免疫球蛋白與抗體

1、 第一節(jié)第一節(jié) 免疫球蛋白與抗體的概念免疫球蛋白與抗體的概念( (重點重點) ) 第二節(jié)第二節(jié) 免疫球蛋白的分子結構免疫球蛋白的分子結構( (重點重點) ) 第三節(jié)第三節(jié) 免疫球蛋白的種類與抗原決定簇免疫球蛋白的種類與抗原決定簇( (重點重點) ) 第四節(jié)第四節(jié) 免疫球蛋白的生物學功能免疫球蛋白的生物學功能( (重點重點) ) 第五節(jié)第五節(jié) 各類免疫球蛋白的主要特性與功能各類免疫球蛋白的主要特性與功能 第六節(jié)第六節(jié) 抗體的人工制備抗體的人工制備 一、抗體的發(fā)現(xiàn)和研究歷史：一、抗體的發(fā)現(xiàn)和研究歷史： 18891889年：年： 感染 感染 動物血清動物血清 凝集反應凝集反應 （凝集素）（凝集素）

2、18901890年年(Behring):(Behring): 白喉類毒素白喉類毒素 免疫 免疫 動物血清動物血清 中和毒素中和毒素 ( (抗毒素抗毒素) ) 并發(fā)現(xiàn)在血清蛋白中主要是并發(fā)現(xiàn)在血清蛋白中主要是 -球蛋白（丙種球蛋白）球蛋白（丙種球蛋白） 具有抗體活性。具有抗體活性。 (antibody(antibody，Ab)Ab) 凝集素凝集素 抗毒素抗毒素 溶菌素溶菌素 沉淀素沉淀素 19301930年發(fā)現(xiàn)：年發(fā)現(xiàn)： 白蛋白白蛋白球蛋白球蛋白 ab g g ab g g ab g g 未免疫動物血清未免疫動物血清 免疫動物血清免疫動物血清 免疫動物血清免疫動物血清 + +抗原處理吸收抗原處理

3、吸收后后 二、抗體的概念二、抗體的概念( (重點重點) ) 抗體（抗體（antibody,Ab)antibody,Ab)：動物機體受到抗原物質：動物機體受到抗原物質 刺激后，由刺激后，由B B淋巴細胞轉化為漿細胞而產生的，能與淋巴細胞轉化為漿細胞而產生的，能與 相應抗原發(fā)生特異性反應的免疫球蛋白。相應抗原發(fā)生特異性反應的免疫球蛋白。 將抗體介導的免疫稱為將抗體介導的免疫稱為體液免疫體液免疫, ,將含有抗體的將含有抗體的 血清稱為血清稱為抗血清抗血清或或免疫血清免疫血清。 三、免疫球蛋白的概念三、免疫球蛋白的概念(重點重點) 19641964年世界衛(wèi)生組織召開會議，將年世界衛(wèi)生組織召開會議，將具

4、有抗體具有抗體 活性或化學結構與抗體相似的球蛋白活性或化學結構與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱為統(tǒng)稱為免疫免疫 球蛋白球蛋白（immunoglobulinimmunoglobulin，簡稱簡稱IgIg ）。）。 免疫球蛋白除分布于體液中之外，還可存在免疫球蛋白除分布于體液中之外，還可存在 于于B B細胞膜上。細胞膜上。 免疫球蛋白可分為免疫球蛋白可分為兩種兩種類型：類型： 分泌性分泌性IgIg ：存在于血清、體液以及分泌液中，具有：存在于血清、體液以及分泌液中，具有 抗體的各種功能?？贵w的各種功能。 膜型膜型IgIg ：位于：位于B B淋巴細胞的表面，即膜表面免疫球淋巴細胞的表面，即膜表面免疫球 蛋白（

5、蛋白（mIgmIg），是），是B B淋巴細胞的抗原識別受體（淋巴細胞的抗原識別受體（BCRBCR）。）。 抗體的化學本質是抗體的化學本質是免疫球蛋白免疫球蛋白，但并非所有免疫，但并非所有免疫 球蛋白都具有球蛋白都具有抗體的活性抗體的活性。 Ig Ab Ab=Ig Ig Ab IgIg與與AbAb的關系的關系 抗體抗體= 生物學功能上的概念生物學功能上的概念 IgIg = 化學結構上的概念化學結構上的概念 四、抗體的分類四、抗體的分類 （一）根據所對應的抗原分：（一）根據所對應的抗原分： （二）根據（二）根據有無抗原刺激分有無抗原刺激分： （三）根據與抗原反應的性質分：（三）根據與抗原反應的性質

6、分： （四）根據根據抗原性分：（四）根據根據抗原性分： 主要根據重鏈的不同主要根據重鏈的不同 一、免疫球蛋白的單體分子結構一、免疫球蛋白的單體分子結構 由由兩條相同兩條相同的較大的的較大的重鏈重鏈和和兩條相同兩條相同的較的較 小的小的輕鏈輕鏈4 4條肽鏈通過輕鏈與重鏈之間的條肽鏈通過輕鏈與重鏈之間的二硫鍵二硫鍵 連接起來構成的連接起來構成的“Y Y”字形的分子結構。字形的分子結構。 （一）重鏈和輕鏈（一）重鏈和輕鏈 1 1重鏈（重鏈（heavy chainheavy chain，H H鏈）鏈） 由由450-550450-550個氨基酸殘基組成，分子量個氨基酸殘基組成，分子量55-75KD55-

7、75KD， 有有4-54-5個鏈內二硫鍵組成的環(huán)肽，兩重鏈之間由一個鏈內二硫鍵組成的環(huán)肽，兩重鏈之間由一 對或兩對以上的二硫鍵互相連接。對或兩對以上的二硫鍵互相連接。 根據根據IgIg重鏈抗原性的差異，重鏈抗原性的差異，IgIg可分為可分為5 5類：類： IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE和和IgDIgD，相應相應H H鏈為鏈為、 、鏈，鏈，不同免疫球蛋白的差別就由重鏈所決定。不同免疫球蛋白的差別就由重鏈所決定。 2 2輕鏈（輕鏈（light chainlight chain，L L鏈）鏈） 由由214214個氨基酸殘基組成，分子量為個氨基酸殘基組成，分子量為24KD24K

8、D，有，有 兩個由鏈內二硫鍵組成的環(huán)肽，在羧基端靠二硫兩個由鏈內二硫鍵組成的環(huán)肽，在羧基端靠二硫 鍵分別與兩條重鏈連接。鍵分別與兩條重鏈連接。 各類免疫球蛋白的輕鏈都相同，均可分為：各類免疫球蛋白的輕鏈都相同，均可分為： KappaKappa（）與）與lambdalambda（）2 2個型。個型。 （二）可變區(qū)和恒定區(qū)（二）可變區(qū)和恒定區(qū) 1 1、H H鏈：鏈：N N端開始的最初端開始的最初110110個氨基酸為個氨基酸為可變區(qū)可變區(qū) （VHVH），之后一直到），之后一直到C C端的氨基酸稱為端的氨基酸稱為恒定區(qū)恒定區(qū) （CHCH）。在）。在VHVH中有中有3 3個區(qū)域的氨基酸變異最大，稱個區(qū)

9、域的氨基酸變異最大，稱 為為高（超）變區(qū)高（超）變區(qū)（HVRHVR），其余的氨基酸變化較小，），其余的氨基酸變化較小， 稱為稱為骨架區(qū)骨架區(qū)。 2 2、L L鏈：鏈：N N端開始的端開始的109109個氨基酸為個氨基酸為可變區(qū)可變區(qū)(VL(VL），）， 其余的為其余的為恒定區(qū)（恒定區(qū)（CLCL）， 在在VLVL中也有中也有3 3個高變區(qū)個高變區(qū)。 （三）功能區(qū)（三）功能區(qū) 1 1、基本含義、基本含義 免疫球蛋白的多肽鏈分子可折疊形成免疫球蛋白的多肽鏈分子可折疊形成 幾個由鏈內二硫鍵連接成的環(huán)狀球形結構，此即其幾個由鏈內二硫鍵連接成的環(huán)狀球形結構，此即其 IgIg的的功能區(qū)（或結構域功能區(qū)（或結

10、構域），每一功能區(qū)約有），每一功能區(qū)約有110110個個 氨基酸組成，其順序具有高度的同源性。氨基酸組成，其順序具有高度的同源性。 2 2、L L鏈功能區(qū)鏈功能區(qū) 有兩個，即有兩個，即VLVL和和CLCL，分別位于可變，分別位于可變 區(qū)和恒定區(qū)。區(qū)和恒定區(qū)。 3 3、H H鏈功能區(qū)鏈功能區(qū) IgGIgG、IgAIgA、IgDIgD有有4 4個個（V V區(qū)區(qū)1 1個，個，VHVH， C C區(qū)區(qū)3 3個，個，CH1CH1、CH2CH2和和CH3CH3）；）；IgMIgM、IgEIgE有有5 5個個（增加（增加 一個一個CH4CH4）。）。 4 4、功能區(qū)作用、功能區(qū)作用 （1 1）VHVH和和VL

11、:VL:特異性識別特異性識別 和結合抗原，和結合抗原，由由VHVH和和VLVL內的內的 高變區(qū)構成抗體分子的抗原高變區(qū)構成抗體分子的抗原 結合點。結合點。 （2 2）CH1CH1和和CL :CL :同種異型同種異型 的遺傳標記的遺傳標記。 （3 3）IgGIgG的的CH2CH2和和IgMIgM的的CH3 CH3 是抗體分子的補體結合點，是抗體分子的補體結合點， 與補體的活化有關。與補體的活化有關。 （4 4）CH3/ CH4:CH3/ CH4:細胞結合細胞結合 位點，位點，是同免疫活性細胞是同免疫活性細胞 （如巨噬細細胞、（如巨噬細細胞、B B細胞、細胞、NKNK 細胞）的細胞）的FCFC受體

12、的結合部位。受體的結合部位。 二、免疫球蛋白的特殊分子結構二、免疫球蛋白的特殊分子結構 （一）絞鏈區(qū)（一）絞鏈區(qū) 1 1、含義、含義 在兩條重鏈之間二硫鍵連接處附近的重鏈恒在兩條重鏈之間二硫鍵連接處附近的重鏈恒 定區(qū)，即定區(qū)，即CH1CH1尾部和尾部和CH2CH2頭部的小段肽鏈；與抗體分子頭部的小段肽鏈；與抗體分子 的構型變化有關的構型變化有關, ,稱為稱為絞鏈區(qū)絞鏈區(qū)。 2 2、功能、功能 含有豐富的含有豐富的脯氨酸脯氨酸，因此易伸展彎曲，當因此易伸展彎曲，當 抗體與抗原結合時，該區(qū)可轉動，一方面使可變區(qū)的抗體與抗原結合時，該區(qū)可轉動，一方面使可變區(qū)的 兩個抗原結合點盡量與抗原結合，另一方面

13、可使抗體兩個抗原結合點盡量與抗原結合，另一方面可使抗體 分子變構，使補體結合位點暴露出來分子變構，使補體結合位點暴露出來。且易被且易被木瓜蛋木瓜蛋 白酶、胃蛋白酶白酶、胃蛋白酶等水解。等水解。 （二）（二）J J鏈和分泌成分鏈和分泌成分 1 1、J J鏈鏈 即連接鏈即連接鏈 是一條多肽鏈，富含半胱氨酸是一條多肽鏈，富含半胱氨酸; ; 由漿細胞合成由漿細胞合成; ; 以二硫鍵的形式共價結合到以二硫鍵的形式共價結合到IgIg的重鏈上的重鏈上; ; 在在IgMIgM和分泌型和分泌型IgAIgA單體之間起連接作用。單體之間起連接作用。 2 2、分泌成份（、分泌成份（SC)SC) （1 1）是二聚體）是

14、二聚體IgAIgA上的一個輔助成分；上的一個輔助成分； （2 2）由上皮細胞合成，化學本質為糖蛋白）由上皮細胞合成，化學本質為糖蛋白 （3 3）以共價形式結合到）以共價形式結合到IgAIgA分子，并一起被分泌分子，并一起被分泌 到粘膜表面，又稱分泌片（到粘膜表面，又稱分泌片（secretory piece, secretory piece, SPSP）；）； （4 4）可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶對二聚體）可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶對二聚體 IgAIgA的降解。的降解。 （三）單體、雙體（三）單體、雙體 和五聚體和五聚體 1 1、單體、單體 由一對由一對L L 鏈和鏈和H H鏈組成的基鏈組成

15、的基 本結構。本結構。 2 2、雙體、雙體 分泌型的分泌型的 IgAIgA由由J J鏈連接的兩鏈連接的兩 個單體。個單體。 3 3、五聚體、五聚體 IgMIgM是是 由由J J鏈和二硫鍵連鏈和二硫鍵連 接的五個單體。接的五個單體。 （一）木瓜蛋白酶酶切結果（一）木瓜蛋白酶酶切結果 木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶可將可將H H鏈鉸鏈區(qū)二硫鍵的近鏈鉸鏈區(qū)二硫鍵的近N N端切斷，端切斷， 得到大小相近的得到大小相近的3 3個片段；其中有兩個相同的片段，個片段；其中有兩個相同的片段， 稱稱抗原結合片段（抗原結合片段（FabFab），另一個為另一個為FCFC片段片段，可形成，可形成 蛋白結晶。蛋白結晶。 三、免疫

16、球蛋白的水解片段與生物學活性三、免疫球蛋白的水解片段與生物學活性 （二）胃蛋白酶酶切結果（二）胃蛋白酶酶切結果 胃蛋白酶胃蛋白酶可將可將H H鏈從鉸鏈區(qū)二硫鍵的近鏈從鉸鏈區(qū)二硫鍵的近C C端切端切 斷，得到一個具有雙價活性的斷，得到一個具有雙價活性的F(ab)F(ab)2 2片片段和若段和若 干個小分子多肽碎片干個小分子多肽碎片（pFcpFc）。）。F(ab)2F(ab)2片段與片段與 抗原結合可發(fā)生凝集和沉淀反應，抗原結合可發(fā)生凝集和沉淀反應，pFcpFc片段失去片段失去 生物學活性。生物學活性。 一、免疫球蛋白的種類一、免疫球蛋白的種類 免疫球蛋白可區(qū)分為類、亞類、型、亞型等。免疫球蛋白可

17、區(qū)分為類、亞類、型、亞型等。 （一）類（一）類 免疫球蛋白免疫球蛋白類類的區(qū)分是依據其的區(qū)分是依據其重鏈重鏈C C區(qū)的理化特性及區(qū)的理化特性及 抗原性抗原性的差異，在同種系所有個體內的免疫球蛋白可分為的差異，在同種系所有個體內的免疫球蛋白可分為 IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE、IgDIgD五大類五大類(class),(class),重鏈分別稱為重鏈分別稱為 ,鏈鏈。 （二）亞類（二）亞類 同一種類免疫球蛋白，又可根據其同一種類免疫球蛋白，又可根據其重鏈恒定區(qū)的微細重鏈恒定區(qū)的微細 結構、二硫鍵的位置與數(shù)目及抗原特性結構、二硫鍵的位置與數(shù)目及抗原特性的不同，進一步分的不同

18、，進一步分 為為亞類亞類（subclasssubclass）。如人的）。如人的IgGIgG有有IgG1IgG1、IgG2IgG2、IgG3IgG3和和 IgG4IgG4四個亞類。四個亞類。 第三節(jié)第三節(jié) 免疫球蛋白的種類與抗原決定簇免疫球蛋白的種類與抗原決定簇 （三）型（三）型 根據輕鏈恒定區(qū)的抗原性不同，各類免疫根據輕鏈恒定區(qū)的抗原性不同，各類免疫 球蛋白的輕鏈分球蛋白的輕鏈分為為和和兩個型兩個型（typetype），任），任 何種類的免疫球蛋白均有兩型輕鏈分子。何種類的免疫球蛋白均有兩型輕鏈分子。 （四）亞型（四）亞型 根據根據型輕鏈型輕鏈N N端恒定區(qū)上氨基酸排列順序端恒定區(qū)上氨基酸排列

19、順序 的差異，免疫球蛋白又的差異，免疫球蛋白又可分為若干亞型可分為若干亞型 （subtypesubtype），），型輕鏈無亞型。型輕鏈無亞型。 （五）亞群（五）亞群 根據免疫球蛋白根據免疫球蛋白V V區(qū)的一級結構特點，可將區(qū)的一級結構特點，可將 免疫球蛋白免疫球蛋白分為分為3 35 5個亞群個亞群（subgroupsubgroup）。）。 二、免疫球蛋白的抗原決定簇（血清型）二、免疫球蛋白的抗原決定簇（血清型） （一）同種型決定簇（一）同種型決定簇 指在同一種屬動物所有個體指在同一種屬動物所有個體 的的IgIg分子共同具有的抗原特異性標志，為分子共同具有的抗原特異性標志，為種屬型種屬型 標志標

20、志。即是說在同一種動物不同個體之間同時存。即是說在同一種動物不同個體之間同時存 在不同類型的免疫球蛋白，不表現(xiàn)出抗原性，只在不同類型的免疫球蛋白，不表現(xiàn)出抗原性，只 是在異種動物之間才表現(xiàn)出抗原性。同種型抗原是在異種動物之間才表現(xiàn)出抗原性。同種型抗原 決定基存在于決定基存在于Ig CIg C區(qū)，表現(xiàn)在全部區(qū)，表現(xiàn)在全部IgIg的類、亞類、的類、亞類、 型、亞型分子上。型、亞型分子上。 （二）同種異型決定簇二）同種異型決定簇 指免疫球蛋白在同一種動指免疫球蛋白在同一種動 物不同個體之間呈現(xiàn)出的抗原性，為物不同個體之間呈現(xiàn)出的抗原性，為個體型標志個體型標志。 同種異型抗原決定基廣泛存在于同種異型抗

21、原決定基廣泛存在于Ig CHIg CH和和CLCL區(qū)。區(qū)。 （三）獨特型決定簇（三）獨特型決定簇 由抗體分子的可變區(qū)呈現(xiàn)出的抗原性就稱為免由抗體分子的可變區(qū)呈現(xiàn)出的抗原性就稱為免 疫球蛋白（抗體）的疫球蛋白（抗體）的獨特型獨特型( (重點重點) )，或稱個體基因或稱個體基因 型型，可變區(qū)內的抗原決定簇稱為，可變區(qū)內的抗原決定簇稱為獨特型決定簇獨特型決定簇，是，是 每個免疫球蛋白分子所特有的抗原特異性標志。每個免疫球蛋白分子所特有的抗原特異性標志。其其 中單個的抗原決定簇，又稱為中單個的抗原決定簇，又稱為獨特位獨特位。 獨特型在異種、同種異體乃至同一個體內均可獨特型在異種、同種異體乃至同一個體內

22、均可 刺激產生相應的抗體，這種抗體稱為刺激產生相應的抗體，這種抗體稱為抗獨特型抗體抗獨特型抗體。 一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白V V區(qū)的功能：區(qū)的功能： 主要是識別和結合特異性抗原主要是識別和結合特異性抗原 （一）（一） 激活補體激活補體 IgG1-3IgG1-3和和IgMIgM與相應抗原與相應抗原 結合后，可因構型改變而結合后，可因構型改變而 使其使其CH2/CH3CH2/CH3功能區(qū)內的功能區(qū)內的 補體結合點暴露，從而激補體結合點暴露，從而激 活補體活補體經典途徑經典途徑。 IgG4IgG4、IgAIgA和和IgEIgE的凝聚物的凝聚物 可激活補體可激活補體旁路途徑旁路途徑。 二、免疫球蛋

23、白二、免疫球蛋白C C區(qū)的功能區(qū)的功能 1.1.調理作用調理作用( (重點重點) )IgGIgG與細菌等顆粒性抗原結合后，與細菌等顆粒性抗原結合后， 可通過其可通過其FcFc段與巨噬細胞和中性粒細胞表面相應段與巨噬細胞和中性粒細胞表面相應 IgG FcIgG Fc受體結合，促進吞噬細胞對細菌等顆?？乖荏w結合，促進吞噬細胞對細菌等顆粒抗原 的吞噬，此即抗體的調理吞噬作用。的吞噬，此即抗體的調理吞噬作用。 （二）結合（二）結合FcFc受體受體 2.2.抗體依賴細胞介導的細胞毒作用（抗體依賴細胞介導的細胞毒作用（ADCCADCC）(重點重點). IgGIgG與腫瘤或病毒感染的靶細胞結合后，可通過與

24、腫瘤或病毒感染的靶細胞結合后，可通過 其其FcFc段與段與NKNK細胞、巨噬細胞和中性粒細胞表面相應細胞、巨噬細胞和中性粒細胞表面相應 IgG FcIgG Fc受體結合，增強受體結合，增強NKNK細胞和觸發(fā)吞噬細胞對靶細細胞和觸發(fā)吞噬細胞對靶細 胞的殺傷作用，此即胞的殺傷作用，此即ADCCADCC效應。效應。 3.3.介導介導I I型超敏反應型超敏反應 IgEIgE引起引起I I型超敏反應型超敏反應 （三）穿過胎盤和粘膜（三）穿過胎盤和粘膜 IgGIgG、sIgAsIgA 一、一、IgGIgG 人和動物中人和動物中含量最高含量最高的免疫球蛋白，的免疫球蛋白， 占血清總占血清總IgIg的的75%

25、75%80%80%，半衰期約，半衰期約20202323天；天； 主要由脾臟和淋巴結中的漿細胞產主要由脾臟和淋巴結中的漿細胞產 生，大部分存在于血液中（生，大部分存在于血液中（45%45% 50%50%），）， 其余存在于組織液和淋巴液中；其余存在于組織液和淋巴液中； IgGIgG是是惟一可通過人和兔胎盤的抗體惟一可通過人和兔胎盤的抗體，在新生動物，在新生動物 抗感染中起重要作用?？垢腥局衅鹬匾饔?。 IgGIgG是動物自然感染和人工主動免疫后，機體所產是動物自然感染和人工主動免疫后，機體所產 生的主要抗體，生的主要抗體，是動物機體抗感染免疫的主力是動物機體抗感染免疫的主力，大多數(shù)抗，大多數(shù)抗

26、菌、抗病毒抗體和抗菌素都為菌、抗病毒抗體和抗菌素都為IgGIgG類，因而也是類，因而也是血清學診斷血清學診斷 和疫苗免疫后監(jiān)測的主要抗體和疫苗免疫后監(jiān)測的主要抗體； IgGIgG還參與抗腫瘤免疫，同時也是引起還參與抗腫瘤免疫，同時也是引起型、型、型型 變態(tài)反應及自身免疫病的抗體變態(tài)反應及自身免疫病的抗體。 IgGIgG通過經典途徑活化補體，具有調理吞噬、介導通過經典途徑活化補體，具有調理吞噬、介導 ADCCADCC、結合、結合SPASPA和結合鏈球菌和結合鏈球菌G G蛋白的作用。蛋白的作用。 動物機體初次免疫后動物機體初次免疫后產生最產生最 早早的免疫球蛋白；但含量僅占血清的免疫球蛋白；但含量

27、僅占血清 IgIg的的10%10%左右，左右， 主要由脾臟和淋巴結中的漿主要由脾臟和淋巴結中的漿 細胞產生，一般不能通過血管壁，細胞產生，一般不能通過血管壁， 主要分布于血液中；主要分布于血液中； IgMIgM是是5 5個單體組成的五聚體個單體組成的五聚體 （pentamerpentamer）, ,又稱為又稱為巨球蛋白巨球蛋白（macroglobulinmacroglobulin）。）。 IgMIgM在體內產最早，但持續(xù)時間短，不是抗感染在體內產最早，但持續(xù)時間短，不是抗感染 免疫的主力，但對免疫的主力，但對早期抗感染免疫和早期血清學診斷早期抗感染免疫和早期血清學診斷十十 分重要，并且分重要，

28、并且IgMIgM有多個抗原結合部位，其單個的殺菌、有多個抗原結合部位，其單個的殺菌、 溶菌、溶血、促進吞噬及凝集作用，均較溶菌、溶血、促進吞噬及凝集作用，均較IgGIgG高；高； IgMIgM同樣具有抗腫瘤作用，也是同樣具有抗腫瘤作用，也是型型型變態(tài)反型變態(tài)反 應及自身免疫病的抗體應及自身免疫病的抗體。 膜表面膜表面IgMIgM是是BCRBCR的主要成分。只表達的主要成分。只表達mIgMmIgM是未成是未成 熟熟B B細胞的標志，記憶細胞的標志，記憶B B細胞表面的細胞表面的mIgMmIgM逐漸消失。逐漸消失。 二、二、IgMIgM IgAIgA以單體和二以單體和二 聚體兩種分子形式存在聚體兩

29、種分子形式存在, , 單體單體存在于血清中，稱存在于血清中，稱 為血清型為血清型IgA,IgA,占血清占血清IgIg 的的10% 10% 20%20%，二聚體為分泌型二聚體為分泌型IgA,IgA,是由呼吸道、消化道、是由呼吸道、消化道、 泌尿生殖道等部位粘膜固有層中的漿細胞所產生。主要存泌尿生殖道等部位粘膜固有層中的漿細胞所產生。主要存 在于呼吸道、消化道、生殖道的外分泌液及初乳、唾液、在于呼吸道、消化道、生殖道的外分泌液及初乳、唾液、 淚液等分泌物中。淚液等分泌物中。 分泌型分泌型IgAIgA是是參與粘膜局部免疫參與粘膜局部免疫的主要抗體，在傳的主要抗體，在傳 染病預防接種中，經滴鼻、點眼、

30、飲水及噴霧途徑免疫，染病預防接種中，經滴鼻、點眼、飲水及噴霧途徑免疫， 均可產生分泌型均可產生分泌型IgAIgA，從而建立相應的粘膜免疫力。，從而建立相應的粘膜免疫力。嬰幼嬰幼 兒和幼畜禽從母乳中可獲得兒和幼畜禽從母乳中可獲得sIgA sIgA 產生產生自然被動免疫自然被動免疫，新新 生兒和幼畜禽易患呼吸道、胃腸道感染可能與生兒和幼畜禽易患呼吸道、胃腸道感染可能與IgAIgA合成不合成不 足有關。足有關。 三、三、IgA IgEIgE產生部位與分泌型產生部位與分泌型IgAIgA相似，是血清中含量最低的相似，是血清中含量最低的IgIg。 IgEIgE的重鏈多一個功能區(qū)的重鏈多一個功能區(qū)CH4CH

31、4，此區(qū)是細胞結合的部位，此區(qū)是細胞結合的部位， 因而它是一種親細胞性抗體。因而它是一種親細胞性抗體。 結合在肥大細胞和嗜堿性細胞上的結合在肥大細胞和嗜堿性細胞上的IgEIgE與抗原結合后，能與抗原結合后，能 引起這些細胞脫顆粒，釋放組織氨等活性介質，從而引起引起這些細胞脫顆粒，釋放組織氨等活性介質，從而引起I I 型過敏反應型過敏反應。 IgEIgE在抗寄生蟲感染在抗寄生蟲感染中具有重要作用，研究表明，蠕蟲、中具有重要作用，研究表明，蠕蟲、 血吸蟲和旋毛蟲等寄生蟲病以及某些真菌感染后，均可誘導血吸蟲和旋毛蟲等寄生蟲病以及某些真菌感染后，均可誘導 機體產生大量的機體產生大量的IgEIgE抗體。

32、抗體。 五、五、IgDIgD IgD IgD在個體發(fā)育的任何時候產生，在血清中濃度極低，平在個體發(fā)育的任何時候產生，在血清中濃度極低，平 均約均約0.03mg/ml0.03mg/ml，且極不穩(wěn)定，容易降解，半衰期僅，且極不穩(wěn)定，容易降解，半衰期僅3 3天；天； 主要作為成熟主要作為成熟B B細胞膜上的抗原特異性受體，是細胞膜上的抗原特異性受體，是B B細胞分細胞分 化發(fā)育成熟的標志化發(fā)育成熟的標志，成熟，成熟B B細胞活化后，或者變成記憶細胞活化后，或者變成記憶B B細胞細胞 時，時，mIgDmIgD逐漸消失。逐漸消失。 對防止免疫耐受有一定作用對防止免疫耐受有一定作用 四、四、IgEIgE

33、各類免疫球蛋白的生物學活性各類免疫球蛋白的生物學活性 免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgGIgAIgAIgMIgMIgDIgDIgEIgE 重鏈名稱重鏈名稱 重鏈功能區(qū)數(shù)目重鏈功能區(qū)數(shù)目4 44 45 54 45 5 主要存在形式主要存在形式單體單體單體、雙體單體、雙體五聚體五聚體單體單體單體單體 分子量分子量(KD)(KD)146-170146-170160160，400400970970175175188188 碳水化合物（碳水化合物（% %）4 41010121218181212 血清濃度血清濃度(mg/dl)(mg/dl)1150115030030021021050501501500.3-

34、40.3-40.0020.002 血清總血清總Ig (%)Ig (%)757510105-105-10110.0010.001 外分泌液外分泌液- -+ +- - - 經典途徑活化補體經典途徑活化補體+- -+- - - 代替途徑活化補體代替途徑活化補體+ + +? ?+ + + 半衰期（天）半衰期（天）20-2320-235.85.85.15.12.82.82.52.5 合成部位合成部位 脾、淋巴結漿細脾、淋巴結漿細 胞胞 粘膜相關淋巴粘膜相關淋巴 樣組織樣組織 脾、淋巴結漿細脾、淋巴結漿細 胞胞 扁桃體、脾漿扁桃體、脾漿 細胞細胞 粘膜固有層漿粘膜固有層漿 細胞細胞 通過胎盤通過胎盤+ +

35、- - - - - 免疫作用免疫作用 抗菌、抗病毒、抗菌、抗病毒、 抗毒素、自身抗抗毒素、自身抗 體體 粘膜局部免疫粘膜局部免疫 作用，抗菌、作用，抗菌、 抗病毒，免疫抗病毒，免疫 排除功能排除功能 早期防御作用，早期防御作用， 溶菌，溶血，溶菌，溶血， SmIgMSmIgM，天然血，天然血 型抗體，類風濕型抗體，類風濕 因子因子 確切功能目前確切功能目前 不清楚不清楚 抗寄生蟲感染，抗寄生蟲感染， I I型超敏反應型超敏反應 一、多克隆抗體（第一代抗體）一、多克隆抗體（第一代抗體） （一）概念（一）概念( (重點重點).). 采用傳統(tǒng)的免疫方法，將抗原物質經不同途采用傳統(tǒng)的免疫方法，將抗原物

36、質經不同途 徑注入動物體內后，經數(shù)次免疫后采取動物血液，徑注入動物體內后，經數(shù)次免疫后采取動物血液， 分離出血清，由此獲得的抗血清即為分離出血清，由此獲得的抗血清即為多克隆抗體多克隆抗體 （polyclonal antibody, PcAbpolyclonal antibody, PcAb），該抗血清是），該抗血清是 一種多克隆的混合抗體，具有高度的異質性，即一種多克隆的混合抗體，具有高度的異質性，即 針對同一抗原決定簇的抗體仍是由不同針對同一抗原決定簇的抗體仍是由不同B B細胞克細胞克 隆產生的不同質的抗體所組成。隆產生的不同質的抗體所組成。 （二）基本制備過程（二）基本制備過程 抗原制備抗

37、原制備動物免疫動物免疫檢測血清抗體檢測血清抗體 效價效價血清分離與保存。血清分離與保存。 第六節(jié)第六節(jié) 抗體的人工制備抗體的人工制備 二、單克隆抗體（第二代抗體）二、單克隆抗體（第二代抗體） ( (重點重點).). （一）概念（一）概念 由一個由一個B B細胞分化增殖的子代細胞細胞分化增殖的子代細胞 （漿細胞）克隆、產生的針對單一抗原決定簇的（漿細胞）克隆、產生的針對單一抗原決定簇的 抗體，或者說是由一個識別一種抗原表位的抗體，或者說是由一個識別一種抗原表位的B B細細 胞克隆產生的同源抗體，胞克隆產生的同源抗體，稱為單克隆抗體稱為單克隆抗體 （McAbMcAb）。）。 （二）優(yōu)點（二）優(yōu)點

38、1.1.有高度的有高度的單一性、均一性單一性、均一性； 2.2.純度高純度高，制備時不需純化抗原就可得到純抗體；，制備時不需純化抗原就可得到純抗體； 3.3.效價高效價高； 4.4.產量高產量高，且可連續(xù)生產特異性強；，且可連續(xù)生產特異性強； 5.5.特異性強特異性強，少或無血清交叉反應。，少或無血清交叉反應。 （三）制備單克隆抗體的基本原理（三）制備單克隆抗體的基本原理 （1 1）DNADNA合成的合成的2 2條途徑條途徑 主要途徑：可被主要途徑：可被氨基喋呤氨基喋呤(A)(A)所阻斷所阻斷 旁路途徑：利用旁路途徑：利用次黃嘌呤次黃嘌呤(H)(H)和和胸腺嘧啶核苷胸腺嘧啶核苷(T)(T) l 次黃嘌呤次黃嘌呤- -鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)(HGPRT) l 胸腺嘧啶核苷激酶胸腺嘧啶核苷激酶(TK)(TK)。 所需要的酶所需要的酶 （2 2）所用的細胞）所用的細胞 （3 3）所用培養(yǎng)基）所用培養(yǎng)基 （三）基本制備過程（三）基本制備過程 制備抗原制備抗原 免疫動物免疫動物 免疫脾細胞和骨髓瘤免疫脾細胞和骨髓瘤 細胞的制備細胞的制備 細胞