白細(xì)胞計(jì)數(shù)2課件分享

1、白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）作者：作者：dr.fengdr.feng白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）2實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)一、 白細(xì)胞計(jì)數(shù)白細(xì)胞計(jì)數(shù) n1.原理：血液經(jīng)稀乙酸定量稀釋并破壞成熟紅細(xì)胞，在血細(xì)原理：血液經(jīng)稀乙酸定量稀釋并破壞成熟紅細(xì)胞，在血細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)規(guī)定區(qū)域內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)，換算成每升血液胞計(jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)規(guī)定區(qū)域內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)，換算成每升血液中白細(xì)胞數(shù)。中白細(xì)胞數(shù)。n2.試劑器材試劑器材 白細(xì)胞稀釋液：冰乙酸白細(xì)胞稀釋液：冰乙酸 2.0ml 10g/l亞甲藍(lán)亞甲藍(lán) 3滴滴 加蒸餾水加蒸餾水 至至100ml2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù)

2、(2)（課件分享）3器材器材 改良牛鮑血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及專用改良牛鮑血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及專用蓋片、微量吸管、帶孔蓋片、微量吸管、帶孔吸頭、吸頭、1ml刻度移液管、刻度移液管、小試管、潔凈軟紗布、小試管、潔凈軟紗布、干棉球、光學(xué)顯微鏡。干棉球、光學(xué)顯微鏡。2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）42020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）52020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）6毛細(xì)血管采血標(biāo)準(zhǔn)操作程序毛細(xì)血管采血標(biāo)準(zhǔn)操作程序 操作步驟：操作步驟：n1 采血部位成人以左手無名指內(nèi)側(cè)為宜，半歲以下嬰幼兒通常采血部位成人以左手無名指內(nèi)側(cè)為宜，半歲以下嬰幼兒通常自拇指內(nèi)側(cè)或足跟兩側(cè)

3、采血。自拇指內(nèi)側(cè)或足跟兩側(cè)采血。n2 輕輕按摩采血部位。輕輕按摩采血部位。n3 用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）74 緊捏刺血部位，使其自然充血。緊捏刺血部位，使其自然充血。5 用無菌刺針穿刺取血，動(dòng)作應(yīng)迅速，深度用無菌刺針穿刺取血，動(dòng)作應(yīng)迅速，深度 23mm，稍加擠壓，稍加擠壓以血液流出為宜。以血液流出為宜。6 用干棉球擦去第一滴血。用干棉球擦去第一滴血。7 按需要依次采血。按需要依次采血。8 采血完畢，用干棉球壓住傷口，止血片刻。采血完畢，用干棉球壓住傷口，止血片刻。2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)

4、（課件分享）8 微量吸管的使用微量吸管的使用n1將帶孔乳膠吸頭輕輕套在微量吸管上，連接緊密不漏氣；將帶孔乳膠吸頭輕輕套在微量吸管上，連接緊密不漏氣；n2拇指和中指夾住吸頭中下端，示指蓋住吸頭小孔，拇、中指輕微拇指和中指夾住吸頭中下端，示指蓋住吸頭小孔，拇、中指輕微擠壓排出適量空氣；擠壓排出適量空氣；n3將微量吸管插入抗凝血，拇、中指緩慢松勁（松動(dòng)快血液會(huì)吸入將微量吸管插入抗凝血，拇、中指緩慢松勁（松動(dòng)快血液會(huì)吸入吸頭），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有氣泡），吸管呈吸頭），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有氣泡），吸管呈水平略下垂，松開示指；水平略下垂，松開示指；n4用干棉球順吸管向下拭盡管

5、外余血（保證血量準(zhǔn)確），輕觸吸管用干棉球順吸管向下拭盡管外余血（保證血量準(zhǔn)確），輕觸吸管下口吸去多余血量，使管內(nèi)抗凝血正處所需刻度；下口吸去多余血量，使管內(nèi)抗凝血正處所需刻度；n5將微量吸管插入小試管底部，三指輕微用力慢慢排出血液，用上將微量吸管插入小試管底部，三指輕微用力慢慢排出血液，用上清液沖洗管內(nèi)余血清液沖洗管內(nèi)余血2-3次，輕搖試管混勻；次，輕搖試管混勻；n6拔出微量吸管棄入污物桶。拔出微量吸管棄入污物桶。2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）9 3.操作步驟操作步驟（1）加稀釋液加稀釋液 用移液管用移液管向小試管內(nèi)加入向小試管內(nèi)加入0.38ml白細(xì)胞稀釋液。白細(xì)胞稀釋液。

6、（2）采血、稀釋用微量吸管采血）采血、稀釋用微量吸管采血20ul，拭去管外余血，釋放于小，拭去管外余血，釋放于小試試 管管底部，用上部底部，用上部稀釋液洗凈吸管內(nèi)余血，稀釋液洗凈吸管內(nèi)余血，輕搖試管輕搖試管混勻，靜混勻，靜置等其溶血。置等其溶血。（3）清潔計(jì)數(shù)板及蓋片（動(dòng)作輕柔），夾持蓋片緣縱向前推輕放于）清潔計(jì)數(shù)板及蓋片（動(dòng)作輕柔），夾持蓋片緣縱向前推輕放于兩側(cè)支持堤上。兩側(cè)支持堤上。（4）充計(jì)數(shù)池將小試管輕微振蕩）充計(jì)數(shù)池將小試管輕微振蕩2min，立即以一次性微量吸管吸，立即以一次性微量吸管吸取混勻后的白取混勻后的白細(xì)胞懸液，充入計(jì)數(shù)池內(nèi)。細(xì)胞懸液，充入計(jì)數(shù)池內(nèi)。靜置靜置2-3min，使細(xì)

7、胞沉，使細(xì)胞沉于于計(jì)數(shù)池底面計(jì)數(shù)池底面。（5）調(diào)試顯微鏡）調(diào)試顯微鏡 將計(jì)數(shù)板放置載物臺(tái)上，將計(jì)數(shù)板放置載物臺(tái)上，選擇（選擇（4 ）低倍鏡，低倍鏡，調(diào)節(jié)聚光器使光線較暗，調(diào)節(jié)旋鈕找到方格線，轉(zhuǎn)至低倍鏡調(diào)節(jié)聚光器使光線較暗，調(diào)節(jié)旋鈕找到方格線，轉(zhuǎn)至低倍鏡（10），），調(diào)節(jié)光亮調(diào)節(jié)光亮 。（6）計(jì)數(shù)計(jì)數(shù) 低倍鏡下計(jì)數(shù)四角低倍鏡下計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)，壓線細(xì)胞個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)，壓線細(xì)胞數(shù)數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右。2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）102020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）11血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方格n計(jì)數(shù)板上下各一個(gè)計(jì)數(shù)池n計(jì)數(shù)區(qū)

8、域分為9個(gè)大方格n四角的大方格各劃分為16個(gè)中方格n中央大方格劃分為25個(gè)中方格n四角的大方格為白細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)n中央大方格四角和正中5個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）12結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算白細(xì)胞總數(shù)白細(xì)胞總數(shù) =4大格白細(xì)胞數(shù)（大格白細(xì)胞數(shù)（n） /410 20 106 = n 20 109/l用用. 109/l（小數(shù)點(diǎn)后一位）表示（小數(shù)點(diǎn)后一位）表示2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）13 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)n 稀釋液，小試管、計(jì)數(shù)板稀釋液，小試管、計(jì)數(shù)板n 采血采血n 充池充池 n 計(jì)數(shù)原則計(jì)數(shù)原則n wbc過多過多n wbc過少過少 n w

9、bc校正校正n 顯微鏡調(diào)試顯微鏡調(diào)試 2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）145.注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)(1).稀釋液密封保存，防止污染，小試管、計(jì)數(shù)板、蓋片均須清潔，稀釋液密封保存，防止污染，小試管、計(jì)數(shù)板、蓋片均須清潔，以免雜質(zhì)、微粒等被誤認(rèn)為細(xì)胞。以免雜質(zhì)、微粒等被誤認(rèn)為細(xì)胞。(2).采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng)，不能過度擠壓，防止組織液滲入或采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng)，不能過度擠壓，防止組織液滲入或采血時(shí)間太長引起血液凝固。采血時(shí)間太長引起血液凝固。(3).稀釋液和采血量要準(zhǔn)確，充分混勻，充液適量，無不足、外溢稀釋液和采血量要準(zhǔn)確，充分混勻，充液適量，無不足、外溢和氣泡，細(xì)胞分布均勻。和

10、氣泡，細(xì)胞分布均勻。(4).白細(xì)胞總數(shù)在參考范圍內(nèi)，大方格間的細(xì)胞數(shù)不得相差白細(xì)胞總數(shù)在參考范圍內(nèi)，大方格間的細(xì)胞數(shù)不得相差10個(gè)個(gè)以上，兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過以上，兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過10。(5).白細(xì)胞數(shù)量過高時(shí)，可加大稀釋倍數(shù)，白細(xì)胞數(shù)量過低時(shí)，可白細(xì)胞數(shù)量過高時(shí)，可加大稀釋倍數(shù)，白細(xì)胞數(shù)量過低時(shí)，可計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)8個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）15(6).一些貧血患者血液中有核紅細(xì)胞增多，會(huì)計(jì)數(shù)在白細(xì)胞一些貧血患者血液中有核紅細(xì)胞增多，會(huì)計(jì)數(shù)在白細(xì)胞總數(shù)內(nèi)，應(yīng)校正?？倲?shù)內(nèi)，應(yīng)校正。校正公式：白細(xì)胞校正數(shù)

11、校正公式：白細(xì)胞校正數(shù)/l=m（100/100+n）m為未校正前白細(xì)胞數(shù)，為未校正前白細(xì)胞數(shù)，n為在白細(xì)胞分類時(shí)，計(jì)數(shù)為在白細(xì)胞分類時(shí)，計(jì)數(shù)100個(gè)白個(gè)白細(xì)胞的同時(shí)計(jì)數(shù)到的有核紅細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞的同時(shí)計(jì)數(shù)到的有核紅細(xì)胞數(shù)。(7).調(diào)試顯微鏡調(diào)試顯微鏡將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板平放于載物臺(tái)，低倍鏡處所充計(jì)數(shù)池正中蓋將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板平放于載物臺(tái)，低倍鏡處所充計(jì)數(shù)池正中蓋片略上方，向下微調(diào)載物臺(tái)（防止壓碎蓋片）至看清計(jì)數(shù)區(qū)片略上方，向下微調(diào)載物臺(tái)（防止壓碎蓋片）至看清計(jì)數(shù)區(qū)域內(nèi)分隔線條為止。域內(nèi)分隔線條為止。2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）166.細(xì)胞計(jì)數(shù)原則細(xì)胞計(jì)數(shù)原則n大方格四邊壓線細(xì)胞大方格四邊壓線細(xì)胞數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下，數(shù)下，n弓形移動(dòng)弓形移動(dòng)2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）177.正常參考值正常參考值成人成人 ： （ 4.0-10.0）109/l新生兒：新生兒： （15.0-20.0）109/l2020-12-24白細(xì)胞計(jì)數(shù) (2)（課件分享）188.考核評(píng)價(jià)考核評(píng)價(jià) a. 常規(guī)考核標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)考核標(biāo)準(zhǔn) （rcs）rcs= 100%評(píng)價(jià)：評(píng)價(jià)： 白細(xì)胞白細(xì)胞 4.0109/l者，者， rcs30% 白細(xì)胞在（白細(xì)胞在（4.1-14.9）109/