藥物的雜質(zhì)檢查-全面

1、第三章第三章 藥物的雜質(zhì)檢查藥物的雜質(zhì)檢查第一節(jié)第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量藥物的雜質(zhì)與限量第二節(jié)第二節(jié) 雜質(zhì)的檢查方法雜質(zhì)的檢查方法第三節(jié)第三節(jié) 藥物中一般雜質(zhì)的檢查藥物中一般雜質(zhì)的檢查第四節(jié)第四節(jié) 特殊雜質(zhì)的鑒定方法特殊雜質(zhì)的鑒定方法一、藥物的純度一、藥物的純度 指藥物純凈程度，反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣，含有雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素。 3-1 藥物的雜質(zhì)與限量藥物的雜質(zhì)與限量 是指藥物中存在的是指藥物中存在的無治療作用無治療作用或或影響藥物的穩(wěn)定性和療效影響藥物的穩(wěn)定性和療效, ,甚至甚至對人體健康有害對人體健康有害的微量物質(zhì)的微量物質(zhì). .2.藥物的雜質(zhì)藥物的雜質(zhì) 為保證藥品質(zhì)量為保證藥品質(zhì)

2、量, ,確保用藥安全、確保用藥安全、有效有效, ,必須檢查雜質(zhì)必須檢查雜質(zhì), ,控制藥物純度控制藥物純度. . 1. 有毒副作用的物質(zhì) 2. 本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì) 3. 本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)純度：純度：藥物的純凈程度。藥物的純凈程度。雜質(zhì)：雜質(zhì)：ChP規(guī)定任何影響藥品純度的物質(zhì)，是影響規(guī)定任何影響藥品純度的物質(zhì)，是影響藥物純度的主要因素藥物純度的主要因素 。藥物的純度檢查也可稱為雜質(zhì)檢查。藥物的純度檢查也可稱為雜質(zhì)檢查。 需要從藥物的外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查和含需要從藥物的外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查和含 量測定等

3、方面進行綜合評定。量測定等方面進行綜合評定。藥物純度與化學(xué)試劑純度：藥物純度與化學(xué)試劑純度：p藥物純度：從雜質(zhì)對用藥安全、有效和對藥藥物純度：從雜質(zhì)對用藥安全、有效和對藥物穩(wěn)定性的影響等方面來限定。只有合格品物穩(wěn)定性的影響等方面來限定。只有合格品和不合格品兩個等級。和不合格品兩個等級。p化學(xué)試劑純度：從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化化學(xué)試劑純度：從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對使用的影響方面來限定，不考慮雜質(zhì)對生對使用的影響方面來限定，不考慮雜質(zhì)對生物體的生理作用及毒副作用。純度等級包括物體的生理作用及毒副作用。純度等級包括色譜純、光譜純、優(yōu)級純、分析純、化學(xué)純色譜純、光譜純、優(yōu)級純、分析純、化學(xué)純等。等。

4、（一）生產(chǎn)過程中引入（一）生產(chǎn)過程中引入二、藥物雜質(zhì)的來源二、藥物雜質(zhì)的來源（1 1）所用原料不純；）所用原料不純；（2 2）合成工藝中未反應(yīng)完全的原料、反應(yīng)中間體、）合成工藝中未反應(yīng)完全的原料、反應(yīng)中間體、 副產(chǎn)物等；副產(chǎn)物等；（3 3）藥物在制成制劑的過程中產(chǎn)生的新雜質(zhì)；）藥物在制成制劑的過程中產(chǎn)生的新雜質(zhì)；（4 4）合成工藝中使用的試劑、溶劑等；）合成工藝中使用的試劑、溶劑等；（5 5）合成工藝中使用的設(shè)備、器皿可能引入重金屬。）合成工藝中使用的設(shè)備、器皿可能引入重金屬。例：阿斯匹林由水楊酸乙酰化制得例：阿斯匹林由水楊酸乙?；频靡阴；煌耆阴；煌耆?水楊酸水楊酸( (雜質(zhì)雜質(zhì)) )

5、OHCOOH(CH3CO)2O+COOHOCOCH3CH3COOH+H2SO47075oC+例：鹽酸普魯卡因注射液的制備例：鹽酸普魯卡因注射液的制備 制備過程中加熱滅菌制備過程中加熱滅菌鹽酸普魯卡因注射液鹽酸普魯卡因注射液 進一步脫羧轉(zhuǎn)化進一步脫羧轉(zhuǎn)化對氨基苯甲酸對氨基苯甲酸 苯胺苯胺 引起毒性反應(yīng)引起毒性反應(yīng)（二）貯藏過程中引入（二）貯藏過程中引入（1 1）保管不善或貯存時間過長）保管不善或貯存時間過長（2 2）包裝不當）包裝不當產(chǎn)生雜質(zhì)產(chǎn)生雜質(zhì)型轉(zhuǎn)化、潮解、發(fā)霉型轉(zhuǎn)化、潮解、發(fā)霉聚合、異構(gòu)化、晶聚合、異構(gòu)化、晶水解、氧化、分解、水解、氧化、分解、在外界條件在外界條件藥品藥品氣、微生物氣、微

6、生物溫度、濕度、日光、空溫度、濕度、日光、空例：麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下，例：麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下，易氧化分解為易氧化分解為醛醛及有毒的及有毒的過氧化物過氧化物。CH3CH2OCH2CH3 CH3CHO + CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羥乙二羥乙基過氧化物基過氧化物）藥典規(guī)定：啟封后藥典規(guī)定：啟封后24小時內(nèi)小時內(nèi)使用使用96：131在藥物生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)的途徑為 A. 原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成 B. 合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成 C. 需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成 D. 所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì) E.

7、由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì) 三、藥物雜質(zhì)的分類三、藥物雜質(zhì)的分類按來源分為：按來源分為： 檢查方法收載在檢查方法收載在ChP正文各品種的質(zhì)量標準中。正文各品種的質(zhì)量標準中。檢查方法收載在檢查方法收載在ChP的附錄中。的附錄中。 特殊雜質(zhì)：特殊雜質(zhì)：一般雜質(zhì)：一般雜質(zhì)：在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏中容易引入在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏中容易引入的雜質(zhì)。的雜質(zhì)。在特定藥物的生產(chǎn)和貯藏中引入的雜質(zhì)。在特定藥物的生產(chǎn)和貯藏中引入的雜質(zhì)。按毒性分為：按毒性分為： 本身一般無害，但其含量多少可反映藥物本身一般無害，但其含量多少可反映藥物純度水平，指示生產(chǎn)工藝是否合理。純度水平，指示生產(chǎn)工藝是否合

8、理。如：氯化物、硫酸鹽等。如：氯化物、硫酸鹽等。對人體有毒害的雜質(zhì)。在質(zhì)量標準中嚴加對人體有毒害的雜質(zhì)。在質(zhì)量標準中嚴加控制，以保證用藥安全?？刂?，以保證用藥安全。如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等。如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等。 信號雜質(zhì)：信號雜質(zhì)：毒性雜質(zhì)：毒性雜質(zhì)：按化學(xué)類別和特性分為：按化學(xué)類別和特性分為： 無機雜質(zhì)無機雜質(zhì) Cl-、S2-、CN-、重金屬等、重金屬等有機雜質(zhì)有機雜質(zhì) 中間體、副產(chǎn)物、降解物、異構(gòu)體等中間體、副產(chǎn)物、降解物、異構(gòu)體等殘留溶劑殘留溶劑（1）具有光學(xué)異構(gòu)體的藥物，生物活性有很大差異；）具有光學(xué)異構(gòu)體的藥物，生物活性有很大差異；如：腎上腺素為左旋體，其升

9、壓作用是右旋體的如：腎上腺素為左旋體，其升壓作用是右旋體的12倍。倍。（2）順式體與反式體藥物，生物活性也不相同；）順式體與反式體藥物，生物活性也不相同；如：如：VA以全反式的生物活性為最高。以全反式的生物活性為最高。（3）多晶型藥物，晶型不同生物活性也有差異；）多晶型藥物，晶型不同生物活性也有差異；如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑，有如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑，有A、B、C三種晶型。三種晶型。其中其中C晶型的驅(qū)蟲率為晶型的驅(qū)蟲率為90%，B晶型的驅(qū)蟲率為晶型的驅(qū)蟲率為4060%，A晶型的驅(qū)蟲率小于晶型的驅(qū)蟲率小于20%。無效或低效雜質(zhì)無效或低效雜質(zhì)按結(jié)構(gòu)可分為按結(jié)構(gòu)可分為2類類無機雜質(zhì)無機雜質(zhì) ClCl- -、S

10、 S2-2-、CNCN- -、AsAs、重金屬、重金屬. .有機雜質(zhì)有機雜質(zhì) 中間體、副產(chǎn)物、分解物、異中間體、副產(chǎn)物、分解物、異構(gòu)體、殘留溶劑構(gòu)體、殘留溶劑. .按性質(zhì)可分為按性質(zhì)可分為3類類信號雜質(zhì)信號雜質(zhì) 指本身一般無害指本身一般無害, ,但其含量多少可反但其含量多少可反映藥物純度水平映藥物純度水平, ,指示生產(chǎn)工藝是否合理指示生產(chǎn)工藝是否合理. . 如：氯化物、硫酸鹽等如：氯化物、硫酸鹽等. .有害雜質(zhì)有害雜質(zhì) 對人體有毒害的雜質(zhì)對人體有毒害的雜質(zhì). .在質(zhì)量標準中在質(zhì)量標準中嚴加控制嚴加控制, ,以保證用藥安全以保證用藥安全. . 如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等如：重金屬、砷鹽、

11、氰化物、氟化物等. . 無效或低效雜質(zhì)無效或低效雜質(zhì)a a 具有立體異構(gòu)體的藥物具有立體異構(gòu)體的藥物, ,其生物活性其生物活性有很大差異有很大差異; ;如：腎上腺素為左旋體如：腎上腺素為左旋體, ,其升壓作用是其升壓作用是右旋體的右旋體的1212倍倍. .b b 異構(gòu)體中異構(gòu)體中, ,其順式體與反式體的生物其順式體與反式體的生物活性也不相同活性也不相同; ;如：如：V VA A以全反式的生物活性為最高以全反式的生物活性為最高.c c 藥物的晶型不同藥物的晶型不同, ,其理化常數(shù)其理化常數(shù), , 溶解性穩(wěn)溶解性穩(wěn)定性、體內(nèi)的吸收和療效也有差異定性、體內(nèi)的吸收和療效也有差異. . 如：驅(qū)蟲藥甲苯咪

12、唑如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑, ,有有A A、B B、C C三種晶型三種晶型. . 其中其中C C晶型的驅(qū)蟲率晶型的驅(qū)蟲率90%,B,B晶型的驅(qū)蟲晶型的驅(qū)蟲率率4060%,A,A晶型的驅(qū)蟲晶型的驅(qū)蟲 率小于率小于20%. .必須重視異構(gòu)體和多晶型對藥物有效性和必須重視異構(gòu)體和多晶型對藥物有效性和安全性的影響安全性的影響. 控制藥物中低效、無效以及控制藥物中低效、無效以及具有毒性的異構(gòu)體和多晶型具有毒性的異構(gòu)體和多晶型, 在藥物純度研在藥物純度研究中日益受到重視究中日益受到重視四、藥物的純度與化學(xué)試劑的純度四、藥物的純度與化學(xué)試劑的純度 藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥品只有兩個等級：合格或不合格。化學(xué)

13、試劑有很多等級，如基準試劑、優(yōu)級純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純、光譜純。99x：85中國藥典中規(guī)定的一般雜中國藥典中規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查中不包括的項目是質(zhì)檢查中不包括的項目是 A. 硫酸鹽檢查 B. 氯化物檢查 C. 溶出度檢查 D. 重金屬檢查 E. 砷鹽檢查 限量表示方法：百分之幾（限量表示方法：百分之幾（%） 百萬分之幾（百萬分之幾（ppm）對照法對照法靈敏度法靈敏度法比較法比較法四、雜質(zhì)的限量四、雜質(zhì)的限量雜質(zhì)限量：雜質(zhì)限量：藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。雜質(zhì)定量測定法雜質(zhì)定量測定法雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量控制方法控制方法限量檢查法限量檢查法（ChP

14、）例例: :平行試驗平行試驗比較兩比較兩比色管的比色管的顏色顏色或或濁濁度度，判斷雜質(zhì)含量，判斷雜質(zhì)含量是否符合規(guī)定。是否符合規(guī)定。對照管對照管樣品管樣品管對照法：對照法：取取限度量限度量的待檢雜質(zhì)對照品配成的對照溶的待檢雜質(zhì)對照品配成的對照溶液，與一定量供試品配成的供試品溶液，在相同條液，與一定量供試品配成的供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超件下處理，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過限量。過限量。靈敏度法：靈敏度法：在供試品溶液中加入一定量的試劑，在供試品溶液中加入一定量的試劑，在規(guī)定條件下反應(yīng)，不得出現(xiàn)正反應(yīng)。即以在規(guī)定條件下反應(yīng)，不得出現(xiàn)正反應(yīng)。即以檢測

15、檢測條件下的反應(yīng)靈敏度來控制雜質(zhì)限量條件下的反應(yīng)靈敏度來控制雜質(zhì)限量。例：乳酸中枸櫞酸的檢查例：乳酸中枸櫞酸的檢查水水供試品供試品(0.5g) 5mL溶液溶液氨試液調(diào)微堿性氨試液調(diào)微堿性1ml氯化鈣試液氯化鈣試液水浴水浴5min不得產(chǎn)生渾濁不得產(chǎn)生渾濁比較法：比較法：取一定量供試品，在規(guī)定條件下測定待檢雜取一定量供試品，在規(guī)定條件下測定待檢雜質(zhì)的特定參數(shù)（如：吸光度等），與規(guī)定限量比較，質(zhì)的特定參數(shù)（如：吸光度等），與規(guī)定限量比較，不得更大。不得更大。例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查 供試品溶液供試品溶液(2.0mg/ml)鹽酸溶液鹽酸溶液供試品供試品 (0.05mol

16、/L)A310nm規(guī)定：規(guī)定：A310nm 0.05100% 雜雜質(zhì)質(zhì)最最大大允允許許量量雜雜質(zhì)質(zhì)限限量量供供試試品品量量100% 對對照照溶溶液液的的濃濃度度 對對照照溶溶液液的的體體積積供供試試品品量量限量計算公式限量計算公式注意注意: 單位是否統(tǒng)一單位是否統(tǒng)一 供試品是否有稀釋供試品是否有稀釋 表示方法表示方法%或或ppm100%C VLS 610(ppm)C VLS 寫成：寫成：或或610 105 01000 01252 0100.%.%. 100%C VLS 例例1.1.對乙酰氨基酚中氯化鈉的檢查對乙酰氨基酚中氯化鈉的檢查-, Cl25ml100ml2.0g依法檢查樣品過濾溶解水對照

17、溶液：標準對照溶液：標準NaCl溶液（溶液（10 gCl-/ml），），取取5.0ml同法操作比較，濁度不得更大。同法操作比較，濁度不得更大。計算：氯化物限量是多少（計算：氯化物限量是多少（%）？）？供試品溶液：供試品溶液：例例2.2.腎上腺素中酮體的檢查腎上腺素中酮體的檢查取本品取本品0.20g，置，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液量瓶中，加鹽酸溶液(92000)溶解并溶解并稀釋至刻度，搖勻，在稀釋至刻度，搖勻，在310nm處測定吸光度不得超過處測定吸光度不得超過0.05，已知酮體的百分吸收系數(shù)為已知酮體的百分吸收系數(shù)為435，求酮體的限量。，求酮體的限量。11%1cm%1cm/EA clcA

18、 El 酮酮體體-40.05= 1.15 10g/100ml435 1 （）-6= 1.15 10g/ml （ （）-30.20= 2.0 10g/ml100c樣樣品品（）631.15 10100% = 0.06%2.0 10cLc 酮酮體體樣樣品品一、雜質(zhì)的研究規(guī)范一、雜質(zhì)的研究規(guī)范（一）有機雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標準中的項目名稱（一）有機雜質(zhì)在藥品質(zhì)量標準中的項目名稱1.1.以雜質(zhì)的化學(xué)名稱作為項目名稱以雜質(zhì)的化學(xué)名稱作為項目名稱 如：阿司匹林中的如：阿司匹林中的游離水楊酸游離水楊酸2.2.以某類雜質(zhì)的總稱作為項目名稱以某類雜質(zhì)的總稱作為項目名稱 如：如：硝酸毛果蕓香堿中的硝酸毛果蕓香堿中的其它生

19、物堿其它生物堿 黃體酮中的黃體酮中的有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)3.3.以檢測方法作為項目名稱以檢測方法作為項目名稱 如：如：雜質(zhì)吸光度、溶液透光率雜質(zhì)吸光度、溶液透光率3-2 雜質(zhì)的檢查方法雜質(zhì)的檢查方法（二）雜質(zhì)檢查項目的確定（二）雜質(zhì)檢查項目的確定（三）雜質(zhì)限量的確定（三）雜質(zhì)限量的確定在確保用藥安全有效的前提下，應(yīng)考慮到生產(chǎn)的可行在確保用藥安全有效的前提下，應(yīng)考慮到生產(chǎn)的可行性、批與批之間的正常波動、藥品本身的穩(wěn)定性。性、批與批之間的正常波動、藥品本身的穩(wěn)定性。根據(jù)起始原料、生產(chǎn)工藝及穩(wěn)定性情況確定。根據(jù)起始原料、生產(chǎn)工藝及穩(wěn)定性情況確定。藥物在質(zhì)量研究中和穩(wěn)定性考察中檢出的，并在批量藥物在質(zhì)量研

20、究中和穩(wěn)定性考察中檢出的，并在批量生產(chǎn)中出現(xiàn)的生產(chǎn)中出現(xiàn)的雜質(zhì)雜質(zhì)和和降解產(chǎn)物降解產(chǎn)物單一對映體藥物：單一對映體藥物：檢查其它對映體檢查其它對映體消旋體藥物：消旋體藥物：旋光度檢查旋光度檢查雜質(zhì)檢查方法包括化學(xué)法、光譜法、色譜法等。雜質(zhì)檢查方法包括化學(xué)法、光譜法、色譜法等。 有機雜質(zhì)多采用色譜法，特別是有機雜質(zhì)多采用色譜法，特別是HPLC。檢查方法要求專屬、靈敏，應(yīng)驗證方法的專屬性。檢查方法要求專屬、靈敏，應(yīng)驗證方法的專屬性。分析方法的檢測限應(yīng)符合質(zhì)量標準中對雜質(zhì)限度的分析方法的檢測限應(yīng)符合質(zhì)量標準中對雜質(zhì)限度的要求。要求。（四）雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗證（四）雜質(zhì)檢查方法的選擇與驗證二、雜質(zhì)的

21、常用檢查方法二、雜質(zhì)的常用檢查方法顯色反應(yīng)檢查法顯色反應(yīng)檢查法沉淀反應(yīng)檢查法沉淀反應(yīng)檢查法生成氣體的檢查法生成氣體的檢查法滴定法滴定法（一）化學(xué)方法（一）化學(xué)方法NHCH2CH2NH2+顯色（比色法檢查）顯色（比色法檢查）如：氯硝柳胺中如：氯硝柳胺中2-氯氯-4-硝基苯胺的檢查硝基苯胺的檢查 顯色反應(yīng)檢查法顯色反應(yīng)檢查法2雜質(zhì)：雜質(zhì)：2-氯氯-4-硝基苯胺硝基苯胺O2NNHClClOHCONO2NHClO+ NaNO2+ 2HCl2NN2Cl +NaCl2H2O+-ClO2NNNNHCH2CH2NH2Cl如：鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查如：鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查沉淀反應(yīng)檢查法沉淀反應(yīng)檢查法H2N

22、NH2+CHOOHHCOHNNH2+ H2O雜質(zhì)：游離肼NNNHNH2HClCHOCNH2NNH2H2OHCl鹽酸肼屈嗪鹽酸肼屈嗪鹽酸肼屈嗪雜質(zhì)：游離肼雜質(zhì)：游離肼比濁法或重量法檢查比濁法或重量法檢查如：硫酸亞鐵片劑中高鐵鹽的檢查如：硫酸亞鐵片劑中高鐵鹽的檢查滴定法滴定法2Fe3+2KI2Fe2+I22K+I22Na2S2O32NaINa2S4O6與藥典規(guī)定限量進行比較與藥典規(guī)定限量進行比較（二）色譜方法（二）色譜方法1. 薄層色譜法薄層色譜法2. 高效液相色譜法高效液相色譜法3. 氣相色譜法氣相色譜法4. 毛細管電泳法毛細管電泳法難以采用化學(xué)法、光譜法對雜質(zhì)進行檢查時，多難以采用化學(xué)法、光譜

23、法對雜質(zhì)進行檢查時，多 采用色譜法。采用色譜法。色譜法是檢查藥物中有關(guān)物質(zhì)的首選方法。色譜法是檢查藥物中有關(guān)物質(zhì)的首選方法。1.1.薄層色譜法薄層色譜法（1）雜質(zhì)對照品法：雜質(zhì)對照品法：適用于雜質(zhì)已知并有雜質(zhì)對照適用于雜質(zhì)已知并有雜質(zhì)對照品的情況。品的情況。方法：根據(jù)雜質(zhì)限量，取供試品溶液和一定濃度的方法：根據(jù)雜質(zhì)限量，取供試品溶液和一定濃度的雜質(zhì)對照品溶液，分別點于同一薄層板上展開，定雜質(zhì)對照品溶液，分別點于同一薄層板上展開，定位后進行檢查。位后進行檢查。供供 對對供試品溶液除主斑點外的其它斑點與供試品溶液除主斑點外的其它斑點與相應(yīng)雜質(zhì)對照品溶液的主斑點比較。相應(yīng)雜質(zhì)對照品溶液的主斑點比較。

24、示例示例3-8（2）供試品溶液自身稀釋對照法：供試品溶液自身稀釋對照法：適用于雜質(zhì)的結(jié)適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)未知或無雜質(zhì)對照品的情況，且雜質(zhì)斑點顏色與構(gòu)未知或無雜質(zhì)對照品的情況，且雜質(zhì)斑點顏色與主成分斑點顏色應(yīng)相同或相近。主成分斑點顏色應(yīng)相同或相近。方法：先配制一定濃度的供試品溶液，然后按限量方法：先配制一定濃度的供試品溶液，然后按限量要求將其稀釋至一定濃度作為對照溶液，將兩溶液要求將其稀釋至一定濃度作為對照溶液，將兩溶液分別點于同一薄層板上展開，定位后進行檢查。分別點于同一薄層板上展開，定位后進行檢查。供試品溶液的雜質(zhì)斑點與自身稀釋對供試品溶液的雜質(zhì)斑點與自身稀釋對照溶液的主斑點比較。照溶液的主斑

25、點比較。示例示例3-11供供 對對（3）雜質(zhì)對照品與供試品溶液自身稀釋對照并用法：雜質(zhì)對照品與供試品溶液自身稀釋對照并用法： 適用于藥物中存在多個雜質(zhì)的情況。適用于藥物中存在多個雜質(zhì)的情況。 有對照品的雜質(zhì)有對照品的雜質(zhì)：雜質(zhì)對照品法檢查；：雜質(zhì)對照品法檢查； 未知雜質(zhì)未知雜質(zhì)或或沒有對照品的雜質(zhì)沒有對照品的雜質(zhì)：供試品溶液自身：供試品溶液自身 稀釋對照法檢查。稀釋對照法檢查。供供 對對 對對（4）對照藥物法：對照藥物法：適用于適用于無合適的雜質(zhì)對照品，或無合適的雜質(zhì)對照品，或雜質(zhì)斑點顏色與主成分斑點顏色有差異而難以判斷限雜質(zhì)斑點顏色與主成分斑點顏色有差異而難以判斷限量的情況。量的情況。方法：

26、方法： 選用與供試品相同的藥物選用與供試品相同的藥物作為對照。作為對照。對照藥物中所含待檢對照藥物中所含待檢雜質(zhì)應(yīng)符合限量要求，穩(wěn)定性好。雜質(zhì)應(yīng)符合限量要求，穩(wěn)定性好。供供 對對2.2.高效液相色譜法高效液相色譜法使用高效液相色譜法測定含量的藥物，可采用使用高效液相色譜法測定含量的藥物，可采用同一色譜條件同一色譜條件進行雜質(zhì)檢查。進行雜質(zhì)檢查。 采用此法檢查雜質(zhì)時，采用此法檢查雜質(zhì)時，ChP規(guī)定應(yīng)進行色譜系規(guī)定應(yīng)進行色譜系統(tǒng)適用性試驗，以保證儀器系統(tǒng)達到雜質(zhì)檢查統(tǒng)適用性試驗，以保證儀器系統(tǒng)達到雜質(zhì)檢查要求要求。 （1）外標法（雜質(zhì)對照品法）：外標法（雜質(zhì)對照品法）：適用于有雜質(zhì)對照適用于有雜質(zhì)

27、對照品，而且進樣量能夠精確控制的情況。品，而且進樣量能夠精確控制的情況。ACCA 雜雜對對雜雜對對%100%CC雜雜供供雜雜質(zhì)質(zhì)限限量量雜質(zhì)對照品溶液雜質(zhì)對照品溶液供試品溶液供試品溶液（雜）（雜）（對）（對）（2）加校正因子的主成分自身對照加校正因子的主成分自身對照法：法：適用于已知雜適用于已知雜質(zhì)的控制。雜質(zhì)的校正因子（質(zhì)的控制。雜質(zhì)的校正因子（f）和相對保留時間收載）和相對保留時間收載在在ChP各品種的質(zhì)量標準中。各品種的質(zhì)量標準中。/ACfAC 主主主主雜雜雜雜雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品+藥物藥物主成分對照品溶液主成分對照品溶液自身稀釋對照溶液自身稀釋對照溶液（主）（主）（雜）（雜）（主）（主

28、）（雜）（雜）供試品溶液供試品溶液/AfCAC 雜雜雜雜對對照照主主（3）不加校正因子的主成分自身對照不加校正因子的主成分自身對照法：法：適用于沒有適用于沒有雜質(zhì)對照品，且雜質(zhì)結(jié)構(gòu)與主成分相似的情況。雜質(zhì)對照品，且雜質(zhì)結(jié)構(gòu)與主成分相似的情況。ACCA雜雜對對照照雜雜主主自身稀釋自身稀釋對照溶液對照溶液（主）（主）供試品溶液供試品溶液（雜）（雜）（4）面積歸一化面積歸一化法：法：適用于供試品中結(jié)構(gòu)相似、相對適用于供試品中結(jié)構(gòu)相似、相對含量較高，且限度范圍較寬的雜質(zhì)含量的粗略考察。含量較高，且限度范圍較寬的雜質(zhì)含量的粗略考察。雜質(zhì)限量（雜質(zhì)限量（%）=A雜雜/A總總100%A總總=A雜雜1A雜雜2

29、A主主供試品溶液供試品溶液（雜（雜1） （雜（雜2）（主）（主）檢查方法檢查方法：同高效液相色譜法：同高效液相色譜法用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查，如藥物中用于藥物中揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查，如藥物中殘留溶劑、農(nóng)藥殘留量等。殘留溶劑、農(nóng)藥殘留量等。3.3.氣相色譜法氣相色譜法4.4.毛細管電泳法毛細管電泳法用于酶類藥物中酶類雜質(zhì)的檢查用于酶類藥物中酶類雜質(zhì)的檢查。檢查方法檢查方法：同高效液相色譜法：同高效液相色譜法利用藥物與雜質(zhì)對光選擇吸收性質(zhì)的差異進行利用藥物與雜質(zhì)對光選擇吸收性質(zhì)的差異進行檢查。檢查。（三）光譜方法（三）光譜方法1.1.紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法例：腎上腺素中腎上腺酮的

30、檢查例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查 方法：規(guī)定雜質(zhì)最大吸收波長（藥物在此無方法：規(guī)定雜質(zhì)最大吸收波長（藥物在此無吸收）處的吸光度；利用雜質(zhì)的呈色反應(yīng)對吸收）處的吸光度；利用雜質(zhì)的呈色反應(yīng)對其進行定量測定。其進行定量測定。 2.2.紅外分光光度法紅外分光光度法主要用于藥物中主要用于藥物中無效無效或或低效晶型低效晶型的檢查。的檢查。例例：甲苯甲苯達達唑中唑中A晶型的檢查晶型的檢查晶型晶型 640cm-1 662cm-1 A型（無效）型（無效） 強強 弱弱 C型型 弱弱 強強方法：比較供試品溶液與含一定量方法：比較供試品溶液與含一定量A晶型的對晶型的對照品溶液在兩波數(shù)處的吸光度比值。照品溶液在兩波數(shù)處

31、的吸光度比值。3.3.原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法主要用于藥物中主要用于藥物中金屬雜質(zhì)金屬雜質(zhì)的檢查。的檢查。方法：標準加入法方法：標準加入法供試品溶液：供試品溶液： 吸光度為吸光度為b對照溶液：對照溶液： 吸光度為吸光度為a（供試品（供試品+限度量的待測元素）限度量的待測元素）要求：要求：b 1000；毛細；毛細 管色譜柱的管色譜柱的N5000。2.2.待測物色譜峰與相鄰色譜峰待測物色譜峰與相鄰色譜峰R1.5。3.3.以以內(nèi)標法測定時，對照品溶液連續(xù)進樣內(nèi)標法測定時，對照品溶液連續(xù)進樣5次，待測次，待測 物與內(nèi)標物峰面積之比的物與內(nèi)標物峰面積之比的RSD5%；以外標法測以外標法測 定

32、時，待測物峰面積的定時，待測物峰面積的RSD10%。（三）系統(tǒng)適用性試驗（三）系統(tǒng)適用性試驗十一、溶液顏色檢查法十一、溶液顏色檢查法檢查藥物中的有色雜質(zhì)。檢查藥物中的有色雜質(zhì)。ChP附錄收載了三種檢查方法：附錄收載了三種檢查方法：第一法：目視比色法，即與標準比色液比較的方法。第一法：目視比色法，即與標準比色液比較的方法。第二法：分光光度法，即控制藥物溶液在某波長處第二法：分光光度法，即控制藥物溶液在某波長處的吸光度。的吸光度。第三法：色差計法，即用色差計對藥物溶液的顏色第三法：色差計法，即用色差計對藥物溶液的顏色進行定量表述和分析。進行定量表述和分析。十二、溶液澄清度檢查法十二、溶液澄清度檢查

33、法檢查藥物中的檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項檢查。一般應(yīng)作此項檢查。 檢查方法：比濁法檢查方法：比濁法從水平方向觀察、比較從水平方向觀察、比較供試品溶液供試品溶液濁度標準液濁度標準液 暗室內(nèi)垂直同暗室內(nèi)垂直同 置傘棚燈下置傘棚燈下（照度（照度1000lx）置配對的置配對的比濁管中比濁管中(CH2)6N4 + 6H2O 6HCHO + 4NH3HCHO + H2N-NH2 H2C=N-NH2 + H2O 甲醛腙白色混濁甲醛腙白色混濁濁度標準液制備原理：濁度標準液制備原理：1.00硫酸肼溶液與硫酸肼溶液與10烏洛托品溶液等量混合配制烏洛

34、托品溶液等量混合配制濁度標準貯備液濁度標準貯備液 濁度標準原液濁度標準原液 濁度標準液濁度標準液( (5個級號，個級號，0.5、1、2、3、4）稀釋稀釋稀釋稀釋濁度標準液配制方法：濁度標準液配制方法：ChP規(guī)定的規(guī)定的“澄清澄清”，指供試品溶液的澄清度相，指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑或未超過同于所用溶劑或未超過0.5號濁度標準液。號濁度標準液。判斷：判斷：多數(shù)藥物的澄清度檢查以水為溶劑，如水溶性不好，多數(shù)藥物的澄清度檢查以水為溶劑，如水溶性不好，也可采用酸、堿或有機溶劑為溶劑。也可采用酸、堿或有機溶劑為溶劑。有機酸的堿金屬鹽類藥物強調(diào)用有機酸的堿金屬鹽類藥物強調(diào)用“新沸過的冷水新沸過的冷

35、水”。注意事項：注意事項：3-4 特殊雜質(zhì)的鑒定方法特殊雜質(zhì)的鑒定方法一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范1.1.新原料藥和新制劑中的雜質(zhì)新原料藥和新制劑中的雜質(zhì) 表觀含量表觀含量0.1%和表觀含量和表觀含量0.1%具強烈生物作用具強烈生物作用 或毒性的雜質(zhì)，要求定性或確證其結(jié)構(gòu)。或毒性的雜質(zhì)，要求定性或確證其結(jié)構(gòu)。 包括：包括：藥物合成中的藥物合成中的有機雜質(zhì)有機雜質(zhì)； 穩(wěn)定性試驗中的穩(wěn)定性試驗中的降解產(chǎn)物降解產(chǎn)物。 2.2.非新藥中發(fā)現(xiàn)的新雜質(zhì)和新降解產(chǎn)物非新藥中發(fā)現(xiàn)的新雜質(zhì)和新降解產(chǎn)物3.3.手性藥物的手性藥物的光學(xué)異構(gòu)體光學(xué)異構(gòu)體（一）合成雜質(zhì)對照品法（一）合成雜質(zhì)對照品法適用

36、于量少，分離純化困難的雜質(zhì)。適用于量少，分離純化困難的雜質(zhì)。方法：比較雜質(zhì)與對照品的色譜性質(zhì)、方法：比較雜質(zhì)與對照品的色譜性質(zhì)、UV曲線特征和曲線特征和MS信息，判斷雜質(zhì)與對照品是否是同一種化合物，從信息，判斷雜質(zhì)與對照品是否是同一種化合物，從而確定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)。而確定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)。（二）色譜制備雜質(zhì)對照品法（二）色譜制備雜質(zhì)對照品法適用于量較大的雜質(zhì)。適用于量較大的雜質(zhì)。方法：通過色譜分離得到特定雜質(zhì)，再通過元素分析、方法：通過色譜分離得到特定雜質(zhì)，再通過元素分析、UV、IR、NMR和和MS確定雜質(zhì)及有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。確定雜質(zhì)及有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。二、特殊雜質(zhì)的鑒定二、特殊雜質(zhì)的鑒定（一）最佳選擇題（

37、一）最佳選擇題1.1.下列屬于信號雜質(zhì)的是（下列屬于信號雜質(zhì)的是（ ） A. 砷鹽砷鹽 B. 硫酸鹽硫酸鹽 C. 鉛鉛 D. 氰化物氰化物 E. 汞汞2.2.藥物中無效或低效晶型的檢查可以采用的方法是藥物中無效或低效晶型的檢查可以采用的方法是（ ） A. 高效液相色譜法高效液相色譜法 B. 紅外分光光度法紅外分光光度法 C. 紫外紫外-可見分光光度法可見分光光度法 D. 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 E. 氣相色譜法氣相色譜法3.3.原子吸收分光光度法檢查藥物中金屬雜質(zhì)時，通原子吸收分光光度法檢查藥物中金屬雜質(zhì)時，通 常采用的方法是（常采用的方法是（ ） A. 內(nèi)標法內(nèi)標法 B. 外標

38、法外標法 C. 加校正因子的主成分加校正因子的主成分 自身對照法自身對照法 D. 標準加入法標準加入法 E. 不加校正因子的主成分自身對照法不加校正因子的主成分自身對照法4.4.藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液 中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是 ( ) ( ) A. 硫酸硫酸 B. 硝酸硝酸 C. 鹽酸鹽酸 D. 醋酸醋酸 E. 磷酸磷酸 5.5.氯化物檢查法中，用以解決供試品溶液帶顏色對氯化物檢查法中，用以解決供試品溶液帶顏色對 測定干擾的方法是（測定干擾的方法是（ ） A. 活性炭脫色法

39、活性炭脫色法 B. 有機溶劑提取后檢查法有機溶劑提取后檢查法 C. 內(nèi)消色法內(nèi)消色法 D. 標準液比色法標準液比色法 E. 改用他法改用他法6.6.中國藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查（中國藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查（ ） A. Fe B. Fe2+ C. Fe3+ D. Fe2+和和Fe3+ E. 以上都不對以上都不對 8.8.下列試液中，用作下列試液中，用作ChP重金屬檢查法中的顯色劑重金屬檢查法中的顯色劑 的是（的是（ ） A. 硫酸鐵銨試液硫酸鐵銨試液 B. 硫化鈉試液硫化鈉試液 C. 氰化鉀試液氰化鉀試液 D. 重鉻酸鉀試液重鉻酸鉀試液 E. 硫酸銅試液硫酸銅試液7.采用硫氰酸鹽法

40、檢查鐵鹽時，若供試液管與對照采用硫氰酸鹽法檢查鐵鹽時，若供試液管與對照 液管所呈硫氰酸鐵的顏色深淺不便比較時，可采液管所呈硫氰酸鐵的顏色深淺不便比較時，可采 取的措施是（取的措施是（ ） A. 內(nèi)消色法內(nèi)消色法 B. 外消色法外消色法 C. 標準液比色法標準液比色法 D. 正丁醇提取后比色法正丁醇提取后比色法 E. 改用他法改用他法10.采用熾灼后硫代以酰胺法檢查重金屬時，應(yīng)控制采用熾灼后硫代以酰胺法檢查重金屬時，應(yīng)控制 的熾灼溫度范圍是（的熾灼溫度范圍是（ ） A. 500600oC B. 600700oC C. 700800oC D. 800900oC E. 9001000oC9.9.硫代

41、乙酰胺法檢查重金屬時，受溶液硫代乙酰胺法檢查重金屬時，受溶液pH影響較影響較 大，適合的大，適合的pH是（是（ ） A. 11.5 B. 9.5 C. 7.5 D. 3.5 E. 1.512.費休氏法測定水分時，水與費休氏試液作用的摩費休氏法測定水分時，水與費休氏試液作用的摩 爾比是（爾比是（ ） A. 水水-碘碘-二氧化硫二氧化硫-甲醇甲醇-吡啶（吡啶（1：1：1：1：3） B. 水水-碘碘-二氧化硫二氧化硫-甲醇甲醇-吡啶（吡啶（1：1：1：1：5） C. 水水-碘碘-三氧化硫三氧化硫-甲醇甲醇-吡啶（吡啶（1：1：1：1：3） D. 水水-碘碘-三氧化硫三氧化硫-甲醇甲醇-吡啶（吡啶（1

42、：1：1：1：5） E. 水水-碘碘-三氧化硫三氧化硫-甲醇甲醇-丙酮（丙酮（1：1：1：1：3）11.11.在古蔡氏檢砷法中，加入醋酸鉛棉花的目的是在古蔡氏檢砷法中，加入醋酸鉛棉花的目的是 （ ） A. 除去硫化氫的影響除去硫化氫的影響 B. 防止瓶內(nèi)飛沫濺出防止瓶內(nèi)飛沫濺出 C. 使砷化氫氣體上升速度穩(wěn)定使砷化氫氣體上升速度穩(wěn)定 D. 使溴化汞試使溴化汞試 紙呈色均勻紙呈色均勻 E. 將五價砷還原為砷化氫將五價砷還原為砷化氫14.濁度標準液的配制是利用烏洛托品在酸性條件濁度標準液的配制是利用烏洛托品在酸性條件 下水解，水解產(chǎn)物與肼縮合，產(chǎn)生不溶于水的下水解，水解產(chǎn)物與肼縮合，產(chǎn)生不溶于水的 白色沉淀，該白色沉淀是白色沉淀，該白色沉淀是（ ） A. 硫酸肼硫酸肼 B. 甲醛腙甲醛腙 C. 甲酰胺甲酰胺 D.乙醛腙乙醛腙 E. 乙酰胺乙酰胺13. ChP中收載的殘留溶劑檢查法是（中收載的殘留溶劑檢查法是（ ） A. HPLC法法 B. TLC法法 C. GC法法 D. TGA法法 E. DSC法法（二）配伍選擇題（二）配伍選擇題A. 硝酸銀試液硝酸銀試液 B. 硫代乙酰胺試液硫代乙酰胺試液 C. 氯化鋇試液氯化鋇試液 D.