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第38講 基因工程及其安全性1根據(jù)基因工程的有關知識,回答下列問題:(1)限制性核酸內切酶切割dna分子后產生的片段,其末端類型有_和_。(2)質粒運載體用ecor 切割后產生的片段如下:aattcg gcttaa為使運載體與目的基因相連,含有目的基因的dna除可用ecor 切割外,還可用另一種限制性核酸內切酶切割,該酶必須具有的特點是_。(3)按其來源不同,基因工程中所使用的dna連接酶有兩類,即_dna連接酶和_dna連接酶。(4)逆轉錄作用的模板是_,產物是_。若要在體外獲得大量逆轉錄產物,常采用_技術。(5)基因工程中除質粒外,_和_也可作為運載體。(6)若用重組質粒轉化大腸桿菌,一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞,原因是_。解析:(1)dna分子經限制酶切割產生的dna片段末端通常有黏性末端和平末端兩種類型。(2)為使運載體與目的基因相連,應使二者被切割后產生的末端相同,故用另一種限制酶切割產生的末端必須與ecor 切割產生的末端相同。(3)根據(jù)酶的來源不同,dna連接酶分為ecoli dna連接酶和t4dna連接酶。(4)以rna為模板,合成dna的過程稱為逆轉錄,若要在體外獲得大量dna分子,可以使用pcr技術。(5)在基因工程中,通常利用質粒作為運載體,另外噬菌體的衍生物和動植物病毒也可作為運載體。(6)大腸桿菌作為受體細胞時,常用ca2處理,使之成為能吸收周圍環(huán)境中dna分子的感受態(tài)細胞。答案:(1)黏性末端平末端(2)切割產生的dna片段末端與ecor 切割產生的相同(其他合理答案也可)(3)ecolit4(4)mrna(或rna)cdna(或dna)pcr(5)噬菌體的衍生物動植物病毒(其他合理答案也可)(6)未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源dna)的能力極弱(其他合理答案也可)2(2016靖江模擬)許多大腸桿菌的質粒上含有l(wèi)acz基因,其編碼的產物半乳糖苷酶在xgal和iptg存在的條件下,可以產生藍色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落呈現(xiàn)白色?;蚬こ讨谐@迷撛韽膶胭|粒的受體細胞中篩選出真正導入重組質粒的細胞,過程如圖所示。請據(jù)圖回答下列問題:(1)基因工程中,構建基因表達載體的目的是_。(2)限制酶ecor 的識別序列和切割位點是gaattc,sma的識別序列和切割位點是cccggg。圖中目的基因被切割下來和質粒連接之前,需在目的基因的右側連接相應的末端,連接的末端序列是_,連接過程中需要的基本工具是_。(3)轉化過程中,大腸桿菌應先用_處理,使其處于能吸收周圍dna的狀態(tài)。(4)菌落顏色為白色的是_,原因是_。(5)菌落中的目的基因是否表達,可采用的檢測辦法是_。解析:(1)基因工程中,構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能遺傳給后代,并表達和發(fā)揮作用。(2)根據(jù)限制酶ecor和sma的識別序列、切割位點和圖解判斷,圖中目的基因被切割下來和質粒連接之前,需在目的基因的右側連接相應的末端,連接的末端序列是ttaa,連接過程中需要的基本工具是dna連接酶。(3)轉化過程中,大腸桿菌應先用ca2處理,使其處于能吸收周圍dna的狀態(tài)。(4)由于lacz標記基因區(qū)插入外源基因后被破壞,不能表達出半乳糖苷酶,故菌落為白色菌落。(5)可采用抗原抗體雜交的辦法檢測菌落中的目的基因是否表達。答案:(1)使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能遺傳給后代,并表達和發(fā)揮作用(2)ttaadna連接酶(3)ca2(4)菌落lacz標記基因區(qū)插入外源基因后被破壞,不能表達出半乳糖苷酶,故菌落為白色(5)抗原抗體雜交3(2016山東日照一模)下圖表示利用細菌中抗蟲基因獲取抗蟲玉米的部分過程(表示操作流程,a、b表示分子,ce表示培養(yǎng)過程,其中過程d表示細菌與玉米細胞混合培養(yǎng)),請回答:(1)上述操作中,獲取目的基因的方法可能是_。流程用到的工具酶為_。(2)過程d指的是基因工程基本操作程序中的_,本過程中用到的方法是_。(3)流程中需要的培養(yǎng)基有_種,與動物細胞培養(yǎng)液顯著不同的是該培養(yǎng)基中含有_,從而促進根、芽的分化。(4)圖示過程中涉及的生物技術有_和_。解析:(1)圖中a、b表示質粒(載體)和基因表達載體。獲取目的基因的方法有多種,可以直接從基因文庫中獲取抗蟲基因。流程為目的基因和質粒重組,需要用到dna連接酶。(2)過程d是指將目的基因導入受體細胞,將目的基因導入植物細胞常使用的方法是農桿菌轉化法。(3)流程為植物組織培養(yǎng)過程,需要分別誘導愈傷組織形成和誘導愈傷組織分化,因此需用不同的培養(yǎng)基。通過添加不同濃度比例的植物激素可以促進根、芽的分化。(4)圖中涉及的生物技術包括基因工程和植物組織培養(yǎng)。答案:(1)直接獲取(從基因文庫中獲取等)dna連接酶(2)將目的基因導入受體細胞農桿菌轉化法(3)2植物激素(4)基因工程植物組織培養(yǎng)4(2016山東泰安模擬)設計并生產更加符合人類需要的蛋白質具有極為廣闊的應用前景。利用胚胎工程技術生產預期蛋白質的流程如圖所示。(1)過程所示的生物工程為_。該工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎,通過_的修飾或合成,對現(xiàn)有的_進行改造,或制造出一種新的蛋白質,以滿足人類生產生活的需求。(2)若預期蛋白質欲通過乳腺生物反應器生產,需在過程之前,對精子進行篩選,以保留含_染色體的精子并對精子進行_處理。(3)若過程中的卵母細胞來自從屠宰場收集的卵巢,則在過程之前,需進行體外培養(yǎng)到_期方能受精。為提高培育成功率,進行過程之前,要對供、受體動物進行_處理。(4)用胚胎分割技術處理發(fā)育到_期或囊胚期的早期胚胎并進行胚胎移植,可獲得同卵雙胎或多胎。解析:(1)蛋白質工程通過基因的修飾或合成,對現(xiàn)有的蛋白質進行改造,或制造出一種新的蛋白質,以滿足人類生產生活的需求。(2)若通過乳腺生物反應器生產預期蛋白質,需要獲得雌性個體,即使獲能的x精子與卵子受精。(3)體外獲得的卵子要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才可與獲能的精子受精。(4)利用胚胎分割技術將發(fā)育到桑椹胚期或囊胚期的早期胚胎進行分割、移植,可獲得同卵雙胎或多胎。答案:(1)蛋白質工程基因蛋白質(2)x獲能(3)減數(shù)第二次分裂中同期發(fā)情(4)桑椹胚5病毒疫苗的研制是現(xiàn)代生物技術應用最廣泛的領域,現(xiàn)在研發(fā)的第二、三代病毒疫苗都基于dna重組技術而建立。請分析回答下列問題:(1)第二代疫苗是以編碼病毒抗原蛋白的rna為模板,經_酶的作用獲得目的基因,再利用_這些工具酶構建重組質粒。形成的重組質粒與經過_處理的大腸桿菌細胞混合轉化大腸桿菌,擴增大腸桿菌以獲得大量的抗原蛋白。(2)在構建好的重組質粒中,引導目的基因表達的序列是_,它是_的識別和結合位點。(3)第三代疫苗即“dna疫苗”,是將編碼某

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