糖化血紅蛋白Hb1C操作指導(dǎo)手冊

1、糖化血紅蛋白(hbalc)操作指導(dǎo)書孫吳縣人民醫(yī)院檢驗科免疫室文件編號 swxrmyyjyk3-my-17笫1頁共7頁版本號：1修訂號：0主題：糖化血紅蛋白作業(yè)指導(dǎo)書頒布日期：2016年10刀1 實驗原理試劑盒原理：本試劑盒含有高特異性、高敏感性抗人hbalc單克隆抗體 (antillbalc)和抗人血紅蛋白單克隆抗體(antillb),其中hbalc單克隆抗體 包被于膜上檢測區(qū)，nc膜下緣與樣品墊交界處包被膠體金(au)標(biāo)記的血紅蛋 白單克隆抗體，質(zhì)控區(qū)包被有兔抗鼠igg抗體。當(dāng)加入樣本時，膠體金標(biāo)記的 血紅蛋白單克隆抗體(antihb)與樣本屮血紅蛋白(hb)及糖化血紅蛋白(hbalc)

2、按比例形成au-antihb-hb和au-antihb-hbalc復(fù)合物，通過膠體金免疫層析技 術(shù)，在質(zhì)控區(qū)應(yīng)用抗原抗體反應(yīng)，在檢測區(qū)au-antiiib-iibalc被hbalc單克隆 抗體(antihbalc)捕獲，定量檢測人血中的hbalc的含量。配套儀器工作原理：待測物與檢測板上的捕獲抗體和膠體金標(biāo)記抗體的結(jié)合產(chǎn) 生顏色的變化顯色的強度變化與待測物濃度有相關(guān)性，測量系統(tǒng)運用光電掃描 標(biāo)記物和待測物結(jié)合區(qū)，獲得光電信號，然后對光電信號的強弱進(jìn)行測量處理, 定量地分析出待測物的濃度。2.標(biāo)本采集1標(biāo)本采集前病人準(zhǔn)備：應(yīng)在無菌情況下采集靜脈血。22標(biāo)本種類：用于人全血樣本，其他體液和樣本可能

3、得不到準(zhǔn)確結(jié)果。2. 3標(biāo)本要求：建議使用edta抗凝管。孫吳縣人民醫(yī)院檢驗科免疫室文件編號 swxrmyyjyk3-my-17笫2頁共7頁版本號：1修訂號：0主題：糖化血紅蛋白作業(yè)指導(dǎo)書頒布日期：2016年10刀標(biāo)本儲存臨床全血樣本采集后，須在4小時之內(nèi)完成檢測；28°c保存，樣本保存7天， 不得凍存。檢測前樣本必須恢復(fù)至室溫。標(biāo)本運輸室溫運輸5標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌污染6試劑6.1試劑名稱：糖化血紅蛋白檢測試劑盒（膠體金法）6. 2試劑生產(chǎn)廠家：基蛋生物科技股份有限公司6.3包裝規(guī)格：10人份/盒，25人份/盒，50人份/盒，100人份/盒。4試劑盒組成：內(nèi)含10條、25條、50條、1

4、00條單人份檢測卡；檢測卡由試 紙條外殼與試紙條構(gòu)成，試紙條由樣品墊、層析膜（檢測區(qū)包被有hbalc單克 隆抗體，質(zhì)控區(qū)包被有兔抗鼠igg抗體，nc膜下緣與樣品墊交界處包被膠體金 標(biāo)記的血紅蛋口單克隆抗體）、吸水紙、襯墊構(gòu)成；檢測緩沖液：10管/盒、25管/盒、50管/盒、100管/盒，lml/管，由磷酸鹽、 蛋白穩(wěn)定劑、表面活性劑等組成，ph二72±02；說明書：1份/盒；sd卡：1個/盒；吸管：10個/盒，25個/盒，50個/盒，100個/盒；注：不同批次的糖化血紅蛋白檢測試劑盒（膠體金法）各組分不可以互換。孫吳縣人民醫(yī)院檢驗科免疫室文件編號 swxrmyyjyk3-my-17笫

5、2頁共7頁版本號：1修訂號：0主題：糖化血紅蛋白作業(yè)指導(dǎo)書頒布日期：2016年10刀65試劑儲存條件及有效期：試劑盒于430°c，鋁箔袋密封狀態(tài)下存放，有效期為18個月；鋁箔袋拆封后，有效期為1小時。儀器設(shè)備71儀器名稱：免疫定量分析儀7. 2儀器廠家：基蛋生物科技股份有限公司7. 3儀器型號：fia860074儀器校準(zhǔn)程序：每個試劑盒中有一個已知的校正數(shù)據(jù)，它記錄在sd卡 上，用以確定分析曲線，檢測前將sd卡插入儀器心側(cè)的檢測孔里進(jìn)行質(zhì)控，該 數(shù)據(jù)信息就能讀入儀器之屮，然后儀器就處于等待使用狀態(tài)。每臺儀器配有一 個校準(zhǔn)光路的質(zhì)控卡，每個月將質(zhì)控卡插入儀器前方的出入口內(nèi)對儀器的光路

6、進(jìn)行維護。8. 操作步驟在使用此試劑前必須仔細(xì)閱讀試劑的說明書，需嚴(yán)格按照試劑說明書執(zhí)行有關(guān)操作，否則無法保證可靠的結(jié)果。8. 1 準(zhǔn)備檢測前將檢測卡、樣本、緩沖液恢復(fù)至室溫（1530°c）,建議檢測卡在恢復(fù)室溫后再拆封，并在有效期內(nèi)盡快使用，防止檢測卡受潮。8.2 校準(zhǔn)確認(rèn)sd卡與檢測卡的批號相匹配，進(jìn)行sd卡校準(zhǔn)（詳見儀器說明書）。8.3 加樣在免疫定量分析儀上選擇“全血”模式，詳見配套儀器使用說明書。孫吳縣人民醫(yī)院檢驗科免疫室文件編號 swxrmyyjyk3-my-17笫4頁共7頁版本號：1修訂號：0主題：糖化血紅蛋白作業(yè)指導(dǎo)書頒布日期：2016年10刀吸取10 11l全血樣木

7、，加入到一管檢測緩沖液中，充分混勻溶血，取100 ul混 合液垂直滴加至檢測卡加樣處，開始計時。& 4檢測3分鐘后，將檢測卡插入到免疫定量分析儀的承載器上，點擊屏幕“測量”或按 下“測量”鍵，儀器會自動檢測并打印結(jié)果。注意：檢測卡插入時，圓頭向內(nèi)，聽到咔噠一聲，卡有被鎖住的感覺，即 說明檢測卡插到位，否則會導(dǎo)致檢測結(jié)果有誤。9. 結(jié)果判斷與分析直接從儀器屏幕給出數(shù)字值。10. 質(zhì)量控制可使用hbalc質(zhì)控品。hbalc質(zhì)控品的瓶子上標(biāo)有其靶值范圍。11. 計算直接讀取屏幕上顯示的數(shù)字結(jié)果即可。12. 參考值（參考范圍）糖化血紅蛋白的參考區(qū)間為3. 8%58%o每個實驗室應(yīng)通過實驗確定陽

8、性判斷值或者參考區(qū)間的適用性，必要吋建 立本實驗室的陽性判斷值或者參考區(qū)間。13 臨床意義糖化血紅蛋白是血紅蛋白（hb）與糖類（如葡萄糖而成的，其合成過程是 緩慢且不可逆的。其合成速率與紅細(xì)胞所處環(huán)境中糖的濃度呈正比，當(dāng)血液中 葡萄糖濃度較高時，人體所形成的hbalc含量也會相對增高；它積累并持續(xù)存孫吳縣人民醫(yī)院檢驗科免疫室文件編號 swxrmyyjyk3-my-17笫5頁共7頁版本號：1修訂號：0主題：糖化血紅蛋白作業(yè)指導(dǎo)書頒布日期：2016年10刀在于紅細(xì)胞120 d生命期中，在紅細(xì)胞死亡之前，血液中的hbalc也會保持相 對不變。糖化血紅蛋白水平反映的是在檢測前120天內(nèi)的平均血糖水平，

9、而與 抽血時間，病人是否空腹，是否使用胰島素等因素?zé)o關(guān)，是判定糖尿病長期控 制的良好指標(biāo)。14. 操作性能1最低檢出限：不高于2. 0%；14.2檢測范圍:2.0%140%；14.3線性范圍：在2.0%14.0%范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)r0.990； 14. 4精密度:重復(fù)性:cvw10%；批間差:cv批間w15%；14.5準(zhǔn)確度（方法學(xué)對比）：用比對試驗進(jìn)行驗證，相關(guān)系數(shù)ro. 975, 相對偏差不大于土 20%o方法局限性15.1本試劑盒僅限于體外診斷用。15.2樣本中的甘油三酯和膽紅素均會干擾檢測結(jié)果，其最大允許濃度分別為甘油三酯25g/l、膽紅素0. lg/lo15. 3百分含量高達(dá)40%

10、的糖化血紅蛋白對檢測不產(chǎn)生hook效應(yīng)。15.4患者若出現(xiàn)貧血或紅細(xì)胞增多癥，其樣本檢測結(jié)果可能增高或偏低。15.5本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，不能單獨作為確診或排除病例的 依據(jù)，為達(dá)到診斷目的，此檢測結(jié)果耍與臨床檢查、病史和其它的檢查結(jié)果結(jié) 合使用。孫吳縣人民醫(yī)院檢驗科免疫室文件編號 swxrmyyjyk3-my-17笫6頁共7頁版本號：1修訂號：0主題：糖化血紅蛋白作業(yè)指導(dǎo)書頒布日期：2016年10刀16.當(dāng)檢驗系統(tǒng)（儀器）不能工作時，所采取的補救措施當(dāng)檢驗系統(tǒng)（儀器）不能工作時，可聯(lián)系儀器廠家，進(jìn)行緊急修理，如一 時不能修好，如別的科室有該型號儀器可到別的儀器上先測，如別的實驗室無

11、該型號儀器，申請廠家送一臺能正常工作的儀器代替。17.參考文獻(xiàn)17.1葉應(yīng)嫵等.全國臨床檢驗操作規(guī)程（第3版）.東南大學(xué)出版社， 2006:347-35117.2 ozdamar 0, gun 1, kcskin u, ct al. the role of maternal serumbeta.-iibalcand papp-a levels at gestational weeks 10 to 14 in the prediction of pre-eclampsiapak j med sci. 2014, 30（3）:568-573 1&注意事項18.1吸管不可以混用，以免交叉污染。18.2檢測卡從鋁箔袋中取出后，應(yīng)盡快進(jìn)行檢測，避免放置于空氣中的時 間過長，導(dǎo)致受潮。18.3檢測卡可在室溫下密封保存，謹(jǐn)防受潮，低溫下保存的檢測卡應(yīng)平衡 至室溫方可使用。18.4本產(chǎn)品內(nèi)含有作為防腐劑的疊氮鈉，疊氮鈉可以和排水管道的銅管或 鉛管發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生爆炸物質(zhì)，請按照當(dāng)?shù)氐挠嘘P(guān)條例妥善處理。18.5本產(chǎn)品含有動物源性成分（如抗體），使用過程中請配戴手套，避免皮膚孫吳縣人民醫(yī)院檢驗科免疫室文件編號 swxrmyyjyk3-my-17笫7頁共7頁版