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文檔簡介
1、實驗五實驗五果蠅唾腺染色體的觀察果蠅唾腺染色體的觀察 1;.1、學習果蠅幼蟲唾腺的剖取方法和唾腺染色體的制片方法;2、觀察果蠅唾腺染色體的形態(tài)特征。一、實驗?zāi)康囊弧嶒災(zāi)康?;. 雙翅目昆蟲(果蠅等)幼蟲期唾腺細胞中具有相當于普通染色體100150倍的巨大染色體,由于存在于唾液腺細胞中,所以稱為唾腺染色體(salivary gland chromosome) 。它是由于唾腺細胞發(fā)育到一定階段后就不再進行有絲分裂,永久停留在間期,唾腺染色體經(jīng)過多次復(fù)制而不分開,約有10004000根染色體絲的拷貝,所以又叫多線染色體(polytene chromosomes )。二、實驗原理二、實驗原理3;.
2、黑腹果蠅巨大的唾腺染色體是從染色中心向四周放射狀地伸出5長1短共6條臂。果蠅染色體數(shù)為2n8。其中1號染色體(X染色體)為端著絲粒染色體,其著絲粒附著地一端在染色中心上,另一端游離;2號、3號染色體為中部著絲粒染色體,每條呈“V“伸展兩臂,4號染色體很短小,呈點狀附在染色中心邊緣。4;.特征 R巨大;R體細胞配對,染色體只有半數(shù)(n);R各染色體的異染色質(zhì)多的著絲粒部分互相靠攏形成染色中心;R深淺不同、疏密個別的橫紋。5;. 染色質(zhì)絲的不同部位螺旋化程度不同,其中螺旋化程度較高的部位形成染色粒,這些染色粒經(jīng)多線染色體的“放大”,形成染色較深的橫紋。橫紋的相對大小和空間排列是恒定的,可以作為天然
3、的精確基因定位的“坐標”。這些橫紋的數(shù)目和位置一般是恒定的,具有果蠅種的特征,染色體的缺失、重復(fù)、倒位、易位等,都能在唾腺染色體上辨別出來。 banded chromosomes 1000 x6;.材料:果蠅的三齡幼蟲試劑: 1%醋酸洋紅器具:顯微鏡、鑷子、解剖針、載玻片、蓋玻片、濾紙、繪圖紙三、儀器與材料三、儀器與材料7;.(1)取果蠅三齡幼蟲置于載玻片上,由于果蠅的唾腺位于幼蟲體前1/3-1/4處,所以左手持鑷子按壓住蟲體后端三分之一的部位,固定幼蟲,右手持解剖針扎住幼蟲頭部口器部位,適當用力向右拉唾腺腺體隨之而出。四、實驗程序四、實驗程序8;.9;.果蠅三齡幼蟲解剖圖果蠅三齡幼蟲解剖圖S
4、alivary gland:唾腺Gonad: 性腺Ganglion: 神經(jīng)節(jié)Trachea: 氣管Ovary:卵巢Intestine:腸10;.挑取果蠅唾腺的過程11;.唾腺的位置及形態(tài)特征12;.13;.(2)滴加一滴醋酸洋紅,在顯微鏡下(4倍鏡)去除唾腺周圍的脂肪等其他組織部分。唾腺是一對透明的棒狀腺體,外有白色的脂肪組織(不透明)。去除幼蟲其它組織部分,并把唾腺周圍的白色脂肪剝離干凈。 14;.分離出來的果蠅唾腺位置:在幼蟲體前約1/3處;形狀:形如一對香蕉,上小上大。一邊常附著帶狀的不透明的脂肪。顏色:半透明如玻璃,略帶白色,比周圍組織透明;細胞特征:唾腺上的細胞較大,輪廓清晰,用低倍
5、鏡即可清楚看到。15;.唾腺組織唾腺組織16;.不同人操作得到的唾腺組織可能不一樣不同人操作得到的唾腺組織可能不一樣17;.放大的唾腺組織放大的唾腺組織18;.放大的唾腺組織放大的唾腺組織19;.放大的唾腺組織放大的唾腺組織20;.(3)蓋上蓋玻片,用刀片支起蓋玻片一角,按住蓋玻片另一邊,用解剖針輕輕敲打蓋玻片,去掉刀片,稍加熱后覆上濾紙垂直壓片。(4)觀察,先在10倍鏡下觀察找到染色體后,再換高倍鏡下觀察,比較各染色體的橫向紋帶、帶寬大小、帶紋排列順序,以及由著絲點糾集組成的染色體中心。 21;.10倍鏡22;.40倍鏡23;.100倍鏡24;.重要實驗步驟重要實驗步驟: 取果蠅三齡幼蟲,一手持鑷子夾住蟲體中部稍后,固定幼蟲,另一手持解剖針按住幼蟲頭部,輕緩拉開頭部,去除幼蟲的其他組織部分和唾腺周圍的脂肪等其他組織,再用常規(guī)染色體制片方法制片。 25;.實驗注意事項實驗注意事項 :1、取果蠅三齡幼蟲最佳,其行動遲緩,肥大,爬上管壁(將要化蛹)。2、要辨
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