益生菌國內(nèi)外研究現(xiàn)狀

1、 獸用新生物制品名稱、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀、選題目的與依據(jù)獸用新生物制品名稱為：動物雙歧桿菌、干酪乳桿菌、糞腸球菌、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌復合活菌制劑（preparation of b. animals，l.casei， e.faecalis ，s.cerevisiae and b.subtilis）。1、研究目的及意義目前，提高畜禽動物飼料收益，減少畜禽患病率，是飼養(yǎng)者追求的目標。歷年來，人們習慣把抗生素作為防病促生長添加劑，并且取得了相應(yīng)的效果。但是，長期使用抗生素由之而來的抗生素殘留、耐藥性問題、抗生素污染問題也愈來愈受到人們的關(guān)注。因而，研制應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖領(lǐng)域的無殘藥、無污染、不產(chǎn)生抗藥性、

2、替代抗生素、預(yù)防動物疾病的的微生態(tài)制劑尤為重要。2、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀： 美國從20世紀70年代開始使用飼用微生物。80年代中期，世界各國，尤其歐洲、日本等發(fā)達國家紛紛積極鼓勵和倡導綠色安全飼料添加劑的研究和推廣。在國外，飼用微生態(tài)制劑已廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)生產(chǎn)中，在理論及應(yīng)用方面進行了深入細致的研究，取得了豐碩的成果。歐美各國和日本已將益生菌用于配合飼料的生產(chǎn)，形成了微生態(tài)制劑產(chǎn)業(yè)。從目前的發(fā)展情況看，國外動物微生態(tài)制劑的研究多是圍繞乳酸桿菌屬、枯草桿菌及一些鏈球菌進行，商業(yè)所用的產(chǎn)品常為復合菌劑，市場需求量很大，市場也較為完善。目前在美國準許飼喂的微生態(tài)制劑年使用量8000噸以上。日本年產(chǎn)值上億元

3、的公司幾十家，主要是雙歧桿菌類產(chǎn)品。在我國，動物微生態(tài)制劑的研究和應(yīng)用起步較晚，表現(xiàn)出一定的作用與效果，但還處于試驗研究階段。而且大部分以芽孢桿菌類產(chǎn)品的研制為主，產(chǎn)品多為單一菌劑，產(chǎn)品質(zhì)量及功效與國外產(chǎn)品尚有很大差距。中國專利開號為cn1103584a涉及一種三株口服液及其制備方法，屬營養(yǎng)保健食品，是雙歧桿菌、屎鏈球菌、嗜酸乳桿菌發(fā)酵的保健口服液。但是液體發(fā)酵，口服液穩(wěn)定性較差、活性益生菌存活率低，保存時間短等缺陷。專利公開號為cn1223865a涉及的一種雙歧三聯(lián)制劑及其制備方法，該制劑是由兩歧雙歧桿菌，糞鏈球菌、乳酸桿菌冷凍干燥活性粉與保護劑組成的一種粉末或膠囊制品。食品及保健品類：70

4、年代，雙歧桿菌開始應(yīng)用于食品制作，與乳酸菌一起制作酸奶、奶酪、飲料、奶粉、片劑納豆芽等。自90年代初以來，形形色色的“益生菌”類保健品風靡了整個世界。與此同時，“益生菌”的研究業(yè)已成為國際上的熱門研究課題。國外已開發(fā)出數(shù)以百計的益生菌保健產(chǎn)品，其中包括：含益生菌的酸牛奶、酸乳酪、酸豆奶以及含多種益生菌的口服液、片劑、膠囊、粉末劑等等。乳暢敏乳酸菌固體飲料，益康5，漢臣氏益生菌、紐利茲益生菌、金紐曼斯。丹麥科漢森公司生產(chǎn)的nitta益生菌，已通過美國fda的gras（大眾安全食品）認證。屬嬰兒級別益生菌，安全可靠，無副作用，此益生菌已經(jīng)有20多年的功效和安全性臨床研究，國內(nèi)有諸多產(chǎn)品,如蒙牛的b

5、b12益生菌酸奶、益生菌乳飲料百益多（雙歧桿菌和干酪乳桿菌發(fā)酵），三株口服液、九株濃縮液、雙歧桿菌奶片、益生菌飲用粉、靚穎牌益生菌、樂桂兒益生菌粉、衡欣益生菌沖劑、活力多等。 獸藥及促生長類：益生素(probiotic)，又稱促生素、生菌劑、活菌制劑、微生態(tài)調(diào)節(jié)劑，其中文名稱尚無統(tǒng)一規(guī)定，對其定義的解釋也不盡一致。首先lilley和stillwell于1965年使用益生素一詞(probiotic)，與抗生素(antibiotic)相對，兩者的作用矛盾?？股厥侵苯託缁蛞种朴泻L。1974年美國reparker認為“益生素是維持腸道菌群平衡的微生物或物質(zhì)”。1989年fuller重新定義為

6、“一種可通過改變腸道微生物平衡而對動物施加有利影響的活的微生物”。1990年h.sossard給益生素的定義是“攝入動物體內(nèi)參與腸內(nèi)微生物群落的阻礙作用，或者通過增強非特異性免疫功能來預(yù)防疾病而間接地起促進作用和提高效率的活的微生物培養(yǎng)物”。1991年我國學者又提出了一個較通俗的概念飼用微生物。益生素常常利用含乳桿菌、需氧芽孢桿菌和雙歧桿菌的復合制劑。國內(nèi)如川農(nóng)的周痢生、肥魚生、南農(nóng)的促康生、復旦的鰻魚食、大連水產(chǎn)的鍵魚生、寵樂寶、順腸片、等上百種產(chǎn)品。他們對于家禽的增重、增加產(chǎn)蛋率、降低死耗及食耗、防止常見疾病都有重要的作用。藥品（制劑）：含雙歧桿菌的單菌或復合制劑國內(nèi)正式批準的有金雙歧、麗

7、珠腸樂、媽咪愛、培菲康。國外有近百種產(chǎn)品，德國有臨床上用于治療志賀氏菌、致病性大腸桿菌、沙門氏菌及彎曲菌等引起腹瀉等疾病有肯定的治療效果。因此益生菌作為治療腹瀉的制劑有這廣泛的前景。其次，對便秘癥、肝臟疾病如高血氨癥、肝性腦病、保護腎功能、降低血清膽固醇、血液尿毒氮及3、選題目的與依據(jù)：動物雙歧桿菌乳酸亞種,bifidobacterium animalisubs( b. lactic v9 )是由內(nèi)蒙古輕工科學研究所1988年分離自健康的母乳喂養(yǎng)蒙古族兒童糞便的一株性能優(yōu)異的益生菌, 菌種保藏號cgmccno.4473。革蘭氏陽性，無芽孢，無莢膜，顯微鏡下呈多形態(tài)，一段稍膨大，或呈y、v型分叉

8、，或少有彎曲。厭氧培養(yǎng)tpy平板培養(yǎng)基上菌落形態(tài)為：圓形或橢圓形、突起、邊緣整齊、光滑、發(fā)亮、淡黃色或白色、不透明、菌落大小直徑為0.52mm。該菌株具有較強的耐酸、耐膽鹽特性，對腹瀉致病菌具有良好的拮抗作用 ,能夠抑制小鼠腸道致瀉菌株的生長繁殖。對常見抗生素的抗性及相關(guān)耐受基因、質(zhì)粒的檢測結(jié)果表明：bifidobacterium animalisubs (b. lactic v9)的抗生素抗性較弱，該菌株中無質(zhì)粒存在。安全性獨立評估表明，該菌株無毒副作用。自從1899年tisser首次從母乳嬰兒糞便中分離出雙歧桿菌近一百年歷史中，國內(nèi)外學者便對其進行了廣泛的研究，發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌是 正常人腸道中

9、的優(yōu)勢菌，對人體微生態(tài)平衡有巨大作用，特別是在改善胃腸道功能方面，創(chuàng)造了細菌學上極其輝煌的篇章。國外學者們早在七十年代，就發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌能夠保護腸道免受 沙門氏菌屬、志賀菌屬和腸致病性大腸桿菌等感染引起的腹瀉。而雙歧桿菌發(fā)揮抵抗胃腸炎的作用在于一方面阻止長期定居的侵人性病原體的影響。雙歧桿菌抑菌機制是與本菌發(fā)酵產(chǎn)酸有關(guān)，比如醋酸、 乳酸。另一方面雙歧桿菌具有廣譜抗菌物質(zhì)，對普通沙門菌屬、李斯 特菌屬、志賀菌屬都有抑制作用；midolo等研究發(fā)現(xiàn)包括兩歧雙歧桿菌的產(chǎn)酸菌，在乳酸濃度為50150 mmol/l時,能對幽門螺桿菌 nc產(chǎn)生抑制. gismondo用包含有嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌的活菌制劑治

10、療因幽門螺桿菌導致的胃和十二指腸疾病的病人，發(fā)現(xiàn)這種活菌制劑能夠有效地與引起疾病的微生物競爭，提高了療效。益生苗( 雙歧桿菌) 可以用來治療因胃腸道疾病所致的腸微生物失調(diào)和增加腸的滲透性；fwara等發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌產(chǎn)生的蛋白因子可以阻止腸產(chǎn)毒性大腸桿 菌與神經(jīng)節(jié)四聚體順式神經(jīng)酰胺結(jié)合，推論出它可通過此作用，保護腸粘膜，抗感染；我國現(xiàn)有的雙歧桿菌活菌制劑有麗珠腸樂 、 培菲康、媽咪愛、金雙歧、乳康生、復方雙歧桿菌豆奶等品牌，主要以藥品的方式被人們接受，用于治療各種腹瀉；動物腹瀉模型和臨床應(yīng)用報告證實：雙歧桿菌制劑對急性腸胃炎、菌痢、病毒性腹瀉、嬰幼兒腹瀉、結(jié)腸炎、抗生素使用不當后腹瀉有肯定的治療作

11、用，這種作用機理在于雙歧桿菌的生物拮抗作用（受體爭奪、生物屏障構(gòu)成、化學屏障：如代謝產(chǎn)物乳酸、乙酸等、類細菌素樣物質(zhì)）等有關(guān)。刺激機體免疫系統(tǒng)，增強吞噬細胞作用及siga產(chǎn)生，提高機體非特異性免疫力；動物實驗證實：雙歧桿菌具有降低內(nèi)毒素釋放，控制膿毒癥作用。這種作用產(chǎn)生于雙歧桿菌定植后，大腸桿菌、克雷伯氏桿菌等革蘭氏陰性桿菌定植和增殖被抑制，這樣菌胞避脂多糖產(chǎn)生減少，lps釋放自然減少有關(guān)；臨床上除直接使用雙歧桿菌制劑外，還 可甩它的促進劑促菌生是雙歧桿菌的生物促進劑，它能消耗腸道內(nèi)的氧氣 ，提供有利于雙歧桿菌生長的低氧環(huán)境22。 乳酸桿菌不僅可以改善機體代謝，促進畜禽生長，提高畜禽的生產(chǎn)性能

12、，還可以改善動物健康水平，預(yù)防疾病及提高動物免疫力等。干酪乳桿菌zhang( lb.casei zhang), 菌種保藏號為cgmcc no.1697是分離自內(nèi)蒙古自治區(qū)錫林郭勒盟地區(qū)傳統(tǒng)發(fā)酵酸馬奶中的一株益生菌，經(jīng)研究表明，該菌株具有良好的耐酸性，人工胃腸液耐受性及膽鹽耐受性，對免疫系統(tǒng)具有顯著調(diào)節(jié)作用。lb .casei zhang的全基因組序列測定和圖譜繪制于2008年5月18日全部完成，安全性獨立評估表明，該菌株無毒副作用。芽孢桿菌由于其具有物理性質(zhì)穩(wěn)定、作用方式獨特、應(yīng)用效果顯著、無污染、無殘留等優(yōu)良特性，作為飼料添加劑主要是通過調(diào)節(jié)動物自身微生物平衡而發(fā)揮其生理作用。芽孢桿菌為需氧

13、菌，在生長過程中需要大量的氧氣，進入動物腸道內(nèi)，消耗大量的游離氧，降低了腸道內(nèi)氧氣濃度和氧化還原電勢，改善了乳酸桿菌、雙歧桿菌等厭氧菌的生長環(huán)境，保持腸道微生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)衡，同時使腸道中原本存在在的需氧腸桿菌等生長因為缺氧而受到抑制，從而提高動物機體抗病能力，減少胃腸道疾病發(fā)生率；酵母菌屬于真菌類，圓形、卵圓形或圓柱形，細胞大小約為15m530m，最長可達100m。酵母菌不是人和動物的腸道的固有菌，但可以在消化道內(nèi)代謝，經(jīng)證明酵母能在消化道后段存活并可促進植酸酶的產(chǎn)生；作為益生素使用的酵母菌則是以活細胞的形式存在。曾正清等(2001)研究了不同添加水平的酵母飼料對肉仔雞腸道主要微生物及免疫機能的影響，發(fā)現(xiàn)在日糧中添加2的酵母飼料能提高肉仔雞的體增重，增加胸腺小葉數(shù)增強肉仔雞免疫功能。添加1、2的酵母飼料能夠降低糞便中、盲腸食糜中大腸桿