細(xì)胞治療未來展望

1、細(xì)胞治療未來展望班級：生物技術(shù)1302班 學(xué)號：4 姓名：張潤細(xì)胞治療是利用患者自體(或異體)的成體細(xì)胞(或干細(xì)胞)對組織、器官進(jìn)行修復(fù)的治療方法。廣泛用于骨髓移植、晚期肝硬化、股骨頭壞死、惡性腫瘤、心肌梗死等疾病。細(xì)胞治療技術(shù)已經(jīng)成為近年來最引人注目的領(lǐng)域之一，雖然國內(nèi)細(xì)胞治療研究不斷取得重要成果，但仍存在一些會對細(xì)胞治療技術(shù)的臨床轉(zhuǎn)化產(chǎn)生負(fù)面影響的不規(guī)范現(xiàn)象。一般來講，細(xì)胞治療包括腫瘤細(xì)胞免疫治療，以及干細(xì)胞治療兩大類。腫瘤細(xì)胞免疫治療是一種新興的腫瘤治療模式，它從病人體內(nèi)采集免疫細(xì)胞，然后進(jìn)行體外培養(yǎng)和擴增，再回輸?shù)讲∪梭w內(nèi)，來激發(fā)以及增強機體的自身免疫功能以治療腫瘤。腫瘤細(xì)胞免疫治療是

2、繼手術(shù)、放療和化療之后的第四種腫瘤治療方法。腫瘤細(xì)胞免疫治療主要包括四大類：過繼細(xì)胞免疫治療、腫瘤疫苗、非特異性免疫刺激、以及免疫檢驗點單克隆抗體。過繼細(xì)胞免疫治療是國際研發(fā)熱點，主要包括TIL、TCR、CAR、LAK、CIK、DC、NK等幾大類。美國前總統(tǒng)卡特在2015年12月宣布其接受4個月的PD1免疫檢查點抑制劑治療后，腦部的黑素瘤已經(jīng)完全消失；且自美國5歲女孩Emily接受CAR-T療法后病情得到完全緩解之后，癌癥免疫療法已經(jīng)被列為當(dāng)年排位第一的科技進(jìn)步，自此世界各大藥物和疾病研發(fā)巨頭也加強了在該領(lǐng)域的研究。目前，研究最為火熱的免疫細(xì)胞療法主要包括以下幾個方面：（一）CAR-T療法前景

3、：CAR-T技術(shù)是目前研究最為火熱的一種免疫細(xì)胞療法。在目前的國內(nèi)外臨床研究進(jìn)展中，美國的CAR-T臨床試驗數(shù)量穩(wěn)居世界第一。來自賓夕法尼亞大學(xué)的Carl H. June 團隊在臨床上的CAR-T研究相對較為領(lǐng)先，其治療急性淋巴白血病的CD19的2期臨床結(jié)果將會在今年的7、8月份公布。美國在研項目中臨床項目仍然以CD19為主，在實體瘤方面大多扔處于I期，并且已公布的臨床結(jié)果并不理想。例如賓夕法尼亞大學(xué)用 mRNA 暫時表達(dá) SS1 抗 mesothelin 的臨床 1 期實驗中， 雖然觀察到了腹水中癌細(xì)胞減少， 但是效果短暫， 很快病程就進(jìn)一步惡化了。 這與初期研發(fā)采用了鼠源性抗體并產(chǎn)生了自身

4、免疫有關(guān)。貝勒醫(yī)學(xué)院采用 2 代 CAR-T 以 HER2 靶點治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的 1 期臨床中， 16 個病人只有 1 個達(dá)到部分緩解（Partial response，PR）， 7 個病情穩(wěn)定（ Stable disease， SD）。 貝勒醫(yī)學(xué)院以 GD2 為靶點治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤 的早期研究中曾經(jīng)有 3/11 的 病人達(dá)到短暫的完全緩解 （ Complete response, CR），但是具有共刺激因子的研究結(jié)果還需要觀察。中國的CAR-T臨床療法數(shù)量僅次于美國，但是由于我國存在很多技術(shù)初創(chuàng)公司，信息不對外公開，加上我國細(xì)胞治療臨床實驗審批權(quán)下放在醫(yī)院一級、缺乏中心化查詢機構(gòu)，還有技術(shù)來源

5、不完全是醫(yī)院自主建立等原因，使得我國很多的臨床研究進(jìn)展無法獲得。就目前已知的CAR-T療法臨床研究情況來看，西比曼、科濟生物、 博生吉、 雅科生物、 北大未名 等后發(fā)企業(yè)將目光同時瞄準(zhǔn)了實體瘤和血液瘤：西比曼生物科技收購了 301 醫(yī)院 4個 CAR-T產(chǎn)品并擁有后續(xù)產(chǎn)品的優(yōu)先權(quán)；科濟生物獨有的 GPC3 靶點治療肝癌和 EGFR治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤； 雅科生物在同濟醫(yī)院和陸道培血液腫瘤中心進(jìn)行 CD19 產(chǎn)品臨床試驗；博生吉在精囊腺癌中 MUC1靶點的 CAR-T 產(chǎn)品取得初步療效；北大未名生物研究所在安醫(yī)大二附院做 CD19臨床。由于國內(nèi)相關(guān)技術(shù)企業(yè)數(shù)量的增多和國外技術(shù)的嫁接等原因，CAR-T療

6、法在國內(nèi)的發(fā)展將會取得前所未有的進(jìn)展。而且有可能會在某些地方趕超歐美國家。但是由于國內(nèi)政策的缺失，當(dāng)前實驗規(guī)范程度不夠，所以預(yù)期在海外獲批之后，國內(nèi)才會跟進(jìn)。（二）基因編輯輔助細(xì)胞治療基因編輯技術(shù)指特異性剪切基因組DNA位點的技術(shù)?；蚓庉嬏刂冈诨蚪M上進(jìn)行特定位點的剪切。基因編輯是指在基因組上剪切將基因編輯與傳統(tǒng)的暫時性表達(dá)的質(zhì)粒區(qū)分開來，對特定位點剪切將基因編輯與隨機整合進(jìn)入基因組的逆轉(zhuǎn)錄病毒區(qū)分開來?；蚓庉嫷膬?yōu)勢在于特異性直接編輯基因組，具有可持續(xù)性和安全性。當(dāng)前的基因編輯技術(shù)主要分為三種：ZFN、TALEN和CRISPR，它們的技術(shù)各具優(yōu)勢，這三種技術(shù)的比較圖如下圖：基因編輯在臨床應(yīng)

7、用上仍然處于早期，主要應(yīng)用仍然在科研領(lǐng)域。傳統(tǒng)上基因編輯技術(shù)主要用于缺失某種正常蛋白的的罕見病領(lǐng)域，例如Bluebird Bio在鐮刀血病中就是利用 MegaTAL 實現(xiàn)基因編輯。在過繼免疫細(xì)胞治療領(lǐng)域，CAR-T 與 TCR-T公司（ 例如Cellectis、 Adaptimmune）等都采用基因編輯敲除內(nèi)在TCR 和MHC的方法制作通用細(xì)胞，另外敲除 CD52 也可以獲得對化療藥物的耐藥性?？偟膩碚f，雖然前景廣大，但是技術(shù)本身還處于臨床研究期，離大面積進(jìn)入應(yīng)用還有段距離。另一方面在科研領(lǐng)域，CRISPR對于研制基因敲除動物模型有重大幫助。由于采用廉價的核酸識別，而不是費時費力的設(shè)計結(jié)合蛋白

8、，極大的降低了模式動物創(chuàng)制的成本。（三）TCRT細(xì)胞受體（TCR）修飾的T細(xì)胞是當(dāng)前過繼性細(xì)胞治療ACT技術(shù)中兩大最新的技術(shù)之一（另一項是CAR-T），實現(xiàn)了從基礎(chǔ)免疫學(xué)機制研究到臨床免疫治療應(yīng)用的轉(zhuǎn)變。目前有三種使用效應(yīng)T細(xì)胞的過繼細(xì)胞療法正朝著注冊審批的方向行進(jìn)。腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（TILs）雖發(fā)展緩慢，但數(shù)十年來一直進(jìn)步，近期一項針對轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的國際III期隨機試驗已經(jīng)開始。新近組建的Lion Biotechnologies公司正商業(yè)化應(yīng)用TILs治療黑色素瘤和其他有T細(xì)胞浸潤的腫瘤。與TILs相比，開發(fā)轉(zhuǎn)基因的方法克服對腫瘤特異性T細(xì)胞免疫耐受。這種方法通過轉(zhuǎn)導(dǎo)嵌合抗原受體（融合抗

9、原結(jié)合域及T細(xì)胞信號結(jié)構(gòu)域）或者TCR /異二聚體，使T細(xì)胞能夠重新高效的識別靶細(xì)胞。通過輸注能夠識別特異靶標(biāo)的基因修飾T細(xì)胞，賦予免疫系統(tǒng)以新的非自然免疫活性。這種方法除了能像細(xì)胞毒性化療和靶向治療快速殺滅腫瘤外，還避免了疫苗和T細(xì)胞檢查點療法的延遲效應(yīng)。除了極個別情況外，細(xì)胞療法的個性化指的是自體的、源于患者的T細(xì)胞。正因如此，過繼細(xì)胞治療的開發(fā)主要依賴于學(xué)術(shù)界與制藥行業(yè)的緊密合作。在這個模式中，學(xué)術(shù)界與工業(yè)界共存，前者開發(fā)和檢驗細(xì)胞工程技術(shù)的新思路，后者擴大和實現(xiàn)新方法在醫(yī)療健康領(lǐng)域中的影響力。這種學(xué)界和工業(yè)界的合作伙伴關(guān)系已經(jīng)在全球的許多機構(gòu)中出現(xiàn)，包括賓夕法尼亞大學(xué)與諾華，貝勒醫(yī)學(xué)院

10、與Bluebird Bio、Celgene公司，紀(jì)念斯隆-凱特林癌癥中心、哈欽森弗萊德癌癥研究中心與Juno Therapeutics公司，國立癌癥研究所與Kite Pharma，西比曼與中國解放軍總醫(yī)院?？傮w來說，現(xiàn)在有數(shù)十家細(xì)胞治療領(lǐng)域的企業(yè)總投資達(dá)數(shù)十億美元。這種合作關(guān)系的影響力仍不明確，學(xué)術(shù)界的學(xué)術(shù)自由與大型企業(yè)專注于價值相遇必將產(chǎn)生沖突，尋求校外的項目資金支持和知識產(chǎn)權(quán)的歸屬問題，將成為創(chuàng)造這個領(lǐng)域的學(xué)者與謀求獲得技術(shù)授權(quán)的制藥公司之間激烈爭論的話題。干細(xì)胞（Stem Cell），在生物學(xué)界又被稱為“萬能細(xì)胞”，它是一種具有自我更新能力以及多向分化潛能的細(xì)胞，干細(xì)胞的英文“Stem”

11、即為“起源”的意思。干細(xì)胞在一定條件下，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能；各種克隆技術(shù)，如克隆羊、克隆牛，利用的就是基于干細(xì)胞的克隆技術(shù)。干細(xì)胞是一種未充分分化、尚不成熟的細(xì)胞，其再生各種組織器官和人體的潛在功能，吸引著越來越多人的眼球。目前國內(nèi)外近年來有關(guān)的干細(xì)胞治療主要有幾種疾病的臨床研究報道情況如下：1).MSCs治療脊髓損傷通過搜索國內(nèi)外相關(guān)的臨床文獻(xiàn)可知，接受脊髓損傷的患者的實驗指標(biāo)（ASIA觸覺評分、Frankel評分總體改善率、日常生活能力訓(xùn)練評分）具有更高的低熱反應(yīng)，與對照組相比差異有顯著性意義（P0.05），說明間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療骨髓損傷有一定的療效并未發(fā)生嚴(yán)重并發(fā)癥，

12、但是還需要高質(zhì)量的隨機對照研究來證實間充質(zhì)干細(xì)胞的安全性及有效性。2) .治療重癥系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE） 南京大學(xué)附屬鼓樓醫(yī)院在2009年通過治療結(jié)果首次證明了異體MSCs治療SLE安全有效。且病人在移植MSCs后9個月及12個月時有一定的復(fù)發(fā)率，提示可在移植后6個月給予重復(fù)輸注以維持疾病的長期緩解。3).干細(xì)胞治療急性植物抗宿主疾病檢索有關(guān)MSCs預(yù)防HSCT后GVHD方面的臨床文獻(xiàn)，通過研究文獻(xiàn)試驗結(jié)果可知：MSCs未能降低急、慢性GVHD發(fā)生率；MSCs未參加原發(fā)病復(fù)發(fā)率及巨細(xì)胞病毒感染率；MSCs未改善病人總體生存率。MSCs可能對GVHD有一定的預(yù)防作用，但由于尚缺乏大樣本的RCT

13、證據(jù)支持，MSCs對GVHD的預(yù)防作用尚不能作出最后結(jié)論。4).干細(xì)胞治療心肌梗死和缺血性心力衰竭 海軍總醫(yī)院與國內(nèi)11所醫(yī)院及北科生物合作研究，進(jìn)行了國內(nèi)首個隨機、雙盲、安慰劑對照的 WJ-MSCs經(jīng)冠狀動脈移植治療急性心肌梗死的臨床試驗，結(jié)果表明，WJ-MSCs治療急性心肌梗死是安全的，無免疫反應(yīng)，可明顯縮小心肌梗死范圍，顯著提高心臟收縮功能，有效預(yù)防心肌梗死后心臟重構(gòu)及心力衰竭發(fā)生，且另有證據(jù)表明，原始的 WJ-MSCs 確實遠(yuǎn)較自體的成體干細(xì)胞更具旁/自分泌效應(yīng)，更具增殖活力及分化潛能。另有試驗表明，干細(xì)胞治療缺血性心力衰竭與急性心肌梗死對于減小患者梗死面積、提高左心室射血功能具備著確

14、切的安全性以及治療效果。5).干細(xì)胞治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病霍普金斯大學(xué)的研究人員 Karussis等人的對于干細(xì)胞的臨床研究結(jié)果表明干細(xì)胞具有定向遷移的能錄且較為安全，還發(fā)現(xiàn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有顯著的免疫調(diào)控功能。劍橋大學(xué)間充質(zhì)干細(xì)胞在該領(lǐng)域的研究實驗結(jié)果表明間充質(zhì)干細(xì)胞治療前后沒有觀察到嚴(yán)重的不良事件，而且經(jīng)間充質(zhì)干細(xì)胞治療后患者的視力以及視覺誘發(fā)反應(yīng)均有所改善，而且視神經(jīng)區(qū)域增加。日本札幌醫(yī)科大學(xué)的研究人員進(jìn)行的間充質(zhì)干細(xì)胞相關(guān)研究證明了間充質(zhì)干細(xì)胞可以有效減少腦卒病灶；韓國亞洲大學(xué)的間充質(zhì)干細(xì)胞臨床研究結(jié)果表明間充質(zhì)干細(xì)胞在缺血性中風(fēng)治療中安全有效。6).干細(xì)胞治療肝功能衰竭通過查找相關(guān)臨

15、床實驗資料可知，自體外周血干細(xì)胞治療可以成為肝移植前的過渡治療手段。7).干細(xì)胞治療糖尿病足日本Kansai醫(yī)科大學(xué)的醫(yī)生和我國的科研人員對糖尿病足病患者的臨床治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該治療手段使大多數(shù)患者達(dá)到了避免截肢或降低截肢平面的目的。目前我國采用自體骨髓干細(xì)胞移植治療下肢缺血的例數(shù)大約在8000例左右，從目前臨床上反饋的結(jié)果證明了這是一種非常安全的有效、值得推廣的技術(shù)。8).干細(xì)胞治療黃斑變性在美國加利福利亞大學(xué)Stein眼科學(xué)院、 Wills眼科醫(yī)院、 Bascorn Palmer眼科學(xué)院展開的hESC-RPE細(xì)胞懸液移植多中心I II期臨床試驗中， 采用 ACT公司提供的hESC-RPE對干

16、性AMD和Stargardt病患者進(jìn)行視網(wǎng)膜下腔注射。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者的癥狀得到了有效緩解。目前，干細(xì)胞的研究正在向臨床應(yīng)用轉(zhuǎn)化，干細(xì)胞的安全性數(shù)據(jù)多來自一些干細(xì)胞的早期探索研究和 I、 II 期臨床試驗?？傮w來看，胚胎干細(xì)胞已經(jīng)在動物試驗中發(fā)現(xiàn)，未經(jīng)分化的胚胎干細(xì)胞移植后可以形成畸胎瘤；誘導(dǎo)多能干細(xì)胞已經(jīng)被證明大約 20% 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞后代會發(fā)生腫瘤，且其誘導(dǎo)過程中需使用反轉(zhuǎn)錄病毒，對臨床使用的安全性也需要驗證。應(yīng)用于臨床治療的細(xì)胞資源需要同時符合幾個重要條件，即培養(yǎng)方便、可以在體外大量增殖，獲得的終末分化細(xì)胞需要具有功能，同時又具備較低的致瘤風(fēng)險。然而到目前為止，無論是具備亞全能性的胚胎干細(xì)胞還是體細(xì)胞來源的誘導(dǎo)型多能性干細(xì)胞，直接進(jìn)行體外分化，都無法同時滿足這些要求；異體造血干細(xì)胞最嚴(yán)重的不良反應(yīng)是急慢性的移植物抗宿主病，會影響移植成功的患者的存活。間充質(zhì)干細(xì)胞目前的臨床研究上沒有發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的不良反