粗顆粒型（M3a）：胞質(zhì)豐富，藍(lán)色外胞質(zhì)呈偽足狀突出，其中布滿粗大、深染、密集或融合的嗜苯胺藍(lán)顆粒，或含較多的Aure小體，有時(shí)呈“柴捆”狀，胞核常被顆粒遮蓋而輪廓不清 （2）細(xì)顆粒型（M3b）：胞質(zhì)中的嗜苯胺藍(lán)顆粒密集而細(xì)小。核扭曲、折疊或分葉，故易誤診為單核細(xì)胞 （3）變異型(M3v)：胞質(zhì)藍(lán)染，顆粒稀少，胞核扭曲、折疊或分葉明顯，易誤診為單核細(xì)胞。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M3實(shí)驗(yàn)室檢查,M3實(shí)驗(yàn)室檢查,M3實(shí)驗(yàn)室檢查,3.細(xì)胞化學(xué)染色 POX、SBB、S-D-NCE和ACP染色均呈陽性或強(qiáng)陽性反應(yīng)。AS-D-NAE可呈陽性反應(yīng)。NAP積分明顯降低。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M3實(shí)驗(yàn)室檢查,急性早幼粒細(xì)胞白血病的POX染色,M3實(shí)驗(yàn)室檢查,4.免疫學(xué)檢驗(yàn) 典型的免疫表型呈 CD13、CD33陽 性，CD34及HLA-DR陰性。故以髓系標(biāo)志為主而 HLA-DR為陰性者M(jìn)3型的可能性大。 5.遺傳學(xué)及分子生物學(xué)檢驗(yàn) 7090的APL具有 特異染色體易位t(15;17)及其產(chǎn)生的PML-RAR 和RAR-PML融合蛋白，是APL特有的遺傳學(xué)標(biāo)志.,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M3實(shí)驗(yàn)室檢查,符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn) 骨髓中以顆粒增多的異常早幼粒細(xì)胞增生為主，30%（NEC）。依顆粒粗細(xì)分為粗顆粒和細(xì)顆粒兩亞型；POX陽性 免疫標(biāo)記具有髓系特征而HLA-DR陰性 特異性基因標(biāo)志為染色體t(l5；17)形成PMLRAR融合基因,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M3診斷標(biāo)準(zhǔn),急性粒-單核細(xì)胞白血病（AMMOL）簡稱急粒-單，是一種由于粒細(xì)胞和單核細(xì)胞兩系同時(shí)發(fā)生惡性增生的急性白血病。臨床上兼有急粒和急單白血病的特征。其中一類獨(dú)特的嗜酸粒細(xì)胞亞型M4Eo伴有增多的異常嗜酸粒細(xì)胞，非隨機(jī)染色體為invdel（l6）,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性粒-單核細(xì)胞白血?。∕4）,1.血象 血紅蛋白和紅細(xì)胞數(shù)為中度到重 度減少；白細(xì)胞可增高、正?；驕p少， 原單核和幼單核細(xì)胞有時(shí)可達(dá)3040 2.骨髓象 骨髓增生極度活躍或明顯活躍。 粒、單核兩系同時(shí)增生,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M4實(shí)驗(yàn)室檢查,M4實(shí)驗(yàn)室檢查,3.細(xì)胞化學(xué)染色 （1）POX、SB染色：原單和幼單核細(xì)胞呈陰性或弱陽性反應(yīng)；而幼粒細(xì)胞呈陽性或強(qiáng)陽性反應(yīng)，故以此可與M2、M3等作初步鑒別 （2）非特異性酯酶染色：應(yīng)用a-醋酸奈酚為底物進(jìn)行染色，原始和幼稚細(xì)胞呈陽性反應(yīng)，其中原粒細(xì)胞不被氟化鈉（NaF）抑制，而原單細(xì)胞可被NaF抑制,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,實(shí)驗(yàn)室檢查,M4實(shí)驗(yàn)室檢查,4.免疫學(xué)檢驗(yàn) 白血病細(xì)胞主要表達(dá)粒、單系抗原CD13、CD14、CD15、CD33、HLA-DR 5.遺傳學(xué)及分子生物學(xué)檢驗(yàn) 常累及11號染色體長臂的異常，包括缺失和易位。11q23重排斷裂點(diǎn)位于HRX(或稱MLL)基因內(nèi)。 M4Eo有16號染色體異常，主要表現(xiàn)為inv（l6）、del（16）和t（l6;16）三種類型，伴inv（l6）的M4Eo患者CR率較高,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M4實(shí)驗(yàn)室檢查,符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn) 染色體inv(l6)導(dǎo)致CBF-MYH11融合基因，此融合基因?yàn)?M4EO的診斷、療效監(jiān)測提供一個(gè)新的特異的敏感標(biāo)志 骨髓中原始粒細(xì)胞、原始單核細(xì)胞、幼稚單核細(xì)胞的異常增生,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M4診斷標(biāo)準(zhǔn),急性單核細(xì)胞白血?。ˋMOL）簡稱急單。本型臨床上除有一般急性白血病的癥狀外，浸潤癥狀較為明顯，其突出表現(xiàn)為皮膚黏膜的損害，皮膚出現(xiàn)彌漫性丘疹、硬性結(jié)節(jié)等,牙齦增生腫脹、出血及潰瘍、壞死等較多見；器官浸潤表現(xiàn)為肝脾、淋巴結(jié)腫大，腎損害也較其他類型多見。特異性染色體異常為11號染色體長臂2區(qū)3帶的缺失或易位致 MLL基因重排。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性單核細(xì)胞白血?。∕5）,概述,1.血象 血紅蛋白和紅細(xì)胞數(shù)呈中度到重度減少。 白細(xì)胞分類可以出現(xiàn)原單和幼單核細(xì)胞增多， 血小板重度減少 2.骨髓象 骨髓增生極度活躍或明顯活躍。原單 加幼單細(xì)胞30。M5a以原單細(xì)胞為主，可 80%（NEC），幼單細(xì)胞較少。M5b中原單、 幼單及單核細(xì)胞均可見到，原單細(xì)胞80,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M5實(shí)驗(yàn)室檢查,M5實(shí)驗(yàn)室檢查,M5實(shí)驗(yàn)室檢查,3.細(xì)胞化學(xué)染色 (1)POX和SBB染色：原單核細(xì)胞呈陰性和弱陽性反應(yīng)而幼單核細(xì)胞多數(shù)為陽性反應(yīng) (2)PAS染色：原單核細(xì)胞約半數(shù)呈陰性反應(yīng)，幼單細(xì)胞多數(shù)為陽性反應(yīng) (3)酯酶染色：非特異性酯酶染色陽性，可被氟化鈉抑制,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M5實(shí)驗(yàn)室檢查,急性單核細(xì)胞白血病的POX染色,M5實(shí)驗(yàn)室檢查,急性單核細(xì)胞白血病-NAE染色,M5實(shí)驗(yàn)室檢查,急性單核細(xì)胞白血病-NAE氟化鈉抑制染色,M5實(shí)驗(yàn)室檢查,4.免疫學(xué)檢驗(yàn) 白血病細(xì)胞表面抗原表達(dá)CD11、CD13、CD14、CD15、CD33、CD34、HLA-DR 5.遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢驗(yàn) t/del(11)(q23)約見于22% M5型，其中60以上病例為M5a，其次為M5b和M4，染色體的缺失和易位均累及11q23帶的HRX基因（MLL基因）,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M5實(shí)驗(yàn)室檢查,符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn) 骨髓中原單核、幼單核細(xì)胞異常增生，原單核細(xì)胞80（NEC）可診斷為M5a；原單核細(xì)胞80，原單核幼單核細(xì)胞30%（NEC）可診斷為M5b 白血病細(xì)胞-NBE陽性且可被氟化鈉抑制確診為單核細(xì)胞性白血病,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M5診斷標(biāo)準(zhǔn),本病包括紅血病和紅白血病。紅血病為紅細(xì)胞系的惡性增生，紅白血病是紅細(xì)胞及白細(xì)胞兩系同時(shí)惡性增生性疾病。 臨床特征與其他型急性白血病相似，發(fā)病較急，病程短，貧血常為首發(fā)癥狀并呈進(jìn)行性加重；其次為發(fā)熱及出血，但出血程度較輕，內(nèi)臟出血少見；脾腫大較常見，肝及淋巴結(jié)腫大不明顯，胸骨可有壓痛。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,紅白血病（M6）,1.血象 2.骨髓象 幼紅細(xì)胞常有明顯的形態(tài)異常，如巨 幼樣變、核碎裂、核分葉、多核、核漿發(fā)育不 平衡等。白細(xì)胞系統(tǒng)明顯增生，原始細(xì)胞大于 30(NEC) 3.細(xì)胞化學(xué)染色 幼紅細(xì)胞PAS常呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，積分值明顯增高,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M6實(shí)驗(yàn)室檢查,M6實(shí)驗(yàn)室檢查,M6實(shí)驗(yàn)室檢查,紅白血病骨髓增生明顯活躍或極度活躍，其中紅細(xì)胞系50；原粒細(xì)胞(或原單幼單核細(xì)胞)30(NEC)，或血片中原粒（或原單）細(xì)胞5%，骨髓中原粒（或原幼單核）細(xì)胞20(NEC)； 部分病例紅系3050，而異常幼紅細(xì)胞（巨幼樣變，雙核、多核、核碎裂）10也可診斷。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M6診斷標(biāo)準(zhǔn),急性巨核細(xì)胞白血病是一種少見類型白血病。1984年，F(xiàn)AB協(xié)作組將此型定為M7型。臨床表現(xiàn)與其他類型急性白血病相似。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,急性巨核細(xì)胞白血?。∕7）,1.血象 常見全血細(xì)胞減少，血紅蛋白減低，白 細(xì)胞總數(shù)大多減低，血小板減少。在血片中可 見到類似淋巴細(xì)胞的小巨核細(xì)胞。 2.骨髓象 骨髓象增生明顯活躍或增生活躍。粒系 及紅系細(xì)胞增生均減低，巨核細(xì)胞系異常增生， 全片巨核細(xì)胞可多達(dá)1000個(gè)以上，以原始及幼 稚巨核細(xì)胞為主，其中原始巨核細(xì)胞大于30。,第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M7實(shí)驗(yàn)室檢查,M7實(shí)驗(yàn)室檢查,3.細(xì)胞化學(xué)染色 對診斷巨核細(xì)胞白血病有 價(jià)值的細(xì)胞化學(xué)染色是5-核苷酸酶、 ACP和PAS為陽性 4.免疫學(xué)檢查 原始細(xì)胞上有vWF抗原和Ib、 IIbIIIa、IIIa糖蛋白 5.遺傳學(xué)檢驗(yàn),第十二章 第四節(jié) 急性髓細(xì)胞白血病,M7實(shí)驗(yàn)室檢查,巨核細(xì)胞白血病，骨髓中原巨核細(xì)胞30（NEC）；原巨核需作電鏡、PPO檢查、細(xì)胞化學(xué)染色5-核苷酸酶、ACP等或單克隆抗體（CD41、CD61、CD42）證實(shí)。,第十二章