基因工程原理練習題及其答案

1、學習必備歡迎下載基因工程復習題題型：名詞解釋（10 個） 30 分；填空（每空1 分）答題（4 個） 20 分；論述題（2 個） 20 分。第一章緒論20分；選擇題（每題1 分） 10 分；簡1. 名詞解釋：基因工程：按照預先設計好的藍圖，利用現代分子生物學技術，特別是酶學技術，對遺傳物質 DNA直接進行體外重組操作與改造，將一種生物 （供體） 的基因轉移到另外一種生物（受體）中去，從而實現受體生物的定向改造與改良。遺傳工程廣義： 指以改變生物有機體性狀為目標，采用類似工程技術手段而進行的對遺傳物質的操作， 以改良品質或創(chuàng)造新品種。包括細胞工程、染色體工程、細胞器工程和基因工程等不同的技術層次

2、。狹義：基因工程?？寺。簾o性 ( 繁殖 ) 系或純系。 指由同個祖先經過無性繁殖方式得到的一群由遺傳上同一的 DNA分子、細胞或個體組成的特殊生命群體。2什么是基因克隆及基本要點?3. 舉例說明基因工程發(fā)展過程中的三個重大事件。A) 限制性內切酶和 DNA連接酶的發(fā)現（標志著 DNA重組時代的開始） ； B) 載體的使用； C) 1970 年，逆轉錄酶及抗性標記的發(fā)現。4. 基因工程研究的主要內容是什么？基礎研究：基因工程克隆載體的研究基因工程受體系統(tǒng)的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技術的研究應用研究：基因工程藥物研究轉基因動植物的研究在食品、化學、能源和環(huán)境保護等方面的應用

3、研究第二章基因克隆的工具酶1. 名詞解釋：限制性核酸內切酶：一類能識別雙鏈DNA中特殊核苷酸序列，并使每條鏈的一個磷酸二酯鍵斷開的內脫氧核糖核酸酶?；匚慕Y構：雙鏈DNA中的一段倒置重復序列，當該序列的雙鏈被打開后，可形成發(fā)夾結構。同尾酶：來源不同、識別序列不同，但產生相同粘性末端的酶。同裂酶：不同來源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的識別序列黏性末端： DNA末端一條鏈突出的幾個核苷酸能與另一個具有突出單鏈的DNA末端通過互補配對粘合，這樣的DNA末端，稱為粘性末端。平末端： DNA片段的末端是平齊的。限制性核酸內切酶的酶活性單位（U）：在酶的最適反應條件下，在50 l 容積中， 60 分鐘

4、內完全切割1 gDNA所需的酶量為1 個酶活性單位（unit或 U）限制性核酸內切酶的星活性：指限制性內切酶在非標準條件下，對與識別序列相似的其它序列也進行切割反應，導致出現非特異性的DNA片段的現象。學習必備歡迎下載連桿（ linker）：化學合成的8 12 個核苷酸組成的寡核苷酸片段。以中線為軸兩邊對稱，其上有一種或幾種限制性核酸內切酶的識別序列，酶切后可產生一定的粘性末端，便于與具有相同粘性末端的另一DNA片段連接。銜接頭 （ adaptor ）：化學合成的寡核苷酸，含有一種以上的限制性核酸內切酶識別序列。其一端或兩端具有一種或兩種內切酶切割產生的黏性末端。底物位點優(yōu)勢效應：酶對同一個D

5、NA底物上的不同酶切位點的切割速率不同。激酶：對核酸末端羥基進行磷酸化的酶。2. 說明限制性內切核酸酶的命名原則要點。用屬名第一個字母和種名的頭兩個字母組成的3 個字母斜體的略語表示寄主菌的物種名以及菌株（型）的代號命名。該菌株（種）中發(fā)現的不同的酶按照順序以羅馬字母編號I, II,III 等。如： Escherichia coli用 Eco 表示。第四個字母代表菌株或株型、變種名，若酶存在于質粒上，則需大寫字母表示非染色體遺傳因子。例：Hin d III從流感嗜血菌株（Haemophilus Influenzue ） d 株中分離的第三個酶。EcoR I 表示基因位于Escherichiac

6、oli 中的抗藥性 R 質粒上。前三個字母用斜體，其他用正體表示。如果酶存在于一種特殊菌株中，三個字母后加上菌株名稱符號, 名稱最后部分往往包含羅馬數字, ? 表示在該特殊菌株中發(fā)現這種酶的先后次序。3. 引起限制性核酸內切酶星活性的可能因素有哪些？若使用 buffer不當 ,會有 star activity，而 star activity是指限制酶對所作用的DNA及序列失去專一性,當酶辨認切割位置的能力降低，導致相似的序列或是錯誤的辨認序列長度也會作用， 而產生錯誤的結果。所以當 DNA同時以兩種限制酶處理時，選擇可使兩種酶之活性反應均可達75以上的restriction buffer，若找

7、不到適當的buffer則先加低鹽的buffer使其中一酶作用后，在加入高鹽buffer使另一酶作用，若無法以鹽的高低分別加入不同的 buffer，則先加入一種buffer作用后，加3M NaOAc/95 alcohol沉淀 DNA，再加另一種 buffer作用。4. DNA 片段之間的連接方式有哪些？具黏性末端的 DNA片段之間的連接、具平末端 DNA片段之間的連接、 DNA片段末端修飾后進行連接、 DNA片段加連桿（ linker ）后的連接。5. 什么是 Klenow 酶?有哪些活性 ?在基因工程中有什么作用 ?Klenow DNA 聚合酶是E.coliDNA polymerase 經蛋白

8、酶（枯草桿菌蛋白酶）裂解而從全酶中除去5'-3'外切活性的肽段后的大片段肽段，而聚合活性和3'-5'外切活性不受影響。也稱為Klenow片段（ Klenow fragment ），或 E.coliDNA 聚合酶 大片段。 53聚合酶35 外切酶無小亞基活性6. DNA聚合酶、 RNA聚合酶、反轉錄酶、末端轉移酶、多核苷酸激酶和堿性磷酸酯酶有哪些主要特性？它們在基因工程中的主要用途分別是什么？第三章基因工程的載體1. 名詞解釋：載體 : 指能夠運載外源DNA片段（目的基因） 進入受體細胞， 具有自我復制能力，使外源 DNA片段在受體細胞中得到擴增和表達，不被受體細

9、胞的酶系統(tǒng)所破壞的一類DNA分子?？寺≥d體： 用于在受體細胞中進行目的基因擴增的載體。一般具有較低的分子量、較高的拷貝數和松弛型復制子。主要由細菌質粒或與其它質粒、噬菌體及真核生物病毒的DNA重組構建。學習必備歡迎下載表達載體：使目的基因在宿主細胞中得以表達的載體?？蓪⒅亟M體 DNA導入適合的受體細胞，使所載的目的基因能夠復制、轉錄和翻譯。穿梭載體 :稱雙功能載體 (bifunctionalvector)。能在兩種不同的生物體內復制的載體。質粒 : 指獨立存在于宿主細胞染色體外、能夠自我復制的DNA分子。松弛型質粒 :拷貝數多于10 個的質粒。嚴謹型質粒 ;拷貝數為 1至幾個的質粒。接合質粒；

10、 指質粒所攜帶的基因的功能是使細胞彼此有效地接觸，以便將質粒 DNA從供體細胞轉移至受體細胞。如：質粒上的tra基因使宿主細胞（大腸桿菌）產生菌毛，合成細胞表面物質，促使宿主細胞與受體細胞接合。質粒的不親和性；顯性質粒; 隱性質粒；質粒的遷移作用；多拷貝質粒；整合質粒；穿梭質粒；表達質粒；探針質粒；pUCl8 質粒； pBR322質粒；溶菌生長 ; 溶源生長；原噬菌體；烈性噬菌體；溶原化；柯斯載體或粘粒(cosmid) ； cos 位點；人工染色體2. 作為工程載體必備哪些基本條件？3.試述質粒載體、噬菌體載體、柯斯載體、M13 單鏈絲狀噬菌體載體和酵母人工染色體載體各自的組成特點及其在基因工

11、程中的應用。4簡述質粒的生物學特性有哪些？5構建人工質粒的目的？6理想質粒載體應具備的條件及構建需遵循的原則是什么？7 -DNA作為載體的優(yōu)點是什么？8. 為什么野生型的 噬菌體 DNA不宜作為基因工程載體 ?該如何改造？第四章目的基因的制備1. 名詞解釋：目的基因；基因文庫cDNA 文庫；2. 常規(guī)分離目的基因的方法有哪些？其原理分別是什么？3克隆目的基因的方法有哪些?4什么是基因組文庫(genomic library)?構建基因組文庫的原理，涉及哪些基本過程?它同遺傳學上的基因庫、cDNA文庫有什么不同?第五章目的基因的導入和重組子的篩選1. 名詞解釋：受體細胞；感受態(tài)細胞；轉化；轉導；轉

12、染；體外裝配；轉換子；重組子；轉化率；負篩選；正篩選；a互補篩選2. 試述幾種常用的轉化方法。3. 試述根據載體的選擇標記進行重組子篩選的方法和原理。4. 試述根據插入序列的表型特征進行重組子篩選的方法和原理。5.DNA 片斷之間的連接方式有哪些？各種連接方式的優(yōu)缺點及DNA重組中需要注意什么問題？6受體細胞選擇的原則？第六章外源基因的表達1. 名詞解釋：融合蛋白；分泌蛋白；包涵體；外源基因表達體系2. 大腸桿菌表達載體構成的重要元件有哪些？3. 試比較大腸桿菌、酵母、植物和動物細胞基因表達載體各自組成的特點。4. 真核基因在大腸桿菌中表達存在的問題和高效表達的對策是什么？5. 基因表達產物的

13、檢測方法有哪些？學習必備歡迎下載第七章基因操作的基本技術1名詞解釋： 分子雜交；探針；PCR; 引物；隨機引物；切口位移； 熱啟動；缺口翻譯； Northern 印跡； Southern 印跡2 DNA制備的基本步驟有哪些？3堿裂解法和CTAB法的原理。4凝膠電泳有哪幾類？影響瓊脂糖凝膠電泳的參數有哪些？5 PCR的基本原理是什么？PCR反應體系的組成成份是什么？6試述 PCR反應的程序及參數。7 PCR反應引物設計需遵循的原則有哪些？8試述核酸分子雜交的類型和基本步驟。9. 探針標記的方法有哪些？10說明 Southern 雜交的原理和方法。11.Northern印跡與 Southern 印

14、跡有什么不同?第八章植物基因工程及應用1植物遺傳轉化方法主要有？2基因槍轉化的優(yōu)點？3天然的Ti 質粒能作為表達載體使用嗎？為什么？4理想殺蟲劑應具備什么特性？第九章動物基因工程及應用1. 名詞解釋：轉基因生物；共抑制效應；多效性胚胎干細胞2轉基因共機制效應的特征？3導致轉基因失活的原因可能有哪些？4試述動物基因工程的載體有？5如何篩選轉基因多效性干細胞？第十章醫(yī)學基因工程及應用1. 名詞解釋 : 胰島素 ; 基因診斷 ; 基因治療 ;2. 基因鑒定的作用？3. 如何進行基因治療？基因工程原理練習題及其答案一、填空題1基因工程是 _年代發(fā)展起來的遺傳學的一個分支學科。2基因工程的兩個基本特點是

15、：(1)_ ，(2)_ 。3基因克隆中三個基本要點是：_； _和 _ 。4通過比較用不同組合的限制性內切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的不同大小的片段，可以構建顯示該區(qū)域各限制性內切核酸酶切點相互位置的_。5限制性內切核酸酶是按屬名和種名相結合的原則命名的，第一個大寫字母取自第二、三兩個字母取自_，第四個字母則用_表示。6部分酶切可采取的措施有：(1)_(2)_ (3)_，等。7第一個分離的限制性內切核酸酶是_；而第一個用于構建重組體的限制性內切學習必備歡迎下載核酸酶是 _。8限制性內切核酸酶BsuRI_ 。和 Hae的來源不同，但識別的序列都是_，它們屬于9DNA聚合酶 I 的 Kleno

16、w 大片段是用 _ 切割 DNA聚合酶 I 得到的分子量為76kDa的大片段，具有兩種酶活性：(1)_； (2)_的活性。10為了防止DNA的自身環(huán)化，可用_去雙鏈 DNA_。11 EGTA是 _ 離子螯合劑。12測序酶是修飾了的T7 DNA 聚合酶，它只有_ 酶的活性，而沒有_酶的活性。13切口移位 (nick translation)_的作用。法標記DNA的基本原理在于利用_的 _和14欲將某一具有突出單鏈末端的雙鏈_或 _。DNA 分子轉變成平末端的雙鏈形式，通?？刹捎?5反轉錄酶除了催化DNA的合成外，還具有_的作用，可以將DNA-16基因工程中依據應用對象分有3 種主要類型的載體：_

17、 、_、_。17就克隆一個基因(DNA 片段) 來說，最簡單的質粒載體也必需包括三個部分：_ 、_、_ 。另外，一個理想的質粒載體必須具有低分子量。18一個帶有質粒的細菌在有EB的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，一部分細胞中已測不出質粒，這種現象叫。19 pBR322 是一種改造型的質粒，它的復制子來源于，它的四環(huán)素抗性基因來自于，它的氨芐青霉素抗性基因來自于。20YAC的最大容載能力是，BAC 載體的最大容載能力是。21 pSCl01 是一種復制的質粒。22 pUCl8 質粒是目前使用較為廣泛的載體。pUC系列的載體是通過和兩種質粒改造而來。它的復制子來自，Amp抗性基因則是來自。23噬菌體之所以被

18、選為基因工程載體，主要有兩方面的原因：一是；二是。24 野生型的M13不適合用作基因工程載體，主要原因是和。25黏粒 (cosmid) 是質粒噬菌體雜合載體，它的復制子來自、 COS位點序列來自，最大的克隆片段達到kb。26野生型的噬菌體 DNA不宜作為基因工程載體，原因是：(1)(2)(3)。27噬菌粒是由質粒和噬菌體DNA共同構成的，其中來自質粒的主要結構是，而來自噬菌體的主要結構是。28噬菌體載體由于受到包裝的限制，插入外源DNA片段后，總的長度應在噬菌體基因組的的范圍內。29在分離 DNA時要使用金屬離子螯合劑，如EDTA和檸檬酸鈉等，其目的是。學習必備歡迎下載30用乙醇沉淀DNA時，

19、通常要在DNA溶液中加人單價的陽離子，如其目的是。31 引物在基因工程中至少有4 個方面的用途：(1)(2)NaCl 和NaAc，(3)(4)。32 Clark 發(fā)現用 Taq DNA聚合酶得到的PCR反應產物不是平末端，而是有一個突出堿基末端的雙鏈DNA分子。根據這一發(fā)現設計了克隆PCR產物的33在 cDNA的合成中要用到S1 核酸酶，其作用是切除在。34乙醇沉淀DNA的原理是。35假定克隆一個編碼某種蛋白質的基因，必須考慮其表達的三個基本條件：(1)_ (2)_(3)_。36受體細胞的感受態(tài)是_ 。37 DNA 重組連接的方法大致分為四種：(1)_(2)_(3)_(4)_。38將含有外源基

20、因組一個酶切片段的質粒稱之為含有一個_ ，各種此類質粒的集合體稱之為構建了一個_。39將含有一個mRNA的 DNA拷貝的克隆稱作一個_ ，源于同一批RNA制備物的克隆群則構建了一個_。40只要知道基因組中某一特定區(qū)域的部分核苷酸組成，用_可以將這段DNA進行百萬倍的擴增。41人工感受態(tài)的大腸桿菌細胞在溫度為_時吸附 DNA, _ 時攝人 DNA。42目前，在重組體的篩選中，已經發(fā)展了許多構思巧妙、具有極高準確性的篩選方法。大致可以分為：(1)_(2)_(3)_(4)_等。43 PCR擴增篩選重組體是比較簡便的篩選方法，它適合于_ 。44 核酸雜交探針可分為兩大類：DNA探針和 RNA探針。其中

21、DNA探針又分為 _探針和 _ 探針。45如果用限制性內切核酸酶切割雙鏈DNA產生 5突出的黏性末端，則可以用_進行 3末端標記。如果用限制性內切核酸酶切割DNA產生的是3突出的黏性末端，可以用 _ 進行 3末端標記。46單鏈 DNA探針的標記可以采用下列方法：(1)_(2)_(3)_。47根據48Northern雜交的結果可以說明：_ 。差示雜交(differentialhybridization)技術需要_ 。49 RNA分子經凝膠電泳后按大小不同分開，然后被轉移到一張硝酸纖維素膜( 尼龍膜 )上，同一放射DNA探針雜交的技術稱_ 。50在 _ 技術中， DNA限制性片段經凝膠電泳分離后，

22、被轉移到硝酸纖維素膜 ( 或尼龍膜 ) 上，然后與放射性的DNA探針雜交。51可用T4 DNA 聚合酶進行平末端的DNA標記，因為這種酶具有_ 和 _的活性。52根據外源片段提供的遺傳表型篩選重組體，必需考慮三種因素：(1)_(2)_(3)_。學習必備歡迎下載53 Northern印跡和Southern印跡有兩點根本的區(qū)別：(1)_(2)_。54放射免疫篩選的原理基于以下三點：(1)_(2)_(3)_。答案1702 (1) 分子水平上的操作；(2) 細胞水平上的表達3 克隆基因的類型；受體的選擇；載體的選擇4限制性酶切圖譜5屬名的第一個字母；種名的前兩個字母；株名6 (1) 減少酶量； (2)

23、 縮短反應時間；(3) 增大反應體積7 EcoK；EcoRl8 GGCC；異源同工酶9 枯草桿菌蛋白酶； (1)5'-3' 合成酶的活性； (2)3'-5' 外切核酸酶10堿性磷酸酶；5端的磷酸基團11 Ca2+12 5'-3' 合成； 3'-5'外切13 DNA 聚合酶 I ： 5' 一 3' 外切核酸酶； 5' 一 3' 合成酶14 S1 核酸酶切割； DNA聚合酶補平15核酸水解酶 H； RNA16質粒 DNA；病毒 DNA；質粒和病毒DNA雜合體17 復制區(qū)： 含有復制起點；選擇標記： 主要

24、是抗性基因；克隆位點： 便于外源DNA的插入18質粒消除 ( 或治愈 )19， pMBl ； pSCl01 ； pSF2124(R 質粒 )20 1000kb ； 300kb21. 嚴緊22 pBR322 和 M13； pMBl；轉座子23它在細菌中能夠大量繁殖，這樣有利于外源DNA的擴增；對某些噬菌體( 如噬菌 ) 的遺傳結構和功能研究得比較清楚，其大腸桿菌宿主系統(tǒng)的遺傳也研究得比較詳盡24沒有合適的限制性內切核酸酶識別位點；選擇標記25質粒；噬菌體；4526 (1)分子量大， (2) 酶的多切點，(3) 無選擇標記27復制區(qū)；IG區(qū)28 75 1052+29螯合 Mg 離子，抑制核酸酶的活

25、性30中和 DNA分子的負電荷，增加DNA分子間的凝聚力31 (1) 合成探針； (2) 合成 cDNA； (3) 用于 PCR反應； (4) 進行序列分析32 T載體33第二鏈合成時形成的發(fā)夾環(huán)?34乙醇使DNA分子脫水35 (1) 保持正確的可讀框(2) 能夠使其轉錄的啟動子(3)具有翻譯的起始和終止信號學習必備歡迎下載36接受外源DNA的生理狀態(tài)37 (1) 黏性末端連接；(2)平末端連接；38 基因組 DNA克??；基因組 DNA文庫39 cDNA克??； cDNA文庫(3)同聚物接尾連接；(4)接頭連接法40聚合酶鏈式反應41 0 C；42 C(PCR)42 (1) 遺傳學方法；(2)物

26、理篩選法；(3)核酸雜交法；(4)表達產物分析法43插入外源片段的種類較多，大小又極為相似的重組體的篩選44基因組DNA； cDNA45 Klenow 酶填補的方法；T4DNA聚合酶46 (1) 用 M13噬菌體載體合成單鏈DNA探針；(2)從 mRNA反轉錄合成單鏈cDNA探針； (3)用不對稱PCR合成單鏈DNA探針47外源基因是否進行了轉錄48兩種不同的細胞群體能夠表達不同的基因，即在一個群體中能夠表達一些基因，而另一個細胞群體中不能表達這些基因49 Northern印跡50 Southern 印跡51 53合成酶； 35外切核酸酶52 (1) 克隆的是完整的基因；(2) 使用的是表達載

27、體；(3) 不含內含子53 (1) 印跡的對象不同：Northern是 RNA，Southern 是 DNA；(2) 電泳條件不同，前者是變在54(1)性條件，后者是非變性條件抗體能夠被吸附到固體支持物上；(2) 同一個抗原可以同幾種抗體結合；(3) 抗體能夠被標記二、選擇題 ( 單選或多選 )1因研究重組DNA技術而獲得諾貝爾獎的科學家是(a)AKornberg (b)WGilbert (c)PBerg (d)B2第一個作為重組DNA載體的質粒是 () McClintock(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl83關于宿主控制的限制修飾現象的本質，下列描述中

28、只有()不太恰當。(a) 由作用于同一 DNA序列的兩種酶構成(b) 這一系統(tǒng)中的核酸酶都是類限制性內切核酸酶(c) 這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA進行修飾(d) 不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制 - 修飾系統(tǒng)4型限制性內切核酸酶：()(a) 有內切核酸酶和甲基化酶活性且經常識別回文序列(b) 僅有內切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一種酶提供(c)限制性識別非甲基化的核苷酸序列(d)有外切核酸酶和甲基化酶活性(e) 僅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一種酶提供5下面有關限制酶的敘述哪些是正確的?()(a) 限制酶是外切酶而不是內切酶(b) 限制酶在特異序列 ( 識別位點 ) 對

29、 DNA進行切割(c) 同一種限制酶切割 DNA時留下的末端序列總是相同的學習必備歡迎下載(d)一些限制酶在識別位點內稍有不同的點切割雙鏈DNA，產生黏末端(e)一些限制酶在識別位點內相同的位置切割雙鏈DNA，產生平末端6第一個被分離的類酶是：()(a)EcoK(b)Hind(c)Hind (d)EcoB7在下列進行DNA部分酶切的條件中，控制那一項最好(a)反應時間(b)酶量(c)反應體積(d)8在下列試劑中，那一種可以螯合Ca2+離子 ?()(a)EDTA(b)檸檬酸鈉(c)SDS(d)EGTA?()酶反應的溫度9在下列工具酶中，那一種可以被EGTA抑制活性 ?()(a)S1單鏈核酸酶(b

30、)末端轉移酶(c)堿性磷酸酶(d)Bal 31核酸酶10限制性內切核酸酶可以特異性地識別：()(a) 雙鏈 DNA的特定堿基對(b) 雙鏈 DNA的特定堿基序列(c)特定的三聯密碼(d)以上都正確11下列關于限制性內切核酸酶的表示方法中，正確一項的是(a)Sau3A I (b)E coRI (c)hind III (d)Sau 3A1()。12限制性內切核酸酶的星號活性是指：()(a) 在非常規(guī)條件下，識別和切割序列發(fā)生變化的活性。(c)切割速度大大加快(d)識別序列與原來的完全不同(b)活性大大提高13下面哪一種不是產生星號活性的主要原因?()(a)甘油含量過高(b)反應體系中含有有機溶劑(

31、c) 含有非 Mg2+的二價陽離子(d) 酶切反應時酶濃度過低14關于宿主控制的限制修飾現象的本質，下列描述中只有()不太恰當(a) 由作用于同一 DNA序列的兩種酶構成(b) 這一系統(tǒng)中的核酸酶都是類限制性內切核酸酶(c) 這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA進行修飾(d) 不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制 - 修飾系統(tǒng)15在長模板鏈的指導下引物延伸合成長的DNA互補鏈時應選用()(a)T4DNA聚合酶(b)Klenow酶(c) 大腸桿菌 DNA聚合酶 I (d)T7DNA聚合酶16末端轉移酶是合成酶類，()(a) 作用時不需要模板(b) 在 Ca2+ 的存在下，可以在突出的 3，末端

32、延長 DNA鏈(c) 在 Ca2+ 的存在下，可以在隱蔽的 3，末端延長 DNA鏈(d) 上述說法有兩種是正確的17在基因工程中，可用堿性磷酸酶()(a)防止 DNA的自身環(huán)化(b)同多核苷酸激酶一起進行DNA的 5，末端標記(c) 制備突出的 3，末端 (d) 上述說法都正確18下列酶中，除()外都具有磷酸酶的活性(a)核酸外切酶(b)外切酶(c)單核苷酸激酶19下列哪一種酶作用時需要引物? ()(a)限制酶(b)末端轉移酶(c)反轉錄酶(d)DNA(d)堿性磷酸酶連接酶20 S1 核酸酶的功能是()(a) 切割雙鏈的 DNA (b) 切割單鏈的 RNA (c) 切割發(fā)夾環(huán) (d) 以上有兩

33、項是正確的21 Klenow 酶與 DNA聚合酶相比，前者喪失了()的活性。學習必備歡迎下載(a)5，-3 ，合成酶，(b)3 ，-5 ，外切酶 (c)5，-3，外切酶(d)轉移酶22下面關于松弛型質粒(relaxed plasmid)性質的描述中，() 是不正確的(a) 質粒的復制只受本身的遺傳結構的控制，而不受染色體復制機制的制約，因而有較多的拷貝數(b)可以在氯霉素作用下進行擴增(c)通常帶有抗藥性標記(d) 同嚴緊型質粒融合后，雜合質粒優(yōu)先使用松弛型質粒的復制子23基因工程中所用的質粒載體大多是改造過的，真正的天然質粒載體很少，在下列載體中只有 ( ) 被視為用作基因工程載體的天然質粒

34、載體(a)pBR322(b)pSCl01(c)pUBll0(d)pUCl824下列哪種克隆載體對外源(a)質粒(b)黏粒(c)DNA的容載量最大 ?(酵母人工染色體(YAC)(d)噬菌體(e) cDNA表達載體25. 松弛型質粒： ( )(a) 在寄主細胞中拷貝數較多(b) 可用氯霉素擴增(c)一般沒有選擇標記(d)上述 (a) 、 (b) 兩項正確26 Col El是惟一用作基因工程載體的自然質粒，這種質粒：()(a)是松弛復制型（ b) 具有，四環(huán)素抗性(c)能被氯霉素擴增(d)能產生腸桿菌素27同一種質粒DNA，以三種不同的形式存在，電泳時，它們的遷移速率是：()(a)OCDNA>

35、SCDNA>LDNA(b)SCDNA>LDNA>OCDNA(c)LDNA>OCDNA>SCDNA(d)SCDNA>OCDNA>LDNA28 pBR322是一種改造型的質粒，含有兩個抗性基因，其中四環(huán)素抗性基因來自：(a)ColEl (b)Ri質粒(c)pSCl01 (d)pUCl8()29關于穿梭質粒載體，下面哪一種說法最正確?()(a) 在不同的宿主中具有不同的復制機制(b) 在不同的宿主細胞中使用不同的復制起點(c) 在不同的宿主細胞中使用不同的復制酶(d) 在不同的宿主細胞中具有不同的復制速率30能夠用來克隆32kb 以下大小的外源片段的質粒載體

36、是()(a)charomid (b)plasmid (C)cosmid (d)phagemid31第一個作為重組DNA載體的質粒是()(a)pBR322 (b)ColEl(c)pSCl01 (d)pUCl832. Ti質粒： ()(a)可從農桿菌轉到植物細胞中(b)作為雙鏈DNA被轉移(c) 在植物中導致腫瘤(d) 介導冠癭堿的合成， 作為細菌的營養(yǎng)物和植物的生長激素(e) 需要細菌的 vir 基因幫助轉移(f)在植物細胞中作為染色體外質粒33黏粒 (cosmid) 是一種人工建造的載體，()(a)它具有 COS位點，因而可進行體外包裝(b)它具有質粒DNA的復制特性(c) 進入受體細胞后，

37、可引起裂解反應(d) 進入受體細胞后， 可引起溶源化反應34有兩種確定核酸中核苷酸序列的方法：化學序列分析法(Maxam-Glbert)和酶學序列分析法(Sanger) 。酶學測序法的基本原理優(yōu)點是：( )(a) 堿基與特殊染料間不同的相互作用(b) 一個合成引物的延伸和 DNA修復合成的可靠終止(c) 限制性位點與 DNA末端標記的相關性學習必備歡迎下載(d) 可同時對 DNA雙螺旋的兩條鏈進行測序(e) 反應是 DNA特異的， RNA不會帶來干擾。這樣既減少純化步驟，也節(jié)約了開支。35關于 cDNA的最正確的說法是：()(a)同 mRNA互補的單鏈DNA(b)同 mRNA互補的雙鏈DNA(

38、c)以 mRNA為模板合成的雙鏈DNA(d)以上都正確36用堿法分離質粒DNA時，染色體DNA之所以可以被除去，是因為：()(a) 染色體 DNA斷成了碎片 (b) 染色體 DNA分子量大，而不能釋放(c)染色體變性后來不及復性(d)染色體未同蛋白質分開而沉淀37. 關于堿解法分離質粒 DNA，下面哪一種說法不正確 ?( )(a)溶液 I 的作用是懸浮菌體(b)溶液的作用是使DNA變性(c) 溶液的作用是使 DNA復性(d) 質粒 DNA分子小，所以沒有變性，染色體變性后不能復性38. Clark做了一個有趣的實驗，發(fā)現TaqDNA聚合酶可以不需要模板，在雙鏈DNA的末端加一個堿基，主要是加(

39、)(a)dGTP(b)dATP(c)dCTP(d)dTTP39根據構建方法的不同，基因文庫分為基因組文庫、cDNA文庫等。在下列文庫中，( )屬 cDNA文庫(a) YAC文庫 (b) MAC文庫(c)扣減文庫 (d) BAC文庫40下面關于多克隆位點(multiple clonesite,MCS)的描述，不正確的句是 ( )(a)僅位于質粒載體中(b)具有多種酶的識別序列(c)不同酶的識別序列可以有重疊(d)一般是人工合成后添加到載體中41在 cDNA技術中，所形成的發(fā)夾環(huán)可用()(a)限制性內切核酸酶切除(b)用 31外切核酸酶切除(c)用 S1 核酸酶切除(d)用 51外切核酸酶切除42

40、在 DNA的酶切反應系統(tǒng)中，通常：( )(a)用 SSC緩沖液 (b)2+加入 Mg作輔助因子(c) 加入 BSA等保護劑 (d) 上述說法中，有兩項是正確的43黏性末端連接法，不僅操作方便，而且()(a)產生新切點(b)易于回收外源片段(c)載體不易環(huán)化(d) 影響外源基因的表達44在下列表型中， ()是基因工程上理想的受體菌表型(a)r+ +*(b)r- -(C)r- -+(d)r+ +-mrecmrecmrecmrec45關于 DNA接頭在基因工程中的作用，下列說法中哪一項不正確?( )(a) 給外源 DNA添加適當的切點(b) 人工構建載體(c)調整外源基因的可讀框(d)增加調控元件4

41、6 cDNA文庫包括該種生物的()(a)某些蛋白質的結構基因(b)所有蛋白質的結構基因(c)所有結構基因(d)內含子和調控區(qū)47下列關于建立cDNA文庫的敘述中，哪一項是錯誤的?()(a) 從特定組織或細胞中提取 DNA或 RNA(b) 用反轉錄酶合成 mRNA的對應單鏈 DNA(c) 以新合成的單鏈 DNA為模板合成雙鏈 DNA(d) 新合成的雙鏈 DNA甲基化48下列對黏性末端連接法的評價中，哪一項是不正確的? ()學習必備歡迎下載(a)操作方便(b)易于回收片段(c)易于定向重組(d)載體易于自身環(huán)化，降低重組率49關于感受態(tài)細胞性質的描述，下面哪一種說法不正確?()(功具有可誘導性(b)具有可轉移性(c)細菌生長的任何時期都可以出現(d)不同細菌出現感受態(tài)的比例是不同的50下面關于用T4 多核苷酸激酶標記5'端制備探針的描述中()是不正確的。(a)既能標記DNA，又能標記RNA(b)既能標記雙鏈DNA又能標記單鏈DNA(c) 只能標記突出的 5' 端不能標記其他類型末端(d)DNA或 RNA必須有 5'-OH 的存在51 Southem 印跡的 DNA探針 ()雜交。(a)只與完全相同的片段(b)可與任何含有相同序列的DNA片段(c)可與任何含有互補序列的DNA片段(