2樣品前處理-2.

1、22. 3固相萃取(Solid phase extraction, SPE)傳統(tǒng)萃?。↙LE）技術(shù)缺點(diǎn)“血液、尿液、唾液等生理體液以及組織勻漿 液中萃取目標(biāo)物，萃取劑不能確保對(duì)所有目 標(biāo)物都有良好的萃取性能（大的Kd值）/濃度低，影響檢測(cè)限丁體液內(nèi)加入有機(jī)溶劑，如甲醇.丙酮.乙睛 等除蛋白（樣品溶液體積的23倍）,離心 沉淀后取上清液檢測(cè)，體積增大，濃度降低“氮?dú)饬鳚饪s，因體積大，費(fèi)時(shí)、費(fèi)氮?dú)?） SPE工作原理固相萃取就是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo) 化合物吸附，與樣品的基體和干擾化合物分離，然 后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附，達(dá)到分離和富集 目標(biāo)化合物的目的。已經(jīng)取代LLE等傳統(tǒng)技術(shù)，成

2、為目前應(yīng)用最為普遍 的前處理技術(shù)。與色譜工作原理類似，但分辨率不如色譜4優(yōu)點(diǎn)：最終洗脫可以采用較少體積洗脫劑，獲得較高 最終濃度可以靈活選擇吸附劑，從水相、有機(jī)相中萃取 各種化合物省時(shí)，平均縮短2/3,樣品處理數(shù)量增加:省耗，節(jié)約溶劑和試劑，減少有機(jī)廢物產(chǎn)生回收率更高改善測(cè)定重現(xiàn)性，無交叉污染樣品處理簡(jiǎn)單，無乳化現(xiàn)象健康，對(duì)機(jī)體傷害小；不使用玻璃器皿:操作簡(jiǎn)便，可自動(dòng)化處理缺點(diǎn)：最后的洗脫溶劑不一定適合后續(xù)的分析系統(tǒng)， 故需要蒸干后重新溶解殘?jiān)滔辔⑤腿。⊿PME）無溶劑萃取技術(shù)，可克 服此問題62）應(yīng)用領(lǐng)域 應(yīng)用領(lǐng)域：化學(xué).化工行業(yè).制藥行業(yè).臨床醫(yī)學(xué)研究.食 品安全領(lǐng)域.煙草行業(yè).環(huán)境保護(hù)

3、、中草藥研究、 等處理樣品種類：固體樣品事先轉(zhuǎn)化為液體:活化/潤(rùn)濕SPE柱，上樣一些化合物被保留淋洗，除掉部分干擾物:洗脫，溶劑洗脫得到目標(biāo)萃取 物 N?氣流吹干流動(dòng)相溶解殘?jiān)后w樣品,萃取半揮發(fā)、不會(huì)發(fā)性目標(biāo)物3) SPE過程 必分析檢:千枕柯4）SPE裝置目前已有的SPE裝置形式:萃取柱（盒八萃取盤.吸管柱.多孔板等SPE裝置形式小柱體積V35ml,吸附劑重量10mg6g為中等數(shù)量樣品設(shè)計(jì)食品安全.環(huán)境分析和研究實(shí)驗(yàn)室吸附劑重量260mg上為高通量分析設(shè)計(jì)（DMPK/BA/BE實(shí)驗(yàn)室）IMEIution板用于微量樣品和高靈敏度分析柱芯式（需Sentry Guard套件）和標(biāo)準(zhǔn)柱由切換閥和軟

4、件控制，無需人工操作10常見SPE小柱結(jié)構(gòu)聚合物整體柱吸管SPESPE動(dòng)力操作方式重力.壓力、真空操作方式：手動(dòng)、自動(dòng)在線.離線11抽真空ResevoirwithAdapter16SPE 操作驅(qū)動(dòng)力：壓力壓力注射器提取小柱接頭adaptor提取小柱簡(jiǎn)易SPE裝置：真空動(dòng)力USE 12D18在線雙柱切換SPE+HPLCHPLCSPE粒徑 柱效 死體積 柱長(zhǎng)塔板數(shù)5|um高 小530cm10000Pump AInjectorlCEaou del5）萃取介質(zhì)顆粒介質(zhì). Extraction-ElutionzCEaoo delPump AInjector.B：ZuumlondelLuEn-oo del

5、一coIMnuvPump B174080|nm低天lcm 180.25 meq/gOasis WAXpKa 60.6 meq/g32Oasis MCX 吸附劑上堿性化合物的作用模式:Mi xed-Mode Cat ion ic-eXchanger（堿性藥物）樣品預(yù)處理活化/平衡：MeOH/Water上樣清洗仁2%甲酸水溶液（目標(biāo)鎖定）清洗 2:100% M&OH （強(qiáng)烈渣洗）洗脫：2% NHOH-MeOH （目標(biāo)釋放）33溶劑蒸發(fā)/重新定容（選項(xiàng)）34Oasis MAX吸附劑上酸性化合物的作用模式:Mixed-Mode Anionic-eXchanger（酸性藥物）樣品預(yù)處理活化/平衡

6、：MeOH/Water上樣清洗2%氨汆（目標(biāo)鎖定）、100% MeOH（強(qiáng)烈清洗）洗脫.2%甲酸MeOH（目標(biāo)釋放）溶劑蒸發(fā)/重新定容35（選項(xiàng)）36固相萃取過程的一般步驟反相萃取上樣：用能夠溶解樣品的弱溶劑攜帶樣品上柱，既要保證樣 品分析物的有效溶解，又要確保溶劑強(qiáng)度不至于把被分析 化合物從柱上洗脫下來；淋洗：用具有一定強(qiáng)度的混合溶劑淋洗去除干擾雜質(zhì)，確保雜質(zhì)被洗脫，而被分析化合物有效的保留在柱上;洗骯：用較強(qiáng)的溶劑把被分析化合物從柱上替換洗脫下來。甲醇和水樣品水溶液5%甲醇水溶液LT活化及平衡T上樣活化:依次用強(qiáng)溶劑、弱溶劑清洗可選步驟被測(cè)組分（緩沖溶液）進(jìn)行活化;甲醇洗脫38:活化及平衡:上樣:清洗:洗脫5-10 mL/min0.5 - 5 mL/min液流不能成線1 - 5 mL/min0.5 - 5 mL/min-液流不能成線:與SPE產(chǎn)品的規(guī)格及萃取介質(zhì)類型有關(guān)37根據(jù)目標(biāo)化合物理化性質(zhì)選擇使用的SPE類型制作化合物凈化洗脫曲線，強(qiáng)溶劑弱溶劑以不同比例，由弱強(qiáng)逐漸增加洗脫強(qiáng)度，通過儀器測(cè)定的回收率來確定最佳的淋洗和洗脫溶劑組成和比例在最佳洗脫