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文檔簡介

1、( 此文檔為 word 格式,下載后您可任意編輯修改!)譯文英文題目Ameliorative Effects of 5-Hydroxymethyl-2-furfural(5-HMF) from Schisandra chinensis on Alcoholic LiverOxidative Injury in Mice中文題目五味子中的5- 羥甲基糠醛( 5-HMF)對酒精性肝損傷小鼠的改善作用作者:陳飛專業(yè):生物工程完成日期 :2015.04.100譯文:五味子中的 5- 羥甲基糠醛( 5-HMF)對酒精性肝損傷小鼠的改善作用摘要:本文的目的是探討 5- 羥甲基糠醛 (5-HMF)對小鼠急性

2、酒精性肝損傷的保護(hù)作用,5-HMF,是一種從五味子果實中分離出來用于動物實驗的一種美拉德反應(yīng)產(chǎn)物,實驗小鼠分別與不同濃度的5- 羥甲基糠醛預(yù)處理 (7.5,15 ,和 30 毫克千克)進(jìn)行灌胃喂養(yǎng)七天。檢查了血清以及肝組織的生化標(biāo)記和酶抗氧化劑,我們的結(jié)果表明肝組織中的 ALT 活性(谷氨轉(zhuǎn)氨酶), AST(谷草轉(zhuǎn)氨酶), TC(總膽固醇), TG(甘油三脂), L-dlc (低密度脂蛋白)和血清中的 MDA(丙二醇)指標(biāo),用 5- 。流動相為 1 毫升分鐘的 10%甲醇。 20 L 樣品溶液的流量直接注入色譜柱。高效液相色譜如圖 2 所示。3.3動物四十八只 4 周齡的 ICR 小鼠,體重為

3、 20 22 g ,用于酒精性損傷的實驗。實驗動物由吉林大學(xué)提供,質(zhì)量證書號為 SCXK(JI )(長春,中國)。飼養(yǎng)在擁有 25 2C , 12小時黑暗光照周期的空調(diào)房間內(nèi)。所有對實驗動物的使用及保養(yǎng)均按照中國的法律。3.4 。實驗組和治療動物隨機分為六組(每組8 只),正常對照組,乙醇對照組,陽性對照組以及三組實驗組。實驗組用5-HMF灌胃處理,連續(xù)七天的劑量分別為7. 毫克公斤每天。除了陽性對照,正常組和酒精組只有0.9%的生理鹽水。 第七天 , 正常對照組給予同等體積的水,其他小鼠用 50%的乙醇( 4.8 克公斤)進(jìn)行最后一次灌胃。然后所有的小鼠禁食12 小時。采集血標(biāo)本及球后在室溫

4、下保存45 分鐘,一小時后分離血清并離心( 1500 轉(zhuǎn), 10 分鐘, 4)保存在 -20 進(jìn)行生化分析。另外,實驗前后,分別稱取動物體重。實驗結(jié)束后,各組小鼠用脊椎脫位的方法處死??焖俳馄嗜〕龈闻K和脾臟,用生理鹽水沖洗兩次,然后用濾紙擦干,測定濕重。與此同時,記錄尺寸,外觀和切割面的紋理。從每只小鼠肝左葉取一小塊組織固定于10%的福爾馬林溶液中進(jìn)行病理學(xué)分析。剩余肝組織存儲在-80 環(huán)境下進(jìn)行肝勻漿制備。3.5 。血清生化標(biāo)志物的檢測。使用南京建成生物工程研究所 (中國南京)的試劑盒測定血清中的 AST,ALT,TC,L-DLC 和 TG等指標(biāo)。3.6 。肝臟的抗氧化活性和氧化應(yīng)激標(biāo)記物檢

5、測為了測定抗氧化活性,將肝組織混勻在 50mM的磷酸鹽緩沖液中( ph7.4 )。產(chǎn)生的緩沖液在 4下離心 15 分鐘,上清液用于測定。肝勻漿中的 CAT, GSH-Px和 SOD水平是根據(jù)試劑盒的說明測定(南京建成生物工程研究所) 。CAT活性用過氧化氫的方法測定,其次是用克萊本的方法測定。 GSH-Px活性根據(jù)莫漢等人的方法測定。 SOD活性采用波尚等人的方法測定。丙二醛( MDA)通過測定形成的硫代巴比妥酸反應(yīng)物質(zhì)。這些物質(zhì)是由德雷珀和哈德利所描述的。用 Bradford 法測定蛋白質(zhì)的含量。3.7 。炎癥標(biāo)記物活性測定無血清培養(yǎng)基中 TNF-和 IL 1B 的水平由制造商確定(明尼阿波

6、利斯, MN,USA)??偟膩碚f,將制備的試劑,樣品用酶標(biāo)記后在 37下反應(yīng) 60 分鐘。加入終止液后,十分鐘內(nèi)測定好 OD值。3.8 。組織病理學(xué)檢查將肝組織(每組數(shù)量為8)固定在 10%中性福爾馬林緩沖液(福爾馬林:磷酸鹽緩沖液( 0.01 M , pH 7.4 )= 1:1 ) 24 小時以上,用常規(guī)石蠟包埋,在切片 5 m厚處標(biāo)記。經(jīng)蘇木精 - 伊紅( H&E)染色,切片組織病理學(xué)變化用尼康 TE 2000 熒光顯微鏡觀察(尼康,東京,日本)。這呈現(xiàn)了有代表性的圖像。組織病理學(xué)特征為肝臟的組織學(xué)變化的評估,包括肝細(xì)胞變性或壞死,脂肪變性,炎癥細(xì)胞浸潤,充血提供了依據(jù)。3.9 。

7、統(tǒng)計分析所有的實驗都獨立的進(jìn)行了三次。通過單向方差分析( ANOVA)確定統(tǒng)計學(xué)意義。其次是最小顯著差異( LSD),采用 SPSS16 軟件包進(jìn)行多重比較檢驗( SPSS公司,芝加哥, IL , USA)。病理資料采用 Ridit 分析分析; P 0.05 或 P0.01 被認(rèn)為是顯著的。4。結(jié)論在這項研究中, 清楚的顯示, 5-HMF可以保護(hù)由酒精引起的肝損害。 并證明了可以恢復(fù) CAT, GSH-Px和 SOD,以及降低血清和肝臟脂質(zhì)過氧化,降低 TNF- 和 IL-1 水平。此外, 5-HMF也可以緩解脂質(zhì)降解和肝細(xì)胞凋亡。 總的來說,這為 5-HMF對于肝損傷的預(yù)防和治療是有益的提供了大量的證據(jù)。圖 1:果糖中 5-HMF的生成途徑圖 2 五味子果實中的高效液相色譜圖樣品 A 和樣品 B表 1 5-HMF 對小鼠體重和臟器的影響表 2 5-HMF 對小鼠 ALT,AST,TC,TG和 L-DLC 水平的影響圖 3 5-HMF 對肝臟中 CAT (A); GSH-Px (B); SOD (C)和 MDA (D) 活動的影響圖 4 5-HMF 對于小鼠肝臟T

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