革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)步驟_第1頁
革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)步驟_第2頁
革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)步驟_第3頁
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1、-作者xxxx-日期xxxx革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)步驟【精品文檔】革蘭氏染色一實(shí)驗(yàn)流程：1、 取載玻片用紗布擦干，載玻片的一面用marker筆畫一個(gè)小圈（用來大致確定菌液滴的位置）。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。 2、 涂片： 液體培養(yǎng)基：左手持菌液試管，在酒精燈火焰附近5cm左右打開管蓋；右手持接種環(huán)在火焰中燒灼滅菌，等冷卻后從試管中沾取菌液一環(huán)，在潔凈無脂的載玻片上涂直徑2mm左右的涂膜，最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。 固體培養(yǎng)基：先在載玻片上滴一滴無菌水，再用接種環(huán)取少量菌體，涂在載玻片上，使其薄而均勻。 3、 晾干：讓涂片在空氣中自然干燥。 4、 固定：讓菌膜朝上，通過火焰2-3次固定（

2、以不燙手為宜）。 5、 染色：將固定過的涂片放報(bào)紙上，滴加草酸銨結(jié)晶紫液，染1min。 6、 水洗：用水緩慢沖洗涂片上的染色液，用吸水紙吸干。簡(jiǎn)單染色結(jié)束可觀察細(xì)胞形態(tài)。 7、 媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。 8、 脫色：吸去殘留水，連續(xù)滴加95%乙醇脫色20-30s至流出液無紫色，立即水洗。 9、 復(fù)染：滴加蕃紅復(fù)染3-5min，水洗。至此，革蘭氏染色結(jié)束。二染色結(jié)果：革蘭氏陽性菌都呈紫色，革蘭氏陰性菌都呈紅色。備注：1.革蘭氏陽性菌：葡萄球菌屬（主要是金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、鏈球菌屬（肺炎鏈球菌、草綠色鏈球菌、腸球菌等）、白喉?xiàng)U菌、炭疽桿菌、破傷風(fēng)桿菌、蠟樣芽孢桿菌等，其中，金黃色葡萄球菌、腸球菌等為臨床重要等病原菌。2.革蘭氏陰性菌：埃希氏菌屬、枸櫞酸菌屬、假單胞菌屬（綠膿桿菌等）、莫拉菌屬（卡他莫拉菌等）、奈瑟菌屬（淋球菌、腦膜炎雙球菌等）、不動(dòng)桿菌屬（鮑曼不動(dòng)桿菌、羅菲不動(dòng)桿菌等）、克雷伯菌屬（主要是肺炎克雷伯桿菌）、沙門氏菌屬、志賀氏菌屬（痢疾桿菌等）、黃桿菌屬、變形桿菌屬、軍團(tuán)菌屬、耶爾森菌屬、嗜血桿菌屬（杜

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