微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)重點(diǎn)第一部分 名詞解釋1.電子顯微鏡電子顯微鏡是利用電子波波長(zhǎng)短,分辨力高的特點(diǎn)以電子流代替光學(xué)顯微鏡的光束使物體放大成象的超顯微鏡檢裝置。2.普通光學(xué)顯微鏡用自然光或者燈光作光源鏡檢物體的顯微鏡。3.合成培養(yǎng)基由化學(xué)成分已知的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基。4.人工培養(yǎng)基人工配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖并積累代謝產(chǎn)物的一種營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。5.天然培養(yǎng)基由化學(xué)成分不完全清楚的天然物質(zhì)如馬鈴薯,麩皮等配制而成的培養(yǎng)基。6.半合成培養(yǎng)基由化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)和化學(xué)成分不完全清楚的天然物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基。7.革蘭氏染色法。革蘭氏染色是細(xì)菌的一種鑒別染色法,細(xì)菌首先用結(jié)晶紫染色,再用碘液固定,然后用

2、95%的酒精脫色,最后用蕃紅復(fù)染。凡是菌體初染的結(jié)晶紫被酒精脫去了紫色后,又被蕃紅復(fù)染成紅色的細(xì)菌稱(chēng)為革蘭氏負(fù)反應(yīng)細(xì)菌；凡是菌體初染的紫色不能被酒精脫色,也不能被蕃紅復(fù)染成紅色的細(xì)菌稱(chēng)為革蘭氏正反應(yīng)細(xì)菌。8.簡(jiǎn)單染色用單一染料使微生物細(xì)胞染上所用染料顏色的染色方法。9.稀釋平板計(jì)數(shù)法將一定量的樣品經(jīng)十倍稀釋后,用平板培養(yǎng)最后三個(gè)稀釋度的樣品稀釋液。待菌落長(zhǎng)出后,計(jì)數(shù)出某一稀釋度的菌落數(shù)后再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品中的含菌數(shù)。10.顯微直接計(jì)利用血球計(jì)數(shù)板或細(xì)菌計(jì)數(shù)板在顯微鏡下測(cè)計(jì)出每小格的微生物細(xì)胞數(shù)量后,再換算出單位體積中微生物細(xì)胞總數(shù)的測(cè)數(shù)方法。11.巴氏消毒巴氏消毒是法國(guó)微生物學(xué)家巴斯德發(fā)

3、明的一種消毒方法。是在62-63的條件下,保溫半小時(shí)殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)體(主要是病原菌)的方法。12.間歇滅菌利用100的溫度殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)體.每次1小時(shí)連續(xù)三天,中間的空隙時(shí)間讓未殺死的芽胞萌發(fā)成營(yíng)養(yǎng)體,在下一次100的溫度下被殺死。如此反復(fù)兩次可將培養(yǎng)基的微生物(包括芽胞)全部殺死。該方法適用于沒(méi)有高壓滅菌器的地方進(jìn)行滅菌處理。113.消毒:只殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)體(主要是病原菌),而不能殺死微生物的芽胞的除菌方法。14.滅菌:利用物理或化學(xué)方法殺死所有微生物包括細(xì)菌的芽胞的除菌方法稱(chēng)為滅菌。15.過(guò)濾除菌:利用一定孔徑的濾膜阻止微生物的通過(guò)而除去溶液中或者空氣中微生物的除菌方法。16.濕熱滅

4、菌:利用熱的蒸汽殺死微生物的滅菌方法。濕熱滅菌又分常壓蒸汽滅菌和加壓蒸汽滅菌17.干熱滅菌:利用干熱空氣殺死微生物的方法。其滅菌工藝條件通常為160-170/2h。18.選擇培養(yǎng)基:根據(jù)使用的目的,控制培養(yǎng)基的組成成分,使之有利于某種微生物的生長(zhǎng)而限制其它微生物的生長(zhǎng),從而能從自然界混雜的群體中分離出某一種單一的微生物。如無(wú)氮培養(yǎng)基用來(lái)分離土壤中的自生固氮菌。19.加富培養(yǎng)基:在基本培養(yǎng)基中加入血清,動(dòng)植物組織液或者其它生長(zhǎng)因子而配制出來(lái)的營(yíng)養(yǎng)特別豐富的培養(yǎng)基。20.鑒別培養(yǎng)基:根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn),通過(guò)指示劑的顯色反應(yīng),用以鑒別不同微生物的培養(yǎng)21.數(shù)值孔徑:數(shù)值孔徑是判斷物鏡和聚光鏡性能的

5、重要指標(biāo),通常用N.A表示:N.A=n.sin(n為介質(zhì)折光率,a為鏡口角)。22.分辨力:分辨力是指顯微鏡能夠分辨出的物體兩點(diǎn)間最小距離的能力。它與波長(zhǎng)及物鏡的數(shù)值孔徑有關(guān)。23.超凈工作臺(tái):利用過(guò)濾除菌的原理而設(shè)計(jì)出來(lái)的一種無(wú)菌操作工作臺(tái),鼓風(fēng)機(jī)鼓出的空氣通過(guò)孔徑很小的薄膜將空氣中的微生物過(guò)濾后變成無(wú)菌空氣吹向操作臺(tái),可防止周?chē)芯諝饬魅?能保證操作臺(tái)始終保持無(wú)菌狀態(tài),便于無(wú)菌操作。24.純培養(yǎng)技術(shù):純培養(yǎng)技術(shù)是培養(yǎng)某個(gè)單一微生物的方法。包括培養(yǎng)基的制作與滅菌。單一微生物的分離與純化,和無(wú)菌操作接種技術(shù)。25.焦深；焦深是指清晰的目的象的上面和下面所看見(jiàn)的物象之間的距離。它與放大倍數(shù)成反

6、比,即放大倍數(shù)越大,焦深越小。26.暗視野顯微術(shù):利用暗視野聚光器能阻止光線直接照射標(biāo)本,而使光線斜射在標(biāo)本上。在顯微鏡中見(jiàn)到黑暗視野中明亮物象的鏡檢技術(shù)。27.熒光顯微術(shù):紫外光作光源的顯微鏡檢技術(shù)。28.負(fù)相差:在黑暗視野中看到明亮物體的相差鏡檢技術(shù)。29.正相差:在明亮視野中看到黑暗物體的相差鏡檢技術(shù)。第二部分 選擇題01.革蘭氏染色的關(guān)鍵操作步驟是:A.結(jié)晶紫染色。B.碘液固定。C.酒精脫色。D.復(fù)染。答:(C)02.放線菌印片染色的關(guān)鍵操作是:A.印片時(shí)不能移動(dòng)。B.染色。C.染色后不能吸干。D.A-C。答:(A)。03.高氏培養(yǎng)基用來(lái)培養(yǎng):A.細(xì)菌。B.真菌。C.放線菌。答:(C)

7、。04.肉湯培養(yǎng)基用來(lái)培養(yǎng):A.酵母菌。B.霉菌。C.細(xì)菌。答:(C)。05.無(wú)氮培養(yǎng)基用來(lái)培養(yǎng):A.自生固氮菌。B.硅酸鹽細(xì)菌。C.根瘤菌。D.A,B均可培養(yǎng)。E.A,B,C均可培養(yǎng)。答:(D)。06.在使用顯微鏡油鏡時(shí),為了提高分辨力,通常在鏡頭和蓋玻片之間滴加:A.二甲苯。B.水。C.香柏油。答:(C)。07.常用的消毒酒精濃度為:A.75%。B.50%。C.90%。答:(A)。08.用甲醛進(jìn)行空氣熏蒸消毒的用量是:A.20ml/M3。B.6ml/M3。C.1ml/M3。答:(B)。09高壓蒸汽滅菌的工藝條件是:A.121/30min。.B.115/30min。C.130/30min。答

8、:(A)。10巴氏消毒的工藝條件是:A.62-63/30min。B.71-72/15min。C.A.B.均可。答:(C)。11半固體培養(yǎng)基的主要用途是:A.檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。B.檢查細(xì)菌的好氧性。C.A.B.兩項(xiàng)。答:(C)。12半固體培養(yǎng)基的瓊脂加入量通常是:A.1%。B.0.5%。C.0.1%。答:(B)。13.使用手提式滅菌鍋滅菌的關(guān)鍵操作是:A.排冷氣徹底。B.保溫時(shí)間適當(dāng)。C.滅菌完后排氣不能太快。D.A-C。答:(A)。14目鏡頭上的"K"字母表示:A.廣視野目鏡。B.惠更斯目鏡。C.補(bǔ)償目鏡。答:(C)。15.目鏡頭上的"P"字母表示:A.

9、平場(chǎng)目鏡。B.廣視野目鏡。C.平場(chǎng)補(bǔ)償目鏡。答:(A)。16.物鏡頭上的"PL"字母表示:A.正低相差物鏡。B.正高相差物鏡。C.負(fù)高相差物鏡。答:(A)。17.物鏡頭上的"UVL"字母表示。A.無(wú)熒光物鏡。B.照相物鏡。C.相差物鏡。答:(C)。18鏡頭上標(biāo)有"對(duì)C"字母的鏡頭是:A.相差調(diào)整望遠(yuǎn)鏡。B.攝影目鏡。C.相差目鏡。答:(A)。19"PA"表示:A.馬鈴薯培養(yǎng)基。B.高氏培養(yǎng)基。C.肉湯培養(yǎng)基。答:(A)。20.無(wú)菌室空氣滅菌常用方法是:A.甲醛熏蒸。B.紫外燈照射。C.噴石炭酸。D.A.B.并用。答

10、:(D)。21.干熱滅菌的關(guān)鍵操作是:A.滅菌物不能有水。B.保溫過(guò)程中不能開(kāi)箱門(mén)。C.降溫不能太快。答:(A)。22霉菌水浸制片的關(guān)鍵操作是:A.菌絲要分散。B.菌絲首先要用50%的乙醇浸潤(rùn)。C.蓋蓋玻片不能有氣泡。D.A-C。答:(A)23.用來(lái)染芽胞的染料通常是:A.孔雀綠。B.結(jié)晶紫。C.復(fù)紅。D.番紅。答:(A)。24復(fù)紅法染鞭毛的關(guān)鍵操作是:A.玻片干凈。B.染料新鮮。C.菌體活化適當(dāng)。D.A.B.C。答:(B)。25.鍍銀法染鞭毛的關(guān)鍵操作是:A.玻片干凈。B.染料無(wú)沉淀。C.加熱適當(dāng)。D.菌體活化適當(dāng)。E.A-D。答:(A)。26進(jìn)行簡(jiǎn)單染色使用的染色液通常是:A.復(fù)紅。B.蕃

11、紅。C.結(jié)晶紫。D.孔雀綠。E.A-D均可。答:(A)。27.物鏡頭上的"APO"字母代表:A.消色差物鏡。B.復(fù)消色差物鏡。C.半消色差物鏡。答:(B)。28物鏡頭上的"Ach"字母表示:A.平場(chǎng)物鏡。B.超平場(chǎng)物鏡。C.消色差物鏡。答:(A)。29物鏡頭上的“NH”字母表示:A.正相差物鏡。B.負(fù)相差物鏡。C.負(fù)高相差物鏡。答:(C)。30物鏡頭上的“0.17”表示:A.要求的蓋玻片厚度。B.要求的載玻片厚度。C.鏡頭浸油的深度。答:(A)。31鏡頭上標(biāo)有“NK"字母的鏡頭是:A.照相目鏡。B.熒光目鏡。C.相差目鏡。答:(A)。32目鏡頭

12、上的“PK”字母表示:A.平場(chǎng)目鏡。B.補(bǔ)償目鏡。C.平場(chǎng)補(bǔ)償目鏡。答:(C)。33物鏡頭上的"Splan"字母表示:A.超平場(chǎng)物鏡。B.平場(chǎng)物鏡。C.消色差物鏡。答:(A)。34物鏡頭上的"SplanApo"表示:A.超平場(chǎng)復(fù)消色差物鏡。B.超平場(chǎng)半消色差物鏡。C.超平場(chǎng)物鏡。答:(A)。35.物鏡頭上的"Planapo"表示:A.超平場(chǎng)物鏡。B.平場(chǎng)物鏡。C.平場(chǎng)復(fù)消色差物鏡。答:(C)。36物鏡頭上的"Plan"字母表示:A.平場(chǎng)物鏡。B.消色差物鏡。C.超平場(chǎng)物鏡。答:(A)。37目鏡頭上的"W&

13、quot;字母表示:A.廣視野高眼點(diǎn)補(bǔ)償目鏡。B.高眼點(diǎn)目鏡。C.廣視野目鏡。答:(C)。38目鏡頭上的"SWK"字母表示:A.超廣視野目鏡。B.高眼點(diǎn)補(bǔ)償目鏡。C.平場(chǎng)補(bǔ)償目鏡。答:(A)。39.目鏡頭上的"WHK"字母表示:A.超廣視野目鏡。B.廣視野高眼點(diǎn)目鏡。C.平場(chǎng)補(bǔ)償目鏡。答:(B)。40.物鏡頭上的"錯(cuò).L"字母表示:A.消色差物鏡。B.半消色差物鏡。C.復(fù)消色差物鏡。答:(B)。第三部分 判斷題01.無(wú)菌吸管上端塞入棉花是為了過(guò)濾口中的有菌空氣。答:(對(duì))。02.無(wú)菌吸管上端塞入棉花的目的是為了防止菌液吸入口中。答:(

14、錯(cuò))。03.稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),放線菌計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個(gè)之間的稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù)。答:(對(duì))。04稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),細(xì)菌計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個(gè)之間的稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù)。答:(對(duì))。05.稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),細(xì)菌,放線菌,真菌的計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個(gè)的稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù)。答:(錯(cuò))。06稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),真菌的計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個(gè)的稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù)。答:(對(duì))。07.稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),細(xì)菌、放線菌、真菌的計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個(gè)的稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù)。答:(錯(cuò))。08.用混菌法測(cè)微生物活菌數(shù)時(shí),每個(gè)平皿中的菌液加入量是1m

15、l。答:(對(duì))。09.用涂抹法測(cè)微生物活菌數(shù)時(shí),每個(gè)平皿中的菌液加入量是0.1ml。答:(對(duì))。10用油鏡鏡檢時(shí)應(yīng)將聚光器升至最高。答:(對(duì))。11使用高倍鏡時(shí),可將聚光器升至最高。答:(錯(cuò))。12.為了滿足微生物對(duì)微量元素的需要,配制培養(yǎng)基所用的水最好使用自來(lái)水。答:(對(duì))。13.稀釋測(cè)數(shù)用的無(wú)菌水通常是由自來(lái)水滅菌而成。答:(對(duì))。14.觀察根霉,青霉只需用低倍鏡觀察即可。答:(錯(cuò))。15.實(shí)驗(yàn)室通常使用血球計(jì)數(shù)板測(cè)微生物的總菌數(shù)。答:(錯(cuò))。16浸油的油鏡頭可用軟的衛(wèi)生紙擦凈。答:(錯(cuò))。17.為了節(jié)省時(shí)間,可直接在染色涂片上滴加香柏油后,直接用油鏡觀察。答:(錯(cuò))。18.使用油鏡的正確

16、操作步驟是:1.低倍鏡觀察。2.高倍鏡觀察。3.轉(zhuǎn)出高倍鏡頭,滴加香柏油后用油鏡觀察。答:(對(duì))。19.在擦拭顯微鏡鏡頭時(shí),應(yīng)向一個(gè)方向擦拭。答:(對(duì))。20.顯微鏡鏡頭的放大倍數(shù)越大,它的數(shù)值孔徑值越大,其鏡口角也越大。答:(對(duì))。21.稀釋平板測(cè)數(shù)通常是采用十倍稀釋法。答:(對(duì))。22.稀釋平板測(cè)數(shù)通常采用的是二倍稀釋法。答:(錯(cuò))。23.做稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),只需一支吸管從頭稀釋到尾即可。答:(錯(cuò))。24.做稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),每做一個(gè)稀釋度都必須更換一支無(wú)菌吸管。答:(對(duì))。25.稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),無(wú)論是用混菌法,還是用涂抹法,每個(gè)平皿中的菌液加入量都是1ml。答:(錯(cuò))。26.稀釋平板測(cè)數(shù)時(shí),

17、無(wú)論是用混菌法,還是用涂抹法,每個(gè)平皿中的菌液加入量都是0.1ml。答:(錯(cuò))。27.實(shí)驗(yàn)室做固體培養(yǎng)基時(shí),常加1.8%的瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時(shí),瓊脂加入量通常是0.5%。答:(對(duì))。28.實(shí)驗(yàn)室做固體培養(yǎng)基,常加2%的瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時(shí),瓊脂加入量通常是1%。答:(錯(cuò))。29.E.coli經(jīng)革蘭氏染色后,菌體呈紅色,它是革蘭氏正反應(yīng)細(xì)菌。答:(錯(cuò))。30.在光學(xué)顯微鏡下,根霉的孢子囊是透明的。答:(錯(cuò))。31.使用手提滅菌鍋滅菌后,為了盡快排除鍋內(nèi)蒸汽,可直接打開(kāi)排氣閥排氣。答:(錯(cuò))。32.蘇云金桿菌的芽胞在菌體的中央。答:(錯(cuò))。33.所有真菌菌落的表面干燥,呈絨毛狀

18、。答:(錯(cuò))。34.所有放線菌菌落表面干燥,呈粉粒狀。答:(錯(cuò))。35.所有細(xì)菌菌落的表面都是光滑濕潤(rùn)狀。答:(錯(cuò))。(芽胞菌菌落表面粗糙。)。36鏡臺(tái)測(cè)微尺每小格的實(shí)際長(zhǎng)度是10微米。答:(對(duì))。37.目鏡測(cè)微尺每小格的實(shí)際長(zhǎng)度是10m。答:(錯(cuò))。38.鏡臺(tái)測(cè)微尺每小格的實(shí)際長(zhǎng)度是10nm(納米)。答:(錯(cuò))。39.血球計(jì)數(shù)板兩邊的平臺(tái)比計(jì)數(shù)區(qū)高0.1cm。答:(錯(cuò))。40.血球計(jì)數(shù)板兩邊的平臺(tái)比計(jì)數(shù)區(qū)高0.1mm。答:(對(duì))。41.棉花塞塞入試管的長(zhǎng)度應(yīng)為棉塞全長(zhǎng)的2/3。答:(對(duì))。42.棉花塞塞入試管的長(zhǎng)度應(yīng)為棉塞全長(zhǎng)的2/3。答:(錯(cuò))。43.擺斜面的長(zhǎng)度應(yīng)不超過(guò)試管長(zhǎng)度的2/3。

19、答:(錯(cuò))。44.擺斜面的長(zhǎng)度應(yīng)不超過(guò)試管長(zhǎng)度的1/2。答:(對(duì))。45.血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)的面積是1mm2。答:(對(duì))。46.用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí),任數(shù)5個(gè)大方格(80個(gè)小格)的菌數(shù)即可。答:(錯(cuò))。47.在使用細(xì)菌計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí),為了防止計(jì)數(shù)偏大,計(jì)數(shù)區(qū)四周壓線的菌只能數(shù)兩邊。答:(對(duì))。48.目鏡測(cè)微尺每格的實(shí)際長(zhǎng)度是未知的,需用長(zhǎng)度已知的鏡臺(tái)測(cè)微尺校正。答:(對(duì))。49.測(cè)微生物的細(xì)胞大小時(shí),需要校正的是鏡臺(tái)測(cè)微尺每格的實(shí)際長(zhǎng)度。答:(錯(cuò))。50.測(cè)微生物細(xì)胞大小時(shí),需要校正的是目鏡測(cè)微尺每格的實(shí)際長(zhǎng)度。答:(對(duì))。51.血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)每小格的體積是1/4000mm3。答:(對(duì))。52.血

20、球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)共有400個(gè)小格,每小格的面積是1/400cm2。答:(錯(cuò))。53.用分裝器將培養(yǎng)基分裝試管時(shí),應(yīng)謹(jǐn)防培養(yǎng)基沾染試管口。答:(對(duì))。54.瓊脂的熔化溫度是90以上,凝固溫度是45以下。答:(錯(cuò))。55.瓊脂的熔化溫度是95以上,凝固溫度是45以下。答:(對(duì))。56.玻璃器材洗凈后在急需時(shí)可采用高壓蒸汽滅菌,而不能用干熱滅菌。答:(對(duì))。57.細(xì)菌計(jì)數(shù)板每小格的體積是1/20000mm3。答:(對(duì))。58.血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)每小格的體積是1/4000cm3。答:(錯(cuò))。59.無(wú)菌室用甲醛熏蒸消毒后可噴氨水以減少甲醛的刺激。答:(對(duì))。第四部分 填空題01.霉菌水浸片的制片程序是加一滴

21、水于載玻片中央,用解剖針挑取菌絲少許,將菌絲用50%的酒精浸潤(rùn),將菌絲用蒸餾水水洗,將菌絲放入載玻片水滴中并小心分散,蓋上蓋玻片。02.放線菌印片染色的操作程序是印片,干燥,固定,復(fù)紅染色2-3分鐘,水洗,晾干。03.固體培養(yǎng)基常用洋菜(瓊脂)作凝固劑,普通固體培養(yǎng)基的用量一般為1.5-2.0%,半固體培養(yǎng)基的用量一般為0.5%。04.簡(jiǎn)單染色的操作程序是涂片,干燥,固定,復(fù)紅染色1-2分鐘,水洗,晾干。05.使用手提式滅菌鍋進(jìn)行滅菌的操作程序是鍋內(nèi)加水,滅菌物體裝鍋,對(duì)稱(chēng)上緊密封螺帽將鍋密封上,加熱升溫,排盡鍋內(nèi)冷空氣,升溫至滅菌工藝條件(一般為98kpa),在工藝條件下保壓計(jì)時(shí)(一般為30

22、分鐘),到時(shí)間后切斷熱源,降溫,出鍋。06實(shí)驗(yàn)室配制固體培養(yǎng)基的操作程序是照配方稱(chēng)取藥品,將藥品溶解在一定量的水中后加熱煮沸,將瓊脂按量稱(chēng)取后用水浸濕,將浸濕的瓊脂加入煮沸的營(yíng)養(yǎng)液中,待瓊脂全部融化后調(diào)節(jié)pH值,補(bǔ)充損失的水分,分裝培養(yǎng)基入不同的容器中。07.有莢膜的細(xì)菌用負(fù)染色法染色后,莢膜為無(wú)色,菌體為紅色.08.細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色后,革蘭氏正反應(yīng)菌呈紫色,革蘭氏負(fù)反應(yīng)菌呈紅色。09.細(xì)菌經(jīng)簡(jiǎn)單染色后呈所染染料的顏色。10.顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)由反光鏡,聚光鏡,物鏡,和目鏡組成。11顯微鏡的機(jī)械部分包括鏡座,鏡臂,載物臺(tái),轉(zhuǎn)換器,鏡筒,推動(dòng)器,粗動(dòng)螺旋,微動(dòng)螺旋聚光鏡升降螺旋等九部分組成。12.

23、高氏培養(yǎng)基通常用來(lái)培養(yǎng)放線菌,其pH值為7.5-8.0。13.PA培養(yǎng)基通常用來(lái)培養(yǎng)真菌菌,其pH值為5-6。14.牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基通常用來(lái)培養(yǎng)細(xì)菌,其pH值為7.0-7.2。15.無(wú)氮培養(yǎng)基通常用來(lái)培養(yǎng)自生固氮菌。其氮源來(lái)自空氣中的N2。16.干熱滅菌的工藝條件是160-170/2h。17.使用顯微鏡低倍鏡觀察時(shí),聚光器應(yīng)該降低,使用顯微鏡高倍鏡觀察時(shí),聚光器應(yīng)該適當(dāng)升高。18.革蘭氏染色的關(guān)鍵操作是酒精脫色。19.顯微鏡的倍數(shù)越大,焦深越小,調(diào)焦應(yīng)該越小心。20.按培養(yǎng)基的形態(tài),可將培養(yǎng)基分為液體,固體,半固體三種類(lèi)型。21.配制常規(guī)培養(yǎng)基時(shí)通常用自來(lái)水。22.熱滅菌通常用來(lái)滅菌玻璃器

24、材,培養(yǎng)基的滅菌通常用高壓蒸汽滅菌。23.細(xì)菌稀釋測(cè)數(shù)通常采用10倍稀釋法,稀釋用試管無(wú)菌水為9毫升。24.配制培養(yǎng)基時(shí)常用1molNaOH、和1molHCL調(diào)節(jié)pH值。25.按培養(yǎng)基的特殊用途,可將培養(yǎng)基分成選擇培養(yǎng)基,加富培養(yǎng)基,鑒別培養(yǎng)基等。26.選擇培養(yǎng)基可用來(lái)分離培養(yǎng)我們所需的特殊微生物類(lèi)群,例如我們要從土壤中分離纖維分解菌,可以利用纖維素作唯一碳源來(lái)篩選纖維分解菌；要分離產(chǎn)蛋白酶的微生物,可以利用酪蛋白,作唯一氮源分離蛋白分解菌。27革蘭氏染色的操作程序是涂片,干燥,固定,結(jié)晶紫染色1分鐘,水洗,碘液媒染1分鐘,水洗,95%的乙醇脫色25秒,水洗,蕃紅復(fù)染3-5分鐘,水洗,晾干。2

25、8.培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。按營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同來(lái)源可分為天然培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基,半合成培養(yǎng)基三大類(lèi)。29.高倍鏡頭的數(shù)值孔徑通常為0.65,放大倍數(shù)為40x。30.油鏡頭的數(shù)值孔徑通常為1.25,放大倍數(shù)為100x或90x31.低倍鏡頭的數(shù)值孔徑通常是0.25,放大倍數(shù)為10x或8x。32.穿刺接種使用的接種工具為接種針,斜面接種使用的接種工具為接種環(huán)。33.進(jìn)行稀釋測(cè)數(shù)使用的主要器材有酒精燈,1ml無(wú)菌吸管,9ml試管裝無(wú)菌水,9cm的無(wú)菌平板。34.用孔雀綠和復(fù)紅作細(xì)菌芽胞染色時(shí),可使菌體呈紅色,使芽胞呈綠色。35.用日光燈作光源時(shí),通常用平面反光鏡

26、,用自然光作光源時(shí),通常用凹面反光鏡。36.無(wú)菌室殺菌通常采用紫外燈照射,和噴灑化學(xué)藥劑(如酚)相結(jié)合的方法37.半固體培養(yǎng)基通常用來(lái)檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。38.擺試管斜面的基本操作方法是將擺斜面用特制木條放在桌面上,將裝有固體培養(yǎng)基的試管趁熱放在特制木條上擺成斜面,斜面長(zhǎng)度不得超過(guò)試管長(zhǎng)度的1/2,將試管棉塞部分用滅菌報(bào)紙蓋上,以防空氣中微生物落到棉塞上引起污染。39不能加熱滅菌的液體培養(yǎng)基應(yīng)采用濾法除菌,通常用的器皿有蔡氏細(xì)菌過(guò)濾濾和膜濾_。40.藍(lán)細(xì)菌的培養(yǎng)可用膜濾_培養(yǎng)基。41.分離酵母菌時(shí)為了抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),通常用膜培養(yǎng)基。42.從土壤中分離真菌時(shí),通常在培養(yǎng)基中加入孟加拉紅和鏈霉素顯抑

27、制細(xì)菌的生長(zhǎng)。43.測(cè)微生物的大小使用的主要工具是微鏡,鏡臺(tái)測(cè)微尺和目鏡測(cè)微尺。44.測(cè)微生物的數(shù)量使用的主要工具是顯微鏡和血球計(jì)數(shù)板。45.進(jìn)行細(xì)菌的顯微計(jì)數(shù)時(shí)使用的主要工具是顯微鏡和細(xì)菌計(jì)數(shù)板。46.普通光學(xué)顯微鏡測(cè)酵母菌的大小的操作程序是將鏡臺(tái)測(cè)微尺置載物臺(tái)上,調(diào)焦找到臺(tái)尺,在低倍鏡下校正目鏡測(cè)微尺每格的長(zhǎng),在高倍鏡下校正目鏡測(cè)微尺每格的長(zhǎng),去掉臺(tái)尺換上待測(cè)樣本片,在高倍鏡下測(cè)出十個(gè)酵母菌寬和長(zhǎng)的格數(shù),將校正值乘入,算出十個(gè)酵母菌的平均寬和平均長(zhǎng),以平均寬x *平均長(zhǎng)Y(m)表示酵母菌的大小。47.顯微計(jì)數(shù)的操作程序是將待測(cè)菌進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?將計(jì)數(shù)板置于載物臺(tái)上,在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)區(qū),將

28、菌液加到計(jì)數(shù)區(qū)上,調(diào)焦看到菌體,按五點(diǎn)取樣法計(jì)數(shù)五個(gè)大方格的菌數(shù),計(jì)算每小格的含菌數(shù),計(jì)算出單位體積(如每ml)中的含菌數(shù)。48.莢膜染色法的操作程序是_涂片,風(fēng)干,加復(fù)紅染色3-5分鐘,水洗,晾干,加墨素涂抹,風(fēng)干。49.芽胞染色的操作程序是片,干燥,固定,孔雀綠加熱染色15分鐘,水洗,復(fù)紅染色2-3分鐘,水洗,晾干。50.芽胞染色的關(guān)鍵操作是孔雀綠加熱染色。51.放線菌印片染色的關(guān)鍵操作是印片時(shí)不能移動(dòng)。52.用負(fù)染色法染莢膜的關(guān)鍵操作是涂抹墨素要薄。53.搖床振蕩培養(yǎng)通常用來(lái)培養(yǎng)好氣微生物,享格特的厭氧操作方法通常用來(lái)培養(yǎng)專(zhuān)性厭氧菌54.革蘭氏染色反應(yīng)與細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和組成有關(guān)。在革蘭

29、氏染色過(guò)程中,當(dāng)用95%酒精處理后,就放在顯微鏡下觀察,革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色,而革蘭氏陰性菌呈無(wú)色。55.血球計(jì)數(shù)板與細(xì)菌計(jì)數(shù)板的主要差別是前者計(jì)數(shù)區(qū)的深度是后者的五倍56.制霉菌水浸片時(shí)加棉蘭染色液可使菌體呈淺蘭色。57.Anabaenaazo對(duì)ica的異型胞通常是間生在光學(xué)顯微鏡下它是透明的,細(xì)胞兩端有極節(jié)。它能控制氧氣的進(jìn)入,保持異型胞內(nèi)低氧分壓,以利于固定分子氮。58.配制培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的配比,特別是C:N比(碳氮比)。一般而言,當(dāng)C:N³5:1時(shí),有利于菌體生長(zhǎng)；當(dāng)C:NÐ5:1時(shí),有利于積累代謝產(chǎn)物。59.由于各種微生物對(duì)某種化合物如抗生素、染料的敏

30、感性不同,可以利用這一特征來(lái)從土壤中分離出不同類(lèi)群的微生物。如在培養(yǎng)基中加入青霉素(鏈霉素),會(huì)殺死或抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng)而分離出真菌；在培養(yǎng)基中加入結(jié)晶紫,有利于分離到革蘭氏陰性菌。60細(xì)菌在革蘭氏染色過(guò)程中,最后用蕃紅復(fù)染的原因是G-細(xì)菌經(jīng)結(jié)晶紫染色、碘液媒染、酒精脫色后菌體紫色脫去,故需用蕃紅復(fù)染,這樣在光鏡下才能見(jiàn)到紅色的菌體。61.高倍鏡下能看到的物象在油鏡下看不到往往是由于片置反和菌體著色太淺引起。62.微生物在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),由于其新陳代謝而使培養(yǎng)基pH值發(fā)生改變；所以在配制培養(yǎng)基時(shí),為維持該條件的相對(duì)恒定,常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質(zhì)如碳酸鹽(CaCO3)或磷酸鹽。63.一般而言

31、,微生物在含糖基質(zhì)上生長(zhǎng),會(huì)產(chǎn)酸,而使pH下降；微生物分解蛋白質(zhì)或氨基酸會(huì)產(chǎn)堿,而使pH上升.64.在微生物培養(yǎng)過(guò)程中使用的培養(yǎng)皿首先是被Petri采用的,因此又稱(chēng)培養(yǎng)皿為Petri_dish。Hesse在其妻子的啟發(fā)下,將固體培養(yǎng)基使用的凝固劑由明膠改為瓊脂65.顯微鏡的微動(dòng)螺旋每轉(zhuǎn)一圈升降距離為0.1毫米66.兩個(gè)典型的革蘭氏正反應(yīng)細(xì)菌和革蘭氏負(fù)反應(yīng)細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色后都呈陰性反應(yīng)往往是由于酒精脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)和菌體培養(yǎng)時(shí)間太長(zhǎng)引起。67.檢查乳品和飲料是否含有大腸桿菌(E.Coli)_等腸道細(xì)菌,可采用伊紅-美蘭培養(yǎng)基,在這種培養(yǎng)基平板上大腸桿菌(E.Coli)會(huì)形成具有金屬光澤的紫黑色小菌落

32、。68.細(xì)菌鞭毛經(jīng)鍍銀法染色后呈褐色。69.細(xì)菌鞭毛經(jīng)李夫森法染色后呈紅色。70.由于升汞(HgCL2)有腐蝕作用,所以不能用于金屬器皿消毒,特別是鋁制品。第五部分 思考題 01.試述在普通光學(xué)顯微鏡下測(cè)定微生物細(xì)胞大小的基本方法。測(cè)定微生物細(xì)胞的大小主要使用目鏡測(cè)微尺。其方法如下:1.先用長(zhǎng)度已知的鏡臺(tái)測(cè)微尺校正目鏡測(cè)微尺。校正的方法是讓臺(tái)尺與目尺重疊,看臺(tái)尺的X格正好與目尺的Y格重疊,然后用計(jì)算目尺每格的長(zhǎng).分別校正目鏡測(cè)微尺在低倍鏡,高倍鏡及油鏡下每格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度。2.將待測(cè)微生物制成水浸片或染色涂片置載物臺(tái)上,調(diào)焦找到微生物后用目鏡測(cè)微尺測(cè)量其寬幾格,長(zhǎng)幾格,然后乘上相應(yīng)放大倍數(shù)下

33、的校正值。3.一般測(cè)10個(gè)微生物,然后以平均值表示。4.若是酵母、細(xì)菌等單細(xì)胞微生物,通常測(cè)其寬和長(zhǎng),然后以平均寬´平均長(zhǎng)表示,單位為m。02以測(cè)蘇云金桿菌工業(yè)菌粉中的活菌數(shù)為例,試述稀釋平板計(jì)數(shù)的基本方法。1.測(cè)數(shù)前先準(zhǔn)備好測(cè)數(shù)用的1ml無(wú)菌吸管,9cm無(wú)菌平板,9ml試管無(wú)菌水和牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。2.稱(chēng)取10克工業(yè)菌粉加入90ml無(wú)菌水中置搖床上或用手振蕩20-30分鐘,讓菌體分散。3.將上述振蕩過(guò)的菌液按無(wú)菌操作法進(jìn)行十倍稀釋直到10-8。4.取9cm無(wú)菌平板9套用記號(hào)筆在平板底編號(hào),10-8編3套,10-7編3套,10-6編3套。    5

34、.用1支1ml的無(wú)菌吸管,取1ml10-8的稀釋菌液放入編號(hào)10-8的平板中,如此將三個(gè)重復(fù)做完.同法取10-7稀釋菌液放入三個(gè)編號(hào)為10-7平板中.同法取10-6稀釋菌液放入三個(gè)編號(hào)為10-6平板中.(均要按無(wú)菌操作法做)。6.將牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基熔化冷至45-50后,在酒精燈火焰邊按無(wú)菌操作法倒入上述9套平板中,每個(gè)加入量大約15-20ml,邊加邊搖動(dòng)平板,使培養(yǎng)基與菌液充分混勻。7.待培養(yǎng)基凝固后,將平板倒過(guò)來(lái),置28-30下培養(yǎng)48小時(shí)后計(jì)數(shù)。03.試述劃線分離的操作方法。1.取9ml無(wú)菌平板一套在火焰旁按無(wú)菌操作法倒人15-20ml營(yíng)養(yǎng)瓊脂,讓其冷凝成平板。2.左手拿上述平板,右

35、手拿接種環(huán)在火焰上滅菌后沾取原始分離物在平板上平行劃線三條3.將接種環(huán)在火焰上滅菌,左手平板轉(zhuǎn)動(dòng)大約70度,用滅菌接種環(huán)通過(guò)第一次劃線的地方作二次劃線,亦劃三條。4.同上法再作第三次,第四次劃線。 5.蓋上平板蓋,將平板倒過(guò)來(lái)置28-30下培養(yǎng)2-4天后觀察結(jié)果.劃的好應(yīng)在第四次劃線處出現(xiàn)單個(gè)菌落。注:本答案也可畫(huà)圖說(shuō)明。04.試述檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性的操作方法。檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性有兩種方法:1.鏡檢法將待檢樣品制成菌懸液,滴一點(diǎn)菌液于一蓋玻片上,取一凹窩載玻片,將凹窩對(duì)準(zhǔn)菌懸液蓋在蓋玻片上,然后將蓋玻片和載玻片一起翻轉(zhuǎn),讓菌懸液在凹窩上的蓋玻片下.然后在顯微鏡下觀察,觀察應(yīng)找懸液的邊緣.因細(xì)菌為了

36、更多地接觸空氣,總向水滴的邊緣運(yùn)動(dòng),觀察時(shí)要注意將細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)與分子的布朗運(yùn)動(dòng)區(qū)別開(kāi)。2.半固體穿刺法將待檢細(xì)菌穿刺接種在半固體試管培養(yǎng)基中,若細(xì)菌僅沿穿刺線生長(zhǎng),說(shuō)明細(xì)菌不運(yùn)動(dòng)。若細(xì)菌沿穿刺線向周?chē)鷶U(kuò)散生長(zhǎng),說(shuō)明細(xì)菌有運(yùn)動(dòng)性。05簡(jiǎn)述配制培養(yǎng)基的基本原則:培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長(zhǎng)繁殖,或用于積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。所以配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意以下原則:1.根據(jù)微生物的不同選用不同的培養(yǎng)基,以滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物的需要。如自養(yǎng)型微生物所要求營(yíng)養(yǎng)較簡(jiǎn)單,而異養(yǎng)型微生物營(yíng)養(yǎng)要求較復(fù)雜。培養(yǎng)細(xì)菌,放線菌,真菌等各有不同的培養(yǎng)基。2。注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比。微生物生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)往往在適當(dāng)

37、時(shí)才生長(zhǎng)良好。濃度大往往會(huì)抑制微生物的生長(zhǎng)。如糖類(lèi),各種重金屬鹽類(lèi)如果濃度太高,也會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)。同時(shí)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度比也應(yīng)注意,特別是C/N比。3.注意將培養(yǎng)基的pH值控制在一定范圍內(nèi)。為了防止因微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物后影響培養(yǎng)基pH值,常在其中加入磷酸鹽,碳酸鹽,以維持培養(yǎng)基pH值的相對(duì)恒定。4.同時(shí)還應(yīng)考慮培養(yǎng)基的氧化還原電位及原材料的經(jīng)濟(jì)、易購(gòu)和來(lái)源廣泛的原則。06試述配制培養(yǎng)基的基本過(guò)程及應(yīng)該注意的問(wèn)題。配制培養(yǎng)基的基本過(guò)程是:1.按培養(yǎng)基的配方稱(chēng)取各種藥品,用量太少的藥品應(yīng)配制成溶液后再取一定量加入。2.將各種藥品加水溶解,通常是加所需水量的一半。3.若配固體培養(yǎng)基,按

38、2%的用量稱(chēng)取瓊脂,用水將瓊脂浸濕一下,用手?jǐn)D去瓊脂中過(guò)多的水分,加入2的溶液中。4.加熱至瓊脂全部溶解,并補(bǔ)足所需的全部水量。5.用1molNaOH和1molHCL調(diào)節(jié)pH至要求值。6.用分裝器將培養(yǎng)基分裝入試管或三角瓶中,塞上棉塞并包扎,滅菌后備用。注意事項(xiàng):1.配制過(guò)程中,在加熱熔化瓊脂時(shí),要不斷攪拌,以防糊底。2.分裝時(shí)不要讓培養(yǎng)基沾染試管口或瓶口,以防培養(yǎng)過(guò)程中容易污染雜菌。   07.試述顯微計(jì)數(shù)的基本方法。顯微計(jì)數(shù)通常用來(lái)測(cè)微生物單細(xì)胞的數(shù)量,大一點(diǎn)的細(xì)胞如酵母菌用血球計(jì)數(shù)板,小一點(diǎn)的細(xì)胞如細(xì)菌用細(xì)菌計(jì)數(shù)板。該測(cè)數(shù)方法不能區(qū)別死活細(xì)胞,測(cè)出的是微生物總的細(xì)胞數(shù)

39、量。血球計(jì)數(shù)板和細(xì)菌計(jì)數(shù)板構(gòu)造相似,計(jì)數(shù)區(qū)的面積都是1mm2,兩者的差別在于血球計(jì)數(shù)板的深度為0.1mm。細(xì)菌計(jì)數(shù)板的深度為0.02mm。無(wú)論是血球計(jì)數(shù)板還是細(xì)菌計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)都劃為25個(gè)大方格,每個(gè)大方格又劃為16個(gè)小格。所以每小格的體積為1/4000mm3或1/20000mm3。計(jì)數(shù)時(shí),先在顯微鏡下找到計(jì)數(shù)區(qū),然后將菌液稀釋到適當(dāng)濃度,取少量菌液滴在計(jì)數(shù)區(qū)上蓋上特制蓋玻片,亦可先蓋蓋玻片。然后用吸管將菌液從計(jì)數(shù)板上的溝里加入?？烤旱谋砻鎻埩Τ錆M計(jì)數(shù)區(qū)。計(jì)數(shù)時(shí)采取五點(diǎn)取樣法數(shù)數(shù),即四角各取一個(gè)大方格,再在中央取一個(gè)大方格。計(jì)數(shù)時(shí)大方格四周壓線的細(xì)胞只數(shù)兩邊,以防增加數(shù)量。將5個(gè)大方格的菌數(shù)加

40、起來(lái)除以80得出每個(gè)小格的菌數(shù),再乘以4000即為1mm3的菌數(shù),再乘上1000即為1ml的菌數(shù),乘上稀釋倍數(shù)即為樣品含菌數(shù)。  08標(biāo)本片上的某一物象,第一次看到后如何再次找到它?要做到這一點(diǎn),首先取決于顯微鏡的好壞,若顯微鏡上的推動(dòng)器帶有縱橫標(biāo)尺,很容易做到這一點(diǎn)。首先記住標(biāo)本片放到推動(dòng)器上的方向,然后記下觀察某一物體時(shí)推動(dòng)器上的縱橫標(biāo)尺的數(shù)字。如縱3,橫4。當(dāng)標(biāo)本片拿下來(lái)后,若要重復(fù)觀察原來(lái)的物象,只要按原方向?qū)?biāo)本片莢在推動(dòng)器上,將推動(dòng)器推動(dòng)到第一次觀察該物體的縱,橫標(biāo)尺數(shù)字縱3,橫4,即可看到第一次觀察過(guò)的物體。     &

41、#160;  09.試述在光學(xué)顯微鏡下所看到的Anabaenaazo對(duì)ica的主要特征。Anabaenaazo對(duì)ica的主要特征是:1.菌體為絲狀體,營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞為綠色,藻絲不扭曲。2.該菌有異型胞,異型胞間生,無(wú)色透明,兩端有極點(diǎn)。 3.厚壁孢子無(wú)色、大、兩端無(wú)極點(diǎn)。10革蘭氏染色反應(yīng)的成敗關(guān)鍵是什么?為什么革蘭氏染色有十分重要的理論與實(shí)踐意義?因通過(guò)革蘭氏染色,可把幾乎所有的細(xì)菌都分成G+和G-菌兩大類(lèi)細(xì)菌,在細(xì)胞結(jié)構(gòu)、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面都呈現(xiàn)出明顯的差異。因此,任何細(xì)菌只要通過(guò)革蘭氏染色,即可提供不少重要的生物學(xué)特性方面的信息。革蘭氏染色反應(yīng)

42、的成敗關(guān)鍵是:1).菌齡:12-24小時(shí)的純培養(yǎng)物。2).革蘭氏染色操作技術(shù)其中嚴(yán)格控制酒精脫色時(shí)間和菌液涂布時(shí)應(yīng)均勻而薄是關(guān)鍵。3).培養(yǎng)基的組成。   11如何從土壤中分離得到一個(gè)微生物的純培養(yǎng)體?首先要根據(jù)分離對(duì)象選擇適宜的培養(yǎng)基。若要分離真菌應(yīng)選用馬丁-孟加拉紅選擇培養(yǎng)基；若要分離細(xì)菌應(yīng)選用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基；若要分離放線菌應(yīng)選用高氏培養(yǎng)基。土樣采回來(lái)后,用常規(guī)的十倍稀釋分離法進(jìn)行稀釋分離,若分離細(xì)菌,一般稀至10-8,若分離放線菌,一般稀至10-6；若分離真菌,一般稀至10-4。取最后三個(gè)稀釋度倒平板獲得單個(gè)菌落。將平板上出現(xiàn)的單菌落轉(zhuǎn)接斜面培養(yǎng),同時(shí)鏡檢菌體的純

43、度,若不純,應(yīng)將培養(yǎng)的單菌落斜面再次進(jìn)行稀釋分離。倒平板獲得單菌落,轉(zhuǎn)接斜面培養(yǎng),同時(shí)鏡檢菌體的純度。反復(fù)幾次直到得到菌體單一的單菌落方可認(rèn)為是某一微生物的純培養(yǎng)體。12察氏培養(yǎng)基的組成為:蔗糖:30克,磷酸氫二鉀:1.0克,硝酸鈉:2克,硫酸鎂0.5克,氯化鉀:0.5克,硫酸亞鐵:0.01克,蒸餾水:1000ml.試述:該培養(yǎng)基的C源,N源各是什么物質(zhì)。除C源和N源外的其它物質(zhì)起什么作用:該培養(yǎng)基為什么不加生長(zhǎng)因子?該培養(yǎng)基的C源物質(zhì)是蔗糖,N源物質(zhì)是硝酸鈉。磷酸氫二鉀、硫酸鎂、氯化鉀、硫酸亞鐵為該培養(yǎng)基提供礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)。蒸餾水提供水分。該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物在培養(yǎng)基上能合成自身所需的全部生長(zhǎng)因子

44、,故無(wú)需添加生長(zhǎng)因素,該培養(yǎng)基所培養(yǎng)的微生物為野生型。13. 簡(jiǎn)述采用多管發(fā)酵法測(cè)定自來(lái)水大腸桿菌群的方法。采用多管發(fā)酵法測(cè)定自來(lái)水大腸桿菌群培養(yǎng)基：乳糖蛋白胨發(fā)酵管（內(nèi)有倒置小套管），三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管（瓶）（內(nèi)有倒置小套管），伊紅美藍(lán)瓊脂平板，滅菌水 儀器或其他用具：載玻片，滅菌的帶玻璃塞空瓶，滅菌培養(yǎng)皿，滅菌吸管，滅菌試管等。（一）自來(lái)水水樣的采集：先將自來(lái)水龍頭用火焰燒灼3min滅菌，再開(kāi)放水龍頭使水流5min后，以滅菌三角燒瓶接取水樣，以待分析。   （二）檢查方法：  1.初(步)發(fā)酵試驗(yàn)  在2個(gè)含有50ml三倍濃縮的乳糖蛋白胨發(fā)酵燒

45、瓶中，各加入100m1水樣。在10支含有5m1三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，各加入10 m1水樣?；靹蚝?，37培養(yǎng)24h，24h未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng)至48h。    2.平板分離  經(jīng)24h培養(yǎng)后，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及48h產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管(瓶)，分別劃線接種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，再于37下培養(yǎng)1824h，將符合下列特征的菌落的一小部分，進(jìn)行涂片，革蘭氏染色，鏡檢。深紫黑色、有金屬光澤；紫黑色、不帶或略帶金屬光澤；淡紫紅色、中心顏色較深。3.復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)  經(jīng)涂片、染色、鏡檢后，如為革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌，則挑取該菌落的另一部分,重新接種于普通濃度的乳糖蛋白胨發(fā)

46、酵管中，每管可接種來(lái)自同一初發(fā)酵管的同類(lèi)型菌落1-3個(gè),37培養(yǎng)24h，結(jié)果若產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，即證實(shí)有大腸菌群存在。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)試卷（一）專(zhuān)業(yè) 班級(jí) 姓名 學(xué)號(hào) 一、填空題(20個(gè)空，每個(gè)2分，共40分)1、固體培養(yǎng)基中一般使用 為凝固劑，其用量一般為 。2、高壓蒸汽滅菌一般采用溫度為 ，滅菌時(shí)間 分鐘。3、革蘭氏染色的步驟依次是： 、 、 、 、 。4、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種培養(yǎng) 的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，高氏一號(hào)培養(yǎng)基是培養(yǎng) 的培養(yǎng)基，馬丁氏培養(yǎng)基是用于分離 的培養(yǎng)基。5、為獲得某種微生物的純培養(yǎng)，一般采用 或 法分離純化該微生物。6、一個(gè)菌落的形態(tài)特征可從 、 、 、 、 、 等方面進(jìn)行描述。二、選擇

47、題（10小題，每小題2分，共20分） 把正確的答案填寫(xiě)在下面的表格內(nèi)。1、革蘭氏（Gram）染色的操作步驟中最關(guān)鍵的一步是：A、結(jié)晶紫染色； B、碘液固定； C、酒精脫色； D、涂片2、在使用顯微鏡油鏡時(shí)，為了提高分辨力，通常在鏡頭和蓋玻片之間滴加：A、二甲苯； B、水； C、香柏油或液體石蠟3、如果血球計(jì)數(shù)板是25×16型，且五個(gè)中方格中總菌數(shù)為A，菌液稀釋倍數(shù)為B，1ml菌液中總菌為A 50000A.B (個(gè)) B 32000A.B（個(gè)）C 5000A.B (個(gè)) D 3200A.B （個(gè)）4、鏡臺(tái)測(cè)微尺每格長(zhǎng)度為： A、0.01mm B、0. 1mm C、1mm D 0.001

48、mm5、大腸桿菌在葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基中：A、不產(chǎn)酸，不產(chǎn)氣 B、不產(chǎn)酸，產(chǎn)氣 C、產(chǎn)酸，產(chǎn)氣 ； D產(chǎn)酸，不產(chǎn)氣6、高氏一號(hào)培養(yǎng)基中碳源是： A、葡萄糖； B、土豆 C、可溶性淀粉； D、蛋白胨三、判斷題(5個(gè)題，每題2分，共10分) 正確的打“”號(hào)，錯(cuò)誤的打“×”號(hào)1、金黃色葡萄球菌革蘭氏染色為紫色，為革蘭氏陽(yáng)性菌 （ ）2、黑曲霉有掃帚狀的分生孢子。 （ ）3、枯草芽孢桿菌能產(chǎn)生胞外淀粉酶，分解淀粉。 （ ）5、血球計(jì)數(shù)板中每個(gè)小方格的面積為1/400mm2。 （ ）四、簡(jiǎn)答題（3小題，每小題10分，共30分）1、試述利用顯微測(cè)微尺測(cè)量酵母菌大小的實(shí)驗(yàn)步驟。3、你是否認(rèn)同基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)

49、加設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)這種實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式？談?wù)勀銓?duì)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的見(jiàn) 和建議。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)試題（一）答案及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)一、填空題（20個(gè)空，每個(gè)1分，共20分）1、瓊脂；1.5-2%（答規(guī)定范圍內(nèi)任意數(shù)字均得分）2、121 ，20-30分鐘（答規(guī)定范圍內(nèi)任意數(shù)字均得分）3、延遲期，對(duì)數(shù)期，穩(wěn)定期，衰亡期 4、紫 ，黃5、細(xì)菌 ，放線菌， 真菌6、稀釋涂布平板法，稀釋混合平板法，平板劃線分離法（答其中任意兩個(gè)得分）。7、基內(nèi)菌絲，氣生菌絲，孢子絲。8、540-560nm（答規(guī)定范圍內(nèi)任意數(shù)字均得分） ， 0.1-0.65二、選擇題（10個(gè)小題，每小題1分，共10分）題號(hào)12345678910答案CCACAACC

50、BC三、判斷題（5個(gè)題，每題1分，共5分）1；2×；3；4×；5. ；四、簡(jiǎn)答題（3小題，每小題10分，共15分）1、試述利用顯微測(cè)微尺測(cè)量微生物大小的實(shí)驗(yàn)步驟。答：1目鏡測(cè)微尺的標(biāo)定2分放置目鏡測(cè)微尺于目鏡放置鏡臺(tái)測(cè)微尺將鏡臺(tái)測(cè)微尺置于顯微鏡的載物臺(tái)上，使刻度面朝上。調(diào)節(jié)焦距，當(dāng)看清鏡臺(tái)測(cè)微尺后，轉(zhuǎn)動(dòng)接目鏡，使目鏡測(cè)微尺的刻度與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行，移動(dòng)推動(dòng)器，使目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的某一區(qū)間的兩對(duì)刻度線完全重合，然后計(jì)數(shù)出兩對(duì)重合線之間各自所占的格數(shù)。3分目鏡測(cè)微尺每小格長(zhǎng)度（um）=2菌體大小的測(cè)定：4分移去鏡臺(tái)測(cè)微尺，換上酵母菌玻片標(biāo)本，校正焦距使菌體清晰，轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺，測(cè)出酵母菌的直徑占幾小格，將測(cè)得的格數(shù)乘以目鏡測(cè)微尺每小格所代表的長(zhǎng)度，即可換算出此單個(gè)菌體直徑，1分在同一涂片上需測(cè)定10-20個(gè)菌體