水質(zhì)指標(biāo)測(cè)定原理、方法及注意事項(xiàng)

1、目錄水質(zhì)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制1溶解氧DO3化學(xué)需氧量（COD）5BOD57氮9磷10校準(zhǔn)曲線11氮、磷測(cè)定簡略步驟12葉綠素Chl-a13懸浮物15水質(zhì)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制精密度控制：對(duì)均勻樣品，凡能做平行雙樣的分析項(xiàng)目，分析每批水樣時(shí)均須做l0% 的平行雙樣，樣品較少時(shí)，每批樣品應(yīng)至少做一份樣品的平行雙樣。測(cè)定的平行雙樣允許差符合規(guī)定質(zhì)控指標(biāo)的樣品，最終結(jié)果以雙樣測(cè)試結(jié)果的平均值報(bào)出。平行雙樣測(cè)試結(jié)果超出規(guī)定允許偏差時(shí)，在樣品允許保存期內(nèi)，再加測(cè)一次，取相對(duì)偏差符合規(guī)定質(zhì)控指標(biāo)的兩個(gè)測(cè)定值報(bào)出。水質(zhì)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制指標(biāo)(建議)項(xiàng)目樣品含量范圍（mg/L）精密度%總氮0.0251.010>

2、1.05氨氮0.020.1200.11.015>1.010硝氮<0.5250.5420>415總磷<0.025250.0250.610>0.65高錳酸鉀指數(shù)<2.025>2.020 準(zhǔn)確度控制：例行地表水質(zhì)監(jiān)測(cè)中，采用標(biāo)準(zhǔn)樣品或質(zhì)控樣品作為控制手段，每批樣品帶一個(gè)已知濃度的質(zhì)控樣品。如果實(shí)驗(yàn)室自行配制質(zhì)控樣，要注意與國家標(biāo)準(zhǔn)樣品比對(duì)，但不得使用與繪制校準(zhǔn)曲線相同的標(biāo)準(zhǔn)溶液，必須另行配制。質(zhì)控樣品的測(cè)試結(jié)果應(yīng)控制在90%110%范圍，標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)試結(jié)果應(yīng)控制在95%1 05%范圍。 準(zhǔn)確度：常用以度量一個(gè)特定分析程序所獲得的分析結(jié)果（單次測(cè)定值或重復(fù)測(cè)定值

3、的均值）與假定的或公認(rèn)的真值之間的符合程度。一個(gè)分析方法或分析系統(tǒng)的準(zhǔn)確度是反映該方法或該測(cè)量系統(tǒng)存在的系統(tǒng)誤差或隨機(jī)誤差的綜合指標(biāo)，它決定著這個(gè)分析結(jié)果的可靠性。 準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)方法：1、標(biāo)準(zhǔn)樣品分析：通過分析標(biāo)準(zhǔn)樣品，由所得結(jié)果了解分析的準(zhǔn)確度2、回收率測(cè)定：在樣品中加入一定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)其回收率，這是目前實(shí)驗(yàn)室中常用的確定準(zhǔn)確度的方法。回收率P（%）=（加標(biāo)試樣測(cè)定值-試樣測(cè)定值）/加標(biāo)量×100% 對(duì)于常規(guī)樣品可憑經(jīng)驗(yàn)實(shí)施，對(duì)于未知樣品一般步驟為1） 了解樣品來源，初步估計(jì)待測(cè)物質(zhì)含量2） 確定稀釋比和測(cè)試體積3） 根據(jù)樣品性質(zhì)、分析方法選擇加標(biāo)方式（取相同體積的兩份樣品，其中一

4、份加標(biāo)，一份不加標(biāo)，這是最常用的加標(biāo)方式）4） 確定加標(biāo)量加標(biāo)實(shí)驗(yàn)的一般原則1） 加標(biāo)物的形態(tài)應(yīng)該和待測(cè)物的形態(tài)相同。2） 樣品與加標(biāo)樣同時(shí)按同一操作步驟和方法測(cè)定，保證實(shí)驗(yàn)條件一致。為提高準(zhǔn)確度，樣品和加標(biāo)樣可分別進(jìn)行平行測(cè)試。3） 加標(biāo)樣中原始樣品的取樣體積、稀釋倍數(shù)及測(cè)試體積，盡可能與樣品測(cè)試時(shí)一致。4） 加標(biāo)量應(yīng)與樣品中相應(yīng)待測(cè)物含量相近，一般為試樣含量的0.52倍，加標(biāo)后的測(cè)定值不應(yīng)超出方法的測(cè)量上限的90%；當(dāng)樣品中待測(cè)物濃度高于校準(zhǔn)曲線的中間濃度時(shí)，加標(biāo)量應(yīng)控制在待測(cè)物濃度的半量；對(duì)于低濃度樣品（接近測(cè)定下限），加標(biāo)量可適當(dāng)增加到試樣含量的3倍或4倍。5） 加標(biāo)物的濃度宜高，加標(biāo)

5、體積宜小，一般不超過原始試樣體積的1%，保持樣品的基體不變。溶解氧DOA 碘量法 原理水樣中加入硫酸錳和堿性碘化鉀，水中溶解氧將低價(jià)錳氧化成高價(jià)錳，生成四價(jià)錳的氫氧化物棕色沉淀。加酸后，氫氧化物沉淀溶解并與碘離子反應(yīng)釋放出游離碘。以淀粉作指標(biāo)劑，用硫代硫酸鈉滴定釋放出的碘，可計(jì)算溶解氧的含量。采樣用碘量法測(cè)定水中溶解氧，水樣常采集到溶解氧瓶中。采集水樣時(shí)，要注意不使水樣曝氣或有氣泡殘存在采樣瓶中?？捎盟畼記_洗溶解氧瓶后，沿瓶壁直接傾注水樣或用虹吸法將細(xì)管插入溶解氧瓶底部，注入水樣至溢流出瓶容積的1/31/2。水樣采集后，為防止溶解氧的變化，應(yīng)立即加固定劑于樣品中（1ml硫酸錳溶液、2ml堿性碘

6、化鉀溶液），并存于冷暗處。藥品1) 硫酸錳溶液：稱取480g硫酸錳（MnSO4·4H2O）或364g MnSO4·H2O溶于水，用水稀釋至1000ml；2) 堿性碘化鉀溶液：稱取500g氫氧化鈉溶解于（300-400ml）水中，另稱取150g碘化鉀（或135gNaI）溶于200ml水中，待氫氧化鈉溶液冷卻后，將兩溶液合并，混勻，用水稀釋至1000ml（該溶液呈強(qiáng)堿性，保存時(shí)切勿使用玻璃瓶塞的容器瓶，或在玻璃瓶塞外包一層濾紙）；3) 1%淀粉溶液：稱取1g可溶性淀粉，用少量水調(diào)成糊狀，再用剛煮沸的水沖稀至100ml（淀粉溶液易變質(zhì)，最好在實(shí)驗(yàn)前配制）。4) 硫代硫酸鈉溶液：稱

7、取3.2g硫代硫酸鈉溶于煮沸冷卻的水中，加入0.2g碳酸鈉，用水稀釋至1000ml，貯于棕色瓶中，使用前用0.025mol/L重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定；5) 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取重鉻酸鉀1.2258g，溶于水，移入1000ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。硫代硫酸鈉標(biāo)定方法：于250ml錐形瓶中，加入100ml水和1g碘化鉀，加入10ml 0.025mol/L重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液、5ml（1+5）硫酸溶液，密塞，搖勻。與暗處靜置5min后，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入1ml淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去為止，紀(jì)錄用量V1。M = (10×0.025)/V1式中：M-硫代硫酸

8、鈉溶液的濃度；V1-滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液的體積步驟溶解氧的固定：加入1 ml硫酸錳溶液、2ml堿性碘化鉀溶液（沿壁加入，切勿引起氣泡產(chǎn)生），蓋好瓶塞，顛倒混合數(shù)次，靜置。待棕色沉淀物降至瓶內(nèi)一半時(shí)，再顛倒混臺(tái)一次，待沉淀物下降到瓶底。析出碘：輕輕打開瓶塞，立即用吸管插入液面下加入2.0 ml硫酸。小心蓋好瓶塞，顛倒混合搖勻至沉淀物全部溶解為止，放置暗處5 min。滴定：移取100 m1 上述溶液于250 ml錐形瓶中，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入1 ml淀粉溶液，繼續(xù)滴定節(jié)藍(lán)色剛好褪去為止，記錄硫代硫酸鈉溶液用量。計(jì)算溶解氧(O2，mg/L)=(M*V*8*1000)/100式

9、中：M-硫代硫酸鈉溶液的濃度；V-滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液體積B溶解氧儀 測(cè)定溶解氧的電極由一個(gè)附有感應(yīng)器的薄膜和一個(gè)溫度測(cè)量及補(bǔ)償?shù)膬?nèi)置熱敏電阻組成。電極的可滲透膜為選擇性薄膜，把待測(cè)水樣和感應(yīng)器隔開，水和可溶性物質(zhì)不能透過，只允許氧氣通過。當(dāng)給感應(yīng)器供應(yīng)電壓時(shí)，氧氣穿過薄膜發(fā)生還原反應(yīng)，產(chǎn)生微弱的擴(kuò)散電流，通過測(cè)量電流值可測(cè)定溶解氧濃度。 為進(jìn)行精確的溶解氧測(cè)量，要求水樣的最小流速為0.3m/s，水流將會(huì)提供一個(gè)適當(dāng)?shù)难h(huán)，以保證消耗的氧持續(xù)不斷地得到補(bǔ)充。當(dāng)液體靜止時(shí)，不能得到正確的結(jié)果。在進(jìn)行野外測(cè)量時(shí)，可用手平行搖動(dòng)電極進(jìn)行。在每次測(cè)量過程中，電極和被檢測(cè)水樣之間必須達(dá)到熱平衡，這個(gè)

10、過程需要一定的時(shí)間?；瘜W(xué)需氧量（COD）A 重鉻酸鉀法原理在強(qiáng)酸并加熱條件下，用一定量的重鉻酸鉀氧化水樣中還原性物質(zhì)，過量的重鉻酸鉀以試亞鐵靈作指示劑，用硫酸亞鐵銨溶液回滴。根據(jù)硫酸亞鐵銨的用量算出水樣中還原性物質(zhì)消耗氧的量。適用范圍用0.25 mol/L濃度的重鉻酸鉀溶液可測(cè)定大于50 mg/L的COD值，未經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定上限是700 mg/L。用0.025mol/L濃度的重鉻酸鉀溶液可測(cè)定550mg/L的COD值，但低于10mg/L時(shí)測(cè)量準(zhǔn)確度較差（考慮使用高錳酸鹽指數(shù)法）。在分析含Cl-水樣時(shí)，罐內(nèi)加入水樣和含Hg+消解液（硫酸汞）后，應(yīng)即時(shí)搖勻（約1分鐘），待Cl-與Hg+充分反應(yīng)后

11、，再加催化劑（保持硫酸汞：氯離子=10：1）。試劑1） 重鉻酸鉀消解液(1/6K2Cr2O7 = 0.20 mol/L)：稱取重鉻酸鉀9.806g，溶于500ml水中，邊攪拌邊慢慢加入濃硫酸250ml，完全冷卻后移入1000ml容量瓶，稀釋至刻度（重鉻酸鉀預(yù)先在120烘干2h，干燥器中冷卻后稱取）；2） 硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O 0.04 mol/L：稱取6水硫酸亞鐵銨16.6g溶于水中，邊攪拌邊慢慢加入20ml濃硫酸，冷卻后移入1000ml容量瓶中，加水稀釋至刻度（配制過程易被污染）；3） 試亞鐵靈指示液：稱取鄰菲羅啉1.458g，硫酸亞鐵0.695

12、g溶于水中，稀釋至100ml，貯于棕色瓶內(nèi)（藥品不易溶，定溶后靜置1-2天后使用）；4） 硫酸-硫酸銀催化劑：于1000ml濃硫酸中加入10g硫酸銀，放置1-3天，不時(shí)搖動(dòng)使其溶解。需對(duì)硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行標(biāo)定：1） 吸取5ml重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液于150ml錐形瓶中，加水稀釋至約30ml，緩慢加入5ml濃硫酸，混均；2） 冷卻后，加入2滴試亞靈指示劑，用硫酸亞鐵銨溶液滴定，溶液的顏色由黃色經(jīng)藍(lán)綠色至紅褐色即為終點(diǎn)，記錄滴定用量V；3） 硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/L）：C=(0.20×5.00)/ V-步驟：1） 吸取5ml水樣于消解罐中，再加入5ml重鉻酸鉀消解液和5ml硫酸

13、-硫酸銀催化劑；旋緊密封蓋，將罐均勻置放入消解爐內(nèi)，離轉(zhuǎn)盤邊沿約2cm周圍上對(duì)稱排放，消解15分鐘；2） 待冷卻后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到250ml錐形瓶中，用蒸餾水沖洗消解罐帽2-3次，沖洗液并入錐形瓶中，控制體積在30ml；3） 加入2滴試亞鐵靈指示劑，再用硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液的顏色由黃色經(jīng)藍(lán)綠色至紅褐色即為終點(diǎn)，記錄硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量；計(jì)算（結(jié)合式）：CODCr(O2,mg/L) = (V0-V1)×C×8×1000/V2 =(V0-V1)×8000/(V× V2)式中：C -硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/L）；V0-空白消耗硫酸

14、亞鐵銨量（ml）； V -標(biāo)定硫酸亞鐵銨量（ml）； V1-水樣消耗硫酸亞鐵銨量（ml）； V2-水樣體積（5ml）； 8 -氧（1/2 O）摩爾質(zhì)量（g/mol）。B 高錳酸鹽指數(shù) 高錳酸鹽指數(shù)，亦稱為化學(xué)需氧量的高錳酸鉀法，是指在酸性或堿性介質(zhì)中，以高錳酸鉀為氧化劑，處理水樣時(shí)所消耗的量，以氧的mg/L來表示。本實(shí)驗(yàn)室采用酸性法測(cè)定。 原理水樣加入硫酸使呈酸性后，加入一定量的高錳酸鉀溶液，并在沸水浴中加熱反應(yīng)一定的時(shí)間。剩余的高錳酸鉀，用草酸鈉溶液還原并加入過量，再用高錳酸鉀溶液回滴過量的草酸鈉，通過計(jì)算求出高錳酸鹽指數(shù)值。適用范圍當(dāng)水樣的高錳酸鹽指數(shù)值超過10mg/L時(shí)，則酌情分取少量試

15、樣，并用水稀釋后再行測(cè)定。采樣與保存水樣采集后，應(yīng)加入硫酸使pH調(diào)至<2，以抑制微生物活動(dòng)。樣品應(yīng)盡快分析，并在48h內(nèi)測(cè)定。試劑1） 高錳酸鉀儲(chǔ)備液（1/5KMnO4=0.1mol/L）：稱取3.2g高錳酸鉀溶于1.2L水中，加熱煮沸，使體積減少到約1L，在暗處放置過夜，過濾后貯于棕色瓶中保存。使用前用0.10mol/L的草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液標(biāo)定，求得實(shí)際濃度。2） 高錳酸鉀使用液（1/5KMnO4=0.01mol/L）：吸取一定量的上述高錳酸鉀溶液，用水稀釋至1000ml，并調(diào)節(jié)至0.01mol/L準(zhǔn)確濃度，貯于棕色瓶中。使用當(dāng)天應(yīng)進(jìn)行標(biāo)定。3） （1+3）硫酸。配制時(shí)趁熱滴加高錳酸鉀溶

16、液至呈微紅色。4） 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1/2Na2C2O4=0.10mol/L）：稱取0.6705g在105110烘干1h并冷卻的優(yōu)級(jí)純草酸鈉溶于水，移入100ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。5） 草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液（1/2Na2C2O4=0.010mol/L）：吸取10ml上述草酸鈉溶液移入100ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。步驟1） 分取100 ml混勻水樣（如高錳酸鹽指數(shù)高于10mg/L，則酌情少取，并用水稀釋至100ml）于250ml錐形瓶中。2） 加入5ml（1十3）硫酸，混勻。3） 加入10 ml 0.01mol/L高錳酸鉀溶液，搖勻，立即放入沸水浴中加熱30min（從水浴重新沸騰起計(jì)

17、時(shí)）。沸水浴液面要高于反應(yīng)溶液的液面。4） 取下錐形瓶，趁熱加入10ml 0.01mol/L草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，搖勻。立即用0.01mol/L高錳酸鉀溶液滴定至顯微紅色，記錄高錳酸鉀溶液消耗量。5） 高錳酸鉀溶液濃度的標(biāo)定：將上述已滴定完畢的溶液加熱至約70，準(zhǔn)確加入10 m1草酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.01 mol/L），再用0.01 mol/L高錳酸鉀溶液滴定至顯微紅色。記錄高錳酸鉀溶液的消耗量，按公式K=10.00/V求得高錳酸鉀溶液的校正系數(shù)(K)，其中V為高錳酸鉀溶液消耗量（ml）。計(jì)算1）水樣不經(jīng)稀釋：高錳酸鹽指數(shù)(O2,mg/L)=(10+V1)K-10 ×M×8

18、5;1000/100，式中，V1為滴定水樣時(shí)高錳酸鉀溶液的消耗量（ml）、K為校正系數(shù)、M為草酸鈉溶液濃度（mol/L）、8為氧（1/2 O）摩爾質(zhì)量。2）水樣經(jīng)稀釋：高錳酸鹽指數(shù)(O2,mg/L)=(10+V1)K-10-(10+V0)K-10 ×C×M×8×1000/V2，式中，V0為空白試驗(yàn)中高錳酸鉀溶液消耗量（ml）、V2為分取水樣量（ml）、C為稀釋的水樣中含水的比值（例如：10.0ml水樣，加90ml水稀釋至100ml，則C=0.90）。BOD5 本實(shí)驗(yàn)室采用稀釋接種法。原理 生化需氧量是指在規(guī)定條件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物質(zhì)，特

19、別是有機(jī)物所進(jìn)行的生物化學(xué)過程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全過程進(jìn)行的時(shí)間很長，如在20培養(yǎng)時(shí)，完成此過程需l00多天。目前國內(nèi)外普遍規(guī)定20±1培養(yǎng)5d，分別測(cè)定樣品培養(yǎng)前后的溶解氧，二者之差即為BOD5值，以氧的毫克/升表示。 對(duì)某些地表水及大多數(shù)工業(yè)廢水，因含較多的有機(jī)物，需要稀釋后再培養(yǎng)測(cè)定，以降低其濃度和保證有充足的溶解氧。稀釋的程度應(yīng)使培養(yǎng)中所消耗的溶解氧大干2 mg/L，而剩余溶解氧在l mg/L以上。為了保證水樣稀釋后有足夠的溶解氧，稀釋水通常要通入空氣進(jìn)行曝氣(或通入氧氣)，使稀釋水中溶解氧接近飽和。稀釋水中還應(yīng)加入一定量的無機(jī)營養(yǎng)鹽和緩沖物質(zhì)（磷酸鹽、鈣、鎂和鐵鹽

20、等），以保證微生物生長的需要。適用范圍 本法適用于測(cè)定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超過6000mg/L的水樣。當(dāng)水樣BOD5大于6000mg/L，會(huì)因稀釋帶來一定的誤差。試劑1） 磷酸鹽緩沖溶液：將8.5g磷酸二氫鉀（KH2PO4），21.75g磷酸氫二鉀（K2HPO4），33.4g七水合磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化銨（NH4Cl）溶于水中，稀釋至1000ml。2） 硫酸鎂溶液：將22.5g七水合硫酸鎂（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀釋至1000ml。3） 氯化鈣溶液：將27.5g無水氯化鈣溶于水，稀釋至1000ml。4） 氯化鐵溶液：將

21、0.25g六水合氯化鐵（FeCl3·6H2O）溶于水，稀釋至1000ml。稀釋水 在520L玻璃瓶內(nèi)裝入一定量的水，控制水溫在20左右。然后用無油空氣壓縮機(jī)或薄膜泵將此水曝氣28h，使水中的溶解氧接近于飽和，也可以鼓入適量純氧。瓶口蓋以兩層經(jīng)洗滌晾干的紗布，置于20培養(yǎng)箱中放置數(shù)小時(shí)，使水中溶解氧含量達(dá)8 mg/L左右。臨用前于每升水中加入氯化鈣溶液、氯化鐵溶液、硫酸鎂溶液、磷酸鹽緩沖溶液各1mL，并混合均勻。水樣的測(cè)定步驟：1） 不經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定：對(duì)于溶解氧含量較高、有機(jī)物含量較少的清潔地表水，可不經(jīng)稀釋，而直接以虹吸法將約20的混勻水樣轉(zhuǎn)移至兩個(gè)溶解氧瓶內(nèi)，轉(zhuǎn)移過程中應(yīng)注意不使

22、其產(chǎn)生氣泡。以同樣的操作使兩個(gè)溶解氧瓶充滿水樣后溢出少許，加塞水封（瓶內(nèi)不應(yīng)有氣泡）。立即測(cè)定其中一瓶溶解氧，將另一瓶放入培養(yǎng)箱中，在20±1培養(yǎng)5d后，測(cè)其溶解氧。2） 需經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定：對(duì)于污染的地表水和大多數(shù)工業(yè)廢水，需要稀釋后再培養(yǎng)測(cè)定。工業(yè)廢水可由重鉻酸鉀法測(cè)得的CODcr值確定。通常需作三個(gè)稀釋比，使用稀釋水時(shí)，由CODcr值分別乘以系數(shù)0.075、0.15、0.225，即獲得三個(gè)稀釋倍數(shù)。3） 稀釋倍數(shù)確定后，以直接稀釋法進(jìn)行測(cè)定：取兩組溶氧瓶（標(biāo)準(zhǔn)體積為250ml），用虹吸法加入部分稀釋水，再加入根據(jù)稀釋比例計(jì)算出的水樣量，然后再以虹吸法引入稀釋水至剛好充滿，加塞，

23、勿留氣泡于瓶內(nèi)。其中一組當(dāng)天測(cè)定溶解氧，另一組在20±1條件下培養(yǎng)5天后測(cè)定溶解氧含量。另取兩個(gè)溶解氧瓶，用虹吸法裝滿稀釋水作為空白，分別測(cè)定5天前、后的溶解氧含量。4） 當(dāng)樣品量太多時(shí)，考慮采用經(jīng)驗(yàn)值進(jìn)行稀釋，即以CODcr值除以12（將CODcr控制在12mg/L以下）獲得稀釋比。5） 碘量法測(cè)定溶解氧：加入1ml硫酸錳溶液、2ml堿性碘化鉀溶液，蓋好瓶塞，顛倒混合數(shù)次，靜置；待棕色沉淀物降至瓶內(nèi)一半時(shí)，再顛倒混合一次；打開瓶塞，加入2ml濃硫酸，蓋好瓶塞，顛倒混合搖勻至沉淀物全部溶解為止，放置暗處5min；移取100ml上述溶液于250ml錐形瓶中，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈

24、淡黃色，加入6滴淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去為止，紀(jì)錄硫代硫酸鈉溶液用量V。計(jì)算：溶解氧(O2，mg/L)=(M*V*8*1000)/100M-硫代硫酸鈉溶液的濃度V-滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液體積注：如果水樣中含有氧化性物質(zhì)（如游離氯大于0.1mg/L時(shí)），應(yīng)預(yù)先于水樣中加入硫代硫酸鈉去處。即用兩個(gè)溶解氧瓶各取一瓶水樣，在其中一瓶加入5ml（1+5）硫酸和1g碘化鉀，搖勻，此時(shí)游離出碘。以淀粉作指示劑，用硫代硫酸鈉溶液滴定至藍(lán)色剛褪，記下用量（相當(dāng)于去處游離氯的量）。于另一瓶水樣中，加入同樣量的硫代硫酸鈉溶液，搖勻后，按操作步驟測(cè)定。氮A 總氮水樣采集后，用硫酸酸化到pH < 2，在

25、24 h內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。在120的堿性介質(zhì)條件下，用過硫酸鉀作氧化劑，不僅可將水樣中的氨氮和亞硝酸鹽氮氧化成硝酸鹽，同時(shí)將水樣中大部分有機(jī)氮化合物氧化為硝酸鹽。而后，用紫外分光光度法分別于波長220 nm與275 nm出測(cè)定其吸光值。適用范圍檢測(cè)下限為0.05 mg/L，上限為4 mg/L。步驟1） 取10 ml水樣，或取適量水樣（使氮含量為2080 g）于25 ml具塞刻度管中，加5 ml堿性過硫酸鉀溶液，加塞后管口包一小塊紗布并用線扎緊，以免加熱時(shí)玻璃塞沖出。將具塞刻度管放在大燒杯中，置于高壓蒸汽鍋中120加熱30 min。2） 消解完成后取出比色管冷卻至室溫。加入（1+9）鹽酸1ml，用超純

26、水稀釋至25 ml標(biāo)線。3） 在紫外分光光度計(jì)上，以超純水作參比，用石英比色皿分別在220 nm及275 nm波長處測(cè)定吸光值。B 硝酸鹽氮原理利用硝酸根離子在220 nm波長處的吸收而定量測(cè)定硝酸鹽氮。溶解的有機(jī)物在220 nm處也會(huì)有吸收，而硝酸根離子在275 nm處沒有吸收。因此，在275 nm處作另一次測(cè)量，以校正硝酸鹽氮值。步驟1） 采集的水樣立即經(jīng)0 45 m微孔濾膜過濾（24h內(nèi)，無須加酸）。2） 取5 ml水樣，或取適量水樣于25 ml具塞刻度管中，用超純水稀釋至25ml標(biāo)線。3） 加入0.5 ml 1 mol/L鹽酸，在紫外分光光度計(jì)上，以超純水作參比，用石英比色皿分別在22

27、0 nm及275 nm波長處測(cè)定吸光值。C 氨氮原理本實(shí)驗(yàn)室采用納氏試劑光度法。碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)生成淡紅棕色膠態(tài)化合物。適用范圍最低檢出濃度為0.025 mg/L，測(cè)定上限為2 mg/L。步驟1） 采集的水樣立即經(jīng)0 45 m微孔濾膜過濾（24h內(nèi)，如需要可加硫酸調(diào)pH < 2）。2） 取10 ml水樣，或取適量水樣于50 ml具塞刻度管中，用超純水稀釋至50ml標(biāo)線。3） 1ml酒石酸鉀鈉溶液，再加入1.5 ml納氏試劑，放置1015 min。在紫外分光光度計(jì)上，以超純水作參比，用石英比色皿分別在420 nm波長處測(cè)定吸光值。磷 總磷消解采用過硫酸鉀消解法，磷酸鹽測(cè)定采

28、用鉬銻抗分光光度法。采集與保存 總磷的測(cè)定，于水樣采集后，加硫酸酸化至pH1保存。溶解性正磷酸鹽的測(cè)定，不加任何保存劑，于25冷處保存，在24 h內(nèi)進(jìn)行分析。方法采集的水樣立即經(jīng)0 45 m微孔濾膜過濾，其濾液供可溶性正磷酸鹽的測(cè)定。濾液經(jīng)強(qiáng)氧化劑（5%過硫酸鉀）的氧化分解，測(cè)得可溶性總磷。取混合水樣(包括懸浮物)，也經(jīng)強(qiáng)氧化劑分解，測(cè)得水中總磷含量。在酸性條件下，正磷酸鹽與鉬酸銨、酒石酸銻氧鉀反應(yīng)，生成磷鉬雜多酸，被還原劑抗壞血酸還原，則變成藍(lán)色絡(luò)合物。適用范圍本方法最低檢出濃度為0.01 mg/L，測(cè)定上限為0.6 mg/L。步驟1） 吸取25ml混勻水樣（必要時(shí)，酌情少取水樣，并加水至2

29、5ml，使含磷量不超過30 g）于50 ml具塞刻度管中，加過硫酸鉀溶液4 ml，加塞后管口包一小塊紗布并用線扎緊，以免加熱時(shí)玻璃塞沖出。將具塞刻度管放在大燒杯中，置于高壓蒸汽鍋中120加熱30 min。2） 試劑空白和標(biāo)準(zhǔn)溶液系列也經(jīng)同樣的消解操作。3） 顯色：向比色管中加入1 ml 10%抗壞血酸溶液，混勻。30s后加2ml鉬酸鹽溶液充分混勻，放置15 min，并在顯色后30 min內(nèi)完成測(cè)量。4） 測(cè)量：700 nm波長處，以零濃度溶液為參比，測(cè)量吸光度。減去空白試驗(yàn)的吸光度，并從校準(zhǔn)曲線上查出含磷量。注意事項(xiàng)1、 冷藏過的水樣，應(yīng)在其恢復(fù)至常溫后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2、 操作所用的玻璃器皿，

30、需用（1+5）或10%鹽酸浸泡6h以上。3、 玻璃器皿（包括具塞比色管）使用時(shí)，將酸液沖洗干凈后，需用純水潤洗3篇，原則上為晾干后使用（倒扣于試管架上，避免管口暴露而使雜質(zhì)進(jìn)入管中）。4、 如測(cè)試用試劑更換，需重新繪制校準(zhǔn)曲線。5、 比色皿使用后盡快清洗，必要時(shí)用酒精或稀硝酸浸泡片刻，以除去吸附的有色沉淀物。校準(zhǔn)曲線 凡應(yīng)用校準(zhǔn)曲線的分析方法，都是在樣品測(cè)得信號(hào)值后，從校準(zhǔn)曲線上查得其含量（或濃度）。因此，繪制準(zhǔn)確的校準(zhǔn)曲線，直接影響到樣品分析結(jié)果的準(zhǔn)確與否。此外，校準(zhǔn)曲線也確定了方法的測(cè)定范圍。 標(biāo)準(zhǔn)溶液一般可直接測(cè)定，但如試樣的預(yù)處理較復(fù)雜致使污染或損失不可忽略時(shí)，應(yīng)和試樣同樣處理后再測(cè)定

31、。 對(duì)于以4-6個(gè)濃度單位所獲得的測(cè)量信號(hào)值繪制的校準(zhǔn)曲線，分光光度法一般要求其相關(guān)系數(shù)|r|0.9990。 回歸方程y=a+bx，其中截距a應(yīng)與0作t檢驗(yàn)，當(dāng)a與0有顯著性差異時(shí)，表示校準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確度不高，直接使用必將給測(cè)定結(jié)果引入差值相當(dāng)于截距a的系統(tǒng)誤差；在完全相同的分析條件下，僅由于操作中的隨機(jī)誤差所導(dǎo)致的斜率變化，分子吸收分光光度法要求其相對(duì)差值小于5%。1、硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：（1）標(biāo)準(zhǔn)貯備液（KNO3=100g/ml）：稱取0.7218g硝酸鉀溶于蒸餾水中，移至1000ml容量瓶中，定容。（2）硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液（KNO3=10g/ml）：將貯備液用蒸餾水稀釋10倍。2

32、、磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：（1）磷酸鹽貯備液（KH2PO4=50 g/ml）：稱取0.2197g磷酸二氫鉀溶于水中，移入1000ml容量瓶中，加（1+1）硫酸5ml，用水稀釋至標(biāo)線；（2）磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液（KH2PO4=2 g/ml）：吸取10ml磷酸鹽貯備液于250ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。3、銨標(biāo)準(zhǔn)溶液：（1）銨標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（NH4CL=1.0mg/ml）：稱取3.819氯化銨溶于水中，定容至1000ml；（2）銨標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（NH4CL=0.01mg/ml）：移取5ml銨標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于500ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。 方法（參考）： 總氮：分別吸取0、0.5、1、2、3、5、7、8ml硝酸

33、鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液于25ml比色管中，用蒸餾水稀釋至10ml標(biāo)線，步驟同總氮測(cè)定； 氨氮：分別吸取銨標(biāo)準(zhǔn)使用液0、0.5、1、3、5、7、10ml于50ml比色管中，加水至標(biāo)線，步驟同氨氮測(cè)定； 硝氮：分別吸取0、0.25、0.5、1、1.5、2、2.5、3ml硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液于25ml比色管中，加水稀釋至25ml，步驟同硝氮測(cè)定； 正磷：分別取磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液0、0.5、1、3、5、7、10、15ml，加水至50ml，步驟同磷酸鹽測(cè)定。注：校準(zhǔn)曲線選取的濃度可按照所測(cè)水樣濃度而另行調(diào)整。如水樣濃度低時(shí)，選取質(zhì)量可降低。計(jì)算總氮、硝氮：A校=A220-2*A275； 式中：A220-220nm波長測(cè)

34、得吸光度；A275-275nm波長測(cè)得吸光度； 求得吸光度的校正值（A校）后，從校準(zhǔn)曲線中查得相應(yīng)的硝酸鹽氮量，除以水樣體積即為水樣測(cè)定結(jié)果（mg/L）。氨氮、總磷、正磷：氮、磷酸鹽（mg/L）=m/V 式中：m-從校準(zhǔn)曲線上查得的含氮量； V-所取水樣體積；氮、磷測(cè)定簡略步驟水樣比色管氧化劑消解顯色劑波長總氮TN取2ml水樣于25ml比色管中，稀釋至10ml加入5ml堿性過硫酸鉀120消解30分鐘加入1ml（1+9）鹽酸，再用蒸餾水稀釋至25ml220、275nm氨氮NH3-N抽濾取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至50ml加入1ml酒石酸鉀鈉溶液，再加入1.5ml納氏試劑420nm硝氮

35、NO3-N抽濾取5ml水樣于25ml比色管中，稀釋至25ml加入0.5ml 1mol/L的鹽酸220、275nm亞硝氮NO2-N抽濾取5ml水樣于50ml比色管中，稀釋至50ml加入1ml磺胺溶液，放置2-8分鐘后再加入1ml乙二胺溶液，混勻，放置10分鐘543nm總磷TP取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至25ml加入4ml過硫酸鉀120消解30分鐘稀釋至50ml后加入1ml抗壞血酸，30秒后加入2ml鉬酸鹽700nm可溶性正磷抽濾取10ml水樣于50ml比色管中稀釋至50ml后加入1ml抗壞血酸，30秒后加入2ml鉬酸鹽700nm可溶性總磷抽濾取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至2

36、5ml加入4ml過硫酸鉀120消解30分鐘稀釋至50ml后加入1ml抗壞血酸，30秒后加入2ml鉬酸鹽700nm試劑：1、 堿性過硫酸鉀：稱取40g過硫酸鉀（K2S2O8），15g氫氧化鈉，溶于超純水中，稀釋至1000ml，溶液存放在聚乙烯瓶內(nèi)，可貯存一周，顏色變紅需重新配制（過硫酸鉀生產(chǎn)過程中易殘留含氮雜質(zhì)，可使用進(jìn)口過硫酸鉀或?qū)⑦^硫酸鉀重結(jié)晶提純；氫氧化鈉易吸水溶解，稱量時(shí)需使用小燒杯而不用稱量紙）；2、 過硫酸鉀：5g過硫酸鉀溶于100ml蒸餾水中（溶解過硫酸鉀時(shí)可利用水浴法，但水浴溫度不可超過60）；3、 抗壞血酸：溶解10g抗壞血酸于水中，定容至100ml，貯存在棕色玻璃瓶中，顏色變

37、黃重配；4、 鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨于100ml水中，溶解0.35g酒石酸銻氧鉀于100ml水中；在不斷攪拌下，將鉬酸銨溶液徐徐加到300ml（1+1）硫酸中，加酒石酸銻氧鉀溶液并且混和均勻，貯存在棕色玻璃瓶中；5、 酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉溶于100ml水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml；6、 納氏試劑：稱取16g氫氧化鈉，溶于50ml水中，充分冷卻至室溫；另稱取7g碘化鉀和10g碘化汞溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至100ml，貯于聚乙烯瓶中，密塞保存（納氏試劑易產(chǎn)生沉淀，取藥時(shí)應(yīng)盡量避開沉淀或重新配藥；因有汞，配藥及測(cè)定氨氮時(shí)最

38、好戴上手套）；7、 磺胺溶液：稱取5g對(duì)氨基苯磺酰胺（磺胺），溶于50ml濃鹽酸和約350ml水的混合液中，稀釋至500ml；8、 乙二胺溶液：稱取0.5gN-（1萘基）乙二胺二鹽酸鹽溶于500ml水中，貯于棕色瓶內(nèi)。葉綠素Chl-a丙酮-凍融法原理 以90%丙酮為萃取劑，利用反復(fù)凍融使藻類細(xì)胞破碎，采用分光光度法測(cè)定葉綠素a。反復(fù)凍融浸提法在操作上方法簡單，不用水浴升溫、超聲波振蕩，不存在高溫條件下葉綠素a被破壞的問題，利用細(xì)胞內(nèi)冰粒的形成和細(xì)胞液濃度的增高引起溶漲，使胞壁結(jié)構(gòu)破碎引起葉綠素溶出。提取效率的提高主要通過反復(fù)凍融對(duì)胞壁的破壞和浸提時(shí)間的延長來實(shí)現(xiàn)。水樣的采集與保存 可根據(jù)需要進(jìn)

39、行分層采樣或混合采樣。水樣采集后應(yīng)放在蔭涼處，避免日光直射。最好立即進(jìn)行測(cè)定的預(yù)處理，如需經(jīng)過一段時(shí)間（448h）方可進(jìn)行預(yù)處理，則應(yīng)將水樣保存在低溫（04）避光處。在每升水樣中加入1%碳酸鎂懸濁液1ml，以防止酸化引起色素溶解。步驟1、 過濾濃縮水樣：在抽濾器上裝好乙酸纖維濾膜(0.7mm, 0.45um，光面朝上)，準(zhǔn)確量取100500ml水樣（視水樣藻濃度而定）進(jìn)行抽濾。取樣前先將水樣充分搖勻，抽濾時(shí)用黑色袋子將樣品罩住，待抽濾完后繼續(xù)抽12min。把膜對(duì)折存放于定性濾紙中包好，在濾紙外用鉛筆清楚標(biāo)記樣品信息（時(shí)間、名稱、過濾水樣體積），同時(shí)在實(shí)驗(yàn)本上做好記錄。向包好樣品的濾紙上加幾滴純水使膜濕潤。用黑色塑料袋包裹樣品。2、 把膜放于-20冰箱冰凍1224h(經(jīng)驗(yàn)是，隔夜即可，-20避光可保存一個(gè)月)，然后于室溫下融化510min（使膜不重疊以便膜充分融化，嚴(yán)格避光，使膜變軟即可），再于-20下冰凍不小于30min，此往復(fù)過程進(jìn)行35次后，把濾膜