血腦屏障的研究方法在中醫(yī)藥中的應(yīng)用及思考

1、血腦屏障的研究方法在中醫(yī)藥中的應(yīng)用及思考第26卷第6期2008年6月中華chinesearchives中醫(yī)藥oftraditional學(xué)刊chinesemedicinevo1.26no.6jun.2008血腦屏障的研究方法在中醫(yī)藥中的應(yīng)用及思考徐瓏瓏,鄭國慶(溫州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院神經(jīng)科,浙江溫州325027)摘要:血腦屏障(bbb)是維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)bbb主要的研究方法有:bbb超微結(jié)構(gòu)的觀察,色素伊文思藍(lán),金屬鑭或者放射性核素等示蹤劑,ct,mri等影像學(xué)觀察,體外模型,特定指標(biāo)等.簡介現(xiàn)代醫(yī)學(xué)bbb主要的研究方法在中醫(yī)藥學(xué)中的應(yīng)用,并作述評(píng).借鑒現(xiàn)代醫(yī)學(xué)血

2、腦屏障的研究手段,為從多方面研究中醫(yī)藥對(duì)血腦屏障的影響提供方法學(xué),有助于中醫(yī)理論研究,中藥歸經(jīng)研究,闡明中醫(yī)藥及針灸的作用機(jī)制等.關(guān)鍵詞:血腦屏障;中醫(yī)藥;研究方法中圖分類號(hào):r203文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:a文章編號(hào):16737717(2008)061289一o4applicationandthingkingofresearchmethodsofbloodbrainbarrierintraditionalchinesemedicinexulonglong,zhengguoqing(neurologycenter,thesecondaffiliatedhospitalofwenzhoumedicalcol

3、lege,wenzhou325027,china)abstract:thebloodbrainbarrier(bbb)isthespecializedsystem,whichensuresproperfunctionofthecentralnervoussystem.manymethods,suchasmicroscopyandtracer(evansblue,lanthanum,radionuclide,eta1),imageology(ct,mri),invitromodel,severalbiochemicalindicatrixareappliedtoinvestigatethemor

4、phousandfunctionofbloodbrainbarrierinwesternmedicine.tointroducethemainmethodsthatareusedtomeasuretheroleofthetraditionalchinesemedicine(tcm)inbbb.therdeoftcminbbbwouldbebetterdiscovereddependingonthedevelopmentofnewmethodologiesofbbb,whichwillbehelpfultoilluminatescientificallythetheoryoftcmandmech

5、anismsoftcmandacupuncture.keywords:bloodbrainbarrier:traditionalchinesemedicine;researchmethods血腦屏障(bloodbrainbarrier,bbb)是維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),其結(jié)構(gòu)和功能的完整對(duì)維持神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能至關(guān)重要.一般認(rèn)為,血腦屏障基本結(jié)構(gòu)包括:腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其問的緊密連接,毛細(xì)血管基底膜及嵌入其中的周細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞終足形成的膠質(zhì)膜.緊密連接是構(gòu)成血腦屏障的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),它是由3種膜內(nèi)在蛋白,即閉合蛋白,咬合蛋白和連接黏附分子(jam),以及包括閉鎖小帶蛋白(zo)一

6、l,zo一2,zo一3,扣帶蛋白和其他蛋白在內(nèi)的多種胞質(zhì)輔助蛋白組成.相鄰細(xì)胞問,細(xì)胞內(nèi)的這些分子互相連接和/或互相作用,誘導(dǎo),維持和調(diào)節(jié)血腦屏障的通透特性.bbb的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)使得血循環(huán)中的有害物質(zhì),如毒素等難以進(jìn)入腦內(nèi),也能將腦內(nèi)有害或過剩物質(zhì)排出腦外,從而維持腦的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定_l.中醫(yī)藥在臨床治療腦部疾病取得了較好的療效,而且實(shí)驗(yàn)收稿日期:2008一o111作者簡介:徐瓏瓏(1977一),女,浙江永嘉人,主治醫(yī)師,碩士,主要從事神經(jīng)病學(xué)的臨床和基礎(chǔ)研究.通訊作者:鄭國慶(1975一),男,浙江溫嶺人,副教授,博士,主要從事中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)病學(xué)的臨床和基礎(chǔ)研究.支持也一定程度上證實(shí)了中醫(yī)方藥對(duì)血腦

7、屏障的影響.近年來,隨著分子生物學(xué),生物化學(xué)等技術(shù)的進(jìn)步,醫(yī)學(xué)研究者對(duì)bbb的結(jié)構(gòu),功能,藥物對(duì)bbb的影響和通過血腦屏障作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)等多個(gè)方面的研究取得了較大的進(jìn)展.傳統(tǒng)的中醫(yī)藥借助現(xiàn)代技術(shù)在中醫(yī)藥對(duì)血腦屏障的作用機(jī)制方面也取得了一定的成果.現(xiàn)就bbb較常用的研究方法以及在中醫(yī)藥中的應(yīng)用,試作闡述.1bbb超微結(jié)構(gòu)的觀察將標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)石蠟切片或染色后用電鏡,光鏡等直接觀察bbb的超微結(jié)構(gòu).特別是電鏡技術(shù)能夠直接觀察緊密連接的結(jié)構(gòu)及蛋白組成,所以結(jié)論比較客觀.但是形態(tài)學(xué)上的完整或相似不能等同于具有完整的屏障功能,所以通常情況下需與其他方法結(jié)合來綜合評(píng)價(jià)bbb.血腦屏障破壞后通透性增加,在

8、光鏡及電鏡下主要表現(xiàn)為毛細(xì)血管,神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞周圍間隙的增寬,神經(jīng)元及少突膠質(zhì)細(xì)胞腫脹,部分血管緊密連接增寬,模糊.如王新高等用電鏡觀察大鼠腦缺血再灌注損傷后大腦皮層發(fā)現(xiàn)血腦屏障破壞嚴(yán)重,毛細(xì)血管周圍大片水腫,而補(bǔ)陽還五湯處理過的大鼠bbb破壞減輕,毛細(xì)血管周圍水腫減輕,連同其它指標(biāo)認(rèn)為補(bǔ)陽還五湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后的學(xué)刊中華中醫(yī)藥第26卷第6期2008年6月中華chlnesearchlves中醫(yī)藥oftradltlonal學(xué)-t:a3c:hinesemedlc:inevoi_26no.6jun.2008血腦屏障具有保護(hù)作用.唐宇平等在大鼠腦出血模型中用電鏡觀察大黃對(duì)bbb以及腦水腫的保

9、護(hù)作用,發(fā)現(xiàn)大黃可明顯減輕星形膠質(zhì)細(xì)胞足突水腫,同時(shí)抑制了bbb開放,減少了血腦屏障損傷.吳緒平等用電針刺激督脈經(jīng)穴”百會(huì)”,”水溝”穴,觀察對(duì)急性腦梗死家兔血腦屏障的變化,發(fā)現(xiàn)電針組大鼠血腦屏障在電鏡下表現(xiàn)為毛細(xì)血管周圍水腫明顯減少,基膜連續(xù)性增加,內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)吞飲細(xì)胞減少,提示電針刺激對(duì)bbb有保護(hù)作用.2示蹤劑色素伊文思藍(lán),金屬鑭或者i,h,14c,13n等放射性核素可與蛋白,脂肪,葡萄糖結(jié)合作為示蹤劑來檢測bbb通透性.通過檢測示蹤劑在腦內(nèi)的位置,數(shù)量和變化,可了解bbb開放的部位以及程度.2.1伊文思藍(lán)目前,伊文思藍(lán)是應(yīng)用最多的一種示蹤劑.伊文思藍(lán)是一種偶氮基熒光染料,分子量961,它

10、可與血清白蛋白結(jié)合.正常情況下,血清白蛋白不能通過血腦屏障.當(dāng)各種因素造成bbb通透性增高或破壞時(shí),伊文思藍(lán)結(jié)合的白蛋白則通過bbb進(jìn)入腦組織.腦組織藍(lán)染面積或體積的大小可定性判斷血腦屏障通透性.伊文思藍(lán)發(fā)射的熒光在熒光顯微鏡下顯紅色,可更好的觀察bbb開放的區(qū)域.如劉傳玉等在大鼠局灶腦缺血再灌注模型中以伊文思藍(lán)滲漏出血管壁而染色的腦組織體積表示血腦屏障破壞程度,他采用mpiass00多媒體彩色病理圖像分析系統(tǒng)按公式計(jì)算腦組織染色體積,(sd/t,s為一片的染色面積,d為厚度,t為線性放大倍數(shù)),即可達(dá)到半定量的目的.此外還可以通過測定伊文思藍(lán)含量來定量反映血腦屏障的通透性.其在組織中的含量,

11、常使用比色法,熒光法進(jìn)行檢測,熒光法較比色法過程較簡便,而且靈敏度高而被更多的使用.盧曉梅等通過檢測腦缺血再灌注小鼠腦組織中伊文思藍(lán)的含量,發(fā)現(xiàn)腦缺血再灌注后4h起腦組織伊文思藍(lán)滲出逐漸增多,48h達(dá)高峰,以后有下降趨勢,燈盞花素組于術(shù)后伊文思藍(lán)滲出明顯低于相應(yīng)時(shí)問的腦缺血再灌注組,認(rèn)為燈盞花素具有降低血腦屏障通透性的作用.陳軍梅等用伊文思藍(lán)滲出法檢測血腦屏障通透性,透射電鏡觀察血腦屏障超微結(jié)構(gòu)變化,發(fā)現(xiàn)a型肝性腦病時(shí),血腦屏障受損,通透性增加,大黃乳酸菌素泡騰片可改善血腦屏障受損情況,并認(rèn)為這可能是該藥治療肝性腦病的作用機(jī)制之一.2.2鑭鑭是一種電子密度高的重金屬,硝酸鑭分子量433,其顆粒

12、大小約40a.正常情況下,它不能穿過bbb.當(dāng)bbb損傷通透性增加時(shí),鑭透過緊密連接滲透到血管外腦組織內(nèi).王強(qiáng)等”透射電鏡下觀察正常大鼠腦組織毛昱細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)合得十分嚴(yán)密,可看到鑭鹽顆粒只位審于血管腔內(nèi),并沿著內(nèi)皮細(xì)胞膜密集,整齊地排列,未見有鑭鹽顆粒滲出到基膜.在染鉛組大鼠毛細(xì)血管腔中可見有二二一瀾鹽顆粒穿過相鄰內(nèi)皮細(xì)胞間的縫隙,滲出到基膜外,進(jìn)入z-do到腦組織有髓神經(jīng)纖維間隙中.學(xué)2.3其它如i,h等.胡俊等3采用i標(biāo)記的牛血清白蛋白作為示蹤劑,探討兔嚴(yán)重燙傷早期血腦屏障改變,發(fā)現(xiàn)兔50%ii度燙傷后2h,雙側(cè)前葉和小腦處血腦屏障出現(xiàn)開放;燙傷后34h,腦組織出現(xiàn)彌漫性血腦屏障開放

13、,認(rèn)為i標(biāo)記的牛血清白蛋白測定微血管通透性靈敏度高,可精確地定量分析,全面,確切地反映早期血腦屏障的病理變化.祝世功等_1采用i標(biāo)記大豆皂苷,觀察了腹腔注射放射性示蹤大豆皂苷在大鼠體內(nèi)和腦內(nèi)的分布,證明了外周給予大豆皂苷可以通過血腦屏障進(jìn)入腦組織,并支持大豆皂甙作用于下丘腦,參與中樞心血管調(diào)節(jié)的觀點(diǎn).郭順根等在實(shí)驗(yàn)中觀察到,h一川芎嗪可較多透過bbb,并在大腦內(nèi)達(dá)到其高峰值得注意的是示蹤劑可較持久而穩(wěn)定地存留于大腦內(nèi),與血液中相應(yīng)時(shí)相的示蹤劑含量比值為1.99,這表明大腦是h一川芎嗪重要的靶器官之一(同肝經(jīng)與督脈會(huì)于巔相符).游金輝等通過靜脈給藥探測h一天麻苷元和h一天麻素在小鼠體內(nèi)的分布結(jié)果

14、顯示天麻素可以透過血腦屏障進(jìn)入腦內(nèi),并在腦,血及肝中迅速分解為天麻苷元,然后以天麻苷元的形式存留在腦組織內(nèi),發(fā)揮中樞鎮(zhèn)靜作用.3影像學(xué)觀察ct,mri可以在不損傷模型的前提下對(duì)模型進(jìn)行連續(xù)的觀察,從而更好的了解bbb在外界干擾下的動(dòng)態(tài)變化,但也只能間接反應(yīng)bbb的結(jié)構(gòu)及功能變化.血腦屏障的開放,血管中液體成份漏出,同時(shí)大分子物質(zhì)如白蛋白等進(jìn)入周圍腦組織,主要引起血管源性水腫.ct檢查能發(fā)現(xiàn)血管源性水腫形成的局部腦組織密度減低改變以及病變體積增大造成的占位效應(yīng),但這些征象出現(xiàn)較晚,敏感度也不是太好.螺旋ct增強(qiáng)掃描對(duì)bbb開放的觀察比普通ct要敏感的多,注入增強(qiáng)劑后,增強(qiáng)劑分子可通過開放的血腦屏

15、障,漏出血管并在細(xì)胞外液中潴留,外漏造影劑數(shù)量與血腦屏障損害程度及開放范圍成正比,表現(xiàn)為血腦屏障開放處信號(hào)強(qiáng)化.如王寧生等通過實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)冰片具有增加生理狀態(tài)下bbb通透性的作用,其以ct動(dòng)態(tài)掃描為檢測手段,比較兔灌服冰片后對(duì)血腦屏障的影響,其結(jié)果顯示,兔灌服冰片后增強(qiáng)掃描時(shí)腦組織的ct值和密度與對(duì)照兔(未灌服冰片)比較有明顯提高,說明冰片能促進(jìn)水溶性造影劑泛影葡胺進(jìn)入大腦實(shí)質(zhì),而正常生理狀態(tài)下泛影葡胺只能停留在血管內(nèi)不能透過血腦屏障,其實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明冰片增強(qiáng)了血腦屏障的通透性.與ct相比,mr對(duì)水含量的變化更為敏感.t2wi的高信號(hào)主要反映血管源性水腫,因此可較好的反映bbb的開放程度.twi

16、增強(qiáng)掃描中,bbb開放,增強(qiáng)劑可以進(jìn)入細(xì)胞外間隙,從而出現(xiàn)腦實(shí)質(zhì)的異常強(qiáng)化,所以急性期腦實(shí)質(zhì)的強(qiáng)化可作為bbb破壞或開放的標(biāo)志l1.鄧軍等利用大鼠腦缺血再灌注模型,應(yīng)用wi和增強(qiáng)t.w1分別對(duì)血管源性水腫和bbb開放進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)腦缺血再灌注后1ht2wi上患側(cè)即出現(xiàn)高信號(hào),而t,wi上3h時(shí)才開始有強(qiáng)化,隨后異常信號(hào)范圍逐漸增大,其中心區(qū)的信號(hào)強(qiáng)度也隨之升高.從病灶中心到周圍正常組織之間信號(hào)強(qiáng)度逐漸減低.t2姐上高信號(hào)區(qū)與twi上的強(qiáng)化區(qū)在分布位置上一致,且t2wi上高信號(hào)區(qū)范圍總比同一時(shí)間點(diǎn)t1wi上的強(qiáng)化范圍大,因此認(rèn)為利用增強(qiáng)mri評(píng)價(jià)早期bbb輕度開放的敏感性有限,綜合運(yùn)用t2w

17、i和增強(qiáng)t1wi檢測腦缺血再灌注損傷能夠獲得更豐富的信息.4體外模型體外培養(yǎng)腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障研究的重要工第26卷第6期2008年6月中華中醫(yī)藥學(xué)刊chinesearchivesoftraditionalchinesemedicinevo1.26no.6jun.2008具.建立一種相對(duì)簡單可靠,接近在體狀態(tài)的體外bbb細(xì)胞模型能更深入了解bbb結(jié)構(gòu),功能,各種病理狀態(tài)如缺血,炎癥,中毒等對(duì)bbb的影響以及藥物對(duì)bbb的作用.體外bbb模型有使用單層腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞和通過腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)等兩種方式.單層原代培養(yǎng)腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞建立的bbb模型會(huì)很快失去腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

18、和bbb特征,如喪失谷胺酰胺轉(zhuǎn)肽酶表達(dá),跨內(nèi)皮細(xì)胞問電阻很低.目前,建立bbb體外模型最理想的方式是通過腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的方式實(shí)現(xiàn)的,它能更好地維持bbb特征-23.bbb各組分如緊密連接,星形膠質(zhì)細(xì)胞等的作用以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路都是通過體外模型明確的.如trannd等通過星形膠質(zhì)細(xì)胞一內(nèi)皮細(xì)胞共同培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證實(shí),星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的轉(zhuǎn)化生長因子b可下調(diào)腦內(nèi)皮細(xì)胞組織纖溶酶原激活物和抗凝血物質(zhì)血栓調(diào)節(jié)素的表達(dá).如陳艷明等通過血腦屏障體外模型發(fā)現(xiàn)冰片能明顯使血腦屏障細(xì)胞問緊密連接松散,使物質(zhì)經(jīng)細(xì)胞間通道轉(zhuǎn)運(yùn)加速;冰片能明顯使血腦屏障細(xì)胞吞飲小泡數(shù)量增多,體積增大,從而使經(jīng)細(xì)胞吞飲的物

19、質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)加速.5生化指標(biāo)由于bbb的存在,血和腦脊液中許多物質(zhì)的含量有極大的區(qū)別,bbb受到破壞時(shí),腦脊液或血液中物質(zhì)含量發(fā)生變化,其程度與bbb破壞的程度相關(guān).所以可通過測定相應(yīng)物質(zhì)含量可評(píng)價(jià)bbb的功能和通透性,但此類結(jié)論較為間接,而且此類指標(biāo)的靈敏度各不相同.覺常見的方法有,(1)bbb指數(shù):按王擁軍等介紹bbb指數(shù)計(jì)算公式,即bbb指數(shù)=腦脊液白蛋白/血清白蛋白.正常情況下,腦脊液中白蛋白含量較低.bbb破壞后,其含量增加,因此可以通過測定上述比值為作為bbb完整程度的指標(biāo).(2)髓鞘堿性蛋白:髓鞘堿性蛋白是組成中樞神經(jīng)髓鞘的主要蛋白.當(dāng)血腦屏障受損或通透性改變時(shí),游離在腦脊中的髓鞘堿性

20、蛋白進(jìn)入血液,導(dǎo)致血液中含量增加.可通過測定血中的髓鞘堿性蛋白來了解bbb破壞程度.(3)zoi蛋白zoi蛋白是構(gòu)成血腦屏障緊密連接的主要蛋白成分之一,石向群等發(fā)現(xiàn)zo一1水平在缺血再灌注損傷后6h即發(fā)生明顯的降低,隨后急速降低,表明毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接完整性在再灌注損傷早期即受到破壞,由此提示zoi蛋白水平的變化可作為血腦屏障破壞的標(biāo)志.但目前中醫(yī)藥在血腦屏障生化指標(biāo)方面的研究相當(dāng)薄弱,報(bào)道并不見,值得以后加強(qiáng).6思考與瞻望各種bbb研究方法有不同的側(cè)重點(diǎn),研究者可根據(jù)不同的研究內(nèi)容來選用合適的研究方法.用電鏡,光鏡等直接觀察bbb的超微結(jié)構(gòu),形態(tài)學(xué)上結(jié)論比較客觀,通常情況下與其他方法結(jié)

21、合來綜合評(píng)價(jià)bbb;利用示蹤劑在腦內(nèi)的位置,數(shù)量和變化,可較好的提示bbb開放的部位以及程度.但上述方法只能在實(shí)驗(yàn)?zāi)┢谔幩绖?dòng)物,取得腦標(biāo)本做病理學(xué)檢查,不能用于活體研究和動(dòng)態(tài)觀察.ct,mri等影像學(xué)手段可以在不損傷模型的前提下對(duì)模型進(jìn)行連續(xù)的觀察,從而更好的了解bbb在外界干擾下的動(dòng)態(tài)變化.體外培養(yǎng)腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞能更深入了解bbb結(jié)構(gòu),功能以及外界對(duì)bbb的影響,可用于藥物篩查;各類特定指標(biāo)能在一定范圍內(nèi)提示bbb的功能和通透性.借鑒現(xiàn)代醫(yī)學(xué)血腦屏障的研究手段,可為從多方面研究中醫(yī)藥對(duì)血腦屏障的影響提供方法學(xué),(1)有助于中醫(yī)理論研究:由于時(shí)代和條件的限制,中醫(yī)學(xué)對(duì)血腦屏障的論述并不多見,

22、事實(shí)上中醫(yī)學(xué)對(duì)腦的記載亦不豐富,但中醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)到腦是生命活動(dòng)的中樞和關(guān)鍵,腦屬奇恒之府,頭為諸陽之會(huì),靈樞?邪氣臟腑病形日:”十二經(jīng)脈,三百六十五絡(luò),其血?dú)饨陨献⒂诿娑呖崭[.”.筆者研究認(rèn)為,玄府與血腦屏障有著內(nèi)在的共性內(nèi)涵和相似之處,而通腑攻下具有開通玄府之功,因此,玄府與血腦屏障的相關(guān)性研究可能是今后的主要切人口之一.(2)有助于中藥歸經(jīng)研究:中藥對(duì)bbb的生理性開放一方面可以探討治療腦病中如何選取直達(dá)腦髓,歸經(jīng)人腦的中藥;另一方面可以為治療腦病的藥物提供佐使引藥,成為其他藥物的載體,提高治療藥物的有效治療濃度.如對(duì)h一川i芎嗪的研究可川i芎能秉上行之性,上行頭目,循經(jīng)人腦提供理論依據(jù);而

23、ct動(dòng)態(tài)掃描對(duì)冰片的研究為冰片”獨(dú)行則勢弱,佐使則有功”及“芳香走竄,引藥上行”提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù).(3)有助于闡明中醫(yī)藥的作用機(jī)制:中醫(yī)藥治療腦源性疾病具有較好的療效,但很多藥物作用機(jī)制不明,其效果的取得與中藥有效成分透過血腦屏障或中醫(yī)藥改善血腦屏障的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能有關(guān).如中醫(yī)方藥對(duì)bbb的保護(hù)作用為中醫(yī)藥治療腦病提供了微觀佐證,同時(shí)為進(jìn)一步研究腦病的中醫(yī)治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).(4)有助于闡明針灸的作用機(jī)制:針灸治療腦病的機(jī)制尚未闡明,目前針灸對(duì)血腦屏障的影響,針刺在病理情況下保護(hù)血腦屏障的機(jī)制研究已顯示了可喜的苗頭.如劉曉霓等建立家兔實(shí)驗(yàn)性腦缺血模型,采用”醒腦開竅”針法進(jìn)行治療,通過形態(tài)學(xué)的方法

24、,定性觀測了兔大腦皮質(zhì)血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的改變,定量觀測了毛細(xì)血管的基膜厚度,結(jié)果顯示針刺能明顯改善腦缺血家兔bbb的破壞程度;膠質(zhì)細(xì)胞腫脹減輕,毛細(xì)血管基膜連續(xù),內(nèi)皮細(xì)胞吞飲小泡減少;定量分析顯示針刺組毛細(xì)血管基膜厚度比模型組有所增加(p0.05),說明針刺在一定程度上能減輕腦缺血所致的血腦屏障的損害.總之,目前中醫(yī)藥的研究使用較多的是利用顯微鏡技術(shù)觀察形態(tài)學(xué)的改變,示蹤劑伊文思藍(lán)以及體外模型觀察bbb通透性,但其它許多較可靠的研究方法如影像學(xué)觀察,一些生化指標(biāo)較少應(yīng)用到中醫(yī)藥的研究中.此外有關(guān)中醫(yī)藥對(duì)bbb超微結(jié)構(gòu)和功能影響的報(bào)道如緊密連接,星形膠質(zhì)細(xì)胞的變化以及各組分之間信號(hào)的調(diào)控等更是少

25、見.因此,中醫(yī)藥在防治腦病方面有突出效果,其對(duì)bbb的影響以及如何通過bbb作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)尚需更深層次的研究.參考文獻(xiàn)中1ballabhp,brauna,nede瑪aardm.thebloodbrainbarrier:artoverview:structure,regulation,andclinicalimplicationsj.底neurobioldis,2004,16(1):113.藥2persidskyy,ramirezs?h,haomhj,etal?bloodbrainbarrier:1291structuralcomponentsandfunctionunderphysiolo

26、gicandpath.logicconditionsj.2oo6,1(3).223236,3王順蓉,張英,李著華.血腦屏障的結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展j.p-hji生理科學(xué)雜志,2005,27(2):8889.4胡俊,黎海濤,丁仕義,等.兔嚴(yán)重燙傷早期腦螺旋c1與mr1第26卷第6期2008年6月中華chinesearchives中醫(yī)藥oftraditional學(xué)刊chinesemedicinev0.26no.6jun.2008動(dòng)態(tài)觀察j.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,26(21):19201923.5王新高,童萼塘.補(bǔ)陽還五湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后血腦屏障的影響j.中國動(dòng)脈硬化雜志,2005,13(

27、5):579582.6唐宇平,蔡定芳,劉軍,等.大黃改善急性腦出血大鼠血腦屏障損傷的水通道蛋白一4機(jī)理研究j.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2006,26(2):152156.7吳緒平,周華,王述菊,等電針對(duì)急性腦梗死家兔血腦屏障的保護(hù)作用及其機(jī)制j.中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志.2004,26(5):422424.8劉傳玉,周素榮,李承晏,等.亞低溫聯(lián)合升壓對(duì)大鼠局灶腦缺血再灌注后血腦屏障,腦組織水含量的影響j.山東醫(yī)藥,2oo5,45(11):2122.9李玲,范滌.慢性低灌注性腦缺血大鼠正常灌注壓恢復(fù)過程中血腦屏障通透性的變化規(guī)律j.中國臨床康復(fù),2005,9(25):9495.1o盧曉梅,趙紅,張海鵬

28、.燈盞花索對(duì)腦缺血再灌注小鼠明膠酶及血腦屏障通透性的影響j.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,35(5):481483.1o陳軍梅,魏瑋,張赤志.大黃乳酸菌素泡騰片對(duì)a型肝性腦病大鼠血腦屏障的影響j.中華實(shí)用中西醫(yī)雜志,2005,18(3):313314.i2吳秀香,盧曉梅,杜莉莉,等.原花青素對(duì)腦缺血再灌注小鼠腦組織細(xì)胞因子,一氧化氮合酶和血腦屏障的影響j.中國動(dòng)脈硬化雜志,2006,14(8):665668.13龍子江,王桐生,王祥國,等.腦創(chuàng)寧對(duì)腦組織含水量和血腦屏障通透性影響j.安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2001,20(2):4143.14王強(qiáng),陳景元,張進(jìn),等.補(bǔ)鐵對(duì)生長發(fā)育期鉛接觸大鼠血腦屏障通

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31、iologyandmethodologyj.neurorx,2005,2(1):6372.23胡利民,范祥,張艷軍,等.大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)血腦屏障體外模型的建立j.天津中醫(yī)藥,2005,22(2):149151.24trannd,corre01ej,schreiberss,eta1.transformingg,rov,a:h25262728293ofactor.betamediatesastrocyte.specificregulationofbrainell.dotheli01anticoagulantfactorsj.stroke,1999,30(8):16711678.陳艷明,王寧生.冰片對(duì)血腦屏障體外模型細(xì)胞