樟芝對(duì)乳腺癌的作用.doc

樟芝對(duì)乳腺癌的作用乳腺癌是乳房腺上皮細(xì)胞在多種致癌因子作用下，發(fā)生 了基因突變，致使細(xì)胞增生失控。由于癌細(xì)胞的生物行為發(fā) 生了改變，呈現(xiàn)出無序、無限制的惡性增生。它的組織學(xué)表 現(xiàn)形式是大量的幼稚化的癌細(xì)胞無限增殖和無序狀地?fù)頂D成 團(tuán)，擠壓并侵蝕破壞周圍的正常組織，破壞乳房的正常組織 結(jié)構(gòu)。乳腺細(xì)胞發(fā)生突變后便喪失了正常細(xì)胞的特性，組織結(jié) 構(gòu)紊亂，細(xì)胞連接松散，癌細(xì)胞很容易脫落游離，隨血液或 淋巴液等播散全身，形成早期的遠(yuǎn)程轉(zhuǎn)移，給乳腺癌的臨床 治愈增加了很大困難。全身重要臟器的轉(zhuǎn)移如肺轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn) 移、骨轉(zhuǎn)移等都將直接威脅人的生命，因此乳腺癌是嚴(yán)重危 及人體生命的惡性腫瘤。圖 18 乳腺癌乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，占惡性腫瘤發(fā)病率的 7-10%，是城市女性惡性腫瘤發(fā)病率的第一位。它的發(fā) 病常與遺傳有關(guān)，在 40-60 歲之間，絕經(jīng)期前后的婦女發(fā)病 率較高。樟芝提取液對(duì)乳腺癌包括三陰乳腺癌有良好的治療 效果。Hsin-Ling Yang 等（2006）證實(shí)了樟芝對(duì) MCF-7 乳腺癌 細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用，并能導(dǎo)致 MCF-7 細(xì)胞的凋亡。用 濃度為 25-150mg/mL 樟芝發(fā)酵液處理 MCF-7 細(xì)胞，可見樟芝 發(fā)酵液可以使 MCF-7 細(xì)胞的活性喪失、染色體濃縮、細(xì)胞內(nèi) DNA 片段數(shù)量和 G1 期細(xì)胞數(shù)量的累積，從而促進(jìn) MCF-7 產(chǎn) 生對(duì)樟芝發(fā)酵液的濃度依賴性細(xì)胞凋亡，其現(xiàn)象通過顯微鏡 觀察 ( 如圖 19)。更進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，MCF-7 在凋亡過程中， 伴隨有細(xì)胞中細(xì)胞色素 c 釋放、caspase-3 活化和特定蛋白水 解酶聚合酶（ADP-ribose）裂解等過程的發(fā)生。同時(shí)，伴隨有 Bax 蛋白水平的減少，及微量的 Bcl-2 的減少。另外，研究 過程中發(fā)現(xiàn)，樟芝可以誘導(dǎo) MCF-7 細(xì)胞中劑量依賴性活性氧（ROS）的生成。整個(gè)研究數(shù)據(jù)顯示，樟芝可以對(duì) MCF-7 細(xì) 胞的活性產(chǎn)生抑制，誘導(dǎo)其發(fā)生細(xì)胞凋亡，可用于抗癌藥物 的開發(fā)。圖 19 顯微鏡下樟芝處理后 MCF-7 細(xì)胞細(xì)胞分別用 0g/ml，50g/ml，100g/ml 和 150g/ml 的樟芝處理 24h。 每個(gè)實(shí)驗(yàn)平行三次。You-Cheng Hseu 等（2007）研究發(fā)現(xiàn)樟芝可以對(duì)乳腺癌 細(xì) 胞 MDA-MB-231 中 的 環(huán) 氧 化 酶 -2（COX-2） 的 活 性 產(chǎn) 生 抑制作用，并可誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞的凋亡。用不同濃度的樟芝 (40-240g/mL）處理 MDA-MB-231 細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，樟芝可 對(duì)其產(chǎn)生劑量和時(shí)間依賴性凋亡作用，伴隨的現(xiàn)象有染色體 濃縮和體間 DNA 片段增加、細(xì)胞色素 c 釋放、caspase 3 活化 和特定蛋白水解酶聚合酶（ADP-ribose）裂解等。該研究證實(shí)， 樟芝誘導(dǎo) MDA-MB-231 乳腺癌細(xì)胞的凋亡過程中，細(xì)胞中的 COX-2 的活性受到了抑制。Hsin-Ling Yang 等（2011）經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)樟芝可以通過對(duì) MAPK 信號(hào)通路的抑制實(shí)現(xiàn)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力產(chǎn)生 抑制。侵染試驗(yàn)和傷口愈合修復(fù)試驗(yàn)證實(shí)樟芝發(fā)酵液可以顯 著地對(duì) MDA-MB-231 細(xì)胞的入侵 / 遷移能力產(chǎn)生抑制作用， ( 如圖 20) 所示。圖 20 侵染試驗(yàn)和傷口愈合修復(fù)試驗(yàn)顯示樟芝對(duì) MDA-MB-231 細(xì)胞侵潤(rùn)和遷 移能力的抑制作用(A)MDA-MB-231 細(xì)胞用 80g/mL 的樟芝預(yù)處理 24h 后，進(jìn)行膜下細(xì)胞入侵 試驗(yàn)，并拍攝（放大 200 倍）；細(xì)胞的侵潤(rùn)能力皆是相對(duì)于未經(jīng)樟芝處理 細(xì)胞的侵潤(rùn)能力而言，未經(jīng)樟芝處理的細(xì)胞的浸染能力為 100%；細(xì)胞的侵 染力是由細(xì)胞計(jì)數(shù)板里細(xì)胞的數(shù)量決定的。(B) 細(xì)胞刮傷處理后用 80g/mL 的樟芝處理，用顯微鏡（放大 100 倍）拍 攝 0h 和 24h 時(shí)細(xì)胞修復(fù)情況，并計(jì)算封閉區(qū)細(xì)胞的數(shù)量。結(jié)果為三次平行 實(shí)驗(yàn)的均值 SD，* 表示與對(duì)比值具有顯著差異 (p0.05)。Yerra Koteswara Rao 等（2011）證實(shí)從樟芝中分離得到的Antrocin 作用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌 MDA-MB-231 細(xì)胞（MMCs）， 可 通 過 作 為 Akt/mTOR 途 徑 的 選 擇 性 小 分 子 抑 制 劑 而 實(shí) 現(xiàn) 對(duì) MDA-MB-231 細(xì)胞的抑制作用，作用示意圖 ( 如圖 21)。 PI3K/Akt/mTOR 是 一 種 公 認(rèn) 度 很 高 的 抗 癌 分 子 靶 點(diǎn) 途 徑。 Antrocin 對(duì) MMCs 的增殖抑制作用很強(qiáng)，其效果可超過阿霉 素、順鉑，所對(duì)應(yīng)的 IC50 為 0.6M。而且可以防止 MMCs 癌 細(xì)胞的聚集，但對(duì)于正常非癌變 MCF10A 和 HS-68 細(xì)胞無任 何毒副作用。另外，Antrocin 可誘導(dǎo) MMCs 細(xì)胞發(fā)生劑量依 賴性細(xì)胞凋亡及細(xì)胞色素 c 和聚合酶（ADP-ribose）的釋放。 Antrocin 也引起了時(shí)間依賴性的抗凋亡蛋白表達(dá)的減少，包 括 Bcl-2、Bcl-xL 和存活素；而且，可以使細(xì)胞中 mRNA 的 數(shù)量減少；同時(shí)伴隨著前凋亡蛋白和胞質(zhì)細(xì)胞色素 c 的增加。 經(jīng)過分子機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，antrocin 可抑制 Akt 及其下影響因子 mTOR、GSK-3 和 NF-B 的磷酸化。更進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)， 未經(jīng) antrocin 處理之前，由小分子干擾 RNA 導(dǎo)致的 Akt 磷酸 化的減少，可增強(qiáng)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用和凋亡促進(jìn)作用。 基于以上研究，得出 antrocin 作為 Akt/mTOR 的雙重抑制劑， 在臨床治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌將有很大的應(yīng)用前景。第四章樟芝的抗癌作用171圖 21 Antrocin 通過 Akt/mTOR 途徑作用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌 MDA-MB-231 細(xì)胞（MMCs）而實(shí)現(xiàn)對(duì) MDA-MB-231 細(xì)胞的抑制Chuan-Chen Lee 等（2012） 經(jīng) 研 究 發(fā) 現(xiàn) 樟 芝（AC） 對(duì) HER-2/neu 超表達(dá)乳腺癌 gMDA-MB-453 和 BT-474 細(xì)胞可以 表現(xiàn)出顯著的細(xì)胞毒性。其中，BT-474 細(xì)胞經(jīng) AC 作用后的 亞細(xì)胞情況 ( 如圖 22) 所示。免疫分析顯示，AC 對(duì) HER-2/ neu 癌細(xì)胞與細(xì)胞內(nèi)的酪氨酸磷酸化均可產(chǎn)生劑量依賴性抑 制。觀察發(fā)現(xiàn)，經(jīng) AC 處理后，細(xì)胞內(nèi)的活性氧（ROS）有 所增加，而抗氧化劑 N- 乙酰半胱氨酸（NAC）則可以有效的 阻止 AC 所誘導(dǎo)的 HER-2/neu 細(xì)胞減少和死亡，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表明 AC 所導(dǎo)致的 HER-2/neu 的細(xì)胞減少和死亡是通過誘導(dǎo) 細(xì)胞內(nèi) ROS 的產(chǎn)生實(shí)現(xiàn)的。另外，AC 可以使細(xì)胞中 cyclin D1、cyclin E 和 CDK4 的表達(dá)降低，以及伴隨有對(duì) PI3K/Akt 和其下游影響因子 GSK-3 和 -catenin 表達(dá)的抑制。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，AC 在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中，細(xì)胞中的 G1期細(xì)胞大量積累、DNA 碎片增多、線粒體功能出現(xiàn)障礙、細(xì) 胞色素 c 釋放增多、caspase-3/-9 被活化、PARP 被降解及 Bcl- 2/Bax 表達(dá)失調(diào)等現(xiàn)象出現(xiàn)。群體集成實(shí)驗(yàn)則顯示了 AC 可以 對(duì) HER-2/neu 癌細(xì)胞的活性產(chǎn)生抑制作用。以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表 明，AC 可以用于 HER-2/neu 超表達(dá)乳腺癌的一種治療手段。圖 22 HER-2/neu 用 AC