雙股DNA病毒.ppt

第27章雙股DNA病毒,第一節(jié)痘病毒科(Poxviridae)第二節(jié)非洲豬瘟病毒科與虹彩病毒科第三節(jié)皰疹病毒科(Herpesviridae)第四節(jié)腺病毒科（Adenoviridae）,第一節(jié)痘病毒科(Poxviridae),本科若干成員在病毒學上有重要意義。Jenner(1798)描述的用牛痘病毒預防人類天花，是病毒免疫的里程碑。目前痘苗病毒及其他痘病毒被作為基因工程疫苗的載體廣泛應用，雞痘、羊痘及羊口瘡危害較嚴重，牛痘病毒具有公共衛(wèi)生意義，黏液瘤及皮膚疙瘩病病毒等是檢疫對象。,分類,本科分兩個亞科:脊椎動物痘病毒亞科及昆蟲痘病毒亞科。前者又分8個屬，除疣病毒屬外，均對動物有致病性。此外，從蜥蜴、蛙、鹿、袋鼠等新分離的痘病毒尚末鑒定。隨著研究的不斷深入，對痘病毒的致病性有新的認識，例如昆蟲痘病毒原先只知道對昆蟲致病，近年來又發(fā)現(xiàn)它對魚類有致病作用。,形態(tài),(1)多為磚形(250nm250nm200nm)；少數(shù)為卵圓形(260nm160nm)副痘；（2）衣殼中含類脂與管狀或球管狀的蛋白質結構，稱為DNA芯髓，芯髓之旁為兩個側體，具有囊膜。,主要特征,（1）基因組單分子的線狀雙股DNA，約200kb；（2）細胞漿內復制；（3）通過胞吞方式出芽，而非細胞裂解釋放出病毒粒子。（4）能在上皮細胞漿中形成胞漿包涵體。,副痘病毒,某些末分類的爬行動物的痘病毒外形為磚狀，但表面結構類似副痘病毒。病毒顆粒的外層結構之內是啞鈴樣的芯髓，以及兩個功能不明的側體(laterbody)。芯髓內含病毒DNA及若干蛋白質。其囊膜含有宿主細胞的類脂成分及某些病毒特殊蛋白。,抵抗力,（1）怕熱：55，20min或37，24h喪失感染力；（2）怕日光和紫外線:可迅速滅活；（3）抗冷，抗干燥；（4）病灶干痘痂，毒力可保存幾個月。,傳播,痘病毒在動物間的傳播途徑如下:皮膚的傷口感染，或由污染環(huán)境的直接或間接傳染。例如口瘡病毒還可通過呼吸道感染，綿羊痘、豬痘、雞痘及黏液瘤也可通過昆蟲叮咬感染。痘病毒感染宿主譜一般較窄，對環(huán)境抵抗力較強，在干燥的痂皮中可存活數(shù)年之久。,培養(yǎng),痘病毒可在發(fā)育的雞胚絨毛尿囊膜上生長，多數(shù)可在膜上形成痘斑，如山羊痘、禽痘、牛痘等。痘斑的形態(tài)、顏色、大小以及形成的時間因痘病毒的種類而異。黏液瘤病毒引起的痘斑比較小，獨立而分散分布，呈灰白色。而牛痘、痘苗病毒常侵害血管，常為出血壞死性的痘斑?？筛鶕话咛卣?，對病毒作出初步鑒定。,致病性,痘病毒可引起各種動物的急性和熱性傳染病，特征是皮膚和粘膜發(fā)生特殊的丘疹和皰疹。兔痘病毒所致的疾病為傳染性皮膚纖維瘤和粘液瘤。禽痘病毒所引起的疾病特點是在上皮組織產生增生性和腫瘤性病。,診斷,（1）病毒分離：采取無菌的清朗庖液或取痘斑研磨后，加雙抗處理后，雞胚絨毛尿囊膜接種，在37孵育57d，可見絨尿膜上形成增生性、壞死性痘皰。（2）病理切片：將絨尿膜固定制作切片，用蘇木素和伊紅染色，在上皮細胞的胞漿內可以見到嗜酸性包涵體。,1、雞痘病毒,（1）禽痘病毒屬成員。（2）某些毒株具有血凝素：雞、其它禽類、綿羊等的紅細胞。（3）致病性：可分為三種病型，即皮膚型、白喉型和混合型。皮膚型：在雞冠、肉髯和眼皮等處，產生一種特殊的痘子。白喉型：主要在口腔和咽喉部分，先在粘膜上生成一種黃白色小結節(jié)，后逐漸融合形成一層黃白色干酪樣的假膜。,輕度感染多無全身變化嚴重者精神沉郁,禽痘,食欲減退，貧血、消瘦,禽痘,頭面部痘痂,禽痘,眼部痘痂,禽痘,喙部痘痂,禽痘,喙部痘疹,禽痘,鴿翅部和頭面部痘痂,禽痘,有時痘疹和痘痂同時存在,禽痘,鴿腿部和爪部病變,禽痘,爪部痘痂,禽痘,爪部嚴重痘痂，嚴重時跛行,禽痘,蛋雞頭面部痘疹和痘痂同時存在,禽痘,病雞常有結膜炎,禽痘,眼瞼粘連,眼瞼粘連,禽痘,皮膚無痘疹，只表現(xiàn)呼吸困難、流鼻,禽痘,皮膚有痘痂，呼吸困難,禽痘,皮膚型在病變發(fā)展的不同時期可見痘疹、痘痂和痘痂脫落后形成的白色斑痕或潰瘍,禽痘,黏膜型可見口腔黏膜有痘樣痂皮,禽痘,黏膜型雞痘口腔病變,禽痘,氣管黏膜白色痘疹,禽痘,氣管黏膜密布白色痘疹,禽痘,防制,目前主要采用雞痘疫苗進行預防。雞痘活疫苗：用于35日齡以上的幼雞，對雛雞有一定的毒力。鴿痘活疫苗：毒力比雞痘疫苗弱，用于1日齡雛雞和產蛋母雞，一般采用毛囊接種法。雞痘鵪鶉化活疫苗：毒力很低，雛雞使用安全，效果良好。注意發(fā)病季節(jié)，驅除傳播本病的蚊、蠓、蜱等吸血昆蟲，加強衛(wèi)生消毒。,2、綿羊痘病毒,（1）致病性：自然條件下只感染綿羊，致全身性皰疹，肺常出現(xiàn)特征性干酪性結節(jié)，各種綿羊對綿羊痘病毒的易感性不同，死亡率550%不等。人由于直接接觸病羊污染的物質也可感染。（2）培養(yǎng)：可在雞胚絨毛尿囊膜上、綿羊、山羊、犢牛睪丸細胞培養(yǎng)中生長，并產生明顯的CPE。（3）預防：定期接種疫苗，常用羊痘氫氧化鋁苗或雞胚化羊痘弱毒疫苗。,3、山羊痘病毒,（1）該病毒與綿羊痘病毒之間存在共同抗原。（2）在自然條件下僅感染山羊，表現(xiàn)為發(fā)熱、有粘液性、膿性鼻漏及全身性皮膚丘疹。,4、粘液瘤病毒,（1）致病性：野兔、家兔都非常易感。兔感染48h后出現(xiàn)臨床癥狀，首先眼結膜炎，接著頭部廣泛腫脹，呈特征性的“獅子頭”，嚴重者體溫升高到42，多在48h死亡。澳大利亞曾引入此病毒，以圖消滅過剩的野生家兔。（2）培養(yǎng)：雞胚絨毛尿囊膜，3d后產生直徑0.51.0mm的圓形痘皰。,5.口瘡病毒(Orfvirus),本病毒為副痘病毒屬的代表種，引致羊的口瘡，又名綿羊接觸傳染性膿皰皮炎。病毒感染綿羊及山羊，主要是羔羊，黃羊羔也可感染，羚羊感染后發(fā)生乳頭狀瘤，人類與羊接觸也可感染。羊口瘡廣泛分布于包括我國在內的世界養(yǎng)羊地區(qū)。,主要特性,病毒比較耐熱，5560經30min才能滅活，在-75時十分穩(wěn)定，在-10時穩(wěn)定性較差。干燥痂皮在野外可保持毒力達數(shù)月之久，于普通冰箱內至少可保存32個月，可被氯仿滅活。對乙醚低度敏感。對pH3.0無耐受力。,診斷,根據臨床癥狀及流行情況不難作出診斷。必要時可取病羊的水泡、膿皰或痂皮等，作電鏡檢查可確診。或接種綿羊睪丸細胞分離病毒。,預防與控制,用含毒的懸液或細胞培養(yǎng)的弱毒，在母羊產羔前數(shù)周在腿內側刺種，可使羔羊獲得有效的被動免疫。,第二節(jié)非洲豬瘟病毒科與虹彩病毒科（AsfarviridaeandIridoviridae）,虹彩病毒科：分為4個屬，其中2個屬與魚類和兩棲類疾病相關。非洲豬瘟病毒科：僅有一個成員，即非洲豬瘟病毒（Africanswinefevervirus，ASFV）。這兩科的病毒均為：線狀雙股DNA，20面體對稱，有囊膜。,1.非洲豬瘟病毒,為非洲豬瘟的病原體：僅家豬易感；以急性高熱為特征，全身出血，病程短，死亡率高；由呼吸道入侵扁桃體和鼻粘膜附近淋巴結增殖血流（病毒血癥，紅細胞及白細胞中含毒）。,病毒的特點（1）雙股DNA，190kb；（2）是唯一已知的核酸為DNA的蟲媒病毒。本病毒各個毒株之間免疫原性很低，對同株的免疫力也是短暫的，目前尚無有效疫苗可用。注意：我國目前沒有非洲豬瘟，必須嚴加防范！,第三節(jié)皰疹病毒科(Herpesviridae),皰疹病毒在哺乳類、鳥類、爬行類、兩棲類、昆蟲及軟體動物均有發(fā)現(xiàn)，除綿羊外的家畜家禽，均可引致重要的傳染病，例如牛鼻氣管炎病毒、偽狂犬病毒及馬立克病病毒等。迄今至少已鑒定100種皰疹病毒，其中至少19種已完成全基因組測序，包括馬皰疹病毒1、2及4型、牛鼻氣管炎病毒1型、牛惡性卡它熱病毒及斑點叉尾鮑皰疹病毒。,主要特性,1、基因組為單分子線狀雙股DNA，約125235kb。2、直徑150nm，162個殼粒組成的20面體對稱，有囊膜，囊膜上有糖蛋白的纖突。3、病毒衣殼在細胞核內復制和裝配，可形成巨大的包涵體，后經核膜以芽生方式獲得囊膜；目前尚不明確如何通過細胞質。,與獸醫(yī)相關的幾個皰疹病毒,偽狂犬病毒（Pseudorrabiesvirus）禽傳染性喉氣管炎病毒（Avianinfectiouslaryngotracheitisvirus）馬立克病病毒（Mareksdiseasevirus，MDV）鴨瘟病毒（Duckplaguevirus）,1、偽狂犬病毒,（1）分類地位：為皰疹病毒甲亞科成員，又名豬皰疹病毒1型。（2）致病性豬為原始宿主，也可感染馬、牛、綿羊、山羊及多種野生動物。,主要癥狀成年豬多為隱性感染，少數(shù)出現(xiàn)輕微發(fā)熱和神經癥狀；幼豬感染后呈發(fā)熱、麻痹、昏迷等癥狀，死亡率很高；懷孕母豬流產、死胎或木乃伊胎；其它動物感染后死亡率很高，特征癥狀為體軀某部奇癢。,（3）病毒分布與動物排毒情況病毒分布：最初位于扁桃體，感染24hr內可從頭部神經節(jié)、脊髓及橋腦中分離到病毒排毒：康復豬可通過鼻腔分泌物及唾液持續(xù)排毒，但糞、尿不帶毒。,（4）病毒培養(yǎng)易在雞胚絨毛尿囊膜上生長，接種后3-4d能形成大小不一的隆起的白色痘斑可在細胞培養(yǎng)中生長：兔、豬和倉鼠的腎細胞（可產生CPE和空斑，形成包涵體）；兔和豚鼠睪丸細胞；雞胚成纖維細胞。,微生物學診斷,動物試驗：12mL適當稀釋的病腦組織懸液皮下接種兔；25d后于接種部位出現(xiàn)奇癢癥狀，最后麻痹致死。病毒分離：常用豬腎細胞系(PK-15)，病毒接種后2472h，出現(xiàn)CPE（細胞層折光性，最后脫落，形成合胞體）。病毒鑒定：可用特異性抗血清做中和試驗、免疫熒光試驗鑒定病毒；ELISA（國際貿易指定試驗）：能迅速檢測大量樣品；PCR技術：鑒定偽狂犬病毒，多用于隱性感染。,預防滅活苗弱毒苗基因缺失苗，在計劃根除偽狂犬病的國家，可選用此類疫苗。,2.禽傳染性喉氣管炎病毒,屬雙股DNA病毒，皰疹病毒科，又名禽皰疹病毒1型，僅1個血清型。20面體對稱，球形。絨尿膜接種，在絨毛尿囊膜增生，壞死，形成大小不等的灰白色痘斑。各種年齡雞均可被感染，僅以成年雞的癥狀最典型：病雞呈現(xiàn)呼吸困難和咳出血性滲出物；產蛋下降，蛋殼褪色，產軟殼蛋。,病雞呼吸困難，表現(xiàn)為頭頸伸直，張口呼吸，常發(fā)出羅音,傳染性喉氣管炎,病雞劇烈甩頭或呈痙攣性咳嗽，?？瘸鲅苑置谖铮嘁蛑舷⑺劳?傳染性喉氣管炎,病毒分離,病料采集：發(fā)病早期的氣管滲出物、氣管粘膜及肺組織。雞胚接種：絨尿膜接種，第3d開始形成痘斑,56d死亡。雛雞接種：易感雛雞接種后34d出現(xiàn)明顯的癥狀和病變。,3.馬立克病病毒,雙股DNA病毒，皰疹病毒科，又名禽皰疹病毒2型。裸露的MDV：直徑85100nm，常見于感染細胞的核內，胞漿中偶爾也可看到。有囊膜的MDV：直徑150160nm，主要見于核膜和核泡，有時見于胞漿。羽囊上皮內的病毒子：完全病毒，不與細胞結合，能在體外存活較長時間，有傳染性。,主要感染雞和火雞，鵪鶉、稚雞、鷓鴣也能感染。以淋巴細胞增生和腫瘤形成為特征，潛伏期較長。一般以23月齡的雞發(fā)病最為嚴重。感染雞群的墊料和羽毛具有傳染性：含有從羽囊上皮細胞來的病毒，傳染性在室溫可保持48個月，在4至少保持10年，但常用化學消毒劑作用10min就能使之滅活。,皮膚型病雞可見全身毛囊腫瘤性增生,馬立克氏病,馬立克氏病,神經型病雞常見一側腰薦神經增粗,肝臟彌漫性腫瘤結節(jié),馬立克氏病,肺臟切面完全瘤化,馬立克氏病,微生物學診斷,采集病料與病毒分離：用病雞的腫瘤組織或抗凝血作為接種材料；血清學試驗：常用瓊擴試驗；流行期，常用高免血清檢測病雞羽囊上皮中的病毒，流行后期，可用已知病毒抗原檢查病雞血清中的抗體。熒光抗體試驗,4.牛傳染性鼻氣管炎病毒,又名牛皰疹病毒1型，屬皰疹病毒甲亞科。感染牛，主要有呼吸道及生殖道兩種表現(xiàn)型。呼吸道型極少發(fā)生于舍飼牛，常見于圍欄牛。引致多種癥狀，包括鼻氣管炎、膿皰性陰道炎、龜頭包皮炎、結膜炎、流產及腸炎，新生犢?？蔀槿硇约膊。⒖捎心X炎。,致病機理,潛伏感染的帶毒?？赡芙K生排毒，成為傳染源。生殖道型可因性交或人工授精引起，呼吸道型與結膜炎可因氣霧傳染。上述兩型均為局部上皮細胞壞死，壞死灶周邊細胞核內可見包涵體。病毒在犢牛肺、睪丸或腎細胞培養(yǎng)生長良好，12d可產生明顯的細胞病變，并有嗜酸性核內包涵體。經適應可在HeLa細胞培養(yǎng)中生長，不能在雞胚生長。,診斷,可取病變組織作涂片或切片，作熒光抗體染色或PCR檢測。必要時可接種牛胚肺細胞等作病毒分離。ELISA法可檢測血清及奶中的抗體。,預防與控制,在流行較嚴重的國家，一般用疫苗預防控制，常用各種弱毒疫苗及基因缺失疫苗。疫苗雖不能防止感染，但可明顯降低發(fā)病率及患病嚴重程度。桿狀病毒表達的gD糖蛋白或含有該基因的DNA疫苗也已試用于免疫預防。在發(fā)病率低的歐洲國家，則采取淘汰陽性牛的嚴厲措施，不再允許使用疫苗。,5.鴨瘟病毒(duckplaguevirus),又名鴨皰疹病毒1型(Anatidherpesvirus1)，引致鴨瘟。主要危害家鴨、番鴨、野鴨、鵝、天鵝及其他水禽也易感。遷徒性水禽對病毒起傳播作用。野鴨在感染后1年以上仍能分離到病毒。,致病機理,病毒只有一個血清型，但毒力有差異。病毒在814d齡鴨胚絨尿膜及鴨胚成纖維細胞上均易生長，前者絨尿膜可出現(xiàn)灰白色壞死灶，胚體死亡，肝有壞死灶。后者可形成核內包涵體。在雞胚或雞胚細胞上經適應后也可生長。病鴨發(fā)生腸炎、脈管炎以及廣泛的局灶性壞死，產蛋率可下降25%40%，發(fā)病率在5%100%，出現(xiàn)臨床癥狀的病鴨大多數(shù)死亡?？赏ㄟ^接觸傳染。,診斷,可結合臨床癥狀作組織切片熒光抗體染色，或檢測包涵體，必要時可分離病毒。應注意與雛鴨肝