核磁共振譜儀培訓(xùn)PPT

1、rxnBROKERCXJ扌圈科彖色令波材科技水方工殍斫宛斫Ningbo Institute of Material Technology and Engineering Chuiese Academy of Sciences NIMTE超導(dǎo)傅里葉變換核磁共振譜儀張公軍公共技術(shù)服務(wù)中心2010年9月第二分核磁壟振的基本原理 第二部分核磁共振儀器介紹第三部分核磁共振實驗第四部分核磁共振實驗室安全注意事項第一部分核磁共振的基本原理一、核磁共振是一種物理現(xiàn)象，一種用來研究物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)及物理 特性的光譜學(xué)方法.將磁性原子核放入強磁場后，用適宜頻 率的電磁波照射，它們會吸收能量，發(fā)生原子核能級躍遷， 同

2、時產(chǎn)生核磁共振信號，得到核磁共振。利用核磁共振光譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)測定，定性與定量分析的方 法稱為核磁共振波譜法。簡稱NMR二、核磁共振的應(yīng)用領(lǐng)域1. 化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定：天然產(chǎn)物化學(xué)、有機合成化學(xué)2. 動態(tài)過程的研究：反應(yīng)動力學(xué)、研究平衡過程（化 學(xué)平衡或構(gòu)象平衡）3. 三維結(jié)構(gòu)研究：蛋白質(zhì)、DNA/DNA復(fù)合物、多糖4. 藥物設(shè)計：NMR研究構(gòu)效關(guān)系5. 醫(yī)學(xué)磁共振成像（MRI）三、核磁共振分類1 按使用范圍分(1)液體有機化合物，天然產(chǎn)物，生物大分子(2)固體不溶性的高分子材料、膜蛋白、剛性的金屬及非金屬材 料。成像、研究動、植物形態(tài)的微成像、功能成像和分子成像。2按磁場源分永久磁鐵、電磁鐵、超導(dǎo)磁場

3、3. 按磁場強度分100, 300, 400, 500, , 800, 900MHZ (兆赫茲),頻率 越高，分辨率越高4. 按射頻源和掃描方式不同分(1) 連續(xù)波NMR譜儀(CW-NMR) 固定電磁波頻率，連續(xù) 掃描靜磁感強度或者固定靜磁感強度，連續(xù)改變電磁波頻 率，具有該種工作方式的譜儀。(2) 脈沖傅立葉變換NMR譜儀(FT-NMR)在某一時刻對樣 品應(yīng)加一個相當(dāng)寬的頻譜的射頻，使不同基團的核同時共 振，同時產(chǎn)生各自的核磁共振信號。四、原子核的磁性原子核具有質(zhì)量并帶正電荷，人多數(shù) 核有自旋現(xiàn)象，在自旋時產(chǎn)生磁矩 小磁矩的方向可用右手定則確定， 核磁矩|Ll和核自旋角動量P都是矢 量，方向

4、相互平彳亍，且磁矩隨角動量 的增加成正比地增加|li = yP丫一磁旋比，不同的核具有不同的磁 旋比，對某元素是定值。是磁性核的 一個特征常數(shù)核的自旋角動量是量子化的，與核的自旋量子數(shù)I的關(guān)系如下:p =7/(/+ 1) /可以為0,丄一,2等值 2 2代入上式得：吋2兀當(dāng)1=0時,P=0,原子核沒有自旋現(xiàn)象只有I >0,原子核才有自旋 角動量和自旋現(xiàn)象實踐證明，核自旋與核的質(zhì)量數(shù),質(zhì)子數(shù)和中子數(shù)有關(guān)質(zhì)量數(shù)（a）原子序數(shù)（Z）自旋量子（I）例子奇數(shù)奇或偶心AA2 2 2“£,比,叱6，嚇9啊35/ = ,"55,35C/I7,/ = y,l76>8偶數(shù)偶數(shù)012

5、廣 16門32 £5，A”偶數(shù)奇數(shù)1, 2, 3無自旋，沒有磁矩，不產(chǎn)生共振吸收No spin/-0Spinning sphere原子核可看作核電荷均勻分布的球體，并象 陀螺一樣自旋，有磁矩產(chǎn)生，是核磁共振研 究的主要對象。這類原子核的核電荷分布可看作一個橢圓 體，電荷分布不均勻，共振吸收復(fù)雜，研究 應(yīng)用較少；靜磁場下原子核的磁性BNet Polarization2010-10-122010-10-12無靜磁場靜磁場Bo存在時So E與外磁場強度成正比，BO越大，能級分裂越大，ZE越大五、核磁共振的條件如果以一定頻率的電磁波照射處于磁場Bo中的核，且射 頻頻率v恰好滿足下列關(guān)系時：h

6、 v = A EA E= vh B0/2 兀v =汩o（核磁共振條件式）2兀處于低能態(tài)的核將吸收射頻能量而躍遷至高能態(tài)，這種 現(xiàn)彖叫做核磁共振現(xiàn)彖。2010-10-12六、傅里葉變換譜儀的工作原理：磁化矢量、射頻脈沖和FID信號土 I>±RF脈沖，覆蓋了 很寬的頻率范圍。按収裾Receiver0 A當(dāng)相應(yīng)頻率的射頻場(RF)脈沖照射時，宏觀磁化矢量將圍繞著射頻場作用的方向從Z-軸轉(zhuǎn)到X-Y平面上.由該平面上的檢測線圈檢測 出時間域的FID信號，再通過傅立葉變換得到 頻率域的核磁共振譜圖.S(3)2010-10-12弟二部分核磁共振譜儀介紹_400MHz AVANCEIII核磁共

7、振譜儀一、儀器的組成2010-10-122010-10-12磁體系統(tǒng)機柜作控制臺2010-10-121 磁體系統(tǒng)， 包括磁體， 探頭、勻場 系統(tǒng)和前置 放人器(HPPR)2010-10-12一磁體勻場系統(tǒng)HPPR採頭和勻場系統(tǒng)一一田住(1) 磁體，提供強而均勻的磁場超屏蔽磁體，磁場強度9. 4特斯 拉，具有液氨液面監(jiān)視、液氨最小 液面報警，液氨自動監(jiān)視和自動定 時記錄功能。(2) 勻場系統(tǒng)安裝在磁體的下端，是一組載 流線圈，作用是通過補償磁場不均 旬度來改善磁場一致柱。(3) 探頭是核磁譜儀的核心部件，它固定于 磁體的中心，為圓柱形。作用有： A：支撐樣品；B：發(fā)射激發(fā)樣品的射 頻信號并接受共

8、振信號；C：通過壓 縮空氣對樣品旋轉(zhuǎn)。BBO 510 Z方向梯度的多核觀察探 頭，除個別的共振頻率極低的核以 夕卜，兒乎覆蓋了所有的NMR可觀察 核。(4) 前置放大器主要功能是放大樣品放射出的微 弱信號，以減小NMR彳言號仔由纜傳輸 中的曩減。2010-10-122機柜，包含譜儀的大部分電子硬件，主要包括采樣控制系統(tǒng)、 控溫單元、靈巧磁體系統(tǒng)和各種功放。3 操作控制臺譜儀的所有操作動作都有操作控制臺控制。即實驗的設(shè) 置和執(zhí)行以及數(shù)據(jù)的分析都是由操作者輸入控制臺的命令控 制，主要包括計算機（用于運行Topspin程序，負(fù)責(zé)所有數(shù) 據(jù)的分析和存儲）和BSMS鍵盤二、儀器的性能指標(biāo)靈敏度三 220

9、:1(0.1%EBH)2160:l(ASTM3C)三20:1(90% formamide, 15N)2140 訂(TPP/ip)分辨率W0.45 Hz(l%CHCVH) <0.2 Hz (ASTM/13C)線形W5/1O(1%CHC13，1H)W2/4 (ASTM,I3C)90度脈沖寬度 W 15 (0.1%EB, 1H) W 10 (ASTM?3C)三、常規(guī)的NMR實驗1. 一維舊譜、13C譜以及其它原子核譜；2.13C DEPT 135鑒別伯、仲、叔、季碳原子(季碳不出 現(xiàn)峰，伯、叔碳為正峰、仲碳為負(fù)峰)；3. 二維同核實驗(1) H-HCOSY譜鑒別原子核間短程耦合；(2) H-H

10、TOCSY譜鑒別原子間長程耦合；(3) H-HNOESYif鑒別氫原子間的空間位置；4. 二維異核實驗(1) C-H HSQC交叉峰表示C、H鍵相連；(2) C-H HMBC交叉峰表示兩鍵以上相連四、NMR實驗前的準(zhǔn)備1 .樣品純度咼，不含有磁性物質(zhì)，樣品的完全溶解。2. 溶劑一一氟代試劑重水(DqO)、氛代氯仿(CDCLP、氛代丙酮(Acetone)、宛代二甲基亞硯(DMSO)、宛代二甲基 甲酰胺(DMF)、氛代三氟醋酸(TFA)等。選擇時應(yīng)考慮：溶解度、溶劑信號對樣品頻譜的干擾、粘滯性、成本、水含量3標(biāo)準(zhǔn)樣品用于定標(biāo)四甲基硅烷（CH3）4Si , 6值為Oppm,縮寫：TMS 優(yōu)點：信號簡

11、單，且在高場，其他信號在低場，8 值為正值；沸點低（265°C）,利于回收樣品； 易溶于有機溶劑；化學(xué)惰性此外還有：六甲基二硅醸（HMDC,8值為0.07ppm）,4,4二甲基4硅代戊磺酸鈉（DSS，水溶性，作為極性化合 物的內(nèi)標(biāo)，但三個CH?的5值為0.53Oppm，對樣品信號有影 響）4樣品管樣品管使用應(yīng)注意問題（1）樣品管必須保持干凈，避免沾染灰塵或劃傷。（2）不能使用試管刷刷洗樣品管（3）新的樣品管不一定是干凈的樣品管的旋轉(zhuǎn)：可以提高分辨率； 缺陷是有旋轉(zhuǎn)邊帶樣品管的清洗(1)新樣品管：丙酮清洗23次，5060度干燥5h。(2)用過的樣品管:a:把樣品管內(nèi)的殘留溶液倒入廢液池

12、;b:根據(jù)樣品管使用的宛代試劑的不同，選用不同的溶劑 清洗3次；同時用超聲波清洗機超聲lOmin左右；c：用水清洗3次，然后再用乙醇清洗23次，最后使用丙 酮清洗3次；d：把清洗過的樣品管，50-60°c干燥5h,即可使用。e：如上述方法不能清洗干凈，用無污染的濃硫酸浸泡 幾個小時，再重復(fù)以上操作清洗。五、操作軟件topspin2.1程序，用于整個核磁儀器的控制、實驗數(shù)據(jù)的采 集和處理、分析等。2010-10-122010-10-12TOP5PIN2.12010-10-12第三部分操作指南2010-10-12一、樣品的準(zhǔn)備1取一定量的樣品放入干凈的樣品管中，一般】H譜取5mg左 右；

13、de譜取50mg左右；2加入一支氛代試劑（約05ml）3蓋上樣品管，輕輕搖動，使其溶解；4將樣品管插入轉(zhuǎn)子中，用定深量筒控制樣品管的高度。（切 勿過深）2010-10-12二、開空壓機提供穩(wěn)定的氣流1打開電源開關(guān)2壓力達(dá)到0. 5以上，聽到有放氣的聲音32010-10-12trig1編出壓力3?扌菲氣口三、樣品的測定以0l%EB/CDC13樣品為例TCP5PIN Z.l1打開軟件：雙擊桌面上的topspin2.1圖標(biāo)“ topspin2.1程序的窗口H Hr liter lUIIUN 2A »a II' /MUXHin m esFile Edi View Spectromet

14、er Process!ng Analysis Options Wndow HelpR n rii ：m a 38 5 W- T ¥ UJWSMXJQ 2D>wsmkO DW»an2010-10-122010-10-12譜圖顯示區(qū)命令行實驗狀態(tài)顯焉靜|“MT|沏!Sprier*CeJ111念/an兀TQCraLt.2010-10-122打開一張已做過的譜圖：展開“D:”中的“customenlO”文件夾，選擇任意個文件如“10010407001=按住鼠標(biāo)左鍵，拖拽到譜圖顯示區(qū)Filq god View SOjectCQirwter ProcQssir>o_Anai

15、ysxs_qQ-tionsVin-do?<_HeQ匚回岡2010-10-122010-10-122c丿 - rrr2n*t/t - X 函徴61©000©已4*7 -* f t A 詢0 apk "02010-10-12l!ifiA引叭卿X兇5g5 A135 U 50I Q CuSXOfref-08*匸 custofrer-09刀亠TP臚10010407001 1001041200! U1D0104130D2 J1D01M240D1 4' 010010430001 *' )10010430002 U1DO1W3OOD3 -O1D01D4300

16、04 4» lJ 10010443001 取 U1001D4430D2 -< U1DO1D519OD1 *' U>1C»!052OOD1 _i1D01D52TOD3 1D01D52roW 亠二 mninn*mni -J100105&XJD1 t 10010560)02* -J 10010600001 亠 0010600002 *'-3100106KOD1* 亠(XH060M02* -J100106K003* -JIOOIOSKODd 和二 100106005 ' 01001060=006 -10010605007100106Ck5

17、008 亍二0605009 1001082001 "10010826002 創(chuàng) J» 100108203 “ _jioom(>&ooi_ii00m&500l三"力5 PrucPn AiquParj 7tJe PuiProg Pca»*5 rtcgrob Smg Structure Fid 頸qu040709/jsXXL C£jC 0 tH12. 3& pro / 4955. 51 ttcXS* &49C - «3»Valus 0.00 r>I15i10PPmcet3»io

18、a：>no ocquiton runnngRd Flashr<：F*KFJ2,lP3V/CHKVTU(k£Mn)29940S $Utu$ meSrooterII ag ITime10 44AutwNmx LOCFCU" Errcr%B f<2" TC4»3»!X ：. I .$ 3 trc -Pi2010-10-123建立實驗：在命令行中輸入“new”，跳出 一窗口，以下的參數(shù)必改：（1）NAME（實驗名稱）：為實驗預(yù) 約號+樣品的序列號；（2）Solvent（溶劑）:選CDC.experiment Dirs（標(biāo)準(zhǔn)實驗的路徑）

19、：第二個Experiment （標(biāo)準(zhǔn)實驗）：氫譜選 “proton”,“C13CPD”,碳譜選磷譜選“P31CPD”（5） TITLE （樣品的名稱）2010-10-12Ql岡I HI ki歯NewPrepare for a new experiment by creating a new data set and initializing its NMR parameters according to the selected experiment type. For multi-receiver experiments several datasets are created.Please

20、 define the number of receivers in the box below.NAME100827000001EXPNO1PROCNO1DIRD：USERcustomer-10SolventCDCI3Experiment Dirs.MB ruker/T OPSPIN2/exp/stan/nmr/parExperimentPROTONvTITLE100827000001 0.1%EB ODOI3 1H1 Receivers (1,2. .8)T0PSP1H ?.1File E<fl View Spectrometer Processing Analysis Oplion

21、s Window Help待測樣品的窗口復(fù) J» 2.OQUU0UU) O1OO62OOO0OC2 IOOB20008Dn3* 100B2000BDM ，010620009001，O1006200090C2* O 100320009DB3 0100CTD23001 011X623021001 工 O100&23022001Eras Ust50GTCMX；兇mf(Xd27G6COOJ 0 t%B C£CrJ 怕 1(0»2?0»0>1 1 1 a )022003 004'Tiw PubeProopeaw imeQfatiScrre S

22、tnxtire F»)speaat't p(ocPr$ 貝cqP8俗砂夂Orw Ornrsu 4 Jtei2咖Q上 UD£TV<0ATOPSAH* Q D E«2niKa ziv data v/atlablaP> ptwewfl Ms a»edl4ble待測樣品的文件夾 i sta/tXESarrePO/CHKBShG statu, mwRAWwhmx LbEv* ErrorVTU | SpoolerX F« 1Q Cei53JtOE:|的小jkrT旳丹2a ot«pp*們 acQu 的 mwmoTme 1049F

23、idFbrjjOCkAcQJSticci rrcrnatKn樣品的狀態(tài)是否正常2010-10-124放入樣品：（1）先打開樣品腔的上蓋（切記）（2）在命令行中輸入“ej”（打開氣流），等待聽到有氣流的 聲音，把準(zhǔn)備好的樣品放入樣品腔（3）輸入“ij”（關(guān)閉氣流），等待片刻，當(dāng)樣品的狀態(tài)窗口顯 不易“歸訐詢，說晦棒品放龍合岳的位晝。05鎖場：在命令行中輸入“l(fā)ockCDCl。確保靜磁場的穩(wěn)定性，不發(fā)生漂移6探頭的諧振調(diào)諧（tuning）與阻抗匹配（matching） 在命令行中輸入“atma”,自動調(diào)諧與阻抗匹配。2010-10-12S p WXMW:弓 1 D： castmiiK 1(1spe

24、ctrum j ProcPars zquPars rrae PuhePrag Peaks | integral sample | struciure ; Fid At-.：；.Fid FlashSamplePOWCHKVTUSpooler8SMS itatu? messagelime護(hù)VKeMn14; 132978crer.o Ajjtosrirnx Locked x ErrorAug 3021fjEni&KDWTUZ.l LXgtv> rertS ?勺久 2:13 PMAcquisitio n informatcn une nucleus 1H une rrequency 38

25、8. U2 :ercer frequency 400.2322010-10-127勻場：確保相同的原子核在磁場內(nèi)的不同位置具有相同的磁 場強度在命令行中輸入“ts”，進(jìn)行自動勻場£fl8nr TOPH ? 1 g (P-ZH040107 e”Fie EcM Sew Spectrometer Processwig Analysis Options Window Help6二 hp t£ » © T V i 1 dfi0 1 函 ©致QQQdGLiks Bro*» L35I30 Grocpi AJ35勻場效果好：鎖場電平信號在屏幕的4/5

26、«1UU02UUU0UU1* O10QB20008Q02 *0100820006003* O100B2QQ080(M i 0100020009001* 100820009002100820009003* 100B200230D1 *0100023021001* 0 100823022001io 100823022002* 100823022003 ，0100623022004* 0100823022009 » 0100023022006* O100B230220D7i 0100824013001-100B240240D1 a 010082402400201008240240

27、03“ O100B24026001 i 0100824026002* O1Q0B240320Q1i 0100825000001* O100B230D4QQ1 » 0100825004002* 0100025034001， 100825036001* 匸 nuHEunn* ogjwtOrvnf“ Ormrsu latest* 亠eqi 逐 Oznsro* ODfruteATOPSPIHrrr7 MO)2?0iOMl : 1 De custtraar «AXQ>ytKninromi3tKnFOfuwnPOWCWVTU I陽、訓(xùn) 2994Locked# ErrcrTime

28、1049 沁gSpOOKTQ"J»1A3 “4 TC«JtX；.l .r 4 95p 吸£ ?乓久10”側(cè)oxn <2010-10-12&采樣參數(shù)設(shè)置:在命令行中輸入“asecT,給出與脈沖相關(guān)的采樣參數(shù)脈沖序列 General掃描次數(shù)ULPROGTDzg306553616CZICZJDSSWH HZAQs28223.683.9846387譜寬(1H: 0-16ppm, 13C: 0-250 ppmDE ps6.50D11.00000000TDO1 Channel f1NUC1伯Edit|P1 IMS10.00PL1 dB120.00PL1

29、W|W|0.00000000SFO1 MHZ400.2324716Pulse program for acquisitionTime domain sizeNumber of scansNumber of dummy sea nsSweep width in HzAcquisition timeReceiver gainDwell timePre-sca n-delayRelaxation delay; 1-5 *T1Dimeri引on of accumulation loopNucleus for chan門巳I 1F1 channel- 90 degree high power pulse

30、F1 channel - power level for pulse (default)F1 channel - power level for pulse (default)Frequency of observe chann巳I2010-10-129 調(diào)入標(biāo)準(zhǔn)實驗參數(shù):在命令行中輸入"getprosor9 General2010-10-12PULPROGTDNSDSSWH HzAQ sRGDW|jsDE |JSD1 sTDOPulse program for acquisitionTime domain sizeNumb巳r of scansNumber of dummy sca

31、nsSweep width in HzAcquisition timeReceiver gainDwell timePre-scan-delayRelaxation delay; 1-5 * T1Dimension of accumulation loop2010-10-122010-10-12 Channel f190度脈沖寬度NUC1P1 MS脈沖功率PL1 dBPL1WWSFO1 MHZNucleus for channel 1F1 channel 90 degree high power pulse F1 channel power level for pulse (default)

32、F1 channel - power level for pulse (default) Frequency of observe chann已I2010-10-1210.調(diào)整儀器的增益：“rga”（自動增益）11.樣品采集：“zg”（開始釆樣），得到FID信號TC«*SP»< 2.1 fi IP7MMO107 M »£File E<8 View Spectrometer Processing Analysis Options Window Help“tr”：采樣過程中 保存FID,采樣 繼續(xù)“stop”：停止采樣, 不保存FID j a a

33、 6 w 4 4 a 1 / x 懷 ll 乂 © *? v Si. a 2R8/B $ 5血&a*g i LaugQ GroLpsl/Mas* -J 2.6!UUUyiMZ* 3 100920009003 100B20D23D01 »0100&23021W1由 91003022001* J 100S23022D024 J 100B33022D03* O 100623022004 »O 10TOJ0220OT* J 100523022X16 i 9 100&23022007 OlOCe240l3COl】100BMD24D01 1009M02

34、4D02 *01004024003 ®010C6240260014 J 100824026002* O 1OO&24032DO14 a 10C825000C01"O 100923004001 *J IOOB250MDO2 ®0100W5034001 a»OlOC«&25036DOl* U 1008230360024 J 100&35036003 gBC沁I1MQH »O 10OT27003DD14 J 1008I9D13D03® 01008： 9013CO4*歸m*4 Ornr iOnrrw2敗 AB

35、* jffang曲 DDA£r>eATOPSPf4w lJ D"«mtAkH-x*pHd Hwh LockmfurmstJonnoM 如如 on ruinrgU>e SwnpV? POW"sis 昭 /=7 startJ r c TCWTJ24IxxkCMrr» rrtJ MyCcwwZ*It rr«CKl【JHt總WEITme 14 147 30vtu (keMn| 29T.7Aytrohhix LocMx Cnor2010-10-12四、數(shù)據(jù)處理對原始數(shù)據(jù)（FID信號）進(jìn)行傅里葉變換、相位校正、標(biāo)峰和積分等。在命令行中

36、依次輸入： “efp”進(jìn)行傅里葉變換 “apk”進(jìn)行自動相位校正BlhdUrr TOraIM Z.1 on IP ZHQ6O1O7 m m)r&uFile Eat Vlev/ Spectrometer Processing Analysis Opttom Wndow Helpj J H « L e ?<1 3d 4- A I. J 尤 j % 3 尖衣 O “ ¥ El t 1 At 2R8/B=妥心疥 gg LastflQ 回0呻,| Al 湘 | )UUO2UUJ(3UL> «Ol006200e0Cr2 iOi008200(t0Ci3 10

37、CB200D60CM J 10CB20DD900： i O 1008200購82 i O 1CW8200CTX03 J 10CB20023001 -J IOQB23021OO1 i100823072001O 1OO023O22OCT2 -1008230X003 U 1O0B23DOTM i O 1008230?X05 工10082302200S O 100023072007 10CB24D13001 »OlCfi02dO?4OOl 滾100824024002 s 7 10002-«0?40OT U 1OGB24026OO1 ，O 10002401002 *0 1008240

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39、t;r«t9E?4S Uatusmesiao?AJosrtnx Lortn?d“ BTnrTine 10362010-10-12標(biāo)峰：點擊工具欄中的圖標(biāo)“鳥匕 進(jìn)入標(biāo)峰窗口，進(jìn)行標(biāo)峰, 點擊“印”，保存，退出/Mfirnkor TOPSPIN Z1 x (P 2H060107 m nmrw匚I岡File Edit Vkw Spckomotor Proco$slife Analysis Options Window Help 匕印倉 © 2八d 厶心 4a|j ui ± s o >- r 7 $ 出Z/ZF/8 二盍邑©® 盤 Q 致* *

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43、出許多方框。調(diào)整方框的大小刪除所右方框手動標(biāo)定peak。點選此模式，則鼠標(biāo)移到想要標(biāo)記的位置，按鼠標(biāo)左鍵標(biāo)記半自動標(biāo)定Peak。此模式會從按下左鍵的位置向右尋找 則不需精確對準(zhǔn)峰頂。刪除所有Peak標(biāo)記習(xí)各Peak標(biāo)I己存入Peak List,離開 Peak picking 模式不保存離開積分：點擊進(jìn)入積分窗口。從譜圖的左邊第一個譜峰開 始積分，按住鼠標(biāo)左鍵，拖動光標(biāo)到譜峰右邊，然后釋放鼠 標(biāo)，重復(fù)積分剩余的譜峰。點擊“別”，保存。2.1 m (P-2IW6O1O7 m mwsuFile Ecfi View Spectrometer Processing Analysis Options Wi

44、ndow Help勺,Q 總加M £鳥J良J* LA A ® 6卜幫（3 丫丄"吆/2*8忌0 夏囲巴二T I 1 zpnp e： <*pErowser LastSO | GroLps xuias uJ lUUdAJUiyUUl F 010C6200C6002* 0 1009200他003 UIOC02OOO3OW U10C6200W001* o IQO02ODD9OD2 0 10C6200OT003 t U10C620023001仝 0 100823021001 0100623022001 0 100023022002* U 100923022003 ，

45、10C623022004 lJ 100923022005* 0 1009230220C600923022007 t O10OT24013001* 010C624024001* Q1OC024O24OCr2 ai0C62402d0CT 10062402001 U 100924026002* UIOC024O52OO1* Q10C6250C0001* Jj 10Ce250MDOI 壬 010C6250CU002 Ul0Ce250a40Ci1 U 1003200%001 £ 3甌如bWld j, ewam*9Je$ti jmr* «jrrmu二 testr 匸 >3&

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47、形格式(*.pdf)點擊工具欄中的“哪篤進(jìn)入畫圖界面0 1Z54AJ3.«<-5»TZ9T(WJLpJ總回産|閱傳 Mr T*9唄財如 Z& xD0PQ呂曇*血尸 9Deto初b如Zoom in Zoomc-jiFUIPowe1財1Uncto |CDC13 1KA T,t：P>U«X- »wiirr100827000001 O.lBB» NW規(guī)8爼6>15KfONod*F«MetprW5FlXX：start£ 1 »40 g90BC2240. WO a An Wfi».s1.GOO GO 000CSUXVIL tl IN-1.00 11. WW412 <W JJZ471CME 4W.Z3WW09.5 9.0 8.5 8Q 7萬 7.0 6.5 6.0 55 5.0 4.5 4.0 3.5 nrwoaz*a rCPVTJ2.l匕 t&