實(shí)訓(xùn)五飼料粗脂肪的測定

1、號肪測定儀實(shí)訓(xùn)五飼料粗脂肪的測定索氏脂肪巽取器，【教學(xué)目標(biāo)】1. 學(xué)會各種飼料樣本的粗脂肪的方法。2. 學(xué)會儀器的使用【教學(xué)重點(diǎn)】樣本的測定方法。【教學(xué)方法】操作指導(dǎo)【課時(shí)分配】6學(xué)時(shí)【原理】索氏脂肪提取器中用乙醚提取試樣，稱提取物的重量，除脂肪外還有有機(jī)酸，磷脂、脂溶性Vit，葉綠素等，因而測定結(jié)果稱粗脂肪或乙醚提取物?！痉治霾襟E】1）仲裁法使用索氏脂肪提取器測定。索氏提取器應(yīng)干燥無水。抽提瓶 （內(nèi)有沸石數(shù)粒）在105C 2C烘箱中烘干60min，干燥 器中冷卻30min,稱重。再烘干30min,同樣冷卻稱重，兩次重量之差小于 0.0008g為恒重。稱取試樣15g（準(zhǔn)確至0.0002g），于

2、濾紙筒中，或用濾紙包好，放入105C 2C烘箱中，烘干120min（或稱測水分后的干試樣，折算成風(fēng)干樣重），濾紙筒應(yīng)高于提取器虹吸管的高度，濾紙包長度應(yīng)以可全部浸泡于乙醚中為準(zhǔn)。將濾紙筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加無水乙醚60100mL在6075C的水?。ㄓ谜麴s水）上加熱，使乙醚回流，控制乙醚回流 次數(shù)為每小時(shí)約10次，共回流約50次（含油高的試樣約 70次）或檢查抽提管流出的乙醚揮 發(fā)后不留下油跡為抽提終點(diǎn)。取出試樣，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去殘 余乙醚。擦凈瓶外壁。將抽提瓶放入105C 2C烘箱中烘干120min，干燥器中冷卻 30min稱重，再烘干3

3、0min，同樣冷卻稱重，兩次重量之差小于O.OOIg為恒重。2）結(jié)果計(jì)算in 7 - mi xlOO%式中：m風(fēng)干試樣重量，gom 已恒重的抽提瓶重量，g om己恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，go3）推薦法魯氏殘留法操作步驟a. 將脫脂濾紙裁成10X 10cm2大小，疊成一邊不封口的紙包，用鉛筆編號，按順序排列于培養(yǎng)皿上，置于105C土 2C烘箱中烘2h,取出放于干燥器中冷卻至室溫，分別放入同一稱量瓶中稱重（mo, g） ob. 將25g風(fēng)干樣品（通過40目篩）用小藥匙小心裝入已經(jīng)稱重的紙包中，封上包口。按順序排列于培養(yǎng)皿中。置于105C 2C烘箱中烘3h,取出放入干燥器中冷卻至室溫,7080C

4、水浴鍋中回分別放入原稱量瓶中，稱至恒重 （mi, g）。將樣品包放入抽提管中，倒入無水乙醚，使之剛 超過樣品包高度，浸泡過夜。然后將浸泡過樣品的無水乙醚放入抽提瓶中，再重新向抽提管 中倒入無水乙醚，使之完全浸沒樣品包。連接裝置，接通冷凝水，在 流68h，回流速度以每分鐘 20mL左右為宜。抽提完畢，取出樣品包，在通風(fēng)處揮干乙醚.剩余乙醚可進(jìn)行回收。c. 將樣品包仍按原序號排列在培養(yǎng)皿中，置于105C 2C烘箱中烘2h,取出放入干燥器中冷卻至室溫，再將樣品包放原稱量瓶中，稱至恒重（m2, g） o結(jié)果計(jì)算粗脂肪=mt m x 100%m1 rd式中，m 濾紙+稱量瓶重（g）;m 提取前樣品包+稱

5、量瓶重（g）;m 提取后樣品包+稱量瓶重（g ）o上述兩種方法都是以乙醚為溶劑的提取方法，其優(yōu)點(diǎn)是具有較好的準(zhǔn)確度和精密度，尤其是測定粗脂肪含量在 5河下的樣品，用此法比較可靠。 缺點(diǎn)是費(fèi)工費(fèi)時(shí)，反復(fù)提取需8 16h；另外乙醚不能將樣品中的全部脂肪提盡。這是因?yàn)椴糠种境Ｅc蛋白質(zhì)或碳水化合物 等非脂肪成分結(jié)合。成為結(jié)合態(tài)脂類，如脂蛋白、糖脂、磷酯等，同時(shí)樣品也必須是烘干的，因乙醚難以滲入含水樣品的組織內(nèi)部。在烘干樣品時(shí)，又應(yīng)考慮到脂肪在高溫下易被空氣氧化等情況。脂肪測定儀 操作步驟a. 打開恒溫加熱裝置開關(guān)，控制工作溫度為75 C。b. 用萬分之一分析天平稱 2g左右的樣品（準(zhǔn)確至0.0002

6、g） （m 1），放入濾紙筒內(nèi)烘干。c. 用套筒夾將6個(gè)濾紙?zhí)淄惭b入浸提冷凝管內(nèi)，當(dāng)確信套筒已被磁鐵吸牢后取下套簡夾。d. 用分析天平稱浸提杯重量 （m2），然后加入約50mL無水乙醚，用杯托將6個(gè)浸提杯放在 加熱板上，再將冷凝管提升機(jī)構(gòu)搬下，使浸提懷與冷凝管連接好。e. 事先接通浸提冷凝管的冷卻水，將濾紙筒置于“沸騰”位置。冷凝管應(yīng)有良好的冷凝 作用；f. 無水乙醚沸騰15min或30min（依樣品含油量而異）后，將濾紙筒提升到“沖洗”位置， 沖洗 30min 或 45min。g. 沖洗結(jié)束后，關(guān)閉冷凝管旋塞閥，回收乙醚。h. 松開冷凝管提升機(jī)構(gòu)，取下浸提杯，并放入烘箱烘干。i. 在干燥器中冷卻浸提杯，然后用分析天平稱重（嗆）。j. 按以下公式計(jì)算樣品中粗脂肪含量。 測定結(jié)果的計(jì)算粗脂肪=V3 V2X 100%W式中：W風(fēng)干試樣重量，g。W已恒重的浸提杯重量，g。W己恒重的盛有脂肪的浸提杯重量，g。6.337重復(fù)性每個(gè)試樣取兩平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗脂肪含量在10%上 （含10%）允許相對偏差為 3%粗脂肪含量在10%下時(shí)，允許相對偏差為 5% 【實(shí)訓(xùn)作業(yè)及思考題】1. 測定混合飼料、配合飼料、濃縮飼料或單一飼料中粗脂肪的含量，并寫出實(shí)訓(xùn)報(bào)告。2. 脂肪包的高度超過虹吸高度對測定結(jié)果有何影響？為什