血凝試驗(yàn)試驗(yàn)報(bào)告

1、血凝實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告影響血液凝固的因素（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^本實(shí)驗(yàn)來了解血液凝固的基本過程及了解影響血液凝固的一些因素（二）實(shí)驗(yàn)對(duì)象：家兔（三）實(shí)驗(yàn)步驟：（略）（四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1、觀察纖維蛋白原在凝血過程中的作用：實(shí)驗(yàn) 中可見到靜置杯內(nèi)血液發(fā)生凝固。攪拌杯內(nèi)血液不 凝固，但在毛刷上見到紅色的血凝塊，經(jīng)水沖洗后 毛刷上纏繞有白色絲狀物。2、觀察影響血凝的一些理化因素：如下表9-1 所示。影響血凝的一些理化因表9-3素實(shí)驗(yàn)條件1. 加少許棉花2. 用石蠟油均勻涂試管內(nèi)壁3. 放置37 °C水浴4.放置冰水水浴5.加肝素10個(gè)單位&加草酸鉀2mg（表9-3文字說明：略）3、觀察內(nèi)源性及外

2、源性凝血過程：如下表9-2 所示表9-2內(nèi)源性和外源性凝血過程的觀察試劑1、富血小板血漿2、少血小板血漿3、生理鹽水4、羊肺懸液5、0.025mol/l cacl2血液凝固時(shí)間（表9-2文字說明：略）（五）討論：血液凝固是指血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)變?yōu)椴涣?動(dòng)的凍膠狀態(tài)血液凝固過程大致分為三個(gè)主要階段：凝血酶原激活物形成；凝血酶原激活成 凝血酶，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。在凝血 酶原激活物的形成過程中分有兩種不同的途徑：內(nèi) 源性凝血途徑和外源性凝血途徑。內(nèi)源性凝血途徑 是由凝血因子?啟動(dòng)的，參與血凝的全部凝血因子 都在血漿內(nèi)。凝血因子？可被各種帶負(fù)電荷的物質(zhì) 等所激活，如血管內(nèi)膜暴露的膠原纖維、玻

3、璃、陶 器等。外源性凝血途徑是由存在于血管外組織中的 凝血因子ni所啟動(dòng)的，其余參與的凝血因子也在 血管內(nèi)。凝血因子n在腦、肺、胎盤組織含量很 豐富。不管是內(nèi)源性凝血途徑或外源性凝血途徑，他 們最后的是使血纖維蛋白的形成而使血液發(fā)生凝 固。在觀察纖維蛋白原在凝血過程中作用的實(shí)驗(yàn) 中，由于參與凝血的全部凝血因子都在血漿中，因 此其凝血過程是屬于內(nèi)源性凝血。由于玻璃和毛刷 表面都帶有負(fù)電荷，后者可激活凝血因子?，啟動(dòng) 內(nèi)源性凝血過程。凝血到最后階段時(shí)，在凝血酶的作用下，把纖維蛋白原水解成血纖維蛋白；形成的 纖維蛋白不斷地交叉成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，把血液中的所有 血細(xì)胞網(wǎng)凝血時(shí)間 50' '8

4、 ' 15' '2 ' 15''6' 45''不凝 不凝 試管1 0.2 ml 0.2 ml0.2 ml 2 ' 15''試管 2 0.2 ml 0.2 ml0.2 ml 3 ' 45''試管 3 0.2 ml 0.2 ml0.2 ml 45 ''羅于其中，從而使血液發(fā)生凝固。靜置杯中的 血液，由于發(fā)生了上述的血液凝固過程，所形成的 纖維蛋白沒有被破壞，所以杯中血液凝固。而攪拌 過的杯內(nèi)血液，雖也發(fā)生血液凝固過程，但所形成 的纖維蛋白卻不斷纏繞到毛刷上，當(dāng)杯內(nèi)

5、血液的纖 維蛋白原全部水解掉后，形成的纖維蛋白也全部纏 繞在毛刷上，這時(shí)血纖維只能網(wǎng)羅毛刷附近的一些 血細(xì)胞，在毛刷上見有血凝塊。經(jīng)水漂洗后，血細(xì) 胞被沖走，毛刷上剩下的是白色細(xì)絲狀的纖維蛋 白。攪拌后的杯內(nèi)血液因纖維蛋白原全部被耗盡，無法再形成纖維蛋白，則攪拌后的杯內(nèi)血液不發(fā)生 凝固。由此可見，血液凝固的過程實(shí)際上是纖維蛋 白形成的過程，任何一個(gè)步驟被破壞，就不會(huì)引起 血液凝固。在血液凝固的兩個(gè)過程中，它們是有所不同 的。兩者的主要區(qū)別如下表9-3所示：表9-3 內(nèi)源性和外源性凝血的主要區(qū)別區(qū)別點(diǎn)啟動(dòng)的凝血因子x因子的激活參與凝血的凝血因子凝血過程凝血時(shí)間內(nèi)源性凝血？需要？因子復(fù)合物 數(shù)量多

6、，且全部在血管中復(fù)雜慢、約數(shù)分鐘夕、 源性凝血ni需要ni因子復(fù)合物數(shù)量少，說因 子在血管外，其余在血管內(nèi) 簡單 快、約幾十秒 鐘由上可知，外源性凝血比內(nèi)源性凝血所需的時(shí) 間短。在實(shí)驗(yàn)結(jié)果表9-2中，第1、2試管都是 由血小板、生理鹽水和cacl2 溶液組成的，參與 凝血的凝血因子都在血漿中，故其凝血過程為內(nèi)源 性凝血。而第3試管是由血小板、羊肺懸液和 cacl2 溶液組成。在第3試管中含有羊肺懸液, 其內(nèi)含有豐富的第ni凝血因子。顯然第3試管發(fā) 生的血液凝固過程主要是外源性凝血途徑。因此第 3試管凝血時(shí)間最快。在第1、2試管中雖然所含 成分相同，但血小板含量不一樣，第1試管血小 板含量高于第

7、2試管。血小板對(duì)血液凝固具有促 進(jìn)作用，表現(xiàn)為：血小板的質(zhì)膜上吸附有許多 凝血因子，如纖維蛋白原、因子v、因子xi等。 其a顆粒中也含有許多凝血因子以及血小板因 子。血小板因子為血液凝固過程提供磷脂表 面，其激活后能加速血凝；同時(shí)其能對(duì)一些血凝因 子具有保護(hù)作用，免受抗凝血酶ui和肝素的破 壞?？梢姡?試管內(nèi)因含有豐富的血小板，故 其凝血時(shí)間比第2試管快。血液凝固受許多因素的影響，如凝血因子的質(zhì) 和量、各種理化因素等棉花給血液凝固提供一個(gè)粗糙表面，容易使血 小板發(fā)生粘著、聚集，然后發(fā)生解體，釋放許多凝 血因子和血小板因子；另外，棉花含許多帶負(fù)電荷 植物纖維，也能激活凝血因子?，啟動(dòng)內(nèi)源性凝血

8、 途徑。因此放有棉花的試管內(nèi)血液凝固加快。試管 內(nèi)壁涂上一層石蠟油時(shí)，由于石蠟油表面光滑，不 易引起血小板粘著，即不易使血小板發(fā)揮促進(jìn)凝血 的作用。另外石蠟油為絕緣體，其把試管表面所帶 的負(fù)電荷覆蓋，不利于凝血因子？的激活，因此血 液凝固變慢。血液凝固實(shí)際上是一系列蛋白酶的水解過程 。 參與血液凝固的凝血因子大多數(shù)是蛋白質(zhì)酶原，其 水解后變成有活性的蛋白質(zhì)酶，如因子ii、因子 xi、因子xii等（因子vii是有活性的）。這些 蛋白質(zhì)酶具有酶隨溫度升高催化活性加強(qiáng)的特 性，也具有蛋白質(zhì)受熱變性的特點(diǎn)。當(dāng)溫度低時(shí)， 蛋白質(zhì)酶的活性下降，而當(dāng)溫度升高到4245 C 以上時(shí)，由于蛋白質(zhì)發(fā)生變性，蛋白質(zhì)

9、的空間結(jié)構(gòu) 被破壞，從而使蛋白質(zhì)功能受損，蛋白質(zhì)酶的活性 下降或失活。因此，把血液放入37 C水浴時(shí)血液 凝固的時(shí)間就比放入冰凍水浴時(shí)所需時(shí)間短 。體內(nèi)重要的抗凝物質(zhì)是抗凝血酶iii和肝素?？?凝血酶i與凝血酶等多種凝血因子的活性中心 絲氨酸殘基結(jié)合，使這些凝血因子的活性受到抑制或失活，從而達(dá)到抗凝作用。肝素則主要 通過與血漿中的一些抗凝蛋白，如抗凝血酶i結(jié) 合，加強(qiáng)后者的抗凝作用。此外，肝素還能使血管 內(nèi)壁細(xì)胞釋放凝血抑制物和纖溶酶原激活物，增強(qiáng) 纖溶作用。因此在試管內(nèi)放入肝素時(shí)血液不會(huì)發(fā)生凝固。血凝過程中，ca是重要的凝血因子，其參與了 血液凝固的許多環(huán)節(jié)，當(dāng)血液中沒有ca2+時(shí)血液 就不

10、會(huì)發(fā)生凝固。在試管內(nèi)放有草酸鉀時(shí)，由于草 酸鉀與血液中的ca2+發(fā)生化學(xué)2+反應(yīng)，生成草酸鈣沉淀，使血液中沒有ca， 故血液不會(huì)發(fā)生凝固。（六）結(jié)論:通過本實(shí)驗(yàn)可知：血液凝固過程可分為三個(gè) 互相聯(lián)系的主要階段，任何一個(gè)階段被破壞，凝血 過程就終止，而血液凝固的過程實(shí)際上是纖維蛋白 形成的過程。根據(jù)凝血酶原激活物形成的途徑 不同，可把血液凝固分為內(nèi)源性和外源性兩條凝血 途徑，內(nèi)源性凝血途徑所消耗的時(shí)間比外源性凝血 途徑長。血小板在血液凝固過程中具有發(fā)揮促 進(jìn)作用。血液凝固除受凝血因子的質(zhì)和量影響 外，還受接觸面、溫度等理化因素的影響。血液接 觸面粗糙、適當(dāng)加溫能加速血凝，而血中加肝素等 抗凝劑、

11、以及除去血中游離鈣離子等可延緩血液凝 固。2+篇二：血凝血凝抑制試驗(yàn)總結(jié)1、如果是馬上要做實(shí)驗(yàn)，先把實(shí)驗(yàn)所需的抗 原、標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清、待檢血清取出回溫，如果待檢血清已冷藏，可取出放入37 °C 恒溫培養(yǎng)箱中回溫，待血清析出后取出（時(shí)間大約 看具體情況而定）。2、試驗(yàn)準(zhǔn)備階段：a準(zhǔn)備好清洗干凈的血清離心管（要有刻度裝 血液）。b采血：注射器內(nèi)先加入一半體積的阿氏液 （防 止血液凝集，當(dāng)所需紅細(xì)胞較多時(shí)，加入注射器量 程一半的阿氏液，當(dāng)所需紅細(xì)胞較少時(shí)，加入1.5 ml2 ml的阿氏液）。c 1%紅細(xì)胞懸液的制備采集至少3只spf （無特定病原體）公雞或無 禽流感和新城疫等抗體的

12、健康公雞的血液與等體 積的阿氏液混合，用ph 7.2、0.01 mol/l pbs 液洗滌3次,每次去掉上層的清液后加入少量 pbs 用注射器反復(fù)抽吸使之混勻，再加至所要刻度，放 入離心。每次均以1000 r/min 離心10 min ， 洗滌后用pbs配成體積分?jǐn)?shù)為1%的紅細(xì)胞懸液， 4 °C保存?zhèn)溆茫▽?shí)際pbs液用1%的生理鹽水代 替）。d所需1%紅細(xì)胞懸液的體積 > 4 hau+1 ml （本例中為30 ml+1 ml=31 ml ）,否則配置的1%紅細(xì)胞懸液不夠用（理論計(jì)算為30.1 ml , 取 31 ml 以防萬一）。e阿氏液（alsevers ）制備葡萄糖 2.0

13、5 g檸檬酸鈉0.80 g檸檬酸 0.055g氯化鈉 0.42 g加蒸餾水至100 ml ，散熱溶解后調(diào)ph值至6.1, 69 kpa 高壓滅菌15 min , 4 °C保存?zhèn)?用。3、血凝試驗(yàn)?zāi)康模簷z測試驗(yàn)所用的標(biāo)準(zhǔn)抗原的血凝滴度， 如檢測結(jié)果血凝滴度為210 = 1024,表示標(biāo)準(zhǔn)抗原稀釋1024倍仍能與紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)。注意：一瓶新的未使用的抗原（禽流感或新城疫為粉 狀），需要加入（用注射器）2ml的稀釋液（0.9% 生理鹽水，一般瓶身上有標(biāo)注加入的體積 2ml）a反應(yīng)板要同時(shí)做三排（每排12孑孔），原因: 根據(jù)三排的多數(shù)結(jié)果來確定血凝滴度。例如：10999三個(gè)結(jié)果為：2、2

14、、2 ,則本次試驗(yàn)標(biāo) 準(zhǔn)抗原血凝滴度為2。b加入1%的紅細(xì)胞懸液后放到微量震蕩器上震 蕩混合1min ,室溫20 °C25 C下靜置40 min ,4、4 hau 抗原例如：標(biāo)準(zhǔn)抗原血凝滴度為210 = 1024,貝1 : 256 ,稀釋時(shí)的pbs中即為4放4 C靜置60 min 。當(dāng)pbs對(duì)照孔紅細(xì)胞呈明 顯紐扣狀沉到孔底時(shí)判定結(jié)果4 hau 抗原=(1 : 210 ) /4 = 將1 ml的抗原加入到255 ml hau。計(jì)算配置4 hau所需稀釋液體積v和標(biāo)準(zhǔn)抗原體積x假設(shè)：待檢血清100份每排12個(gè)孔（實(shí)際 只需要11孑L,但多計(jì)算一些，以防不夠）每孔加入25 ul 4 ha

15、u抗原體積=25ul X 12X 100 = 30000 ul = 30 ml設(shè)標(biāo)準(zhǔn)抗原體積為x則有： 1: 256 = x : 30000標(biāo)準(zhǔn)抗原體積 x = 3000 / 256 = 117.1875 ul =0.117 ml稀釋液體積 v = 30 - 0.117 = 29.883ml但實(shí)際量取時(shí)稀釋液體積直接用 30ml計(jì)算， 因?yàn)?.117 ml數(shù)量很小，可以忽略不計(jì)。6、血凝抑制試驗(yàn)a紅細(xì)胞在使用過程中應(yīng)經(jīng)常搖勻。b加入1%的紅細(xì)胞懸液后放到微量震蕩器上震 蕩混合1min ,室溫20 °C25 C下靜置40 min , 若環(huán)境溫度過高，放4 C靜置60 min 。當(dāng)pbs

16、 對(duì)照孔紅細(xì)胞呈明顯紐扣狀沉到孔底時(shí)判定結(jié)果 。7、結(jié)果判定血凝試驗(yàn)：將反應(yīng)板傾斜，看是否呈淚滴狀， 不呈淚滴狀的說明發(fā)生血凝血凝抑制：將反應(yīng)板傾斜，看是否呈淚滴狀， 呈淚滴狀的說明未發(fā)生血凝或血凝不完全即血凝 抑制8、篇三：血凝試驗(yàn)檢查的影響因素分析血凝試驗(yàn)檢查的影響因素分析【關(guān)鍵詞】血凝試驗(yàn)血凝試驗(yàn)是臨床工作中常用的檢測項(xiàng)目，血凝 試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性是指導(dǎo)臨床正確治療的保障。作 為血凝功能異常的篩查試驗(yàn)，在出血性疾病的診 斷、抗凝治療監(jiān)測，術(shù)前檢查中具有重要作用，且 應(yīng)用廣泛。由于凝血試驗(yàn)與一般的檢驗(yàn)項(xiàng)目測定不 同，其影響因素具有特殊性。當(dāng)其啟動(dòng)因子被某些 因素激活后，就會(huì)發(fā)生一系列連鎖反應(yīng)

17、，導(dǎo)致檢測 結(jié)果的極大誤差。因此，對(duì)于檢驗(yàn)人員和臨床醫(yī)生 掌握和了解影響血凝試驗(yàn)相關(guān)因素顯得尤為重 要。血凝試驗(yàn)的因素有以下幾個(gè)方面。1.血樣的采集與處理1.1. 采血技術(shù)1.1.1. 患者應(yīng)處于平靜狀態(tài)。因?yàn)榍榫w緊張，劇 烈運(yùn)動(dòng)會(huì)激活或干擾血小板、凝血因子和 纖溶酶原等成分。1.1.2. 患者應(yīng)空腹。進(jìn)餐后，血中的乳糜微粒等 將對(duì)血凝試驗(yàn)結(jié)果造成干擾。1.1.3. 采血前不應(yīng)拍打采血部位，必須順利一針 見血”避免混入組織液或發(fā)生溶血。因?yàn)?組織液中會(huì)有豐富的因子iii ,可激活外源 性凝血途徑，加速凝血酶源的消耗，使試 驗(yàn)結(jié)果偏低。1.1.4. 壓脈帶不應(yīng)扎的太緊，壓迫時(shí)間不應(yīng)過 長。壓力大

18、及束縛時(shí)間過長可影響局部血 液的濃縮和內(nèi)皮細(xì)胞釋放t-pa ,后者可 引起纖溶活動(dòng)增強(qiáng)。1.1.5.1.1.6.1.1.7.1.2.采血速度要適當(dāng)，若太快易產(chǎn)生氣泡，使 纖溶蛋白原、因子v、因子込變性。因此， 建議使用定量真空采血管。采血后要立即與抗凝劑混合，但不要用力 震蕩。nccls 推薦使用帶塞塑料或聚乙烯 試管采血，因不帶蓋，血漿ph值升高， 影響試驗(yàn)結(jié)果。采血順序?qū)υ囼?yàn)結(jié)果也有影響。朱忠勇報(bào) 道1: pt血樣采集順序第二管、第三 管與第一管比較差異有顯著性(p<0.01) ，aptt的差異則無顯著性(p >0.05)。這可能與采血時(shí)壓脈帶壓迫時(shí)間 過長有關(guān)。因此，采多管血

19、樣時(shí)，血凝試 驗(yàn)標(biāo)本應(yīng)取第一管。標(biāo)本運(yùn)輸、保存與處理標(biāo)本應(yīng)隨采隨測， 如需運(yùn)輸，標(biāo)本應(yīng)在室溫下運(yùn)送，因低溫會(huì) 損傷血小板活化因子使pt、aptt結(jié)果降 低，血漿標(biāo)本原則上應(yīng)立即檢測，血液一旦離體后即開始變化，隨離體的時(shí)間不同凝血 因子逐漸消耗，從而檢測出的結(jié)果也不同。 在原血漿管置室溫2h測得的結(jié)果與立即測 定的pt、aptt結(jié)果差異無顯著性(p > 0.05)而分離出血漿的試管置室溫2h所測 結(jié)果與立即測定pt、aptt結(jié)果有明顯差異 (p V 0.01)2,因此，凝血試驗(yàn)應(yīng)在室溫保存4h內(nèi)完成，不能完成4 C冰箱保 存，24h內(nèi)完成。-20 C保存標(biāo)本需1周內(nèi) 完成，否則會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生

20、影響3。血液 離心是凝血試驗(yàn)標(biāo)本處理的關(guān)鍵步驟，離心 的目的就是盡可能地除去血漿中的血小 板，使標(biāo)本成為乏血小板血漿，以便排除血 小板數(shù)量和功能對(duì)試驗(yàn)的影響，有報(bào)道認(rèn)為4標(biāo)本離心的相對(duì)離心力ref > 2000g，離心時(shí)間不少于15min為宜。1.3.抗凝劑的選擇 抗凝劑的選擇對(duì)結(jié)果起著重要作用，根據(jù)iesh及ieth 推薦0.019mol/l的枸椽酸鈉，作為凝血因子檢測的首選抗凝劑。因枸椽酸鈉對(duì)v、誠 因子有一定的保護(hù)作用，因不受肝素影響還 適用于接受肝素治療的病人的監(jiān)測。而草酸 鹽能與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響血凝 儀的光電終點(diǎn)。肝素可與at- ni作用抑制凝 血因子的反應(yīng)，edt

21、a能抑制或干涉纖維蛋 白凝塊形成纖維蛋白原單體聚合，且對(duì)v因 子保護(hù)性差。血液與抗凝劑的比例必須相當(dāng)準(zhǔn)確，應(yīng)按9 : 1 比例混合，9份血液準(zhǔn)確地講是指9份紅細(xì)胞壓積 正常血液中血漿的量而言，抗凝劑只對(duì)血漿起作 用，如抗凝劑加入不準(zhǔn)確和由于貧血或紅細(xì)胞增多 癥血漿量的變化而引起抗凝劑在血漿中絕對(duì)含量 改變，進(jìn)而影響試驗(yàn)結(jié)果。因此在日常工作中要注 意紅細(xì)胞壓積的變化，當(dāng)hct超出或低于正常范 圍時(shí)，應(yīng)用計(jì)算公式隨時(shí)調(diào)整抗凝劑的用量，以保 證抗凝劑有血漿中的絕對(duì)含量不變5。公式：抗凝劑用量(ml)=0.00185X全血量(ml) X (1-hct%)2.試劑2.1 .試劑的選擇 試劑的質(zhì)量是確保結(jié)

22、果可靠性的先決條件，試劑的選擇一方面要根據(jù)所用 檢測儀器的類型，另一方面要根據(jù)試驗(yàn)檢測 目的選擇對(duì)其敏感的試劑。如aptt試驗(yàn)時(shí) 所用的活化劑不同，對(duì)血內(nèi)肝素狼瘡抗凝物 質(zhì)及因子血、ix缺乏癥的敏感性也不同， 所以要根據(jù)檢測項(xiàng)目來選擇不同活化劑的 aptt試劑，為了試驗(yàn)結(jié)果便于比較和估計(jì) 抗凝劑療效或指導(dǎo)用藥，最好選擇inr報(bào) 告方式，因此，選擇試劑應(yīng)標(biāo)有isi值， 理論上isi值越接近1.0越好，isi值的 高低決定inr的精度，也決定了試劑的質(zhì) 量6。2.2 .試劑的使用及保存2.2.1. 試劑在使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按說明書操作。試劑 復(fù)溶劑一般為蒸餾水，注射用水及ph 6.0 7.0去離子水，如

23、復(fù)溶劑ph值增高會(huì) 使凝固時(shí)間延長，若水質(zhì)混濁表明有污染 或鈣離子存在，含有保護(hù)劑抗生素抗體或 其他添加劑的水，不能用于試劑的復(fù)溶 齊U。復(fù)溶劑后的試劑不能反復(fù)凍融，不用 時(shí)應(yīng)加蓋并保存在2 °C8C ;所有試劑 均應(yīng)在有效期內(nèi)使用。2.2.2. 試劑使用中要注意污染的問題，避免如試 劑瓶蓋錯(cuò)蓋，造成交叉污染，用同一吸管 或移液頭造成試劑標(biāo)本的交叉污染等。3操作的因素試驗(yàn)操作技術(shù)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有很大的影響，即使 很微小的變化也會(huì)造成試驗(yàn)結(jié)果的明顯的變化 。3.1首先要檢查儀器電源、光源是否穩(wěn)定，預(yù) 熱時(shí)間或溫度設(shè)置是否正確。3.2檢查所有試劑、緩沖液、標(biāo)本是否合格， 如有問題及時(shí)更換。3

24、.3每次檢測之前，應(yīng)先檢測參比血漿或質(zhì)控 血漿以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。3.4加試劑時(shí)要防止氣泡產(chǎn)生，無論是透射光 還是散射光測定，防止氣泡產(chǎn)生是保證結(jié)果準(zhǔn)確性 的前提，有氣泡時(shí)凝血時(shí)間會(huì)假性延長。3.5在加樣過程中除保證樣品量的準(zhǔn)確外，還 應(yīng)保持加樣器與反應(yīng)杯垂直，加樣動(dòng)作要穩(wěn)、準(zhǔn)、 快，既要讓感應(yīng)器充分接觸，又不能停頓時(shí)間過 長。測定過程中應(yīng)保持反應(yīng)杯的清潔，防止外異物 掉入比色杯。4藥物與疾病因素某些藥物本身就具有影響凝血機(jī)制的功能或是 有協(xié)同抗凝作用，如水合氯醛、阿司匹林、保泰松、 氯貝丁酯、吲哚美辛等可使口服抗凝藥物在血液中 濃度明顯增高。有資料表明7,大劑量使用青 霉素，當(dāng)血漿青霉素

25、濃度達(dá)5000u/ml 時(shí)pt、 aptt明顯延長，且隨藥物濃度的增加而時(shí)間延 長；頭孢哌酮具有甲硫甲唑環(huán)的側(cè)鏈與前凝血酶原 相仿；羧酶可錯(cuò)誤地與抗生素結(jié)合而導(dǎo)致凝血酶原 的形成減少，干擾肝臟中vk的代謝，導(dǎo)致低凝血 酶血癥8。肝素、華法林、雙香豆素、低分子 右旋糖酐等可抑制凝血酶，從而妨礙纖維蛋白原變 為纖維蛋白，阻止血小板的粘附和聚集，使血漿中 抗凝物質(zhì)含量增多，影響凝血試驗(yàn)，使凝固時(shí)間延 長。除藥物對(duì)凝血試驗(yàn)結(jié)果的影響之外，很多疾病 的因素也對(duì)結(jié)果有很大的影響。如die時(shí)，由于 凝血因子的大量消耗和產(chǎn)生的fdp拮抗凝血酶的 作用，使pt延長。但在die早期，病人血液處 于高凝狀態(tài)，pt縮

26、短。此時(shí)分析血凝結(jié)果一定要 結(jié)合患者病情進(jìn)展程度。各種疾病導(dǎo)致溶血、黃疸 脂血、紅細(xì)胞含有磷脂，能縮短aptt的值。當(dāng) het > 50%時(shí)血漿中抗凝劑濃度增高，aptt假性 延長；相反，hte < 20%時(shí)aptt假性縮短，應(yīng)適 當(dāng)調(diào)整凝劑用量可減少影響。各種原因引起的出血 傾向，不能僅依靠血凝分析判斷作為診斷指標(biāo)，因 為血凝分析受的影響因素太多太雜，應(yīng)結(jié)合血小板 計(jì)數(shù)、3p試驗(yàn)等共同作為診斷指標(biāo)。高血壓或急性呼吸窘迫綜合征等疾病時(shí)，血管 因缺氧和硬化發(fā)生，腫脹損傷，激活內(nèi)外凝血途 徑，導(dǎo)致凝血功能顯著增強(qiáng)，繼而引起一系列敏感 指標(biāo)的改變9,10。除上述分析的影響因素外，季節(jié)變化

27、以及飲食 因素等都對(duì)凝血實(shí)驗(yàn)有影響，如茶葉中的茶多酚， 桔汁中的枸櫞酸鹽，海帶中的藻酸雙酯鈉等都有抗 凝作用。由此可見，血凝試驗(yàn)的結(jié)果受多方面因素的影 響，只有掌握和了解這些，才能盡可能避免不利因 素的干擾和錯(cuò)誤的解釋，才能真正給臨床以幫助?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1.肖秀林，陳紅宇，王昌富，等.pt和aptt 樣本采集順序和保存溫度的探討.上海醫(yī)學(xué) 檢驗(yàn)雜志，2001，16(2) : 104.2. 康志榮.不同存放條件對(duì)血漿凝血試驗(yàn)結(jié)果的影響臨床檢驗(yàn)雜志，1998 , 16(1) : 52.3. 李立青.標(biāo)本放置時(shí)間及溫度對(duì)凝血三項(xiàng)測 定結(jié)果的影響.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2004， 3(5) : 47.4. 張

28、金蓮.標(biāo)本離心條件和放置時(shí)間對(duì)凝血酶 原時(shí)間和活化部分凝血活酶時(shí)間的影響.鄭 州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2004，39：675.5. 叢玉隆，王淑娟.今日臨床學(xué).北京：中國科 學(xué)技術(shù)出版社，1997，10. 6 程峰，朱忠 勇.凝血酶原時(shí)間測定標(biāo)準(zhǔn)化及在抗凝治療 中應(yīng)用.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1995，18(2): 111.7常劍峰.大劑量伕內(nèi)酰胺類抗生素凝血實(shí)驗(yàn) 的干擾.臨床檢驗(yàn)雜志，2000，18：211.8徐淑云.臨床用藥指南.合肥：安徽科技出版 社, 1997，58.9門劍龍.原發(fā)性高血壓患者測定凝血抗凝等 指標(biāo)的臨床意義.臨床檢驗(yàn)雜志,2000 , 18(4)250.10門劍龍急性呼吸窘迫綜

29、合癥患者抗凝血 及纖溶系統(tǒng)功能狀態(tài)改變的觀察臨床檢驗(yàn)雜 志，2000，18(6) : 372.作者單位：1 130062 吉林長春，長春市第二 醫(yī)院6. 130062 吉林長春，長春市朝陽區(qū)人民醫(yī)院 篇四：生理學(xué)影響血液凝固因素的實(shí)驗(yàn)報(bào)告 模板一實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1、觀察纖維蛋白原在凝血過程中的作用：實(shí) 驗(yàn)中可見靜置燒杯內(nèi)的血液發(fā)生凝固。攪拌杯內(nèi)的血液不發(fā)生凝固,但毛刷上可見紅色 的血凝塊，將毛刷沖洗干凈后可見毛刷上纏有白色 絲狀物。2、 觀察影響血凝的一些理化因素：實(shí)驗(yàn)條件凝血時(shí)間棉花少許2' 00''石蠟油潤滑整個(gè)試管表面30' 16''37攝氏度水

30、浴中3' 30''浸在盛有碎冰塊的燒杯中&gt;20 '加肝素10個(gè)單位（加血后搖勻）&gt;20 '加草酸鉀2mg&gt;20 '從表9-1可以看出：棉花和石蠟油是觀察血液 接觸粗糙程度對(duì)血液凝固的影響，結(jié)果血液中加有 棉花時(shí)血液凝固速度比石蠟油明顯快很多；水浴是 觀察溫度對(duì)血液凝固的影響，結(jié)果放于冰水低溫環(huán) 境中的血液凝固速度比置于37攝氏度溫水環(huán)境中 的明顯要慢；當(dāng)血液中加了肝素、草酸鉀等抗凝1.2.3.4.5.6.劑，在20分鐘內(nèi)均不發(fā)生凝血，往該兩管各加 0.025mol/l cacl2 溶液23滴后，肝素管仍

31、舊沒有發(fā)生血液凝固，草酸鉀管整體沒有發(fā)生血液 凝固，但出現(xiàn)血凝塊懸浮于試管中。7.觀察內(nèi)源性和外源性凝血過程：如下表9-2 所示表9-2內(nèi)源性和外源性凝血過程的觀察試劑第一管第二管第三管1、富血小板血漿0.2ml2、少血小板血漿0.2ml0.2ml3、牛理鹽水0.2ml0.2ml4、羊肺懸液0.2ml5、0.025mol/l cacl20.2ml0.2ml0.2ml血漿凝固時(shí)間2' 9''4' 42''15''從表9-2可以看出：第三號(hào)試管凝血速度最 快，第一號(hào)試管凝血速度次之，第二號(hào)試管凝血速 度最慢。（一） 討論：血液凝固是指

32、血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)變?yōu)椴涣?動(dòng)的凝膠狀態(tài)的過程。其過程分為三個(gè)主要階 段：凝血酶原激活復(fù)合物的形成 ；凝血酶的 的激活；纖維蛋白的生成。在凝血酶原激活復(fù) 合物的形成過程中分有兩種不同的途徑：內(nèi)源性凝 血途徑和外源性凝血途徑。內(nèi)源性凝血途徑是由凝 血因子皿啟動(dòng)的，參與血凝的全部凝血因子都在 血漿內(nèi)。凝血因子皿可被各種帶負(fù)電荷的物質(zhì)所 激活，如血管內(nèi)膜破損后暴露的膠原纖維、玻璃、 陶器等。外源性凝血途徑是由存在于血管外組織中 的凝血因子ni （組織因子）所啟動(dòng)的，其余參與 血凝的凝血因子也在血管內(nèi)。凝血因子込在腦、 肺等組織含量很豐富不管是內(nèi)源性凝血途徑或外源性凝血途徑，它 們最后都是由于血纖維

33、蛋白的形成而使血液發(fā)生 凝固的。在觀察纖維蛋白原在凝血過程中作用的實(shí) 驗(yàn)中，由于參與凝血的全部凝血因子都在血漿中， 因此其凝血過程是屬于內(nèi)源性凝血。由于玻璃和毛 刷表面都帶有負(fù)電荷，后者可激活凝血因子 皿, 啟動(dòng)內(nèi)源性凝血過程。凝血到最后階段時(shí)，在凝血 酶的作用下，把纖維蛋白原激活成纖維蛋白，形成 的纖維蛋白不斷地交叉成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，把血液中得所 有血細(xì)胞網(wǎng)羅其中，從而使血液發(fā)生凝固。靜置杯 中的血液，由于發(fā)生了上述的血液凝固過程，所形 成的纖維蛋白沒有被破壞，所以杯中的血液凝固。 而攪拌過的杯內(nèi)的血液，雖也發(fā)生了血液凝固過程，但所形成的纖維蛋白卻不斷纏繞到 毛刷上，當(dāng)杯內(nèi)血液的纖維蛋白原全部激活

34、后，所 形成的纖維蛋白也全部纏繞在毛刷上，這時(shí)纖維蛋 白只能網(wǎng)羅毛刷附近的一些血細(xì)胞，所以在毛刷上 見有血塊。經(jīng)水漂洗后血細(xì)胞被沖走，毛刷上剩下 的是白色細(xì)絲狀的纖維蛋白。攪拌后的杯內(nèi)的纖維 蛋白原全部被耗盡，無法再形成纖維蛋白，則攪拌 后的杯內(nèi)血液不發(fā)生凝固。人體內(nèi)已知的凝血因 子，除凝血因子iv是ca2 +外，其余的凝血因子 都是蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)對(duì)溫度敏感，過低溫度會(huì)使之 失活但不變性，過高溫度會(huì)使之變性而失活。人體 內(nèi)本質(zhì)為蛋白質(zhì)的凝血因子、凝血酶等在37攝氏 度（即人體正常體溫）時(shí)活性最高，凝血因子的作 用是將凝血酶原激活成凝血酶，凝血酶進(jìn)而將纖維 蛋白原水解成纖維蛋白，最終發(fā)生凝血；在冰水浴 中血液的凝血因子失活或活性很低，不能有效形成 纖維蛋白，故不發(fā)生凝血或凝血速度很慢，因此放 于冰水低溫環(huán)境中的血液凝固速度比置于 37攝氏 度溫水環(huán)境中的明顯要慢。肝素是一種酸性黏多