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文檔簡介

細(xì)胞生物學(xué)摘要第一章 細(xì)胞概述細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,也是生命活動(dòng)的基本單位,由膜包圍著含有細(xì)胞核或擬核的原生質(zhì)所組成。1665年胡克首先發(fā)現(xiàn)細(xì)胞(顯微圖譜),1838年,德國植物學(xué)家施萊登創(chuàng)立了植物細(xì)胞學(xué)說;1939年,德國動(dòng)物學(xué)家施旺創(chuàng)立了動(dòng)物細(xì)胞學(xué)說。1965年,Derobtis將其編著的普通細(xì)胞學(xué)改為細(xì)胞生物學(xué)標(biāo)志著細(xì)胞生物學(xué)的誕生,研究細(xì)胞及其生物學(xué)功能的科學(xué)稱為細(xì)胞生物學(xué)。作為生命活動(dòng)的結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,細(xì)胞有著各種形態(tài),但又有一系列的共同點(diǎn):細(xì)胞都具有選擇性的膜結(jié)構(gòu)、遺傳物質(zhì)和核糖體,都能進(jìn)行自我增殖,都有新陳代謝和運(yùn)動(dòng)性。組成細(xì)胞的化合物有水、無機(jī)鹽、小分子有機(jī)物(糖、脂、核苷酸及氨基酸等),以及核酸、蛋白質(zhì)、多糖等生物大分子。細(xì)胞分原核細(xì)胞和真核細(xì)胞兩大類。原核細(xì)胞沒有核膜,缺乏多種細(xì)胞器,但有核糖體;真核細(xì)胞分生物膜體系、遺傳信息表達(dá)體系、細(xì)胞骨架體系。病毒不具細(xì)胞結(jié)構(gòu),只含核酸和蛋白質(zhì),是非細(xì)胞的生命體。第二章 細(xì)胞生物學(xué)研究方法顯微成像包括直接成像和間接成像。顯微技術(shù)是生物學(xué)中最基本的研究技術(shù),包括光學(xué)顯微技術(shù)和電子顯微技術(shù)。顯微鏡是利用透鏡的成像原理制成的,主要參數(shù)有透鏡分辨率、放大率。光學(xué)顯微鏡因受可見光波長的限制,最小只能分辨0.2m的細(xì)微結(jié)構(gòu),電子束的波長比光波長小得多,因此電子顯微鏡的使用可使分辨率大提高。常見的光學(xué)顯微鏡有普通雙筒顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、暗視野顯微鏡、倒置顯微鏡。電子顯微鏡是研究亞顯微結(jié)構(gòu)的主要工具,包括透射電鏡和掃描電鏡。細(xì)胞化學(xué)技術(shù)包括酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)等。流式細(xì)胞分選技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)和現(xiàn)代生物技術(shù)中的重要技術(shù),可用于分選細(xì)胞和染色體。細(xì)胞工程技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)與遺傳學(xué)的交叉學(xué)科,主要利用細(xì)胞生物學(xué)的原理和方法,結(jié)合工程學(xué)的技術(shù)手段,按照人們預(yù)先的設(shè)計(jì)改變或創(chuàng)造細(xì)胞遺傳性的技術(shù),主要內(nèi)容有:細(xì)胞融合、細(xì)胞生物反應(yīng)器、染色體轉(zhuǎn)移、細(xì)胞器移植、基因轉(zhuǎn)移、細(xì)胞及組織培養(yǎng)。分離技術(shù)是一大類技術(shù)的總稱,包括細(xì)胞組分的分離和生物大分子的分離,常見內(nèi)容有離心分離技術(shù)、層析分離技術(shù)。第三章 細(xì)胞質(zhì)膜與跨膜運(yùn)輸細(xì)胞質(zhì)膜是細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。細(xì)胞膜的主要功能有:界膜和區(qū)室化、調(diào)節(jié)運(yùn)輸、功能定位和組織化、信號檢測與傳遞、能量轉(zhuǎn)換等功能。紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡單,是研究膜結(jié)構(gòu)的最好材料。經(jīng)過低滲處理的紅細(xì)胞會形成血影,可以較容易地分離出膜蛋白。紅細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)側(cè)的膜蛋白有血影蛋白、血型糖蛋白、帶3蛋白、肌動(dòng)蛋白、錨定蛋白等,它們和纖維蛋白一起組成膜骨架。膜的主要成分是膜脂、膜蛋白、膜糖三大類。磷脂、鞘脂、膽固醇是主要的膜脂,具有雙親媒性。根據(jù)膜蛋白的存在方式可分為整合蛋白、外周蛋白、脂錨定蛋白,細(xì)胞質(zhì)膜的生物學(xué)功能主要由膜蛋白完成。可用離子型和非離子型的去垢劑來分離膜蛋白。膜糖一般以糖蛋白或糖脂的形式存在,主要存在于質(zhì)膜外側(cè)。流動(dòng)鑲嵌模型是目前普遍接受的細(xì)胞質(zhì)膜結(jié)構(gòu)模型,它強(qiáng)調(diào)了膜的不對稱性和流動(dòng)性。膜脂、膜蛋白、膜糖是不對稱分布的,這就導(dǎo)致膜功能的不對稱性,從而保證生命活動(dòng)的高度有序性。膜的流動(dòng)性包括膜脂的側(cè)向擴(kuò)散、旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)、翻轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)和膜蛋白的隨機(jī)移動(dòng)、定向運(yùn)動(dòng)、局部擴(kuò)散等。膜的流動(dòng)性與細(xì)胞質(zhì)膜的酶活性、物質(zhì)運(yùn)輸、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、能量轉(zhuǎn)換、細(xì)胞周期、發(fā)育及衰老等過程有很大關(guān)系??梢酝ㄟ^人鼠細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)、淋巴細(xì)胞的成斑成帽反應(yīng)、光脫色熒光恢復(fù)技術(shù)、電子自旋共振譜技術(shù)研究膜的流動(dòng)性。溫度、脂肪酸鏈長度、不飽和度、膽固醇含量、卵磷脂與鞘磷脂的比值以及影響膜蛋白運(yùn)動(dòng)的因素都能影響膜的流動(dòng)性。物質(zhì)跨膜運(yùn)輸是細(xì)胞質(zhì)膜的基本功能,分為被動(dòng)運(yùn)輸和主動(dòng)運(yùn)輸。被動(dòng)運(yùn)輸不消耗能量,且順濃度梯度,分為簡單擴(kuò)散和促進(jìn)擴(kuò)散,后者需要載體蛋白或通道蛋白的幫助。通道蛋白有電位閘門通道、配體閘門通道、機(jī)械閘門通道等。水可以通過簡單通道跨膜,也可通過水通道蛋白協(xié)助跨膜。主動(dòng)運(yùn)輸?shù)?個(gè)基本特點(diǎn)是:逆濃度運(yùn)輸、依靠膜運(yùn)輸?shù)鞍?、需要消耗能量、具有選擇性和特異性。參與主動(dòng)運(yùn)輸?shù)腁TPase可分為P型泵、V型泵、F型泵和ABC運(yùn)輸?shù)鞍?,Na+/K+ 泵和Ca+泵均屬于典型的P型離子泵。細(xì)菌的主動(dòng)運(yùn)輸有磷酸化運(yùn)輸、細(xì)菌視紫紅質(zhì)質(zhì)子泵、ABC運(yùn)輸?shù)鞍椎取5谒恼?細(xì)胞環(huán)境與互作多細(xì)胞生命有機(jī)體中,細(xì)胞組成不同的組織,它們通過細(xì)胞相互間以及細(xì)胞與細(xì)胞外環(huán)境相互作用調(diào)節(jié)細(xì)胞的遷移、生長以及組織的三維結(jié)構(gòu)。動(dòng)物是由多種類型的細(xì)胞組成的有機(jī)體,不同類型的細(xì)胞通常組成不同的組織。在多數(shù)組織中,細(xì)胞要向細(xì)胞外分泌一群大分子,它們在細(xì)胞間交織連接成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),將這種結(jié)構(gòu)稱為細(xì)胞外基質(zhì)。細(xì)胞外基質(zhì)的組成可分為三大類:a、蛋白聚糖,它們能夠形成水性的膠狀物;b、結(jié)構(gòu)蛋白,如膠原和彈性蛋白,它們賦予細(xì)胞外基質(zhì)一定的強(qiáng)度和韌性;c、黏著蛋白,如纖連蛋白和層黏著蛋白,它們促使細(xì)胞同基質(zhì)結(jié)合。細(xì)胞識別,指細(xì)胞對同種或一種細(xì)胞、同源或異源細(xì)胞以及對自己和異己物質(zhì)分子的認(rèn)識和鑒別。細(xì)胞黏著則是指相鄰細(xì)胞或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)以某種方式黏合在一起,組成組織或與其他組織分開,這種黏合的方式比較松散。另外從事件發(fā)生的次序來說,細(xì)胞識別在先,細(xì)胞黏著在后,識別是黏著的基礎(chǔ)。細(xì)胞在識別和黏著的基礎(chǔ)上進(jìn)行細(xì)胞連接。細(xì)胞連接有三種方式:緊密連接、斑塊連接、通訊連接。比較復(fù)雜的是斑塊連接,它又分為同肌動(dòng)蛋白纖維相連的黏著連接(涉及相鄰兩細(xì)胞的黏著帶和涉及細(xì)胞同細(xì)胞外基質(zhì)的粘著斑)和同中間纖維相連的橋粒連接(涉及相鄰兩細(xì)胞的橋粒和涉及細(xì)胞同細(xì)胞外基質(zhì)的半橋粒)。第五章 細(xì)胞通訊 細(xì)胞通訊是指多細(xì)胞生物細(xì)胞間或細(xì)胞內(nèi)通過高度精確和高度有效的接受信息的通訊機(jī)制并通過放大引起快速的細(xì)胞生理反應(yīng),或者引起基因活動(dòng),從而發(fā)生一系列的細(xì)胞活動(dòng)來協(xié)調(diào)各組織行動(dòng),使之成為統(tǒng)一的生命整體并對外界環(huán)境變化做出綜合應(yīng)答。細(xì)胞有三種“談心”方式:通過信號分子、相鄰細(xì)胞表面分子的相互作用、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的作用。信號分子可分為水溶性和脂溶性兩種,按信號傳導(dǎo)方式可分為三種類型:激素、局部介質(zhì)、神經(jīng)遞質(zhì)。受體分為細(xì)胞表面受體和細(xì)胞內(nèi)受體兩種。表面受體分為單次跨膜、7次跨膜和多亞基跨膜3個(gè)家族,主要有離子通道耦聯(lián)受體、G-蛋白耦聯(lián)受體、酶聯(lián)受體等3種類型。受體與配體相互作用具有特異性、高親和力、飽和性、可逆性等特點(diǎn),并可引發(fā)生理反應(yīng)。研究受體與配體的相互作用常采用單克隆抗體標(biāo)記法、親和標(biāo)記法等。PKA系統(tǒng)是以cAMP作為第二信使激活蛋白激酶A(PKA)進(jìn)行信號放大,包括激活型和抑制型兩種類型。在激活型中,G蛋白偶聯(lián)受體與信號分子結(jié)合后,G蛋白被激活,活性亞基與其他兩個(gè)亞基分離并激活腺苷酸環(huán)化酶(AC),產(chǎn)生第二信使cAMP,cAMP激活PKA,PKA再作用于靶蛋白,產(chǎn)生細(xì)胞應(yīng)答。在抑制型中,激活的蛋白則抑制AC的活性。通過對AMP的降解可解除PKA系統(tǒng)的信號作用。PKC系統(tǒng)是以三磷酸肌醇(IP3)二酰甘油(DAG)為第二信使,并通過蛋白激酶C(PKC)引起級聯(lián)反應(yīng)。PKC系統(tǒng)中,磷脂酶C相當(dāng)于PKA系統(tǒng)的AC,經(jīng)G蛋白激活后的磷脂酶水解質(zhì)膜上的4,5-二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2),產(chǎn)生IP3和DAG。IP3 的作用是釋放出內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的Ca2+,DAG和Ca2+ 共同作用激活PKC,PKC參與多種生化反應(yīng)的催化。DAG和IP3 的信號解除都可以通過水解和磷酸化來完成,Ca2+ 的信號解除則需要通過IP3 磷酸化生成的IP4 與質(zhì)膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的Ca2+ -ATP酶的共同作用。酶聯(lián)受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)有以cGMP作為第二信使激活蛋白激酶G的系統(tǒng)以及受體酪氨酸激酶/Ras途徑。胰島素受體信號轉(zhuǎn)到調(diào)節(jié)和表皮生長因子受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑是典型的受體酪氨酸激酶途徑。Ras蛋白活性受到GAP和GEE的控制,其激活亦涉及Grb2蛋白和Sos蛋白。整聯(lián)蛋白介導(dǎo)的黏著斑的裝配、黏著斑的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)也是細(xì)胞表面受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要方式。細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)具有趨同、趨異于竄擾等現(xiàn)象。信號的終止通過信號分子水解、受體鈍化、受體減量調(diào)節(jié)以及磷酸酶的作用來實(shí)現(xiàn)。 第六章 核糖體與核酶核糖體是細(xì)胞內(nèi)一種核糖核蛋白顆粒,含有rRNA和r蛋白質(zhì)。核糖體可分為真核生物核糖體和原核生物核糖體,前者有細(xì)胞質(zhì)核糖體、線粒體核糖體和葉綠體核糖體3種類型。核糖體均由大小兩個(gè)亞基組成,進(jìn)行蛋白質(zhì)合成時(shí)才結(jié)合在一起。原核生物核糖體沉降系數(shù)為70S,由50S大亞基(含33種不同的蛋白質(zhì)以及23S和5SrRNA)和30S小亞基(含21種蛋白質(zhì)以及16SrRNA)組成;真核生物核糖體沉降系數(shù)為80S,由60S大亞基(含大約49種蛋白質(zhì)以及28S、5S和5.8SrRNA)和40S小亞基(含大約33種蛋白質(zhì)以及18SrRNA)組成。核糖體的生物發(fā)生包括蛋白質(zhì)和rRNA的合成、核糖體亞基的組裝等。真核生物的18S、5.8S、28SrRNA基因組成一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位,轉(zhuǎn)錄成一個(gè)45S的前體。原核生物的16S、23S、5S3種rRNA基因組成一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位。真核生物核糖體亞基在核仁中裝配,原核生物核糖體亞基在細(xì)胞質(zhì)中裝配。核糖體的功能是進(jìn)行蛋白質(zhì)多肽鏈的合成。核糖體中有一個(gè)mRNA結(jié)合位點(diǎn)和3個(gè)tRNA結(jié)合位點(diǎn):A位點(diǎn)、P位點(diǎn)、E位點(diǎn)。原核生物mRNA通過5端的SD序列與核糖體16SrRNA結(jié)合,真核生物則依賴于mRNA5端甲基化帽子結(jié)構(gòu)將mRNA與核糖體小亞基結(jié)合。多肽鏈的合成分為起始、延伸和終止3個(gè)不同過程。蛋白質(zhì)合成過程中可以形成多聚核糖體。小分子RNA可分為snRNA和scRNA,前者存在于細(xì)胞核中,后者存在于細(xì)胞質(zhì)中。反義RNA是與mRNA或其他RNA互補(bǔ)的RNA分子,來源于反向轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物或是不同基因的產(chǎn)物??煞譃轭?、類、類反義RNA。核酶是具有催化活性的RNA,分為RNA和蛋白質(zhì)復(fù)合物、小分子的RNA和、組內(nèi)含子三種類型。核剪接涉及核酶的作用,具有GU-AG規(guī)則、裝配成剪接體、形成套索結(jié)構(gòu)等3個(gè)特點(diǎn)。、組內(nèi)含子的剪接機(jī)制完全不同。RNA編輯是指mRNA水平上改變遺傳信息過程,涉及指導(dǎo)RNA的作用。第七章 線粒體與過氧化物酶體線粒體是細(xì)胞內(nèi)氧化磷酸化和形成ATP的主要場所,是細(xì)胞的“動(dòng)力工廠”。線粒體有內(nèi)外兩層膜,外膜含有孔蛋白,通透性高。內(nèi)膜通透性較低,通常向基質(zhì)折褶形成嵴,嵴上有許多規(guī)則排列的基粒。內(nèi)膜上有許多參與運(yùn)輸、合成、電子傳遞和ATP合成的酶類。線粒體中絕大多數(shù)蛋白質(zhì)由核基因編碼,在細(xì)胞質(zhì)游離核糖體上合成后通過轉(zhuǎn)運(yùn)肽運(yùn)輸?shù)骄€粒體中,轉(zhuǎn)運(yùn)過程需要受體、消耗能量以及分子伴侶的幫助等。線粒體是真核生物氧化代謝的部位。糖酵解生成的丙酮酸進(jìn)入線粒體基質(zhì),經(jīng)過三羧酸循環(huán)生成FADH2和NADH,再進(jìn)入呼吸鏈進(jìn)行氧化磷酸化,最后生成ATP和水。呼吸鏈上的電子載體有黃素蛋白、細(xì)胞色素、鐵硫蛋白和輔酶Q。主呼吸鏈由復(fù)合物、構(gòu)成,傳遞氧化NADH釋放的電子,次呼吸鏈由復(fù)合物、構(gòu)成,傳遞氧化FADH2釋放的電子。呼吸鏈通過3個(gè)氧化磷酸化偶聯(lián)位點(diǎn)即復(fù)合物、建立質(zhì)子動(dòng)力勢,驅(qū)動(dòng)ATP合酶合成ATP。英國生化學(xué)家Mitchell于1961年提出化學(xué)滲透假說,合理解釋了線粒體氧化磷酸化的機(jī)制。線粒體是一種半自主性的細(xì)胞器,具有有限的遺傳物質(zhì)以及蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)等。線粒體通過二裂法進(jìn)行增殖。關(guān)于線粒體的起源有內(nèi)共生學(xué)說和非內(nèi)共生學(xué)說兩種假說。過氧化物酶體是由一層單位膜包裹的囊泡,含40余種酶類,主要是氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶。過氧化物酶體具有解毒、調(diào)節(jié)氧濃度、氧化脂肪酸、進(jìn)行含氮物質(zhì)代謝等功能。過氧化物酶體也是通過二裂法進(jìn)行增殖,其酶類和蛋白質(zhì)均為核基因編碼并于細(xì)胞質(zhì)游離核糖體上合成后轉(zhuǎn)運(yùn)而來。第八章 葉綠體與光合作用葉綠體由葉綠體被膜、類囊體和基質(zhì)組成。類囊體分基粒類囊體和基質(zhì)類囊體,是光合作用反應(yīng)的場所。葉綠體的主要功能是進(jìn)行光合作用,分兩個(gè)階段進(jìn)行。光合作用的第一階段是光反應(yīng),包括光能的吸收、電子的傳遞、光合磷酸化3個(gè)主要過程。進(jìn)行光吸收的功能單位是光系統(tǒng),它由捕光復(fù)合物和光反應(yīng)中心復(fù)合物組成,被吸收的光能在色素分子之間傳遞。光反應(yīng)的第二步是電子傳遞。這一過程中,H2O是原初電子供體,NADPH+是最終電子受體。電子載體位于類囊體膜上,包括細(xì)胞色素、鐵氧還蛋白、NADPH+還原酶、質(zhì)體藍(lán)素、NADPH+、細(xì)胞色素b/f復(fù)合物等。電子傳遞復(fù)合物包括光系統(tǒng)、光系統(tǒng)和細(xì)胞色素b/f復(fù)合物。其中光系統(tǒng)又由捕光復(fù)合物、PS反應(yīng)中心復(fù)合物和水裂解放氧復(fù)合物組成,光系統(tǒng)由捕光復(fù)合物和PS反應(yīng)中心復(fù)合物組成。電子傳遞有環(huán)式和非環(huán)式兩種途徑。葉綠體光合磷酸化的機(jī)制與線粒體的氧化磷酸化相似。在電子傳遞過程中,類囊體膜兩側(cè)建立質(zhì)子動(dòng)力勢。光合磷酸化分為循環(huán)式光合磷酸化和非環(huán)式光合磷酸化。光合作用的第二階段是CO2的固定,即暗反應(yīng),在葉綠體基質(zhì)中進(jìn)行。光呼吸是一種依靠光來消耗O2,釋放CO2的作用。光呼吸作用的結(jié)果是降低了光合作用的效率。葉綠體是半自主細(xì)胞器,其基因組為環(huán)狀,編碼部分葉綠體所需的蛋白質(zhì)和RNA,大多數(shù)蛋白質(zhì)由核基因編碼并通過信號序列轉(zhuǎn)運(yùn)而來。葉綠體是由原生質(zhì)體分化來,并通過分裂而增殖。第九章 內(nèi)膜系統(tǒng)與蛋白質(zhì)分選和膜運(yùn)輸內(nèi)膜系統(tǒng)主要是指內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、液泡和細(xì)胞核膜,這些膜結(jié)構(gòu)是相互流動(dòng)的,處于動(dòng)態(tài)平衡,在功能上也是相互協(xié)同的。蛋白質(zhì)分選是細(xì)胞對新蛋白質(zhì)的識別、挑選,并通過特殊方式運(yùn)送靶位點(diǎn)的過程。內(nèi)膜系統(tǒng)是蛋白質(zhì)分選的主要系統(tǒng)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是由一層單位膜所形成的囊狀、泡狀和管狀的結(jié)構(gòu),并形成一個(gè)連續(xù)的網(wǎng)膜系統(tǒng)。它可分為糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能有:糖原分解釋放葡萄糖、類固醇激素的合成、脂的合成與運(yùn)轉(zhuǎn)、解毒和調(diào)節(jié)鈣離子濃度等。糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能主要是參與蛋白質(zhì)的合成與運(yùn)輸。實(shí)驗(yàn)證明,信號肽對于蛋白質(zhì)合成的分選具有決定作用。信號肽長度一般為1535個(gè)氨基酸,沒有特異性。信號肽通過與信號識別顆粒、依靠蛋白的相互作用將新合成的蛋白質(zhì)引導(dǎo)到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,新生肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔后除了要進(jìn)行正確的折疊外,還要經(jīng)過蛋白質(zhì)N端糖基化和形成脂錨定蛋白。高爾基體是蛋白質(zhì)的分選站,它由內(nèi)側(cè)網(wǎng)絡(luò)、中間囊膜和外側(cè)網(wǎng)絡(luò)3部分功能區(qū)室組成。高爾基體的功能主要是蛋白質(zhì)和脂運(yùn)輸、蛋白質(zhì)的糖基化、蛋白聚糖的合成、蛋白原的水解和蛋白質(zhì)的分選。溶酶體是動(dòng)物細(xì)胞中一種單層膜包被的膜結(jié)合細(xì)胞器。溶酶體可分為初級溶酶體、次級溶酶體和后溶酶體,次級溶酶體又可分為自噬性、異噬性和混合性溶酶體。溶酶體的功能有吞噬作用、自噬作用、自溶作用和細(xì)胞外的消化作用等。細(xì)胞的分泌活動(dòng)涉及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和細(xì)胞質(zhì)膜,可分為組成型和調(diào)節(jié)型兩種。前者不需任何信號觸發(fā),后者則相反。分泌活動(dòng)的過程主要包括蛋白質(zhì)的合成、分選、加工和胞吐作用。胞吐作用的相反過程是內(nèi)吞作用,它可分為吞噬作用、吞飲作用和受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用。受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用的典型例子是低密度脂蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合鐵離子的內(nèi)吞運(yùn)輸。還有一種特殊的內(nèi)吞作用就是轉(zhuǎn)胞吞作用。根據(jù)外被蛋白質(zhì)的不同,將膜泡分為:披網(wǎng)格蛋白小泡、COP被膜小泡和COP被膜小泡。披網(wǎng)格蛋白小泡的形成需網(wǎng)格蛋白、銜接蛋白和發(fā)動(dòng)蛋白的參與。COP被膜小泡的形成需裝配反應(yīng)因子(ARF)和外被體蛋白質(zhì)的參與。分泌小泡尋靶可用SNARE假說解釋。Rab蛋白可調(diào)節(jié)小泡運(yùn)輸與融合。膜的合成是通過不斷地將脂和蛋白插入已有的膜。磷脂的插入是通過磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,或通過出芽和膜融合。而膜融合蛋白則來源于糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),細(xì)胞內(nèi)側(cè)的外周蛋白則是由游離核糖體合成的。第十章 細(xì)胞骨架與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)細(xì)胞骨架是細(xì)胞內(nèi)以蛋白質(zhì)纖維為主要成分的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),包括微管、微絲和中間纖維,具有多種功能。微管主要分布在核周圍,它由微管蛋白異源二聚體組成。微管有單管、二聯(lián)管和三聯(lián)管,其中單管不穩(wěn)定,二聯(lián)管和三聯(lián)管穩(wěn)定。微管的體外組裝分為成核和延長兩個(gè)過程,其中成核是限速步驟。微管有()和()端,因此微管具有極性。影響微管體外裝配穩(wěn)定性的因素有GTP濃度、壓力、溫度、pH、微管蛋白臨界濃度、藥物等。細(xì)胞內(nèi)的微管處于動(dòng)態(tài)不穩(wěn)定狀態(tài)。微管通過與微管結(jié)合蛋白(MAP)結(jié)合擴(kuò)展其功能。微管的功能有:支架作用、細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)能壍?、纖毛和鞭毛的構(gòu)件、參與細(xì)胞的有絲分裂和減數(shù)分裂等。微絲又稱肌動(dòng)蛋白纖維,由肌動(dòng)蛋白組成。微絲的裝配分三個(gè)階段:成核、快速延長和穩(wěn)定,其中需ATP的參與。這一過程受G肌動(dòng)蛋白臨界濃度和一些離子濃度的影響。肌動(dòng)蛋白也有踏車現(xiàn)象。微絲的穩(wěn)定性受細(xì)胞松馳素和鬼筆環(huán)肽的影響。分子發(fā)動(dòng)機(jī)是一類利用ATP供能,產(chǎn)生推動(dòng)力,進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的運(yùn)輸或運(yùn)動(dòng)的蛋白。分子發(fā)動(dòng)機(jī)有肌球蛋白家族。驅(qū)動(dòng)蛋白家族和動(dòng)力蛋白家族等。其中驅(qū)動(dòng)蛋白和動(dòng)力蛋白是以微管作為運(yùn)行的軌道,而肌球蛋白則是以微絲作為運(yùn)行的軌道。分子發(fā)動(dòng)機(jī)的運(yùn)輸是單方向的、逐步進(jìn)行的。驅(qū)動(dòng)蛋白在神經(jīng)細(xì)胞中的功能是將物質(zhì)從神經(jīng)細(xì)胞的胞體運(yùn)向軸突末端,并沿微管的()端向()端移動(dòng)。細(xì)胞質(zhì)動(dòng)力蛋白的移動(dòng)方向則相反,它是有絲分裂中染色體運(yùn)動(dòng)的力的來源,也參與小泡和膜結(jié)合細(xì)胞器的運(yùn)輸。肌球蛋白是一種肌動(dòng)蛋白纖維的分子發(fā)動(dòng)機(jī),研究得較為清楚的有肌球蛋白、肌球蛋白和肌球蛋白。肌球蛋白為肌收縮和細(xì)胞質(zhì)分裂提供動(dòng)力,肌球蛋白和肌球蛋白則涉及細(xì)胞骨架與膜間的相互作用。中間纖維是三種骨架纖維中最復(fù)雜的一種,它的裝配分三個(gè)過程:由單體形成二聚體,再由二聚體形成四聚體,然后由8個(gè)四聚體組成原絲。中間纖維的功能有:為細(xì)胞提供機(jī)械強(qiáng)度支持、參與細(xì)胞連接、是核骨架的主要成分并維持細(xì)胞核膜穩(wěn)定。第十一章 細(xì)胞核與染色體細(xì)胞核是細(xì)胞的遺傳機(jī)構(gòu),主要有兩個(gè)功能:一是通過遺傳物質(zhì)的復(fù)制和細(xì)胞分裂保持細(xì)胞世代間的連續(xù)性;二是通過基因的選擇性表達(dá),控制細(xì)胞活動(dòng)。真核生物的細(xì)胞核有雙層的核被膜包裹著,核被膜由外核膜、內(nèi)核膜、核周腔、核孔復(fù)合體和核纖層等5個(gè)部分組成。核孔復(fù)合體具有選擇性運(yùn)輸作用,核蛋白進(jìn)入細(xì)胞核須由核定位信號(NLS)引導(dǎo),并且要有一種小GTP結(jié)合蛋白的幫助。分子伴侶是細(xì)胞內(nèi)的一類蛋白質(zhì),它們介導(dǎo)其它蛋白質(zhì)的正確裝配,但自己不成為最后功能結(jié)構(gòu)中的組分。第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的分子伴侶是核質(zhì)蛋白,它介導(dǎo)核小體組裝。分子伴侶的功能有:幫助蛋白質(zhì)折疊和裝配、幫助蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和定位、參與細(xì)胞器和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的發(fā)生、參與應(yīng)激反應(yīng)、參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等。染色質(zhì)是細(xì)胞間期細(xì)胞核內(nèi)能被堿性染料染色的物質(zhì),由DNA和蛋白質(zhì)組成。染色體是由染色質(zhì)壓縮包裝而成的棒狀結(jié)構(gòu),是中期染色質(zhì)的表現(xiàn)形式。組蛋白是真核生物染色體的基本結(jié)構(gòu)組分,有H1、H2A、H2B、H3、H4等五種類型。它們帶正電荷,能與DNA中帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)相互作用。其中, H2A、H2B、H3、H4為核小體核心組蛋白; H1在構(gòu)建核小體時(shí)起連接作用。級蛋白的某些氨基酸側(cè)鏈常會被磷酸化、乙?;蚣谆约癆DP的核糖化等修飾,這些修飾對保護(hù)、穩(wěn)定和調(diào)控遺傳物質(zhì)的功能起重要作用。非組蛋白是指細(xì)胞核中不參與核小體組成和一在蛋白質(zhì),它們有多種功能:包括染色體的構(gòu)建、調(diào)控基因的表達(dá)等。根據(jù)染色質(zhì)染色反應(yīng)不同,分為異染色質(zhì)和常染色質(zhì),異染色質(zhì)通常沒有轉(zhuǎn)錄活性。核小體又稱核體、核粒。由146個(gè)堿基對的DNA在八聚體的組蛋白外繞了1.75圈,H1位于核小體DNA的進(jìn)出口處。兩相鄰核小體DNA之間以連接DNA相連。在DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄時(shí),核小體不會完全解體。有多種模型推測核小體與轉(zhuǎn)錄的關(guān)系。DNA經(jīng)過4步包裝形成染色體,從DNA到染色體共壓縮了8400倍。著絲粒又稱主縊痕,動(dòng)粒是裝配在著絲粒外側(cè)的2層蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),細(xì)胞分裂時(shí)提供了與紡錘體微管結(jié)合的位點(diǎn)。而次縊痕則是核仁組織區(qū)。某些生物在發(fā)育過程中,某些組織的細(xì)胞會出現(xiàn)巨型染色體,包括多線染色體和燈刷染色體。核仁由核纖維區(qū)、顆粒區(qū)、核仁染色質(zhì)、基質(zhì)等四部分組成。它是一種動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)。核仁的主要功能是合成rRNA、裝配核糖體,也在一定程度上控制蛋白質(zhì)合成的速度。第十二章 細(xì)胞周期與細(xì)胞分裂生長和生殖是生物的基本特性,通常將通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生的新細(xì)胞的生長開始到下一次分裂形成子細(xì)胞結(jié)束為止所經(jīng)歷的過程稱為細(xì)胞周期。在這一過程中,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。將細(xì)胞周期分為兩個(gè)主要階段:分裂期(M期)的分裂間期。M期所持續(xù)的時(shí)間較短,一般為3060min,分裂間期的時(shí)間較長,根據(jù)細(xì)胞的類型和所處的條件不同而不同,有幾小時(shí)、幾天、幾周或更長。根據(jù)新細(xì)胞從開始生長到分裂前止的分裂間隔期中的生理和生化變化,可將分裂期分為:G1期、S期、G2期。細(xì)胞周期的調(diào)控機(jī)制最早是從酵母中獲得突破,發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞周期蛋白和周期蛋白依賴性蛋白激酶,它們控制著細(xì)胞周期的進(jìn)程。細(xì)胞周期中有兩個(gè)主要的關(guān)卡,一個(gè)是在G1期,另一個(gè)在G2期。有絲分裂是細(xì)胞周期的分裂期(M期)進(jìn)行的分裂活動(dòng)。在這個(gè)時(shí)期,通過紡錘體的形成和運(yùn)動(dòng),將在S期已經(jīng)復(fù)制好了的DNA平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞,以保證遺傳的連續(xù)性和穩(wěn)定性。這一時(shí)期的主要特征是出現(xiàn)紡錘體。有絲分裂包括核分裂的胞質(zhì)分裂兩個(gè)過程,一般在核分裂之后隨之發(fā)生胞質(zhì)分裂。M期持續(xù)的時(shí)間很短,但形態(tài)變化很大,根據(jù)形態(tài)變化的特征,通常將分裂期分為前期、早中期、中期、后期和末期。減數(shù)分裂是生殖細(xì)胞產(chǎn)生配子的分裂,包括兩次連續(xù)的分裂,形成4個(gè)單倍體子細(xì)胞。相繼的兩次分裂分別稱為減數(shù)分裂和減數(shù)分裂。由于細(xì)胞核分裂了兩次,而染色體只是在第一次減數(shù)分裂前的間期復(fù)制了一次,所以細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂導(dǎo)致染色體數(shù)目減少一半。第一次減數(shù)分裂可分為前期,中期,后期,末期。第二次減數(shù)分裂可分為前期,中期后期,末期。減數(shù)分裂是遺傳重組產(chǎn)生的主要原因,重組的兩個(gè)事件分別發(fā)生在前期和中期。第十三章 胚胎發(fā)育與細(xì)胞分化動(dòng)物和植物的雌配子通常稱為卵,而將雄配子稱為精子。配子形成的過程稱為配子發(fā)生。在配子發(fā)生過程中,二倍體的原始生殖細(xì)胞要通過減數(shù)分裂和分化才能轉(zhuǎn)化成單倍體的卵或精子在大多數(shù)動(dòng)物中,卵子形成(即卵子發(fā)生)發(fā)生在卵巢,并且有一個(gè)增殖期。雄性的精子發(fā)生與卵子發(fā)生過程有很大不同,它是在睪丸中通過精子發(fā)生過程產(chǎn)生的。精子與卵子的融合,即受精作用。受精作用所涉及的反應(yīng)包括:頂體反應(yīng)、皮層反應(yīng)、原核融合等。受精后胚胎的早期發(fā)育主要包括卵裂、胚泡形成的宮內(nèi)植入三個(gè)階段。細(xì)胞分化是胚胎細(xì)胞分裂后未定型的細(xì)胞在形態(tài)和生化組成上向?qū)R恍曰蛱禺愋苑较虬l(fā)展,或由原來較簡單具有可塑性的狀態(tài)向異樣化穩(wěn)定狀態(tài)發(fā)展的過程。細(xì)胞分化時(shí)的主要特征是細(xì)胞出現(xiàn)不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)和合成組織特異性蛋白質(zhì),演變成特定表型的細(xì)胞類型。其結(jié)果是,在空間上,細(xì)胞之間出現(xiàn)差異;在時(shí)間上同一細(xì)胞和它以前的狀態(tài)有所不同,從本質(zhì)上說,細(xì)胞分化是從化學(xué)分化到形態(tài)、功能分化的過程。由于分化和形態(tài)建成是非常復(fù)雜的過程,影響的因素多,包括:細(xì)胞粘合分子在胚胎發(fā)育中的作用、激素對形態(tài)分化和建成的影響、分化抑制作用、細(xì)

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