《細(xì)胞工程》課件(新人教版-選修3)

1、1專題專題細(xì)胞工程細(xì)胞工程 2.動(dòng)物細(xì)胞工程22.2 動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程單克隆抗體等等 動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞融合是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。3為什么要進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?1.1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)如何進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)?培養(yǎng)時(shí)又需要提供哪些必要條件呢？2.2.12.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) 從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它們分散從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它們分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。些細(xì)胞生長和增殖。1.1概念概念4動(dòng)

2、物細(xì)胞的培養(yǎng)過程 幼齡動(dòng)物幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官取動(dòng)物器官和組織和組織剪碎組織剪碎組織胰蛋白酶處理胰蛋白酶處理細(xì)胞培細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)51.2 1.2 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程n胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液細(xì)胞懸液10代細(xì)胞代細(xì)胞50代細(xì)胞代細(xì)胞剪碎胰蛋白酶洗滌、稀釋、洗滌、稀釋、分離分離原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)用用胰蛋白酶胰蛋白酶分散分散細(xì)胞，說明細(xì)胞細(xì)胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)。動(dòng)物細(xì)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)適宜的胞培養(yǎng)適宜的PH為為7.27.4，此環(huán)境下胃蛋白此環(huán)境下胃蛋白酶（酶（2.0）沒有）沒

3、有活性，而胰蛋白活性，而胰蛋白酶酶(7.2-8.4)的活的活性較高。性較高。比老齡動(dòng)比老齡動(dòng)物的組織物的組織細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，能力強(qiáng)，有絲分裂有絲分裂旺盛。分旺盛。分化程度越化程度越低，增殖低，增殖能力越強(qiáng)，能力越強(qiáng)，越容易培越容易培養(yǎng)。養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體成生物體細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖緩慢，核緩慢，核型可能變型可能變化化動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。和韌性的組織和器官。貼壁生長接觸抑制10代以內(nèi)，保持正常二倍

4、體核型代以內(nèi)，保持正常二倍體核型傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)6有關(guān)概念n原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)：動(dòng)物組織消化后的初次培動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱養(yǎng)稱為原代細(xì)胞。為原代細(xì)胞。n傳代培養(yǎng)：將傳代培養(yǎng)：將貼滿瓶壁的貼滿瓶壁的細(xì)胞細(xì)胞需要重需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。這樣的培養(yǎng)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。這樣的培養(yǎng)過程稱為過程稱為傳代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)。7 多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識，思考以下中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識，思考以下問題：問題： 1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？體外培養(yǎng)細(xì)胞

5、時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？ 2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？ 討討 論論葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、促生長因葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、促生長因子和動(dòng)物血清等。子和動(dòng)物血清等。適宜溫度、適宜溫度、PH和氣體環(huán)境；無菌無毒環(huán)境和氣體環(huán)境；無菌無毒環(huán)境1 1）無菌、無毒：無菌、無毒： 2 2）全部的營養(yǎng)物質(zhì)：全部的營養(yǎng)物質(zhì)： 3 3）適宜的溫度和適宜的溫度和PHPH值：值： 4 4）必要的氣體條件：必要的氣體條件：（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等。（葡萄糖、氨基酸、

6、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等。）保證細(xì)胞順利的保證細(xì)胞順利的生長增殖生長增殖36.5+36.5+（- -）0.50.5度度, 7.2-7.4, 7.2-7.4O O2 2和和COCO2 2（95%95%空氣和空氣和5% CO5% CO2 2 ）維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)液的PH1.1.3 3 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件9獲得細(xì)胞獲得細(xì)胞細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品新的個(gè)體或細(xì)胞新的個(gè)體或細(xì)胞產(chǎn)品產(chǎn)品培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果或細(xì)胞產(chǎn)物或細(xì)胞產(chǎn)物快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株等無病毒植株等培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的葡萄糖、動(dòng)物血清葡萄糖、動(dòng)物血清促生長因子促生長因子蔗糖、植物激素蔗

7、糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖原原 理理動(dòng)物細(xì)胞培動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較10 1 1）大規(guī)模的生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品大規(guī)模的生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品 如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體 2 2）為基因工程技術(shù)提供受體細(xì)胞為基因工程技術(shù)提供受體細(xì)胞3 3）培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植4 4）有毒物質(zhì)的檢測有毒物質(zhì)的檢測5 5）細(xì)胞的生理、藥理、病理研究細(xì)胞的生理

8、、藥理、病理研究 如用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)如用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供依據(jù)防癌癥及其他疾病提供依據(jù)1.4動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用11思考：思考：2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？細(xì)胞培養(yǎng)材料？1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？基有何獨(dú)特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成、動(dòng)物細(xì)胞

9、培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？新個(gè)體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有：等。獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動(dòng)物血清等、成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體成新的動(dòng)物個(gè)體12有關(guān)概念細(xì)胞株：細(xì)胞株：原代細(xì)

10、胞一般傳至原代細(xì)胞一般傳至10-50代左代左右細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，右細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。少數(shù)細(xì)胞存活，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系：細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺細(xì)胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的遺細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接

11、觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。132.2.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 將動(dòng)物的一個(gè)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的胞核的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新中，使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的的胚胎胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體動(dòng)物個(gè)體（克（克隆動(dòng)物）隆動(dòng)物）用核移植的方法得到的動(dòng)物用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。分分類類胚胎細(xì)胞核移植：胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易性容易 細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全

12、能細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性不容易性不容易2.1 動(dòng)物細(xì)胞核移植概念：動(dòng)物細(xì)胞核移植概念：14例：例：克隆羊培育過克隆羊培育過程程黑面綿羊去黑面綿羊去核卵細(xì)胞核卵細(xì)胞白面綿羊乳白面綿羊乳腺細(xì)胞核腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植重組細(xì)胞重組細(xì)胞電脈沖刺激電脈沖刺激早期胚胎早期胚胎胚胎移植胚胎移植另一頭綿羊的子宮另一頭綿羊的子宮妊娠、出生妊娠、出生克隆羊多利克隆羊多利152.2體細(xì)胞核移植的過程：體細(xì)胞核移植的過程：請看教材請看教材P48圖圖2-21思考：思考：1.核移植的受體細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？核移植的受體細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？2.通過什么手段激活受體細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎？通過什么手段激活受

13、體細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎？3.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的理論基礎(chǔ)是什么？動(dòng)物體細(xì)胞核移植的理論基礎(chǔ)是什么？ M中期卵母細(xì)胞中期卵母細(xì)胞誘導(dǎo)方法：物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，誘導(dǎo)方法：物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。動(dòng)物細(xì)胞核的全能性動(dòng)物細(xì)胞核的全能性16 培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至1050代左右時(shí)，部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生代左右時(shí)，部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變，變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變，而而10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細(xì)胞核移植中，倍體核型。因此

14、，在體細(xì)胞核移植中，為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代常采用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。代以內(nèi)的細(xì)胞。1.用于核移植的供體細(xì)胞一般用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，代以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為想一想，這是為什什么？么？討論：討論：172.3體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：1、在畜牧業(yè)中可以加、在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程速家畜遺傳改良的進(jìn)程2、保護(hù)瀕危物種、保護(hù)瀕危物種3、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植的移植4、了解胚胎發(fā)育和衰、了解胚胎發(fā)育和衰老

15、過程；追蹤研究疾病老過程；追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病的發(fā)展過程和治療疾病18 1、成功率比較低2、大多存在健康問題3、克隆動(dòng)物食品安全問題2.4體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：1920一、動(dòng)物細(xì)胞融合一、動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用受精作用211動(dòng)物細(xì)胞融合的概念：動(dòng)物細(xì)胞融合的概念： 動(dòng)物細(xì)胞融合又稱細(xì)胞雜交，是指動(dòng)物細(xì)胞融合又稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)的過程。融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)

16、細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。胞。22動(dòng)物細(xì)胞融合232 2. .誘導(dǎo)融合方法誘導(dǎo)融合方法：誘導(dǎo)方式誘導(dǎo)方式物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法生物法：生物法： 滅活的病毒滅活的病毒仙臺病毒仙臺病毒紫外線紫外線喪失感染性喪失感染性（不感染細(xì)胞）（不感染細(xì)胞）保留融合活性保留融合活性 （誘導(dǎo)細(xì)胞融合）（誘導(dǎo)細(xì)胞融合）24用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過程用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過程細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒病毒顆粒細(xì)胞核細(xì)胞核25主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用用 途途物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、振物理（離心、振蕩、電

17、刺激）蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法用胰蛋白酶用胰蛋白酶分散分散細(xì)胞細(xì)胞誘誘導(dǎo)融合導(dǎo)融合去除細(xì)胞壁后誘去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合融合融合前處理前處理細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性原原 理理動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較較26二、單克隆抗體什么是抗體？什么是抗體？ 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。具有免疫功

18、能的球蛋白。漿漿細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞產(chǎn)生抗體。抗體。27思考思考1.傳統(tǒng)生產(chǎn)抗體的方法和缺陷？傳統(tǒng)生產(chǎn)抗體的方法和缺陷？2.B淋巴細(xì)胞有什么特點(diǎn)？淋巴細(xì)胞有什么特點(diǎn)？方法：反復(fù)給動(dòng)物注射某種抗原方法：反復(fù)給動(dòng)物注射某種抗原缺陷：產(chǎn)量低，純度差，特異性差缺陷：產(chǎn)量低，純度差，特異性差28B淋巴細(xì)胞與抗體B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體?？梢援a(chǎn)生抗體。動(dòng)物體內(nèi)的動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。特定的抗原具有特異性免疫作用。每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。種抗體

19、。29單克隆抗體概念 由由單個(gè)單個(gè)B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞經(jīng)過經(jīng)過無性繁無性繁殖殖（克隆），形成基因型相同的（克?。?，形成基因型相同的細(xì)細(xì)胞群胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克的抗體稱為單克隆抗體。隆抗體。 特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高 、可大、可大量制備量制備30如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？n利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能n利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特性利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特性n利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性

20、的雜交瘤細(xì)胞胞特性的雜交瘤細(xì)胞n利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞31 單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程 注射抗原注射抗原B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體3233思考：思考：1、本過程利用了哪些原理？、本過程利用了哪些原理？免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？細(xì)胞融合？ 這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體?？寺】贵w。34單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯。應(yīng)用主要有：應(yīng)用