線性范圍及檢測限.doc

學習資料收集于網(wǎng)絡，僅供參考線性與范圍 (linearity and range) 分析方法的線性是在給定范圍內(nèi)獲取與樣品中供試物濃度成正比的試驗結(jié)果的能力。換句話說，就是供試物濃度的變化與試驗結(jié)果(或測得的響應信號)成線性關(guān)系。 所謂線性范圍是指利用一種方法取得精密度、準確度均符合要求的試驗結(jié)果，而且成線性的供試物濃度的變化范圍，其最大量與最小量之間的間隔，可用mgL mgL、 ugml ugml等表示。 線性與范圍的確定可用作圖法(響應值Y濃度X)或計算回歸方程(Ya+bX)來研究建立。 測定樣品時所有生物藥物分析方法都必須同時作標準曲線。每次作標準曲線時，方法應與分析方法考核時完全一致。標準濃度應包括一定梯度的5-8個濃度(非線性者如免疫分析可適當增加)，每個濃度只需測定一次(免疫分析可測定兩次并取均值)；標準曲線應覆蓋樣品可能的濃度范圍，對于含量測定要求一般濃度上限為樣品最高濃度的120，下限為樣品最低濃度的80 (但應高于LOQ)；目前仍廣泛采用相關(guān)系數(shù)(r)表示標準曲線的線性度、并控制r0.9900。對照品的LOQ必須包括在線性范圍。 線性范圍是指 與檢測器響應信號成線性關(guān)系的樣品的含量范圍. 一般情況下,標準曲線的最低和最高值是包含在線性范圍內(nèi)的,而且不同人做的標準曲線,他所取的最低和最高值也不會都相同,打個比方來說,A做5個點的標準曲線,所選擇的標準樣品的濃度分別為:1,5,10,15,20,那么最低最高值分別為1和20,而對于這種要檢測的物質(zhì)來說,它的線性范圍可能是10E5,要遠大于制作標準曲線所選擇的濃度范圍.通常在建立一個新方法的時候可以通過文獻查到一些物質(zhì)的線性范圍,而實際工作中,要確切知道某種物質(zhì)的線性范圍必要性可能也不大。S/N=3時的濃度是檢測限，也就是峰高約在基線噪音高的3倍，注入液相色譜儀的對照品百分濃度。S/N=10是定量限，也就是峰高約在基線噪音高的10倍時，注入液相色譜儀的對照品量。首先，配制一個較低濃度的對照品溶液，注入液相色譜儀，觀察其峰高比基線噪音高多少倍（假設X倍），將該溶液稀釋到X/3倍，基本即為該物質(zhì)的檢測限，將該溶液稀釋到X/10倍，基本即為該物質(zhì)的定量限。具體操作時，就是把一定濃度的溶液不斷稀釋，直到S/N=3。一般就是用眼來估計了，不過也可以計算出來，好像是用標準曲線計算的，具體公式你可以查一下書。Detection LimitLimit of DetectionDLLOD檢出限D(zhuǎn)L是一種比值，用%或ppm表示，等于最低檢出濃度與樣品溶液濃度（通常是一個固定的限度值）的比值，因此只有在滿足最低檢出濃度和最低檢出量的同時才能夠做出檢出限。它主要適用于雜質(zhì)測定中的雜質(zhì)限度檢查項目的方法驗證，即你通過這個驗證證明你的方法能夠檢出足夠低的雜質(zhì)，就是說，如果你作出的檢測限（最低檢測濃度）比限度好高，那是萬萬不行的。檢測限不但要低于限度，最好遠遠小于雜質(zhì)限度。根據(jù)分析方法是采用非儀器分析還是儀器分析可用幾種方法來確定檢測限度，除了下面所列的方法外其他的方法也可能被接受。6 1 根據(jù)直觀評價 直觀評價可以用于非儀器分析方法，也可用于儀器分析方法。檢測限度的測定是通過對一系列已知濃度分析物的樣品進行分析，并以能準確測得被分析物的最小量來建立?！就ㄟ^進樣大量不同濃度的溶液，證明你所說的檢測限是最低的，通常費力不討好，但是卻是無奈的情況下最好的辦法。62根據(jù)信噪比 該方法儀適用于出現(xiàn)基線噪音的分析方法。信噪比的測定是通過比較含已知低濃度被分析物的樣品與空白樣品的測試信號，確定被分析物可被確切地檢測的最小濃度，當信噪比在3：1或2：1時的檢測限度通常被接受?！敬朔ǔＳ茫杭从^察圖譜，保證圖譜中信號峰強度同一段平緩的噪音峰強度的平均值約為3：1即可?！?3 根據(jù)響應值的標準差和斜率 【這種方法好啊，省時省力，就是費腦筋，我目前還沒搞懂，如果由高手事件過請指教，廢話少說】檢測限度（DL）表示為：DL=3.3/S ：響應值的標準差 S：校正曲線的斜率斜率S可從被分析物的校正曲線來估算，的值可由多種途徑估算。如：631 根據(jù)空白的標準差 通過幾份空白樣品的分析，然后計算其響應值的標準差，測出分析背景響應值的大小。632 根據(jù)校正曲線 通過對含有DL范圍內(nèi)被分析物樣品的分析來研究其標準曲線，回歸線的剩余標難差或回歸線的y軸截距標準差都可作為標準差。64 申報數(shù)據(jù) 必須同時提供檢測限度和測定檢測限度的方法。如果見是根據(jù)直觀評估或信噪比得來的，應提供相關(guān)的一些色譜圖。 如通過計算或外推法得到檢測限度的估算值，可對一系列接近或等于檢測限度樣品的逐個分析來論證這一估算值?！旧鲜鲑Y料引致ICHQ2B，建議諸位閱讀英文原文，恐翻譯不到位引起歧義】檢測限是一種限度檢驗效能指標，它既反映方法與儀器的靈敏度和噪音的大小，也表明樣品經(jīng)處理后空白(本底)值的高低。要根據(jù)采用的方法來確定檢測限。當用儀器分析方法時，可用已知濃度的樣品與空白試驗對照，記錄測得的被測藥物信號強度S與噪音(或背景信號)強度N，以能達到SN2或SN3時的樣品最低藥濃為LOD；也可通過多次空白試驗，求得其背景響應的標準差，將三倍空白標準差(即3空或3S空)作為檢測限的估計值。為使計算得到的LOD值與實際測得的LOD值一致，可應用校正系數(shù)來校正，然后依之制備相應檢測限濃度的樣品，反復測試來確定LOD。如用非儀器分析方法時，即通過已知濃度的樣品分析來確定可檢出的最低水平作為檢測限。另外，實際工作中以下幾個概念是經(jīng)常混淆的：1，最低檢測濃度2，最低檢出量3，檢出限1，最低檢出濃度：滿足最低檢測限要求時，進樣供試品溶液的濃度，常見單位：微克/毫升，納克/毫升，克/毫升【濃度單位】。2，最低檢出量：最低檢出量=最