藥物的雜質(zhì)檢查-全面PPT課件

第三章藥物的雜質(zhì)檢查 第一節(jié)藥物的雜質(zhì)與限量第二節(jié)雜質(zhì)的檢查方法第三節(jié)藥物中一般雜質(zhì)的檢查第四節(jié)特殊雜質(zhì)的鑒定方法 一 藥物的純度 指藥物純凈程度 反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣 含有雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素 3 1藥物的雜質(zhì)與限量 是指藥物中存在的 無(wú)治療作用或 影響藥物的穩(wěn)定性和療效 甚至 對(duì)人體健康有害的微量物質(zhì) 2 藥物的雜質(zhì) 為保證藥品質(zhì)量 確保用藥安全 有效 必須檢查雜質(zhì) 控制藥物純度 1 有毒副作用的物質(zhì)2 本身無(wú)毒副作用 但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)3 本身無(wú)毒副作用 也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效 但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì) 純度 藥物的純凈程度 雜質(zhì) ChP規(guī)定任何影響藥品純度的物質(zhì) 是影響藥物純度的主要因素 藥物的純度檢查也可稱為雜質(zhì)檢查 需要從藥物的外觀性狀 理化常數(shù) 雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定等方面進(jìn)行綜合評(píng)定 藥物純度與化學(xué)試劑純度 藥物純度 從雜質(zhì)對(duì)用藥安全 有效和對(duì)藥物穩(wěn)定性的影響等方面來(lái)限定 只有合格品和不合格品兩個(gè)等級(jí) 化學(xué)試劑純度 從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響方面來(lái)限定 不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用 純度等級(jí)包括色譜純 光譜純 優(yōu)級(jí)純 分析純 化學(xué)純等 一 生產(chǎn)過(guò)程中引入 二 藥物雜質(zhì)的來(lái)源 1 所用原料不純 2 合成工藝中未反應(yīng)完全的原料 反應(yīng)中間體 副產(chǎn)物等 3 藥物在制成制劑的過(guò)程中產(chǎn)生的新雜質(zhì) 4 合成工藝中使用的試劑 溶劑等 5 合成工藝中使用的設(shè)備 器皿可能引入重金屬 例 阿斯匹林由水楊酸乙?；频?例 鹽酸普魯卡因注射液的制備 二 貯藏過(guò)程中引入 1 保管不善或貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng) 2 包裝不當(dāng) 例 麻醉乙醚在日光 空氣及濕氣作用下 易氧化分解為醛及有毒的過(guò)氧化物 CH3CH2OCH2CH3 CH3CHO CH3CH OH O O CH OH CH3 二羥乙基過(guò)氧化物 藥典規(guī)定 啟封后24小時(shí)內(nèi)使用 96 131 在藥物生產(chǎn)過(guò)程中引入雜質(zhì)的途徑為A 原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成B 合成過(guò)程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成C 需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附 共沉淀生成混晶等造成D 所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì)E 由于操作不妥 日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì) 三 藥物雜質(zhì)的分類(lèi) 按來(lái)源分為 檢查方法收載在ChP正文各品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中 檢查方法收載在ChP的附錄中 特殊雜質(zhì) 一般雜質(zhì) 在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏中容易引入的雜質(zhì) 在特定藥物的生產(chǎn)和貯藏中引入的雜質(zhì) 按毒性分為 本身一般無(wú)害 但其含量多少可反映藥物純度水平 指示生產(chǎn)工藝是否合理 如 氯化物 硫酸鹽等 對(duì)人體有毒害的雜質(zhì) 在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中嚴(yán)加控制 以保證用藥安全 如 重金屬 砷鹽 氰化物 氟化物等 按化學(xué)類(lèi)別和特性分為 1 具有光學(xué)異構(gòu)體的藥物 生物活性有很大差異 如 腎上腺素為左旋體 其升壓作用是右旋體的12倍 2 順式體與反式體藥物 生物活性也不相同 如 VA以全反式的生物活性為最高 3 多晶型藥物 晶型不同生物活性也有差異 如 驅(qū)蟲(chóng)藥甲苯咪唑 有A B C三種晶型 其中C晶型的驅(qū)蟲(chóng)率為90 B晶型的驅(qū)蟲(chóng)率為40 60 A晶型的驅(qū)蟲(chóng)率小于20 無(wú)效或低效雜質(zhì) 按結(jié)構(gòu)可分為2類(lèi) 無(wú)機(jī)雜質(zhì) Cl S2 CN As 重金屬 有機(jī)雜質(zhì) 中間體 副產(chǎn)物 分解物 異構(gòu)體 殘留溶劑 按性質(zhì)可分為3類(lèi) 信號(hào)雜質(zhì) 指本身一般無(wú)害 但其含量多少可反映藥物純度水平 指示生產(chǎn)工藝是否合理 如 氯化物 硫酸鹽等 有害雜質(zhì) 對(duì)人體有毒害的雜質(zhì) 在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中嚴(yán)加控制 以保證用藥安全 如 重金屬 砷鹽 氰化物 氟化物等 無(wú)效或低效雜質(zhì) a具有立體異構(gòu)體的藥物 其生物活性有很大差異 如 腎上腺素為左旋體 其升壓作用是右旋體的12倍 b異構(gòu)體中 其順式體與反式體的生物活性也不相同 如 VA以全反式的生物活性為最高 c藥物的晶型不同 其理化常數(shù) 溶解性穩(wěn)定性 體內(nèi)的吸收和療效也有差異 如 驅(qū)蟲(chóng)藥甲苯咪唑 有A B C三種晶型 其中C晶型的驅(qū)蟲(chóng)率90 B晶型的驅(qū)蟲(chóng)率40 60 A晶型的驅(qū)蟲(chóng)率小于20 必須重視異構(gòu)體和多晶型對(duì)藥物有效性和安全性的影響 控制藥物中低效 無(wú)效以及具有毒性的異構(gòu)體和多晶型 在藥物純度研究中日益受到重視 四 藥物的純度與化學(xué)試劑的純度 藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用 藥品只有兩個(gè)等級(jí) 合格或不合格 化學(xué)試劑有很多等級(jí) 如基準(zhǔn)試劑 優(yōu)級(jí)純 GR 分析純 AR 化學(xué)純 CP 色譜純 光譜純 99x 85 中國(guó)藥典中規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查中不包括的項(xiàng)目是A 硫酸鹽檢查B 氯化物檢查C 溶出度檢查D 重金屬檢查E 砷鹽檢查 限量表示方法 百分之幾 百萬(wàn)分之幾 ppm 四 雜質(zhì)的限量 雜質(zhì)限量 藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量 對(duì)照法 取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品配成的對(duì)照溶液 與一定量供試品配成的供試品溶液 在相同條件下處理 比較反應(yīng)結(jié)果 以確定雜質(zhì)含量是否超過(guò)限量 靈敏度法 在供試品溶液中加入一定量的試劑 在規(guī)定條件下反應(yīng) 不得出現(xiàn)正反應(yīng) 即以檢測(cè)條件下的反應(yīng)靈敏度來(lái)控制雜質(zhì)限量 例 乳酸中枸櫞酸的檢查 比較法 取一定量供試品 在規(guī)定條件下測(cè)定待檢雜質(zhì)的特定參數(shù) 如 吸光度等 與規(guī)定限量比較 不得更大 例 腎上腺素中腎上腺酮的檢查 限量計(jì)算公式 注意 單位是否統(tǒng)一 供試品是否有稀釋 表示方法 或ppm 一 雜質(zhì)的研究規(guī)范 一 有機(jī)雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的項(xiàng)目名稱 1 以雜質(zhì)的化學(xué)名稱作為項(xiàng)目名稱如 阿司匹林中的游離水楊酸2 以某類(lèi)雜質(zhì)的總稱作為項(xiàng)目名稱如 硝酸毛果蕓香堿中的其它生物堿黃體酮中的有關(guān)物質(zhì)3 以檢測(cè)方法作為項(xiàng)目名稱如 雜質(zhì)吸光度 溶液透光率 3 2雜質(zhì)的檢查方法 二 雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的確定 三 雜質(zhì)限量的確定 在確保用藥安全有效的前提下 應(yīng)考慮到生產(chǎn)的可行性 批與批之間的正常波動(dòng) 藥品本身的穩(wěn)定性 根據(jù)起始原料 生產(chǎn)工藝及穩(wěn)定性情況確定 藥物在質(zhì)量研究中和穩(wěn)定性考察中檢出的 并在批量生產(chǎn)中出現(xiàn)的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物單一對(duì)映體藥物 檢查其它對(duì)映體消旋體藥物 旋光度檢查 雜質(zhì)檢查方法包括化學(xué)法 光譜法 色譜法等 有機(jī)雜質(zhì)多采用色譜法 特別是HPLC 檢查方法要求專屬 靈敏 應(yīng)驗(yàn)證方法的專屬性 分析方法的檢測(cè)限應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)雜質(zhì)限度的要求 四 雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗(yàn)證 二 雜質(zhì)的常用檢查方法 顯色反應(yīng)檢查法沉淀反應(yīng)檢查法生成氣體的檢查法滴定法 一 化學(xué)方法 顯色 比色法檢查 如 氯硝柳胺中2 氯 4 硝基苯胺的檢查 顯色反應(yīng)檢查法 如 鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查 沉淀反應(yīng)檢查法 比濁法或重量法檢查 如 硫酸亞鐵片劑中高鐵鹽的檢查 滴定法 二 色譜方法 薄層色譜法高效液相色譜法氣相色譜法毛細(xì)管電泳法 難以采用化學(xué)法 光譜法對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行檢查時(shí) 多采用色譜法 色譜法是檢查藥物中有關(guān)物質(zhì)的首選方法 1 薄層色譜法 1 雜質(zhì)對(duì)照品法 適用于雜質(zhì)已知并有雜質(zhì)對(duì)照品的情況 方法 根據(jù)雜質(zhì)限量 取供試品溶液和一定濃度的雜質(zhì)對(duì)照品溶液 分別點(diǎn)于同一薄層板上展開(kāi) 定位后進(jìn)行檢查 供試品溶液除主斑點(diǎn)外的其它斑點(diǎn)與相應(yīng)雜質(zhì)對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)比較 示例3 8 2 供試品溶液自身稀釋對(duì)照法 適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)未知或無(wú)雜質(zhì)對(duì)照品的情況 且雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色應(yīng)相同或相近 方法 先配制一定濃度的供試品溶液 然后按限量要求將其稀釋至一定濃度作為對(duì)照溶液 將兩溶液分別點(diǎn)于同一薄層板上展開(kāi) 定位后進(jìn)行檢查 供試品溶液的雜質(zhì)斑點(diǎn)與自身稀釋對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較 示例3 11 3 雜質(zhì)對(duì)照品與供試品溶液自身稀釋對(duì)照并用法 適用于藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)的情況 有對(duì)照品的雜質(zhì) 雜質(zhì)對(duì)照品法檢查 未知雜質(zhì)或沒(méi)有對(duì)照品的雜質(zhì) 供試品溶液自身稀釋對(duì)照法檢查 4 對(duì)照藥物法 適用于無(wú)合適的雜質(zhì)對(duì)照品 或雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色有差異而難以判斷限量的情況 方法 選用與供試品相同的藥物作為對(duì)照 對(duì)照藥物中所含待檢雜質(zhì)應(yīng)符合限量要求 穩(wěn)定性好 2 高效液相色譜法 使用高效液相色譜法測(cè)定含量的藥物 可采用同一色譜條件進(jìn)行雜質(zhì)檢查 采用此法檢查雜質(zhì)時(shí) ChP規(guī)定應(yīng)進(jìn)行色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以保證儀器系統(tǒng)達(dá)到雜質(zhì)檢查要求 1 外標(biāo)法 雜質(zhì)對(duì)照品法 適用于有雜質(zhì)對(duì)照品 而且進(jìn)樣量能夠精確控制的情況 2 加校正因子的主成分自身對(duì)照法 適用于已知雜質(zhì)的控制 雜質(zhì)的校正因子 f 和相對(duì)保留時(shí)間收載在ChP各品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中 3 不加校正因子的主成分自身對(duì)照法 適用于沒(méi)有雜質(zhì)對(duì)照品 且雜質(zhì)結(jié)構(gòu)與主成分相似的情況 4 面積歸一化法 適用于供試品中結(jié)構(gòu)相似 相對(duì)含量較高 且限度范圍較寬的雜質(zhì)含量的粗略考察 雜質(zhì)限量 A雜 A總 100 A總 A雜1 A雜2 A主 3 氣相色譜法 4 毛細(xì)管電泳法 利用藥物與雜質(zhì)對(duì)光選擇吸收性質(zhì)的差異進(jìn)行檢查 三 光譜方法 1 紫外 可見(jiàn)分光光度法 例 腎上腺素中腎上腺酮的檢查 方法 規(guī)定雜質(zhì)最大吸收波長(zhǎng) 藥物在此無(wú)吸收 處的吸光度 利用雜質(zhì)的呈色反應(yīng)對(duì)其進(jìn)行定量測(cè)定 2 紅外分光光度法 主要用于藥物中無(wú)效或低效晶型的檢查 例 甲苯達(dá)唑中A晶型的檢查 晶型640cm 1662cm 1A型 無(wú)效 強(qiáng)弱C型弱強(qiáng) 方法 比較供試品溶液與含一定量A晶型的對(duì)照品溶液在兩波數(shù)處的吸光度比值 3 原子吸收分光光度法 主要用于藥物中金屬雜質(zhì)的檢查 方法 標(biāo)準(zhǔn)加入法 四 其它方法 1 熱分析法 熱重分析 TGA 利用熱天平在程序控制溫度下 測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量隨溫度的變化關(guān)系 用于藥物中結(jié)晶水和吸附水的區(qū)分 以及干燥失重測(cè)定 草酸鈣 CaC2O4 H2O 的熱重曲線 差熱分析 DTA 在程序控制溫度下 測(cè)量樣品與參比物 一種在測(cè)量溫度范圍內(nèi)不發(fā)生任何熱效應(yīng)的物質(zhì) 之間的溫度差 T隨溫度的變化關(guān)系 根據(jù)峰的個(gè)數(shù) 形狀和位置進(jìn)行藥物鑒別 晶型鑒別 純度檢查 熔點(diǎn)及水分等的測(cè)定 3 pH測(cè)定法 用電位法測(cè)定供試液的pH 衡量其酸堿性雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定 2 酸堿度檢查法 利用藥物與雜質(zhì)酸堿性的差異進(jìn)行檢查 1 酸堿滴定法 在一定指示液下 用規(guī)定濃度的酸或堿滴定液滴定供試液中的堿性或酸性雜質(zhì) 以消耗酸或堿滴定液的體積作為限度指標(biāo) 2 指示劑法 將一定量指示液的變色pH范圍作為供試液中酸堿性雜質(zhì)的限度指標(biāo) 3 物理性狀檢查法 1 臭味和揮發(fā)性差異2 顏色的差異3 溶解行為的差異4 旋光性質(zhì)的差異 例 ChP對(duì)硫酸阿托品中莨菪堿的檢查 供試品水溶液 50mg mL 的旋光度不得過(guò) 0 4 一 氯化物檢查法 3 3一般雜質(zhì)的檢查方法 暗處放置5min 避免AgCl分解 操作方法 供試液有色 采用內(nèi)消色法處理 無(wú)氯化物雜質(zhì) 與供試溶液顏色相同 討論 二 硫酸鹽檢查法 介質(zhì) 稀HCl 2ml 50ml溶液 反應(yīng)試劑 25 BaCl2溶液對(duì)照溶液 標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液 100 gSO42 ml 三 鐵鹽檢查法 硫氰酸鐵法 ChP和USP采用 介質(zhì) 稀HCl 4ml 50ml溶液 氧化劑 過(guò)硫酸銨 NH4 2S2O8 反應(yīng)試劑 30 硫氰酸銨溶液對(duì)照溶液 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鐵銨溶液 10 gFe ml 操作方法 討論 1 加過(guò)量的硫氰酸銨 使反應(yīng)向正向進(jìn)行 2 過(guò)硫酸銨的作用 氧化供試品中Fe2 成Fe3 防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色 3 某些藥物 如葡萄糖等 檢查時(shí)需加硝酸處理 硝酸也可將Fe2 氧化為Fe3 剩余硝酸必須加熱煮沸除去 4 若供試液管與對(duì)照液管色調(diào)不一致 或所呈硫氰酸鐵的顏色深淺不便比較時(shí) 可用正丁醇或異戊醇提取后 分取醇層比色 5 具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物 需經(jīng)熾灼破壞處理后再依法檢查 四 重金屬檢查法 重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬雜質(zhì) 如 Ag Pb Hg Cu Cd Bi Sb Sn Ni Co Zn等 在藥品生產(chǎn)中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多 且鉛易在體內(nèi)積蓄中毒 以Pb為重金屬代表 用鉛的限量表示重金屬限度 適用于溶于水 稀酸和乙醇的藥物 介質(zhì) 醋酸鹽緩沖液 pH3 5 2ml 25ml溶液反應(yīng)試劑 硫代乙酰胺 CH3CSNH2 對(duì)照溶液 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液 10 gPb ml 黃色至棕黑色混懸液 第一法 硫代乙酰胺法 操作方法 1 金屬離子與硫化氫的呈色受溶液pH的影響較大 pH在3 0 3 5時(shí) 沉淀較完全 酸度增大 呈色變淺甚至不呈色 討論 2 供試品溶液如帶顏色 采用外消色法處理 在對(duì)照溶液管中滴加少量稀焦糖溶液調(diào)節(jié)顏色 3 供試品中如含微量高鐵鹽 可加入抗壞血酸使Fe3 還原為Fe2 第二法 熾灼后的硫代乙酰胺法 將供試品熾灼破壞后 使有機(jī)結(jié)合的重金屬游離 再按第一法檢查 適用于含芳環(huán) 雜環(huán)以及不溶于水 稀酸 乙醇的有機(jī)藥物 1 原理 2 操作方法 對(duì)照溶液的配制 取上述同樣量試劑置瓷皿中蒸干后 用于配制對(duì)照溶液 依法檢查 3 討論 1 HNO3處理后 必須蒸干除盡氧化氮 2 熾灼溫度要嚴(yán)格控制 500 600 3 含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物在熾灼時(shí)腐蝕瓷坩堝 改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿 適用于溶于堿而難溶于稀酸或在稀酸中產(chǎn)生沉淀的藥物 第三法 硫化鈉法 介質(zhì) 氫氧化鈉試液反應(yīng)試劑 硫化鈉對(duì)照溶液 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液 五 砷鹽檢查法 1 古蔡氏法 原理 藥物中的微量砷鹽與金屬鋅在酸性條件下反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫 遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑 操作方法 供試品溶液按各品種規(guī)定方法制備 標(biāo)準(zhǔn)砷斑采用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液 1 gAs ml 制備 生成砷斑 吸收硫化氫氣體防止形成HgS色斑 古蔡檢砷裝置 1 供試品為硫化物 亞硫酸鹽 硫代硫酸鹽時(shí) 在酸中生成H2S或SO2 與HgBr作用生成HgS或Hg 干擾砷斑檢查 可先用硝酸將其氧化成硫酸鹽 2 供試品為鐵鹽 Fe3 時(shí) 消耗KI SnCl2 并氧化砷化氫 可先加酸性氯化亞錫試液還原高鐵 3 砷以共價(jià)鍵結(jié)合的有機(jī)藥物 進(jìn)行有機(jī)破壞后再檢查 討論 2 二乙基二硫代氨基甲酸銀法 Ag DDC法 同古蔡氏法 吡啶吸收HDDC 1 USP采用0 5 Ag DDC的吡啶溶液 ChP采用0 25 Ag DDC的三乙胺 三氯甲烷溶液 靈敏度略低于吡啶溶液 2 銻化氫與Ag DDC的反應(yīng)靈敏度較低 本法受銻的干擾較小 討論 Ag DDC法檢砷裝置 3 其它方法 1 白田道夫法 原理 氯化亞錫在鹽酸溶液中將砷鹽還原成棕褐色的膠態(tài)砷 特點(diǎn) 用于含銻藥物的砷鹽檢查時(shí) 不產(chǎn)生干擾 但靈敏度低 2 次磷酸法 原理 次磷酸在鹽酸溶液中將砷鹽還原成棕色的游離砷 特點(diǎn) 用于硫化物 亞硫酸鹽及含銻藥物的砷鹽檢查時(shí) 不產(chǎn)生干擾 但靈敏度比古蔡氏法低 ChP規(guī)定干燥失重的量應(yīng)恒重 即供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0 3mg以下 六 干燥失重測(cè)定法 檢查藥物中的水分及其它揮發(fā)性物質(zhì) 干燥失重 藥品在規(guī)定的條件下 經(jīng)干燥后所減失的量 以百分率表示 三 干燥劑干燥法適用于受熱分解或易升華的藥物干燥器 室溫 常用干燥劑 硅膠 濃硫酸 五氧化二磷 一 常壓恒溫干燥法適用于受熱較穩(wěn)定的藥物干燥箱 105 二 減壓干燥法與恒溫減壓干燥法適用于熔點(diǎn)低或受熱分解的藥物減壓干燥器 室溫 恒溫減壓干燥器 60oC 常用干燥劑 無(wú)水氯化鈣 硅膠 五氧化二磷 七 水分測(cè)定法 費(fèi)休氏法是一種測(cè)定物質(zhì)中水分的容量分析法 屬于碘量法 可以準(zhǔn)確測(cè)定藥物中的結(jié)晶水 吸附水和游離水 原理 利用I2氧化SO2為SO3時(shí) 需要有定量的水分參與反應(yīng) 根據(jù)消耗碘的量來(lái)測(cè)定水分的量 ChP USP和BP均收載了費(fèi)休氏法和甲苯法 費(fèi)休氏試液由碘 二氧化硫 無(wú)水吡啶和無(wú)水甲醇組成 A 供試品消耗費(fèi)休氏試液的體積 ml B 空白消耗費(fèi)休氏試液的體積 ml F 每1ml費(fèi)休氏試液相當(dāng)于水的重量 mg W 供試品的重量 mg 取供試品適量 約消耗費(fèi)休氏試液1 5ml 加入無(wú)水甲醇2 5ml 不斷攪拌下 用費(fèi)休氏試液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色 或用永停滴定法指示終點(diǎn) 另取無(wú)水甲醇2 5ml用同法進(jìn)行空白試驗(yàn) 測(cè)定方法 八 熾灼殘?jiān)鼨z查法 方法 規(guī)定量供試品置坩堝中 精密稱定 熾灼炭化 H2SO4濕潤(rùn) 低溫加熱至硫酸蒸氣除盡 700 800 熾灼灰化 精密稱定 700 800 熾灼至恒重 熾灼殘?jiān)?硫酸灰分 熾灼殘?jiān)?有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物經(jīng)加熱分解后 再經(jīng)高溫?zé)胱扑a(chǎn)生的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽 注意事項(xiàng) 1 供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定 一般應(yīng)使熾灼殘?jiān)繛? 2mg 殘?jiān)蘖恳话銥? 1 0 2 2 含氟的藥物對(duì)瓷坩堝有腐蝕 應(yīng)采用鉑坩堝 3 若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查 應(yīng)在500 600 熾灼至恒重 九 易炭化物檢查法 易炭化物 藥物中遇H2SO4易炭化或易氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì) 方法 供試品用硫酸溶解后 靜置15min 與規(guī)定對(duì)照溶液目視比色 對(duì)照液 1 標(biāo)準(zhǔn)比色液 2 由比色用氯化鈷液 比色用高錳酸鉀液和比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配制而成的溶液 3 高錳酸鉀液 殘留溶劑 在合成原料藥 輔料或制劑生產(chǎn)的過(guò)程中使用的 但在工藝中未能完全除去的有機(jī)溶劑 十 殘留溶劑測(cè)定法 1 毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法2 毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣程序升溫法3 溶液直接進(jìn)樣法 一 測(cè)定方法 GC 頂空分析法也稱液上氣相色譜分析 是指用氣相色譜法來(lái)分析封閉系統(tǒng)中與液體或固體樣品相平衡的氣體的一種方法 特點(diǎn) 可免去樣品萃取 濃集等步驟 并可避免非揮發(fā)性組分對(duì)色譜柱的污染 但要求待測(cè)物有足夠的揮發(fā)性 2 外標(biāo)法 二 計(jì)算法 1 內(nèi)標(biāo)法 1 用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算 填充柱的N 1000 毛細(xì)管色譜柱的N 5000 2 待測(cè)物色譜峰與相鄰色譜峰R 1 5 3 以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí) 對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次 待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的RSD 5 以外標(biāo)法測(cè)定時(shí) 待測(cè)物峰面積的RSD 10 三 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 十一 溶液顏色檢查法 檢查藥物中的有色雜質(zhì) ChP附錄收載了三種檢查方法 十二 溶液澄清度檢查法 檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì) 用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查 檢查方法 比濁法 濁度標(biāo)準(zhǔn)液制備原理 濁度標(biāo)準(zhǔn)液配制方法 ChP規(guī)定的 澄清 指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑或未超過(guò)0 5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液 判斷 多數(shù)藥物的澄清度檢查以水為溶劑 如水溶性不好 也可采用酸 堿或有機(jī)溶劑為溶劑 有機(jī)酸的堿金屬鹽類(lèi)藥物強(qiáng)調(diào)用 新沸過(guò)的冷水 注意事項(xiàng) 3 4特殊雜質(zhì)的鑒定方法 一 特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范 1 新原料藥和新制劑中的雜質(zhì)表觀含量 0 1 和表觀含量 0 1 具強(qiáng)烈生物作用或毒性的雜質(zhì) 要求定性或確證其結(jié)構(gòu) 包括 藥物合成中的有機(jī)雜質(zhì) 穩(wěn)定性試驗(yàn)中的降解產(chǎn)物 2 非新藥中發(fā)現(xiàn)的新雜質(zhì)和新降解產(chǎn)物3 手性藥物的光學(xué)異構(gòu)體 一 合成雜質(zhì)對(duì)照品法 適用于量少 分離純化困難的雜質(zhì) 方法 比較雜質(zhì)與對(duì)照品的色譜性質(zhì) UV曲線特征和MS信息 判斷雜質(zhì)與對(duì)照品是否是同一種化合物 從而確定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu) 二 色譜制備雜質(zhì)對(duì)照品法 適用于量較大的雜質(zhì) 方法 通過(guò)色譜分離得到特定雜質(zhì) 再通過(guò)元素分析 UV IR NMR和MS確定雜質(zhì)及有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu) 二 特殊雜質(zhì)的鑒定 一 最佳選擇題 1 下列屬于信號(hào)雜質(zhì)的是 A 砷鹽B 硫酸鹽C 鉛D 氰化物E 汞 2 藥物中無(wú)效或低效晶型的檢查可以采用的方法是 A 高效液相色譜法B 紅外分光光度法C 紫外 可見(jiàn)分光光度法D 原子吸收分光光度法E 氣相色譜法 3 原子吸收分光光度法檢查藥物中金屬雜質(zhì)時(shí) 通常采用的方法是 A 內(nèi)標(biāo)法B 外標(biāo)法C 加校正因子的主成分自身對(duì)照法D 標(biāo)準(zhǔn)加入法E 不加校正因子的主成分自身對(duì)照法 4 藥物中氯化物雜質(zhì)檢查 是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁 所用的稀酸是 A 硫酸B 硝酸C 鹽酸D 醋酸E 磷酸 5 氯化物檢查法中 用以解決供試品溶液帶顏色對(duì)測(cè)定干擾的方法是 A 活性炭脫色法B 有機(jī)溶劑提取后檢查法C 內(nèi)消色法D 標(biāo)準(zhǔn)液比色法E 改用他法 6 中國(guó)藥典收載的鐵鹽檢查 主要是檢查 A FeB Fe2 C Fe3 D Fe2 和Fe3 E 以上都不對(duì) 8 下列試液中 用作ChP重金屬檢查法中的顯色劑的是 A 硫酸鐵銨試液B 硫化鈉試液C 氰化鉀試液D 重鉻酸鉀試液E 硫酸銅試液 7 采用硫氰酸鹽法檢查鐵鹽時(shí) 若供試液管與對(duì)照液管所呈硫氰酸鐵的顏色深淺不便比較時(shí) 可采取的措施是 A 內(nèi)消色法B 外消色法C 標(biāo)準(zhǔn)液比色法D 正丁醇提取后比色法E 改用他法 10 采用熾灼后硫代以酰胺法檢查重金屬時(shí) 應(yīng)控制的熾灼溫度范圍是 A 500 600oCB 600 700oCC 700 800oCD 800 900oCE 900 1000oC 9 硫代乙酰胺法檢查重金屬時(shí) 受溶液pH影響較大 適合的pH是 A 11 5B 9 5C 7 5D 3 5E 1 5 12 費(fèi)休氏法測(cè)定水分時(shí) 水與費(fèi)休氏試液作用的摩爾比是 A 水 碘 二氧化硫 甲醇 吡啶 1 1 1 1 3 B 水 碘 二氧化硫 甲醇 吡啶 1 1 1 1 5 C 水 碘 三氧化硫 甲醇 吡啶 1 1 1 1 3 D 水 碘 三氧化硫 甲醇 吡啶 1 1 1 1 5 E 水 碘 三氧化硫 甲醇 丙酮 1 1 1 1 3 11 在古蔡氏檢砷法中 加入醋酸鉛棉花的目的是 A 除去硫