
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1、人感染 H7N9 禽流感標(biāo)本采集要求一、人感染 H7N9 禽流感病毒的病原學(xué) :依據(jù)人感染 H7N9 禽流感診療方案(2013 第一版) 禽流感病毒屬 正粘病毒科甲型流感病毒屬。禽甲型流感病毒顆粒呈多形性,其中球形直 徑80120nm,有囊膜?;蚪M為分節(jié)段單股負(fù)鏈 RNA。依據(jù)其外膜血凝 素(H)和神經(jīng)氨酸酶(N)蛋白抗原性不同,目前可分為16個(gè)H亞型(H1 H16)和9個(gè)N亞型(N1N9)。禽甲型流感病毒除感染禽外,還可感染人、 豬、馬、水貂和海洋哺乳動(dòng)物。 可感染人的禽流感病毒亞型為 H5N1 、H9N2、 H7N7、H7N2、H7N3,此次報(bào)道的為全球首次發(fā)現(xiàn)人感染 H7N9禽流感病
2、毒。該病毒為 H7N9 和 H9N2 重配的新型病毒,其內(nèi)部基因來(lái)自于 H9N2 禽流感病毒,基因序列分析表明為禽源病毒。二、人感染 H7N9 禽流感監(jiān)測(cè)病例定義:同時(shí)具備以下 4 項(xiàng)條件 依據(jù)人感染 H7N9 禽流感疫情防控方案 (第 一版)1、發(fā)熱(腋下體溫38C);2、具有肺炎的影像學(xué)特征;3、發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)降低或正常 ,或淋巴細(xì)胞分類計(jì)數(shù)減少;4、不能從臨床或?qū)嶒?yàn)室角度診斷為常見(jiàn)病原所致肺炎。(除第 4 條不同于不明原因肺炎病例定義,以上三條均相符。不明原 因肺炎第 4 條為:經(jīng)規(guī)范抗菌藥物治療 35 天,病情無(wú)明顯改善或呈進(jìn)行 性加重。)三、標(biāo)本采集種類:醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)及時(shí)采集病例
3、相關(guān)臨床樣本。1、上呼吸道標(biāo)本(包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻 洗液);2、下呼吸道標(biāo)本(如氣管吸取物、肺洗液、肺組織標(biāo)本)3、血清標(biāo)本(發(fā)病 7 天內(nèi)急性期血清以及間隔 2-4周的恢復(fù)期血清);4、尸檢標(biāo)本(如病人死亡,應(yīng)當(dāng)盡可能說(shuō)服家屬同意尸檢, 及時(shí)進(jìn) 行尸體解剖,采集肺組織、氣管、支氣管等組織標(biāo)本) ;5、應(yīng)當(dāng)盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道標(biāo)本(尤其是下呼吸道標(biāo)本)。四、標(biāo)本采集主要器材和試劑:1、拭子:WHO及美國(guó)CDC規(guī)定,鼻煙拭子采集只能用塑料桿的滌綸 或人造棉拭子(如常用的聚酯纖維拭子) ,不能用藻酸鈣拭子或木桿拭子, 因可能使某些病毒失活或抑制 PCR;脫脂棉含有熒
4、光物質(zhì),影響實(shí)時(shí)應(yīng)熒 光定量PCR結(jié)果。2、壓舌板3、3ml Hanks 液螺口采樣管4、封口袋5、冷藏運(yùn)輸包6、油性標(biāo)記筆或標(biāo)簽紙7、樣品登記表8、真空采血管9、個(gè)人防護(hù)裝備五、標(biāo)本采集方法:鼻咽拭子采樣是流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)中的一個(gè)重要環(huán)節(jié),操作簡(jiǎn)單 ,但在流感監(jiān)測(cè)工作中卻極為重要。標(biāo)本采集的時(shí)間、位臵及質(zhì)量對(duì)能否分離到病 毒或提取到有活性的 RNA 至關(guān)重要,而標(biāo)本保存與運(yùn)輸不當(dāng),也會(huì)影響病 毒的分離。為提高病毒的分離率,在用于病毒分離樣品的采集數(shù)量、類型 和地點(diǎn)方面,實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)與流行病學(xué)人員達(dá)成共識(shí)。一般來(lái)說(shuō),用 于病毒分離的樣品應(yīng)與血樣同時(shí)采集,以便進(jìn)行血清學(xué)診斷。1、 鼻拭子:采集
5、標(biāo)本時(shí),囑咐病人頭部盡量保持不動(dòng),將聚酯纖維 頭拭子輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)緩緩插入病人鼻孔至顎部 (注意:不可太用力, 但要盡量深, 通常 5cm 以上),停留數(shù)秒吸取分泌物,輕輕旋轉(zhuǎn)取出拭子,臵采樣管折斷 手接觸部位的塑料柄,使拭子浸泡至采樣液中,旋緊管蓋。2、 咽拭子:囑咐病人放松,發(fā)“啊”聲, 立即用壓舌板壓住病人舌 前 2 3,聚酯纖維頭拭子適度用力多次抹擦懸雍垂(腭垂或小舌,見(jiàn)圖) 后部咽后壁及雙側(cè)扁桃體,避免觸及舌部,取出后臵采樣管,折斷手接觸 部位的塑料柄,使拭子浸泡至采樣液中,旋緊管蓋。3、切記:咽拭子與鼻拭子采到一個(gè) Hanks 管(2 3ml )。如 商品 化采樣管液體過(guò)多,采樣前倒掉一部分,以提高病毒濃度及陽(yáng)性率。聚丙 烯拭子采樣前不需用生理鹽水濕潤(rùn),以吸收更多的分泌物。4、漱口液標(biāo)本:在病人發(fā)熱 72小時(shí)內(nèi)盡早采集。 先讓病人咳嗽幾聲, 將 5-10ml 無(wú)菌生理鹽水(不含青霉素)倒入病人口中,讓病人頭向后傾并 發(fā)出“噢”的聲音,反復(fù)幾次。將漱口液吐入 50ml 帶墊圈的螺口塑料離心 管中,旋緊管蓋。5、尸檢組織標(biāo)本:病人死亡后應(yīng)盡早進(jìn)行解剖,采集肺、氣管、腎、精品文檔,供參考!脾、肝、心臟、腦、血凝塊等組織和淋巴結(jié)等重要器官標(biāo)本。每一采集部 位分別使用不同消毒器械;每種組織應(yīng)多部
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