殺菌抑菌基本知識(shí)課件

1、殺菌抑菌基本知識(shí)殺菌抑菌基本知識(shí)殺菌抑菌基本知識(shí) 技術(shù)部殺菌抑菌基本知識(shí)一、名詞解釋一、名詞解釋l1、抗菌劑能夠在一定時(shí)間內(nèi)，使某些微生物（細(xì)菌、真菌、酵母菌、藻類及病毒等）的生長或繁殖保持在必要水平以下的化學(xué)物質(zhì)?？咕鷦┦且活惥哂幸志蜌⒕阅艿男滦椭鷦?l2、殺菌指殺滅物體中的致病菌，物體中還含有芽孢、嗜熱菌等非致病菌。l3、抑菌采用化學(xué)或物理方法抑制或妨礙細(xì)菌生長繁殖及其活性的過程。殺菌抑菌基本知識(shí)一、名詞解釋一、名詞解釋l4、中和劑在微生物殺滅試驗(yàn)中，用以消除試驗(yàn)微生物與消毒劑的混懸液中和微生物表面上殘留的消毒劑，使其失去對微生物抑制和殺滅作用的試劑。l5、PBS磷酸鹽緩沖液，0.03

2、mol/L,pH=7.2。l6、MIC最小抑菌濃度。殺菌抑菌基本知識(shí)一、名詞解釋一、名詞解釋l7、cfu在活菌營養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí)，由單個(gè)菌體或聚集成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長繁殖所形成的集落，稱為菌落形成單位，以其表達(dá)活菌的數(shù)量。殺菌抑菌基本知識(shí)一、名詞解釋一、名詞解釋l8、試驗(yàn)菌l金黃色葡萄球菌（ATCC6538） 細(xì)菌繁殖體中化膿性代表。殺菌抑菌基本知識(shí)一、名詞解釋一、名詞解釋l大腸桿菌（8099或ATCC259922） 細(xì)菌繁殖體中腸道菌的代表。殺菌抑菌基本知識(shí)一、名詞解釋一、名詞解釋l白色念珠菌（ATCC10231） 空氣中細(xì)菌的代表。殺菌抑菌基本知識(shí)一、名詞解釋一、名詞解釋l銅綠假單胞菌

3、（ATCC15442） 醫(yī)院感染中最常分離的細(xì)菌繁殖體的代表。殺菌抑菌基本知識(shí)二、殺菌率試驗(yàn)二、殺菌率試驗(yàn)l1、制備試驗(yàn)菌懸液 濃度為：用100l滴于對照片上，回收菌落數(shù)為11041109 cfu/片。l2、制備染菌樣片 取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片和對照樣片上滴加100l，作用2min。殺菌抑菌基本知識(shí)二、殺菌率試驗(yàn)二、殺菌率試驗(yàn)l3、操作步驟 分別將樣片投入含5ml相應(yīng)中和劑的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，取其中2-3個(gè)稀釋度，分別吸取0.5ml，只要兩個(gè)平皿中，用40-50的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙氏瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌)15ml作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，倒

4、置培養(yǎng)。l4、培養(yǎng)時(shí)間、溫度 細(xì)菌：35 2 ，48小時(shí) 酵母菌： 37 2 ，72小時(shí)殺菌抑菌基本知識(shí)二、殺菌率試驗(yàn)二、殺菌率試驗(yàn)l5、計(jì)算公式 式中： X殺菌率，% A對照樣片平均菌落數(shù) B被試樣片平均菌落數(shù)l6、評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 殺菌率90%，產(chǎn)品有殺菌作用。X= ABAX 100% _殺菌抑菌基本知識(shí)三、抑菌率試驗(yàn)三、抑菌率試驗(yàn)l1、制備試驗(yàn)菌懸液 濃度為：用100l滴于對照片上，回收菌落數(shù)為11041109cfu/片。l2、制備染菌樣片 取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片和對照樣片上滴加100l，作用20min。殺菌抑菌基本知識(shí)三、抑菌率試驗(yàn)三、抑菌率試驗(yàn)l3、操作步驟 分別將樣片投入含5ml

5、 PBS 的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，取其中2-3個(gè)稀釋度，分別吸取0.5ml，只要兩個(gè)平皿中，用40-50的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙氏瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌)15ml作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，倒置培養(yǎng)。l4、培養(yǎng)時(shí)間、溫度 細(xì)菌：35 2 ，48小時(shí) 酵母菌： 37 2 ，72小時(shí)殺菌抑菌基本知識(shí)三、抑菌率試驗(yàn)三、抑菌率試驗(yàn)l5、計(jì)算公式 式中： X抑菌率，% A對照樣片平均菌落數(shù) B被試樣片平均菌落數(shù)l6、評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 抑菌率50%-90%，產(chǎn)品有抑菌作用。 抑菌率90%，產(chǎn)品有較強(qiáng)抑菌作用。X= ABAX 100% _殺菌抑菌基本知識(shí)四、殺菌性能與抑菌性能的不同點(diǎn)

6、l1、含義不同殺菌抑菌消毒劑對微生物的殺滅能力。 消毒劑抑制或妨礙細(xì)菌生長繁殖及活性的能力。 殺菌抑菌基本知識(shí)四、殺菌性能與抑菌性能的不同點(diǎn)l2、作用時(shí)間不同 殺菌抑菌2min20min殺菌的作用時(shí)間可為2min、5min、10min、20min，相同條件下，作用時(shí)間越短，殺菌率越低，所以選擇最短的作用時(shí)間來檢測殺菌性能更具有代表性。 抑菌的作用時(shí)間可為2min、5min、10min、20min，相同條件下，作用時(shí)間越長，抑菌率越低，所以選擇最長的作用時(shí)間來檢測抑菌性能更具有代表性。 殺菌抑菌基本知識(shí)四、殺菌性能與抑菌性能的不同點(diǎn)l3、殘留消毒劑的去除方法不同殺菌抑菌中和劑法（化學(xué)中合法） 稀

7、釋法指在消毒劑與微生物作用到達(dá)規(guī)定時(shí)間的終點(diǎn)時(shí)，取樣加于適宜種類和濃度的中和劑中，將殘留消毒劑迅速中和，使其不再持續(xù)抑制或殺滅微生物的方法。 將經(jīng)消毒劑作用過的微生物樣本，用稀釋液（PBS）稀釋，降低殘留消毒劑濃度，以消除對微生物的抑制作用。 殺菌抑菌基本知識(shí)四、殺菌性能與抑菌性能的不同點(diǎn)l4、評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 殺菌抑菌殺菌率90，產(chǎn)品有殺菌作用。 抑菌率5090，產(chǎn)品有抑菌作用，抑菌率90，產(chǎn)品有較強(qiáng)的抑菌作用。 殺菌抑菌基本知識(shí)五、抗（抑）菌試驗(yàn)五、抗（抑）菌試驗(yàn)l1、目的 測定抗（抑）菌產(chǎn)品對細(xì)菌和真菌的抗（抑）菌作用。 常使用的方法有抑菌環(huán)試驗(yàn)、最小抑制濃度測定試驗(yàn)等等。殺菌抑菌基本知識(shí)五、抗

8、（抑）菌試驗(yàn)五、抗（抑）菌試驗(yàn)l2、抑菌環(huán)試驗(yàn) 1）原理 利用抑菌劑不斷溶解經(jīng)瓊脂擴(kuò)散形成不同濃度梯度，以顯示其抑菌作用。 殺菌抑菌基本知識(shí)五、抗（抑）菌試驗(yàn)五、抗（抑）菌試驗(yàn)l2）操作程序l（1）制備抑菌片 滴加實(shí)際使用濃度抑菌劑溶液的直徑為5mm,厚不超過4mm圓片。l（2）制備陰性對照片 不含抑菌成分的與實(shí)驗(yàn)組大小相同的樣片。l（3）接種試驗(yàn)菌 蘸取濃度為 5105510-9cfu/ml試驗(yàn)菌懸液，在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板均勻涂抹。l（4）抑菌樣片和對照片貼放l（5）培養(yǎng)溫度： 37 2 ，l 培養(yǎng)時(shí)間：1618小時(shí)殺菌抑菌基本知識(shí)五、抗（抑）菌試驗(yàn)五、抗（抑）菌試驗(yàn)l3）評價(jià)l（1）抑菌作

9、用的判斷 抑菌環(huán)直徑大于7mm者，判為有抑菌作用。 抑菌環(huán)直徑小于或等于7mm者，判為無抑菌作用。l（2）3次重復(fù)試驗(yàn)均有抑菌作用結(jié)果者，判為合格。l（3）陰性對照組應(yīng)無抑菌環(huán)產(chǎn)生。否則試驗(yàn)無效。殺菌抑菌基本知識(shí)五、抗（抑）菌試驗(yàn)五、抗（抑）菌試驗(yàn)l3、最小抑菌濃度（MIC） 1)原理 采用瓊脂稀釋法將不同濃度的抑菌劑混合溶解在瓊脂培養(yǎng)基中，然后點(diǎn)種細(xì)菌，通過細(xì)菌的生長與否，確定抗（抑）菌物質(zhì)抑制受試菌生長的最低濃度，即最小抑菌濃度（MIC）殺菌抑菌基本知識(shí)五、抗（抑）菌試驗(yàn)五、抗（抑）菌試驗(yàn)l2）操作程序l（1）配制抗（抑）菌溶液 l（2）配制雙倍濃度培養(yǎng)基l（3）配制含抗（抑）菌液培養(yǎng)基l（4）取1l2l（含菌量約為107cfu/ml）菌懸液點(diǎn)種于含抗（抑）菌液培養(yǎng)基的平皿l（5）以同