佛山市高中生物 第二章 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 2.2 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)(二)學(xué)案 選修1

1、學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)（二)學(xué)習(xí)目標(biāo)1。通過(guò)閱讀教材p1617“（一)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基”，掌握配制培養(yǎng)基的步驟和倒平板操作的過(guò)程。2。結(jié)合教材p1819“（二）純化大腸桿菌,理解并掌握利用平板劃線法和稀釋涂布平板法來(lái)純化微生物的方法.重難點(diǎn)擊：1.掌握制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法。2.學(xué)會(huì)用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化微生物。【預(yù)習(xí)案】一制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基是細(xì)菌培養(yǎng)中常用的一種培養(yǎng)基,大腸桿菌的純化就是用的該培養(yǎng)基。1.牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的成分及各成分提供的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基組分提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)牛肉膏5.0 g_蛋白胨1

2、0。0 g 和維生素nacl 5。0 g_蒸餾水定容至1 000 ml氫元素、 元素2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程（1）培養(yǎng)基的配制計(jì)算：根據(jù)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 的比例，計(jì)算配制100 ml培養(yǎng)基時(shí) 各成分的用量（2）（2）滅菌(3）倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時(shí),在酒精燈火焰附近操作進(jìn)行：在火焰旁 手拿錐形瓶， 手拔出棉塞(如圖1)。使錐形瓶的瓶口迅速通過(guò) ，目的是進(jìn)行 ,防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基（如圖2）。 手將培養(yǎng)皿打開 ， 手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上 （如圖3）。等待平板 后，將平板 放置（如圖4)。3.培養(yǎng)基的選擇:培養(yǎng)基配制好后，要放在 中保溫12 d，若 則說(shuō)明制備的培養(yǎng)基是合格的。4.平

3、板冷凝后，要將平板倒置的原因：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基 ，又可以防止 。二純化大腸桿菌：純化大腸桿菌就是為了獲得大腸桿菌的純種菌落，這需在培養(yǎng)時(shí),盡量使菌落中的菌體來(lái)自于一個(gè)大腸桿菌的分裂，即這個(gè)菌落的細(xì)菌群體由 繁殖而來(lái)，這就需要接種時(shí)盡量接種單個(gè)的大腸桿菌，最常用的是 法和 法.1.平板劃線法：結(jié)合示意圖,完成下面步驟:2。稀釋涂布平板法：(1)系列稀釋操作 （2)涂布平板操作3.菌種的保存將菌種放在低溫環(huán)境中保藏的目的是_ 。歸納提煉：1。平板劃線法中幾次灼燒接種環(huán)的目的2.稀釋涂布平板法：應(yīng)特別注意：（1)酒精燈與培養(yǎng)皿

4、的距離要合適.（2）吸管頭不要接觸任何其他物體.(3）吸管要在酒精燈火焰周圍使用活學(xué)活用: 1。下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，敘述錯(cuò)誤的是(）a.操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌b。將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯c。待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時(shí)進(jìn)行倒平板d。待平板冷卻凝固約510 min后，將平板倒過(guò)來(lái)放置2.下列敘述錯(cuò)誤的是（）a.右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞，為避免 污染需放在酒精燈火焰附近b.倒平板整個(gè)過(guò)程應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行c.打開培養(yǎng)皿蓋,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿， 左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋d。為避免水滴滴入培養(yǎng)基，平板應(yīng)倒過(guò)來(lái)放置3.如圖為純化大

5、腸桿菌的一個(gè)操作環(huán)節(jié),下列相關(guān)敘述中,錯(cuò)誤的是(）a。該操作步驟是接種，方法是平板劃線法b。除第一次劃線外，以后的每一次劃線的起點(diǎn)是上一 次劃線的末端c。圖中細(xì)菌密度最小的是5處 d。該接種方法適用于細(xì)菌的計(jì)數(shù)【小結(jié)提升】【典題訓(xùn)練】1。有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述，錯(cuò)誤的是（）a.首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋b.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面c.在適宜條件下培養(yǎng)d。結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落2.如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?2345。下列操作方法正確的是（）a.只在操作前將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌b.劃線操作須在火焰上進(jìn)行c。在5區(qū)域中才可以得到所需菌落

6、d.在12345區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌3.將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37 恒溫箱的目的是（)a.對(duì)比觀察培養(yǎng)基有沒(méi)有被微生物利用b.對(duì)比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌c.沒(méi)必要放入未接種的培養(yǎng)基 d.為了下次接種時(shí)再使用4.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是（）a。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌b。接種純種細(xì)菌 c.適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) d。防止外來(lái)雜菌的入侵5。（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮 、 和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、 、 等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。（2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行 （消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和 ；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能 .（3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值,除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的 。（4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)