waters色譜柱相關(guān)知識PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計學(xué)1waters色譜柱相關(guān)知識色譜柱相關(guān)知識流動相線性速度不均勻譜帶擴(kuò)展第1頁/共105頁第2頁/共105頁第3頁/共105頁SiSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiOOOSiCH3H3CCH3SiCH3H3CCH3HHHHHHH第4頁/共105頁第5頁/共105頁

2、第6頁/共105頁第7頁/共105頁第8頁/共105頁NovaPak C18未封口 C18 抗壞血酸 煙酰胺 對氨基苯甲酸 哌咯西叮 核黃素 苯酚 鹽酸硫胺第9頁/共105頁第10頁/共105頁1 2 3 4 5 6 7 8 9 pH硅膠的溶解曲線第11頁/共105頁第12頁/共105頁第13頁/共105頁液液相相色色譜譜柱柱填填 料料柱柱 管管顆粒表面性質(zhì)顆粒度長 度內(nèi) 徑材 料化學(xué)性質(zhì) k，分辨率機(jī)械因素N壽命，柱效，速度，溶劑消耗第14頁/共105頁時保留時間長第15頁/共105頁第16頁/共105頁C 1C 1C 4C 4C 6C 6C 8C 8C 18C 18PhenylPhenyl

3、C NC NN HN H2 2 BandaPakBandaPakResol veResol veN ova-PakN ova-PakD el t a-PakD el t a-PakSym m et rySym m et rySpheri sorbSpheri sorb第17頁/共105頁第18頁/共105頁第19頁/共105頁第20頁/共105頁 他莫昔芬0.25 g/mL信噪比11.06.5AUSymmetry C18AU5.0010.00MinutesConventional C18第21頁/共105頁99.6 %99.8 %99.9 %峰面積回收率T = 1.0092.3 %95.3 %

4、97.8 %T = 1.58Waters21,379峰面積回收率第22頁/共105頁n持長壽命第23頁/共105頁4. AcenaphthenePeak ID:1. Propranolol2. Butylparaben3. Naphthalene 5. AmitriptylineUsing Symmetry QC conditions: 3.9 x 150 mm, 1.0 mL/min,MeOH/20 mM K2HPO4/KH2PO4, pH 7.0, (65/35), 23.4CTime (min)0102030C18-Silica1234512345XTerra MS C18USP T =

5、2.28USP T =1.35Alden, Iraneta第24頁/共105頁第25頁/共105頁0 06 6121218182424303036364242C18-Silica GC18-Silica FC18-Silica EC18-Silica DC18-Silica CC18-Silica BC18-Silica AXTerra MS C18壽命 (小時)第26頁/共105頁AU0.000.100.20Minutes0.200.400.600.801.001.201.401.601.802.002.202.40第27頁/共105頁第28頁/共105頁第29頁/共105頁第30頁/共10

6、5頁第31頁/共105頁第32頁/共105頁第33頁/共105頁第34頁/共105頁第35頁/共105頁第36頁/共105頁第37頁/共105頁第38頁/共105頁第39頁/共105頁理論塔板數(shù)計算公式：Ws 方法Wtan16切線法Wh5.54半峰高W3s9 3sW4s16 4sW5s25 5s21WVNs第40頁/共105頁18.70RV plates 8742 20.8018.7016 4Ns0.80W InjectInject0.68W 16.63RV plates 9569 268. 063.16164Ns 不好的色譜柱的柱效反而比好色譜柱的要高，因?yàn)槠渫衔膊糠譁y不出來第41頁/共10

7、5頁7018. RVplates 8240 1.0318.7025N25 1.03W height4.4%height4.4%plates 3334 N5 s s2441631625.6316. RV1.44W Good ColumnInjectInject第42頁/共105頁記記住住拿拿到到一一根根從從未未用用過過的的色色譜譜柱柱時時 一一定定要要先先看看其其使使用用說說明明！第43頁/共105頁第44頁/共105頁n有機(jī)溶劑或水的比例第45頁/共105頁第46頁/共105頁第47頁/共105頁nn有各種填料的預(yù)裝柱供選擇，使用方便。填料容積較小，會引起柱效降低第48頁/共105頁記記住住每

8、每種種色色譜譜柱柱可可能能有有特特定定的的方方法法 一一定定要要先先看看其其使使用用說說明明！第49頁/共105頁第50頁/共105頁第51頁/共105頁第52頁/共105頁第53頁/共105頁第54頁/共105頁第55頁/共105頁第56頁/共105頁第57頁/共105頁第58頁/共105頁第59頁/共105頁第60頁/共105頁第61頁/共105頁第62頁/共105頁第63頁/共105頁第64頁/共105頁第65頁/共105頁第66頁/共105頁 選擇性吸附去除干擾物在廣泛極性范圍內(nèi)，對酸性、堿性及中性物質(zhì)皆可獲得高而重現(xiàn)性的回收率 容易實(shí)現(xiàn)自動化以獲得高樣品吞吐量 簡單方法 容易使用，耐

9、受性好 快速、經(jīng)濟(jì)第67頁/共105頁第68頁/共105頁第69頁/共105頁第70頁/共105頁第71頁/共105頁第72頁/共105頁NNOHOONO+NOR1R2HNNOOOHNH20NH2NOOOHN+AQC衍生試劑及氨基酸衍生后的氨基酸CO26-氨基鄝啉N-羥基琥珀酰亞胺N-羥基琥珀酰亞胺半衰期1秒半衰期約15秒6-氨基喹啉第73頁/共105頁第74頁/共105頁第75頁/共105頁 HLB親水-親脂平衡共聚物“親水親水”l使填料具有水可浸潤性質(zhì)l降低與水的接觸角“親脂親脂”l提供對被分析物質(zhì)的反相保留能力NO親水性單體親水性單體 N-乙烯基吡咯烷酮親脂性單體親脂性單體 二乙烯基苯第

10、76頁/共105頁Oasis HLB 固相提取小柱第77頁/共105頁H L HLHLHLHLHLLLLLLLLL LLLL HLBH = 親水單元L = 親脂單元C18第78頁/共105頁Oasis HLB固相提取小柱第79頁/共105頁020406080100AcidsNeutralsBases% 回收率Ibuprofen (2.5 ?g)Naproxen (2 ?g)Salicylic Acid (5 ?g)Sulfadiazine (10 ?g)Sulfamerazine (10 ?g)Acetaminophen (0.5 ?g)Theobromine (0.5 ?g)Paraxant

11、hine (0.5 ?g)Theophylline (0.5 ?g)Caffeine (0.5 ?g)Procainamide (0.5 ?g)Ranitidine (0.5 ?g)Oxycodone (1 ?g)Propranolol (4 ?g)Naltrexone (1 ?g)Salbutamol (2 ?g)Doxepin (4 ?g) Spiked Serum on 1 cc 30 mg Oasis? HLB Cartridges第80頁/共105頁 平衡/活化小柱1mL甲醇/1mL水上樣可上200 mL樣品清洗1mL5%甲醇/水洗脫1mL甲醇揮發(fā)并用流動相重組樣品制備將樣品用水稀釋

12、準(zhǔn)備進(jìn)樣第81頁/共105頁Oasis HLB ：優(yōu)化的提取方法第82頁/共105頁特征三，重現(xiàn)性O(shè)asis HLB吸附劑填料在Waters ISO 9002-認(rèn)可的工廠中生產(chǎn) 確保重現(xiàn)性.l 優(yōu)勢4每批吸附劑進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，建立SPE填料重現(xiàn)性的新標(biāo)準(zhǔn)l 益處:4每盒產(chǎn)品附帶合格證書4不同批次具有重現(xiàn)的回收率第83頁/共105頁Oasis 不同批次間重現(xiàn)性Batch ABatch BBatch C 0.96% 1.21% 2.02% 3.66% 2.40% 3.06% 3.67% RSD020406080100% RecoveryProcainamideRanitidineAcetami

13、nophenPropranololDP-phthalateDoxepinb-Methasone Valerate第84頁/共105頁各種藥物提取，尤其是生理體液中的藥物， 如血漿、尿液中的藥物等天然產(chǎn)物提取農(nóng)業(yè)化學(xué)應(yīng)用，如提取除草劑、殺蟲劑等環(huán)境化學(xué)應(yīng)用，如提取多環(huán)芳烴等第85頁/共105頁第86頁/共105頁第87頁/共105頁第88頁/共105頁第89頁/共105頁第90頁/共105頁第91頁/共105頁第92頁/共105頁第93頁/共105頁第94頁/共105頁第95頁/共105頁第96頁/共105頁第97頁/共105頁第98頁/共105頁第99頁/共105頁第100頁/共105頁第101頁/共105頁第102頁/共105頁第103頁/共105頁判斷故障與故障排除的原則判斷故障與故障排除的原則規(guī)則一 確認(rèn)問題至少發(fā)生兩次以上。如果問題不重復(fù) 出現(xiàn)，很難證實(shí)其確實(shí)