遺傳實(shí)驗(yàn)試卷

1、廈門(mén)大學(xué)遺傳與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程試卷生命科學(xué)學(xué)院生物學(xué)系2002年級(jí) 各 專(zhuān)業(yè)主考教師： 章 軍 試卷類(lèi)型：（A卷/B卷）一、填空題（每題2分，共50分）1. 果蠅具有豐富的外表型態(tài)差異，包括_、_、_，_與_。2. FISH技術(shù)的全稱(chēng)是_。3. 細(xì)菌轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中所用的菌株分別是：_和_ ,用的培養(yǎng)基是_培養(yǎng)基。4. 轉(zhuǎn)座子引起的插入突變實(shí)驗(yàn)中所用的菌株分別是：_ 和_。5. 在提基因組DNA時(shí)，為保證DNA的完整性應(yīng)該采取的步驟有 ， ， 。6. DNA凝膠電泳可以以 和 為凝膠介質(zhì)，當(dāng)DNA為 bp時(shí),用 作為介質(zhì)，當(dāng)DNA為 bp時(shí)， 用 作為介質(zhì)。7. 抽提DNA純化時(shí)，一般采用 抽提，

2、采用 體積；沉淀DNA用 ，體積 ；洗滌沉淀時(shí)用 。8. DNA純度一般用 比值來(lái)衡量，當(dāng)比值在 表示DNA很純，當(dāng) 表示 不干凈，當(dāng) 表示含 過(guò)多。9. 衡量DNA得率或濃度時(shí)應(yīng)該用 值來(lái)進(jìn)行計(jì)算，公式表示為 。10. 進(jìn)行電泳加樣時(shí)，要將DNA樣品與 混合，其主要成分為 ，如要加樣10lDNA要加 l混合。11. 在提取DNA時(shí)，酚氯仿的作用是 ，其比例應(yīng)為 ，可選擇使用酚氯仿異戊醇 ，酚的飽和是用 ，在使用酚時(shí)應(yīng)注意 ，一般用的酚需要 酚，要用 瓶子來(lái)裝。12. 酚是蛋白變性劑，用酚抽提細(xì)胞 DNA時(shí)，具有兩方面的作用：(1) (2) 。13. 提質(zhì)粒DNA時(shí)，加入STE的作用是 ；加入

3、溶液的作用是 ，現(xiàn)象 ；加入溶液作用 ，現(xiàn)象 ，成分主要為 ，提供 環(huán)境；加入溶液作用是 ，現(xiàn)象 ，成分主要是 ，目的是 。14. 質(zhì)粒DNA有以下?tīng)顟B(tài) 、 、 、 ，進(jìn)行電泳時(shí) 跑的最快在最前面，其次為 、 ，最后為 。15. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常用的槍頭有以下幾種： l用 色槍頭， l用 色槍頭， l用 _色槍頭。16. 轉(zhuǎn)化時(shí)用的感受態(tài)細(xì)菌需要用 處理，轉(zhuǎn)化細(xì)菌時(shí)需要進(jìn)行 ， 時(shí)間為 秒，目的是 。17. 膠回收DNA時(shí)需注意 ， ，應(yīng)盡量將 足夠小 徹底，其中加入 與 ，質(zhì)量比應(yīng)為 。洗滌液中含有 ，洗脫液可以用 代替。18. 酶切DNA時(shí)，如DNA不純可通過(guò) ， ， 進(jìn)行克服。19. 連接反

4、應(yīng)時(shí)，外源DNA與質(zhì)粒DNA的摩爾比例應(yīng)為 ，連接反應(yīng)時(shí)體系常用 。20. 在酶切反應(yīng)管加完各種反應(yīng)物后，需要離心2秒鐘，其目的是 _和_。21. 用乙醇沉淀 DNA時(shí)，通常要在DNA溶液中加入單價(jià)的陽(yáng)離子，如 NaCl和 NaAc，其目的是 。22. PCR反應(yīng)過(guò)程分為三個(gè)步驟，即 ， 和 。23. PCR反應(yīng)受 ， ， ， ， 等因素的影響。24. 部分酶切可采取的措施有：(1) (2) (3) 等。25. 限制性?xún)?nèi)切核酸酶通常保存在 濃度的甘油溶液中。二、簡(jiǎn)答題（每題5分，共40分）26. 請(qǐng)列出雌雄果蠅主要特征。27. 簡(jiǎn)述染色體組型分析的分組排隊(duì)原則。28. 噬菌體效價(jià)和轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率如何

5、計(jì)算？如何計(jì)算Tn5易位插入突變總頻率？29. 為了選擇下面兩種突變型，應(yīng)對(duì)只含有葡萄糖、硫酸銨以及無(wú)機(jī)離子的基本培養(yǎng)基作何調(diào)整?leu，亮氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型；gal，不能以半乳糖作為唯一碳源的突變型。30. 請(qǐng)你用Hind設(shè)計(jì)一個(gè)質(zhì)粒的DNA酶切反應(yīng)體系。31. 簡(jiǎn)述一個(gè)完整外源DNA的克隆過(guò)程。32. 一個(gè)攜帶有氨芐和卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒被僅在卡那霉索基因中有識(shí)別位點(diǎn)的EcoR消化。消化物與酵母 DNA連接后轉(zhuǎn)化對(duì)兩種抗生索都敏感的E coli菌株。(l)利用哪一種抗生素抗性選擇接受了質(zhì)粒的細(xì)胞?(2)怎樣區(qū)分接受了插入酵母 DNA的質(zhì)粒的克隆?33. 你打算擴(kuò)增下圖所示的兩段序列之間的 D

6、NA，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一對(duì)引物序列。 5-GACCTGTGGAAGC-CATACGGGATTG-3 3-CTGGACACCTTCG-GTATGCCCTAAC-5 三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（10分）種子在儲(chǔ)藏過(guò)程中發(fā)生了某種變化，使得長(zhǎng)成的水稻很容易被一種病原菌感染。據(jù)推測(cè)可能是某一化學(xué)誘導(dǎo)的突變導(dǎo)致一個(gè)具有抗菌功能的關(guān)鍵酶丟失。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證這種推測(cè)是否正確，如何使種子重新獲得對(duì)這種病的抗性?提示：根瘤農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)具有通過(guò)其 Ti質(zhì)粒將細(xì)菌 DNA帶入植物基因組的獨(dú)特功能。附加題：談?wù)勀銓?duì)該門(mén)實(shí)驗(yàn)課的建議或意見(jiàn)。參考答案：一、 填空題1 眼色、眼形、翅形、剛毛的形

7、狀和數(shù)目2 熒光原位雜交技術(shù)3 gal+、gal-、 EMB4 Tn5、 FD10065 低溫、動(dòng)作輕柔、抑制酶活6 瓊脂糖、聚丙烯酰胺，100、瓊脂糖、100、聚丙烯酰胺7 苯酚、一倍、無(wú)水乙醇、兩倍、70%乙醇8 OD260/OD280、1.8-2.0、1.8、DNA、1.6、蛋白質(zhì)9 OD、DNA濃度（g/ml）=（OD260-OD330）50g/ml稀釋倍數(shù)（100）10 上樣緩沖液、溴酚蘭、111 蛋白質(zhì)變性、24：1、25：24：1、Tris、防止氧化、飽和、棕色12 蛋白質(zhì)變性、細(xì)胞破壁13 緩沖液、溶菌、溶液渾濁、細(xì)胞破壁蛋白變性、溶液變粘稠、SDS、堿性、中和、絮狀沉淀、乙酸

8、、使染色體和蛋白質(zhì)變性沉淀，使質(zhì)粒DNA析出14 ccc、oc、lc、l、ccc、oc、lc、l15 1000、藍(lán)、200、黃、10、白16 CaCl2、42熱激、90、使質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化入細(xì)胞17 去除雜質(zhì)、提高得率、DNA膠切塊、溶解、膠塊、溶解液、1：3、70%乙醇、無(wú)菌水18 酚抽提、乙醇沉淀、加RNA酶19 1：1、T4DNA連接酶20 混勻、濃縮21 中和DNA電荷促沉淀22 變性、退火、延伸23 溫度、Mg+、dNTP、模板、引物24 降低反應(yīng)溫度、縮短時(shí)間、減少用量25 50%二、 簡(jiǎn)答題26雌果蠅 個(gè)體較大 腹部末端較尖 腹部背面有五條黑條紋 外生殖器較簡(jiǎn)單，有陰道板和肛上板等

9、結(jié)構(gòu) 腹部腹面有6個(gè)腹片 無(wú)性梳雄果蠅 個(gè)體較小 腹部末端較鈍 腹部背面有三條黑條紋，最后一條極寬，并延伸到腹面 外生殖器較復(fù)雜，有生殖弧、肛上板、陰莖等結(jié)構(gòu) 腹部腹面有4個(gè)腹片 前腿跗節(jié)上有性梳27分組排隊(duì)原則l 著絲粒類(lèi)型相同，相對(duì)長(zhǎng)度相近的分一組l 同一組的按染色體長(zhǎng)短順序配對(duì)排列l(wèi) 各指數(shù)相同的染色體配為一對(duì)l 可根據(jù)隨體的有無(wú)進(jìn)行配對(duì)l 將染色體按長(zhǎng)到短排隊(duì)，短臂向上28效價(jià)(單位/ml)=斑數(shù)x稀釋倍數(shù)x取樣量轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率=(轉(zhuǎn)導(dǎo)子數(shù)/ml)/(噬菌體數(shù)/ml)x100%Tn5易位插入突變總頻率=F因子上lac基因插入突變數(shù)（B板上菌落數(shù)）/F因子轉(zhuǎn)移數(shù)（A板上菌落數(shù)）x100%29在培養(yǎng)基中添加亮氨酸進(jìn)行負(fù)篩選；在培養(yǎng)基中以半乳糖代替葡萄糖進(jìn)行負(fù)篩選305-