衣原體檢驗(yàn)立克次體檢驗(yàn)支原體檢驗(yàn)螺旋體及檢驗(yàn).ppt

支原體 概念 支原體是一類缺乏細(xì)胞壁 形態(tài)上呈高度多形性 可通過濾菌器 并能在無生命培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的最小的原核細(xì)胞型微生物 形態(tài)染色 無細(xì)胞壁 能通過濾菌器高度多形性革蘭陰性 不易著色常用吉姆薩染色 呈淡紫色 培養(yǎng)特性 細(xì)胞膜含膽固醇營(yíng)養(yǎng)要求高二分裂繁殖為主生長(zhǎng)緩慢 荷包蛋 樣菌落 生化反應(yīng) 分解葡萄糖糖 生殖道支原體 肺炎支原體不分解葡萄糖 利用精氨酸 人型支原體 口腔支原體等 肺炎支原體 其頂端結(jié)構(gòu)能黏附宿主上皮細(xì)胞從宿主細(xì)胞膜獲取營(yíng)養(yǎng) 并產(chǎn)生有毒代謝產(chǎn)物 或引起超敏反應(yīng) 使細(xì)胞損傷多經(jīng)呼吸道感染引起原發(fā)性非典型性肺炎 泌尿生殖道感染支原體 種類 人型支原體 生殖道支原體 溶脲脲原體傳播途徑 性傳播垂直傳播所致疾病 非淋病性尿道炎早產(chǎn) 流產(chǎn) 微生物學(xué)檢查 分離培養(yǎng) 菌落特征 形態(tài)觀察 生化反應(yīng)冷凝集試驗(yàn) 檢測(cè)冷凝集素PCR技術(shù) 采用基因擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)支原體的DNA 支原體與細(xì)菌的區(qū)別 立克次體 立克次體是一類嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物 是引起斑疹傷寒 恙蟲病 Q熱的病原體 立克次體共同特點(diǎn) 大小介于細(xì)菌和病毒之間 革蘭染色陰性 多呈球桿狀專性細(xì)胞內(nèi)寄生以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介多引起人畜共患病對(duì)抗生素敏感 生物學(xué)特性 形態(tài)染色 球桿狀 常用Giemsa染色 在感染的細(xì)胞中排列不規(guī)則培養(yǎng)方法 動(dòng)物接種 雞胚接種 細(xì)胞培養(yǎng)抗原構(gòu)造 與變形桿菌OX菌株有共同抗原 用于外斐反應(yīng) 致病性 致病物質(zhì)內(nèi)毒素 與細(xì)菌內(nèi)毒素毒性作用相似磷脂酶A 溶解宿主細(xì)胞膜和溶酶體膜致病機(jī)制 侵犯小血管內(nèi)皮細(xì)胞 節(jié)肢動(dòng)物叮咬 侵犯小血管內(nèi)皮細(xì)胞 第一次菌血癥 侵犯全身小血管內(nèi)皮細(xì)胞 第二次菌血癥 高熱頭痛皮疹 所致疾病 普氏立克次體 所致疾病 流行性斑疹傷寒傳染源 病人傳播媒介 人虱傳播方式 人虱 人虱 人 人 流行性斑疹傷寒傳播方式 所致疾病 地方性斑疹傷寒傳染源 鼠等傳播媒介 鼠蚤傳播方式 莫氏立克次體 鼠 鼠 鼠蚤 鼠蚤 人 地方性斑疹傷寒傳播方式 鼠虱 免疫性 以細(xì)胞免疫為主病后免疫力牢固 微生物學(xué)檢查 標(biāo)本采集 血液分離培養(yǎng) 接種豚鼠血清學(xué)試驗(yàn) 外斐反應(yīng) 衣原體 是一類能通過細(xì)菌濾器 嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生 有獨(dú)特發(fā)育周期的原核細(xì)胞型微生物 衣原體共同特征 革蘭陰性 圓形或橢圓形有細(xì)胞壁有獨(dú)特的發(fā)育周期 二分裂繁殖細(xì)胞內(nèi)寄生對(duì)抗生素敏感種類 沙眼衣原體肺炎衣原體鸚鵡熱衣原體 生物學(xué)特性 形態(tài)染色與發(fā)育周期 原體 感染型 始體 繁殖型 培養(yǎng)特性 專性細(xì)胞內(nèi)寄生雞胚卵黃囊接種 致病性與免疫性 致病物質(zhì)內(nèi)毒素 外膜蛋白所致疾病沙眼包涵體性結(jié)膜炎非淋病性泌尿生殖道感染性病淋巴肉芽腫呼吸道感染免疫性 病后免疫力不牢固 微生物學(xué)檢查 直接鏡檢 結(jié)膜病灶刮片Giemsa染色 查包涵體免疫熒光染色查衣原體碘液分離培養(yǎng)雞胚卵黃囊接種核酸檢測(cè) 螺旋體 是一類細(xì)長(zhǎng) 柔軟 彎曲呈螺旋狀 運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物 種類 鉤端螺旋體疏螺旋體密螺旋體 特征 有細(xì)胞壁有DNA和RNA以二分裂方式繁殖對(duì)抗生素敏感 鉤端螺旋體 引起鉤端螺旋體病 生物學(xué)性狀 形態(tài)染色細(xì)長(zhǎng) 螺旋細(xì)密 兩端彎曲如鉤常用Fontana鍍銀染色 染成棕褐色運(yùn)動(dòng)活潑培養(yǎng) 適宜溫度28 30 常用柯氏培養(yǎng)基 生長(zhǎng)緩慢抵抗力 一般 對(duì)青霉素敏感 在水中存活時(shí)間長(zhǎng) 致病性 致病物質(zhì) 溶血素 細(xì)胞毒因子 內(nèi)毒素樣物質(zhì)所致疾病 鉤端螺旋體病 人畜共患疾病傳染源 鼠類 豬傳播途徑 經(jīng)粘膜或破損皮膚經(jīng)胎盤傳播 臨床特征 鉤體血癥 眼紅腿疼淋巴大 寒熱酸痛一身乏 臨床類型 流感傷寒型黃膽出血型肺出血型腎功衰竭型等 免疫性 病后對(duì)同型鉤體有牢固免疫力以體液免疫抗感染為主 尿 血標(biāo)本 鏡檢 分離培養(yǎng) 血清學(xué)鑒定 動(dòng)物試驗(yàn) 檢測(cè)核酸 微生物學(xué)檢查 微生物學(xué)檢查 血清學(xué)診斷檢測(cè)特異性抗體 顯微鏡凝集溶解試驗(yàn) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 防治原則 防鼠 滅鼠 加強(qiáng)對(duì)帶菌家畜的管理流行地區(qū)易感人群接種疫苗治療首選青霉素 梅毒螺旋體 是引起梅毒的病原體梅毒屬性傳播疾病 生物學(xué)性狀 形態(tài)染色 兩端尖直 螺旋細(xì)密規(guī)則 運(yùn)動(dòng)活潑培養(yǎng)特性 不易人工培養(yǎng)抗原性 特異性抗原 刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性凝集抗體復(fù)合抗原 刺激機(jī)體產(chǎn)生梅毒反應(yīng)素抵抗力 極弱 對(duì)青霉素 四環(huán)素等敏感 致病性 致病物質(zhì) 莢膜樣物質(zhì) 粘多糖酶所致疾病 梅毒后天梅毒 經(jīng)性接觸傳染臨床分期一期梅毒 外生殖器硬性下疳二期梅毒 全身梅毒疹三期梅毒 皮膚粘膜潰瘍 侵犯內(nèi)臟器官或組織先天梅毒 經(jīng)胎盤傳給胎兒胎兒表現(xiàn)為流產(chǎn) 死胎出生后表現(xiàn)為鋸齒形牙 鞍形鼻等 免疫性 以細(xì)胞免疫為主抗磷脂抗體 梅毒反應(yīng)素 對(duì)機(jī)體無保護(hù)作用 僅供血清學(xué)試驗(yàn) 微生物學(xué)檢查 硬性下疳 梅毒疹滲出液 鏡檢梅毒螺旋體 血清標(biāo)本 非特異性試驗(yàn) 查梅毒反應(yīng)素 特異性試驗(yàn) 測(cè)定梅毒螺旋體特異性抗體 防治原則 加強(qiáng)性衛(wèi)生教育和嚴(yán)格社會(huì)管理 梅毒確診后 宜用青霉素等藥物及早予以徹底治療 二期梅毒 二期梅毒 三期梅毒 梅毒螺旋體 鉤端螺旋體 碘液染色 衣原體免疫熒光染色 原體 沙眼 獨(dú)特的發(fā)育周期 外斐反應(yīng) 變形桿菌OX菌株代替立克次體抗原進(jìn)行交叉凝集反應(yīng) 以檢測(cè)患者血清中有無立克次體抗體 以協(xié)助某些立克次體病的診斷 外斐反應(yīng)的交叉凝集 支原體與細(xì)菌L型的區(qū)別 支原體 荷包蛋 樣菌落 支原體電鏡圖 恙蟲病立克次體 所致疾病 恙蟲病傳染源 鼠等傳播媒介 恙螨傳播方式 恙蟲病傳播方式 鼠類 恙螨幼蟲 卵 成蟲 稚蟲 卵 成蟲 稚蟲 第二代幼蟲 人 病毒 病毒是個(gè)體微小 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單 只含一種核酸 在細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖的非細(xì)胞型微生物 病毒特征 體積微小 能通過濾菌器 需用電子顯微鏡觀察非細(xì)胞結(jié)構(gòu) 無細(xì)胞結(jié)構(gòu) 由蛋白質(zhì)和核酸組成 核酸類型單一 只含一種核酸嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生以復(fù)制方式增殖抵抗力特殊 耐冷不耐熱 對(duì)抗生素不敏感 病毒的基本性狀和分類 病毒的形態(tài) 結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成 病毒的大小與形態(tài) 病毒體 指完整的 成熟的具有感染性的病毒顆粒 病毒的測(cè)量單位 納米 nm 病毒形態(tài) 球形 桿形 絲狀 彈狀 磚形蝌蚪形等研究病毒大小和形態(tài)的方法 電子顯微鏡超濾膜法超速離心法 病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成 病毒結(jié)構(gòu) 基本結(jié)構(gòu) 核衣殼 輔助結(jié)構(gòu) 核心 衣殼 殼粒 衣殼 包膜 核心 只含一種核酸 DNA或RNA 分別稱DNA病毒和RNA病毒 控制病毒的增殖 變異 毒力等性狀除去病毒衣殼仍具有感染性的核酸稱感染性核酸 化學(xué)成分為蛋白質(zhì)構(gòu)型 螺旋對(duì)稱 20面體立體對(duì)稱 復(fù)合對(duì)稱具有保護(hù)核酸的作用具有抗原性 能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答通過與宿主細(xì)胞表面受體結(jié)合參與感染 衣殼 包膜 化學(xué)成分 類脂 多糖和蛋白質(zhì)類脂 多糖來自宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)由病毒基因編碼包膜蛋白形成刺突包膜蛋白的作用 具有抗原性參與病毒感染可引起機(jī)體發(fā)熱 病毒的增殖 病毒的增殖周期 吸附 穿入 脫殼 生物合成 組裝與釋放 病毒的增殖周期 吸附 特異性吸附穿入 通過胞飲 融合 轉(zhuǎn)位作用方式脫殼 生物合成 病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄復(fù)制子代病毒核酸轉(zhuǎn)譯子代病毒蛋白組裝與釋放芽生釋放 破胞釋放 病毒增殖示意圖 吸附 宿主細(xì)胞 穿入 脫殼 生物合成 組裝 釋放 病毒的異常增殖和干擾現(xiàn)象 病毒的異常增殖 頓挫感染 缺陷病毒病毒的干擾現(xiàn)象概念 兩種病毒同時(shí)或先后感染同一宿主細(xì)胞 可發(fā)生一種病毒干擾另一種病毒增殖的現(xiàn)象 干擾機(jī)理誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生干擾素 競(jìng)爭(zhēng)干擾干擾類型 同種干擾 異種干擾 自身干擾實(shí)際意義 指導(dǎo)疫苗的合理使用 理化因素對(duì)病毒的影響 溫度 病毒耐冷不耐熱 應(yīng)低溫保存病毒輻射 破壞病毒核酸結(jié)構(gòu) 導(dǎo)致病毒滅活脂溶劑 有包膜病毒對(duì)脂溶劑敏感消毒劑 可滅活病毒抗生素 病毒對(duì)抗生素不敏感 抗生素治療病毒性疾病無效 病毒的變異 變異類型 毒力變異耐藥性變異抗原性變異溫度敏感性變異變異機(jī)制基因突變基因重組 病毒的分類 根據(jù)宿主不同分類動(dòng)物病毒 植物病毒 昆蟲病毒 細(xì)菌病毒根據(jù)核酸類型分類 DNA病毒 RNA病毒根據(jù)有無包膜分類 有包膜病毒 無包膜病毒臨床分類呼吸道病毒 消化道病毒 肝炎病毒 蟲媒病毒 出血熱病毒 腫瘤病毒 亞病毒 類病毒 只有單股RNA 無蛋白質(zhì)衣殼主要引起植物疾病朊粒只含具有感染性的蛋白質(zhì) 分子量3 0 104 與老年性癡呆 多發(fā)性硬化癥 腦組織海綿狀淀粉樣變 瘋牛病 等有關(guān) 病毒的感染與免疫 病毒的感染方式 水平傳播 通過黏膜表面 呼吸道 消化道 泌尿生殖道通過皮膚傳播 媒介昆蟲叮咬皮膚醫(yī)源性傳播 經(jīng)輸血 注射 拔牙 手術(shù)等垂直傳播 經(jīng)胎盤傳播經(jīng)產(chǎn)道傳播 病毒感染的類型 隱性感染 成為病毒攜帶者 獲得免疫顯性感染 急性感染持續(xù)性感染慢性感染潛伏感染 慢發(fā)感染 病毒的致病機(jī)制 一 病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用影響細(xì)胞的生命力殺細(xì)胞感染非殺細(xì)胞感染細(xì)胞融合形成包涵體 有些病毒感染的細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下可觀察到胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)圓形或卵圓形的斑塊狀結(jié)構(gòu)細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞凋亡 二 病毒感染的免疫病理損傷體液免疫損傷通過 型超敏反應(yīng)引起損傷細(xì)胞免疫損傷通過Tc細(xì)胞和Th1細(xì)胞殺傷病毒感染的細(xì)胞 同時(shí)造成組織細(xì)胞損傷病毒直接損傷淋巴細(xì)胞或淋巴器官艾滋病毒直接殺傷CD4T細(xì)胞 抗病毒免疫 干擾素 干擾素概念 干擾素是個(gè)體出生后 由病毒或干擾素誘導(dǎo)劑刺激多種細(xì)胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白 種類 型干擾素 干擾素 干擾素 型干擾素 干擾素 免疫干擾素 干擾素的產(chǎn)生及干擾素的作用機(jī)制干擾素的生物學(xué)活性 抗病毒 免疫調(diào)節(jié) 抗腫瘤 非特異性殺傷不受MHC限制通過依賴抗體的殺傷作用 ADCC 不依賴抗體的殺傷作用 自然殺傷 干擾素可調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的殺傷作用 NK細(xì)胞 特異性免疫 體液免疫的保護(hù)作用中和抗體 阻止病毒吸附依賴抗體的細(xì)胞毒作用 ADCC 殺傷病毒寄生的細(xì)胞細(xì)胞免疫的保護(hù)作用TH1 釋放細(xì)胞因子效應(yīng)Tc CTL 特異性殺傷病毒寄生的細(xì)胞 微生物學(xué)檢查 標(biāo)本采集與送檢 用于培養(yǎng) 注意時(shí)間 部位 處理 保存血清學(xué)診斷 雙份血清標(biāo)本檢查方法 顯微鏡觀察 電鏡 光鏡血清學(xué) 查病毒標(biāo)記物 檢測(cè)特異性抗體病毒基因檢測(cè) 病毒的分離培養(yǎng) 組織細(xì)胞培養(yǎng) 將組織或細(xì)胞模擬體內(nèi)的生理?xiàng)l件在試管或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng) 使其生存或生長(zhǎng) 稱組織培養(yǎng) 組織培養(yǎng)方法 原代培養(yǎng) 如原代猴腎細(xì)胞等次代培養(yǎng) 二倍體細(xì)胞株 如人胚肺成纖維細(xì)胞傳代株W1 38傳代細(xì)胞系 多為腫瘤細(xì)胞或突變的二倍體細(xì)胞 如Hela細(xì)胞 Hep 2細(xì)胞等 雞胚接種 雞胚接種的優(yōu)點(diǎn)雞胚接種的缺點(diǎn)雞胚接種部位 卵黃囊接種 尿囊腔接種 絨毛尿囊膜接種 動(dòng)物接種 病毒的鑒定 初步鑒定 動(dòng)物感染 根據(jù)病毒感染動(dòng)物的表現(xiàn)初步判斷雞胚接種 根據(jù)接種部位不同 收獲不同材料 進(jìn)行觀察細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞病變效應(yīng)紅細(xì)胞吸附干擾作用物理化學(xué)實(shí)驗(yàn) 病毒的鑒定 最后鑒定 中和試驗(yàn)已知抗體 待檢病毒 細(xì)胞培養(yǎng) 觀察有無細(xì)胞病變交叉保護(hù)試驗(yàn)病毒免疫動(dòng)物 2周后 用標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物作攻擊試驗(yàn)不接種病毒的動(dòng)物 2周后 用標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物作攻擊試驗(yàn) 病毒的血清學(xué)診斷 標(biāo)本采集 早期和恢復(fù)期雙份血清急性期單份血清IgM的測(cè)定雙份血清的IgG的測(cè)定 常用方法中和試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)血凝抑制試驗(yàn)免疫熒光試驗(yàn)酶免試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn)間接血凝試驗(yàn) 特異性預(yù)防 人工主動(dòng)免疫滅活疫苗減毒活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗人工被動(dòng)免疫抗病毒免疫血清丙球 藥物治療 金剛烷胺 抑制病毒脫殼 預(yù)防感冒 病毒蛋白酶的抑制物 indinavir 核苷類藥物 皰疹凈 阿昔洛韋 抗病毒藥物 特異性抗體治療性疫苗 免疫制劑 其他 干擾素及干擾素誘生劑 中草藥 抗病毒基因治療 asODN asON 核酶 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 抗原 抗體 補(bǔ)體 綿羊紅細(xì)胞 溶血素 溶血 不溶血 病毒與抗體對(duì)應(yīng) 病毒與抗體不對(duì)應(yīng) 血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn) 血凝試驗(yàn) 血凝素 雞紅細(xì)胞 紅細(xì)胞凝集血凝抑制試驗(yàn) 血凝素 抗體 雞紅細(xì)胞 紅細(xì)胞不凝集 20面體立體對(duì)稱 RNA Capsomere 殼粒 螺旋對(duì)稱 病毒的分離培養(yǎng) 三大培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物接種雞胚接種細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞病變效應(yīng) CPE 病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變 干擾素的產(chǎn)生及作用機(jī)制 病毒結(jié)構(gòu)示意圖 核心 衣殼 包膜 無包膜