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文檔簡(jiǎn)介
1、基因工程基因工程(生物技術(shù))是狹義的遺傳工程。核心是構(gòu)建重組DNA分子,故也稱(chēng)重組DNA技術(shù)。工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生理論基礎(chǔ):1.DNA是生物遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)。2.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的確立。3.遺傳信息傳遞方式的認(rèn)定。限制性核酸內(nèi)切酶:能夠識(shí)別和切割DNA分子內(nèi)一小段特殊核苷酸序列的酶。DNA連接酶質(zhì)粒(載體):具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子,在細(xì)菌之中獨(dú)立于擬核之外。常用大腸桿菌質(zhì)粒,這種質(zhì)粒常含有抗生素抗性基因(作為標(biāo)記基因)。 除質(zhì)粒外載體還有噬菌體、植物病毒和動(dòng)物病毒(均為DNA病毒)基因工程的原理和技術(shù)基本原理:讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細(xì)胞在穩(wěn)定和高效地表達(dá)?;?/p>
2、本操作步驟:1. 獲取目的基因。 目的基因的序列已知:1.化學(xué)方法合成。2.逆轉(zhuǎn)錄法(以m-RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成)。3.用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增目的基因。 目的基因的序列未知:從基因文庫(kù)(包括DNA分子的所有基因)中獲取2. 形成重組DNA分子 用相同的限制酶切割目的基因和載體DNA3. 將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞 常用的轉(zhuǎn)化方法:導(dǎo)入植物細(xì)胞:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(農(nóng)桿菌特點(diǎn):易感染雙子葉植物和裸子植物,對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力。原理:Ti質(zhì)粒上的t-DNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞,并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上),其次還有基因槍法和花粉管通道法等。導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:顯微注射
3、技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。導(dǎo)入微生物細(xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌,其轉(zhuǎn)化方法是:先用氯化鈣處理細(xì)胞,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。4. 篩選含有目的基因的受體細(xì)胞 依據(jù):標(biāo)記基因(或目的基因)是否表達(dá)5. 目的基因的表達(dá) 目的基因是否插入:DNA分子雜交,看是否出現(xiàn)雜交帶 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了m-RNA:核酸分子雜交目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):抗原-抗體雜交個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定:抗蟲(chóng)、抗病接種實(shí)驗(yàn)基因工程的應(yīng)用基因工
4、程與遺傳育種(農(nóng)牧業(yè)) 轉(zhuǎn)基因植物:解決傳統(tǒng)育種方法所需時(shí)間較長(zhǎng),且遠(yuǎn)緣親本難以雜交的問(wèn)題。 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因工程與疾病治療(醫(yī)藥工業(yè)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域) 基因工程藥物: 胰島素(注射):蛋白質(zhì)激素,治療胰島素依賴(lài)型糖尿病。傳統(tǒng):從豬羊的胰腺中提取。現(xiàn):轉(zhuǎn)入了人胰島素原基因的大腸桿菌,可以合成人胰島素原,加工后得到有生物活性的胰島素干擾素(注射):病毒侵入細(xì)胞后產(chǎn)生的糖蛋白。有抗病毒、抗細(xì)胞分裂和免疫調(diào)節(jié)功能。傳統(tǒng):從人血液中提取?,F(xiàn):人白細(xì)胞干擾素基因獲得克隆和表達(dá)。乙型肝炎疫苗:蛋白質(zhì)?,F(xiàn)還無(wú)特效藥物治療乙肝。現(xiàn):酵母乙肝疫苗(酵母菌),哺乳動(dòng)物細(xì)胞乙肝疫苗。 基因治療:向目標(biāo)細(xì)胞中引入正常功能基因
5、,以糾正或補(bǔ)償基因的缺陷。 首例:將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入患者有缺陷的,經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)后可產(chǎn)生ADA,將成千上萬(wàn)個(gè)轉(zhuǎn)基因的T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移到患者骨髓組織中。 技術(shù)還不成熟基因工程與生態(tài)環(huán)境保護(hù)(環(huán)境保護(hù)領(lǐng)域):工程菌植物的克隆技術(shù)基礎(chǔ):植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞全能性和組織培養(yǎng)方法植物細(xì)胞全能性(有全套基因):植物體的每個(gè)生活細(xì)胞都具有遺傳上的全能性,因而都具有發(fā)育成完整植株的潛能。(一些品系的培養(yǎng)細(xì)胞所誘導(dǎo)出的再生植株,在多次繼代培養(yǎng)后,會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力) 全能性表達(dá)的難易程度:受精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞;植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞植物組織培養(yǎng)程序 條件:離體(基因的選擇性表達(dá))、營(yíng)養(yǎng)劑、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、
6、無(wú)菌、半固體培養(yǎng)基(含0.7-1%瓊脂) 愈傷組織:一種相對(duì)沒(méi)有分化的活的薄壁細(xì)胞團(tuán)組成的新生組織,在創(chuàng)傷的刺激下脫分化在創(chuàng)傷表面形成的。通過(guò)調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)配比,可誘導(dǎo)出芽和根的頂端分生組織,再得植株。 胚性細(xì)胞:將含愈傷組織培養(yǎng)物的試管放在搖床上,通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)分散成的單細(xì)胞。細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小、細(xì)胞核大。可發(fā)育成胚狀體,再得植株。 用原生質(zhì)體培養(yǎng)也可得新植株植物細(xì)胞全能性的體現(xiàn) 在長(zhǎng)期培養(yǎng)中,培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原因:1. 染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等,且結(jié)果不可逆。2. 細(xì)胞或組織中激素平衡被打破或細(xì)胞對(duì)外源生長(zhǎng)物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變3. 產(chǎn)
7、生了缺乏成胚性的細(xì)胞系細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng):?jiǎn)渭?xì)胞細(xì)胞團(tuán)球形胚心形胚胚狀體完整植株器官培養(yǎng):有的植物可以在愈傷組織的基礎(chǔ)上直接發(fā)育出花器官(調(diào)節(jié)激素比)可在試管中進(jìn)行植物受精過(guò)程和自受精卵進(jìn)行的植物胚胎發(fā)育過(guò)程原生質(zhì)體培養(yǎng)和植物細(xì)胞工程由于植物細(xì)胞壁的存在,植物的組織培養(yǎng)和克隆有一定難度。 原生質(zhì)體:獲得:在0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液環(huán)境下用纖維素酶和果膠酶的混合液處理細(xì)胞,獲得球形的原生質(zhì)體。 原生質(zhì)體融合(植物體細(xì)胞雜交)意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。打破物種之間的生殖隔離,擴(kuò)大遺傳重組范圍。 植物細(xì)胞工程:培養(yǎng)植物細(xì)胞(原生質(zhì)體),借助基因工程方法,將外源遺傳物質(zhì)導(dǎo)入
8、受體細(xì)胞,或通過(guò)細(xì)胞融合、顯微注射等(原生質(zhì)體)將不同來(lái)源的遺傳物質(zhì)重新組合(再誘導(dǎo)出細(xì)胞壁),培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞或重組細(xì)胞,得新植株。多途徑的植物克隆實(shí)踐(培養(yǎng)特定細(xì)胞系)1.次生代謝產(chǎn)物(中藥)的工業(yè)化生產(chǎn)2.單倍體克?。ɑㄋ帯⒒ǚ叟囵B(yǎng))3.抗炎或抗病突變體、抗賴(lài)氨酸類(lèi)似物突變體動(dòng)物的克隆技術(shù)基礎(chǔ):動(dòng)物的細(xì)胞和組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成理論基礎(chǔ):細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):取部分組織,經(jīng)過(guò)機(jī)械消化或胰酶消化,分散成單個(gè)細(xì)胞,再培養(yǎng)。動(dòng)物組織培養(yǎng):動(dòng)物組織在體外及人工條件下維持生活狀態(tài)或生長(zhǎng)特性??梢园殡S組織分化。長(zhǎng)期的組織培養(yǎng)只能使單一類(lèi)型的細(xì)胞保留下來(lái),最終成了簡(jiǎn)單的細(xì)胞培養(yǎng)。(統(tǒng)稱(chēng))組培:
9、各種生物體結(jié)構(gòu)成分的體外培養(yǎng)(包括器官培養(yǎng)(器官的原基、一部分或整個(gè)器官)組織培養(yǎng)技術(shù)(防污染:加抗生素):從組織切片中取下小片樣品。胰蛋白酶酶解,消化組織中的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分,獲得單個(gè)的成纖維細(xì)胞懸液。轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液中原代培養(yǎng)(CO2培養(yǎng)箱中保溫)(卡氏瓶,瓶蓋透氣),形成生長(zhǎng)暈并增大后,將原代細(xì)胞(用胰蛋白酶處理成單細(xì)胞懸液)分裝到多個(gè)卡氏瓶中進(jìn)行傳代培養(yǎng)。(定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害)細(xì)胞系、細(xì)胞株 細(xì)胞系:可連續(xù)傳代的細(xì)胞。原代培養(yǎng)物在首次傳代時(shí)就成為細(xì)胞系。 必須傳代的原因:如果不進(jìn)行分離培養(yǎng),到一定時(shí)期的細(xì)胞就會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大和代謝消耗引起營(yíng)養(yǎng)枯竭
10、,不能正常生長(zhǎng)。 有限細(xì)胞系:不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系。二倍體細(xì)胞通常為有限細(xì)胞系。 連續(xù)細(xì)胞系(轉(zhuǎn)化細(xì)胞系):能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系。異倍體核型。惡性細(xì)胞系:有異體致瘤性。另一種連續(xù)細(xì)胞系:有不死性,但保留接觸抑制,不致瘤。 細(xì)胞株(有限細(xì)胞系):通過(guò)一定選擇或純化的方法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞。一般具有恒定的染色體組型、同工酶類(lèi)型、病毒敏感性和生化特性。分為有限細(xì)胞株和連續(xù)細(xì)胞株??寺∨囵B(yǎng)法(細(xì)胞克?。┑玫郊?xì)胞株 把一個(gè)單細(xì)胞(祖細(xì)胞)(最基本要求)從群體中分離出來(lái)單獨(dú)培養(yǎng),使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體(純系(未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)性)。 原代培養(yǎng)細(xì)胞和有限細(xì)
11、胞系克隆起來(lái)較為困難。 提高細(xì)胞克隆形成率:適宜培養(yǎng)基、添加血清、以滋養(yǎng)細(xì)胞(本身失去增殖力的小鼠成纖維細(xì)胞)支持生長(zhǎng)、激素(胰島素:促進(jìn)血糖吸收)刺激、用CO2培養(yǎng)箱調(diào)節(jié)pH。 最主要用途:從普通細(xì)胞系中分理出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系。動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合和細(xì)胞雜交 融合方法:滅活的仙臺(tái)病毒(動(dòng)物)、聚乙二醇(動(dòng)植)、電融合技術(shù)(動(dòng)植) 細(xì)胞雜交:基因型不同的細(xì)胞間的融合。細(xì)胞融合:基因型相同或不同的細(xì)胞間的融合。 由于細(xì)胞雜交中染色體容易丟失,利用雜交細(xì)胞檢測(cè)特定染色體丟失與特定基因產(chǎn)物(蛋白質(zhì))減少的對(duì)應(yīng)關(guān)系可以進(jìn)行基因定位。雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體的制備
12、 利用抗原(被檢測(cè)的物質(zhì))抗體反應(yīng),可以診斷和防止各種疾病,可以研究抗原物質(zhì)在細(xì)胞中的定位及其功能等.由于抗原抗體反應(yīng)的高度特異性,可使用雜交瘤技術(shù)制備高純度的抗體。雜交瘤技術(shù)(獲得針對(duì)羊紅細(xì)胞的單克隆抗體) 向小鼠注射特定的抗原蛋白(滅活的病毒),獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞(脾細(xì)胞),和經(jīng)培養(yǎng)的骨髓瘤細(xì)胞融合,形成雜交細(xì)胞。篩選雜交細(xì)胞(抗體檢驗(yàn)),克隆能產(chǎn)生抗體的陽(yáng)性細(xì)胞。篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交細(xì)胞(抗體檢驗(yàn)),再克隆陽(yáng)性細(xì)胞。獲得來(lái)自單一細(xì)胞的既能產(chǎn)生特異抗體、又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞。 進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)(注射小鼠腹腔 優(yōu)點(diǎn):無(wú)需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和無(wú)菌環(huán)境,操作簡(jiǎn)便)或體外培養(yǎng)(培養(yǎng)基),產(chǎn)生單
13、克隆抗體。 單抗比一般血清優(yōu)越的多:1.一般抗血清中的抗體是一群識(shí)別不同抗原位置的抗體混合物。單抗特異性強(qiáng),靈敏度高,能大量制備。 2.單抗可作為特異探針,研究相應(yīng)抗原蛋白的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞學(xué)分布及其功能。動(dòng)物的克隆培養(yǎng)原理:細(xì)胞核的全能性動(dòng)物細(xì)胞的分化被認(rèn)為一般是不可逆的,因?yàn)樵趧?dòng)物發(fā)育的過(guò)程中,細(xì)胞的發(fā)育潛能逐漸變窄。動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度八分裂球以下具有全能性,即具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能。多能細(xì)胞:具有分化出多種組織的潛能(多能造血干細(xì)胞)。單能細(xì)胞:只能分化為一種細(xì)胞(單能造血干細(xì)胞)。已經(jīng)分化的細(xì)胞不再分化為其他細(xì)胞,甚至終生不再分裂。無(wú)論分化還是癌化,變化的都是表現(xiàn)型,基因的完
14、整性可以保留。細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn) 紫外線破壞受精卵核,細(xì)胞核移到無(wú)核卵形成一個(gè)重建的“合子”,使重組細(xì)胞發(fā)育成囊胚。 腸上皮核移植1%-2%形成蝌蚪,囊胚核移植50%形成蝌蚪或可育成蛙 核移植需要借助精密的顯微操作儀器和高效率的細(xì)胞融合法。體細(xì)胞克隆1.取卵,去核。去核卵母細(xì)胞:含有促進(jìn)細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì),體積大易操作,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多。2.取乳腺上皮細(xì)胞,進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)限制性培養(yǎng)(降低培養(yǎng)基中牛血清濃度),取出雙倍體核3.將乳腺細(xì)胞中的雙倍體核植入去核卵中,分裂至八細(xì)胞胚(用電脈沖細(xì)胞融合法選擇)置入代孕母羊子宮(胚胎能存活的生理基礎(chǔ):無(wú)免疫排斥反應(yīng))。證明了細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核(包括異源的細(xì)胞核)發(fā)育的
15、作用成功原因:重組卵細(xì)胞最初分裂時(shí)雖然復(fù)制了DNA,但基因的轉(zhuǎn)錄尚未開(kāi)始;同時(shí),供體核DNA開(kāi)始丟失來(lái)源于乳腺細(xì)胞的調(diào)節(jié)蛋白(最初阻止核基因的表達(dá));重組細(xì)胞開(kāi)始第三次分裂時(shí),原乳腺細(xì)胞的調(diào)節(jié)蛋白全部被卵細(xì)胞質(zhì)中的蛋白因子替換了,因此核DNA被重新編排,胚細(xì)胞開(kāi)始表達(dá)自己的基因,進(jìn)而調(diào)控胚在代孕母親子宮中的進(jìn)一步發(fā)育。胚胎工程從受精卵談起個(gè)體發(fā)育分為胚胎發(fā)育(受精卵發(fā)育成幼體)和胚后發(fā)育(幼體到成體 包括變態(tài)發(fā)育)受精作用:精卵識(shí)別(同種動(dòng)物精子卵細(xì)胞表面有特異性互相識(shí)別的糖蛋白)、精子附著于卵膜、精卵質(zhì)膜融合胚胎發(fā)育過(guò)程(受精卵-卵裂期(卵裂球2-32 2-8每個(gè)細(xì)胞都有全能性)-囊胚期-原
16、腸胚期(最關(guān)鍵)-組織器官、系統(tǒng)(組織器官形成期)-胎兒) 囊胚(胚泡):外表為一層扁平細(xì)胞,稱(chēng)滋養(yǎng)層,發(fā)育成胚胎的附屬結(jié)構(gòu)或胚外結(jié)構(gòu)(胚盤(pán))。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)不斷增殖分化將發(fā)育成完整的胚胎。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞,是一種未分化的細(xì)胞,具有發(fā)育全能性,能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官。 原腸胚的內(nèi)、中、外三個(gè)胚層逐漸分化形成各種器官原基。胚胎工程 胚胎工程通常指各種胚胎操作技術(shù) 研究對(duì)象通常限定于高級(jí)脊椎動(dòng)物,特別是哺乳動(dòng)物。體外受精、胚胎體外培養(yǎng) 體外受精:1.將成熟的精子放入培養(yǎng)液中培養(yǎng),使精子達(dá)到獲能狀態(tài),這樣才能夠穿入卵細(xì)胞內(nèi)部2.從卵巢中獲得次級(jí)卵母細(xì)胞。常用方法:卵巢經(jīng)超數(shù)排卵處理后用
17、超聲監(jiān)視器確定卵泡位置,插入穿刺針吸取卵泡液,取出卵母細(xì)胞,在體外進(jìn)行人工培養(yǎng),促其成熟。3.獲能的精子和成熟后的卵細(xì)胞在體外合適的環(huán)境下共同培養(yǎng)一段時(shí)間,便可受精4.培養(yǎng),植入或著床。移植的最適時(shí)間:發(fā)育到8細(xì)胞以上的胚胎(早期囊胚) 胚胎體外培養(yǎng):通過(guò)人工創(chuàng)造的環(huán)境,對(duì)獲取的早期胚胎進(jìn)行體外培養(yǎng)。 由于胚胎不同發(fā)育時(shí)期生理代謝的需求不同,需配置一系列含有不同成分的培養(yǎng)液,用以培養(yǎng)不同發(fā)育時(shí)期的胚胎。胚胎移植(借腹懷胎) 由于無(wú)法進(jìn)行全體外培養(yǎng),目前,胚胎移植成為胚胎工程中獲得后代的唯一方法。 實(shí)質(zhì):早期胚胎在相同的生理環(huán)境下空間位置的轉(zhuǎn)移。 過(guò)程:一頭母畜(經(jīng)濟(jì)價(jià)值高、遺傳性狀優(yōu)良)發(fā)情超
18、數(shù)排卵并經(jīng)配種后,在一定時(shí)間內(nèi)從其生殖器官中(輸卵管和子宮角)取出早期胚胎,進(jìn)行遺傳學(xué)診斷后,分別移植到另外一頭與供體同期發(fā)情排卵、未經(jīng)配種的母畜(一般品種)的相應(yīng)部位(輸卵管或子宮角),在受體子宮著床。胚胎分割 借助顯微操作技術(shù)將早期胚胎(囊胚及囊胚前)切割成幾等份(囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)需均等分割),再移植到代孕母子宮中發(fā)育,產(chǎn)生同卵多仔后代(表現(xiàn)性可能不同 變異)的技術(shù) 基本過(guò)程:將發(fā)育良好的胚胎移入含有培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中,在顯微鏡下用切割針或切割刀把胚胎分散開(kāi),或用酶處理等方式將卵裂球中的細(xì)胞分散開(kāi);分割的胚胎或細(xì)胞直接移植給受體,或在體外培養(yǎng)到囊胚階段再移植。胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞培養(yǎng) 胚胎干細(xì)胞
19、是一種未分化的細(xì)胞,具有發(fā)育全能性和二倍體核型。在適當(dāng)條件下可被誘導(dǎo)分化成多種細(xì)胞、組織。 培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的關(guān)鍵是需要一種培養(yǎng)體系。這種體系必須能促進(jìn)胚胎干細(xì)胞生長(zhǎng),同時(shí)還要抑制胚胎干細(xì)胞的分化。在培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時(shí),首先要在培養(yǎng)皿底部制備一層細(xì)胞,稱(chēng)為飼養(yǎng)層(胚胎成纖維細(xì)胞:無(wú)增值能力,可以分泌一些能抑制細(xì)胞分化的物質(zhì)),再將干細(xì)胞接種在飼養(yǎng)層上。把胚胎放在培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),直到內(nèi)細(xì)胞團(tuán)突出飼養(yǎng)層外,然后用酶消化或機(jī)械剝離內(nèi)細(xì)胞團(tuán),再把它用酶消化成單個(gè)細(xì)胞,置于新鮮培養(yǎng)液中培養(yǎng)。胚胎干細(xì)胞核移植 指把胚胎干細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中,經(jīng)過(guò)胚激活、胚胎培養(yǎng)、胚胎移植后直接由受體完成克隆動(dòng)物的技術(shù)
20、。 作用 胚胎干細(xì)胞可以進(jìn)行基因敲除,獲得基因敲除動(dòng)物,如用基因敲除手段可以獲得適合人體移植的豬器官,減弱或消除排斥反應(yīng);人體的胚胎干細(xì)胞可以轉(zhuǎn)變?yōu)槿梭w的任何一種細(xì)胞和組織,利用這一特性可以培育用于移植的細(xì)胞、組織和器官;通過(guò)胚胎干細(xì)胞,我們還可以在試管中改良并創(chuàng)造動(dòng)物新品種,再結(jié)合基因工程等技術(shù)培育出生長(zhǎng)快、抗病力強(qiáng)、高產(chǎn)的家畜品種,生產(chǎn)有價(jià)值的動(dòng)物等。生態(tài)工程背景:人口爆炸,資源枯竭,生態(tài)環(huán)境破壞,糧食短缺,空氣污染生態(tài)工程的主要類(lèi)型原理:整體、協(xié)調(diào)、循環(huán)、再生項(xiàng)目理論基礎(chǔ)意義實(shí)例物質(zhì)循環(huán)再生原理循環(huán)再生可避免環(huán)境污染及其對(duì)系統(tǒng)穩(wěn)定和發(fā)展的影響無(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)協(xié)調(diào)性原理生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡可
21、避免系統(tǒng)的失衡和破壞太湖富營(yíng)養(yǎng)化問(wèn)題整體性原理社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、自然復(fù)合系統(tǒng)統(tǒng)一協(xié)調(diào)各種關(guān)系,保障系統(tǒng)的平衡與穩(wěn)定林業(yè)建設(shè)中自然系統(tǒng)與社會(huì)、經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)的關(guān)系問(wèn)題研究對(duì)象:社會(huì)經(jīng)濟(jì)自然復(fù)合生態(tài)系統(tǒng)。生態(tài)工程主要類(lèi)型:(1)物質(zhì)循環(huán)利用的生態(tài)工程城市:生活垃圾進(jìn)行減量化、無(wú)害化、資源化處理,將生活垃圾中有機(jī)部分、人畜的糞便等轉(zhuǎn)化為優(yōu)質(zhì)生態(tài)復(fù)合肥。農(nóng)村:發(fā)展養(yǎng)殖業(yè),將農(nóng)作物秸稈“過(guò)腹還田”,利用禽畜糞便與作物秸稈培養(yǎng)食用菌后再培養(yǎng)蚯蚓,蚓烘殘?jiān)僮鳛榉柿?,既減少或避免了田間燒草給環(huán)境帶來(lái)的污染,又增加了產(chǎn)值。(2)節(jié)水和廢水處理與應(yīng)用的生態(tài)工程節(jié)水:西北干旱地區(qū):雨水和地表水收集;農(nóng)業(yè)區(qū):節(jié)水灌溉技術(shù);城市、工業(yè)節(jié)水系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)等。廢水處理與應(yīng)用(對(duì)工業(yè)廢水、生活污水等實(shí)施減量、回收、再生、再循環(huán)):造糖廠:糖蜜制酒精;造紙廠:廢液回收鈣粉、木質(zhì)素;屠宰場(chǎng):廢血提取凝血酶、血紅蛋白。(3) 山區(qū)小流域綜合治理與開(kāi)發(fā)的生態(tài)工程(4) 清潔及可再生能源系統(tǒng)組合利用的生態(tài)工程沼氣、太陽(yáng)能、風(fēng)能的開(kāi)發(fā)和利用問(wèn)題:“沼氣工程”是我國(guó)農(nóng)村普遍存在的一種生態(tài)工程,它遵循的主要原理是什么?答:物質(zhì)循環(huán)、再生原理。(5)其他類(lèi):住宅、小區(qū)和城鎮(zhèn)建設(shè)生態(tài)工程;荒山、荒坡、灘涂、濕地以及礦山廢棄地生態(tài)恢復(fù)工程;生態(tài)旅游;綠色化
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