跌打紅藥片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)探究

1、跌打紅藥片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)探究【摘要】目的建立跌打紅藥片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用 反相一高效液相色譜法(rphplc)測(cè)定跌打紅藥片中人參 皂苷rgl、rbl及三七皂苷r1的含量。采用異羥肟酸鐵和薄 層色譜法(tlc)鑒別白芷、紅花、土鱉蟲藥材。結(jié)果人參 皂苷rgl、rbl和三七皂苷r1分別在0.39487.896 ug、 0.40367.072 pg、0. 20484. 096 u g范圍內(nèi)線性關(guān)系 良好，平均回收率分別為100.10%、99.68%、100.82%, rsd 分別為0.72%、0.67%、0.62%。結(jié)論實(shí)驗(yàn)方法專屬性強(qiáng)、重 復(fù)性好，準(zhǔn)確簡(jiǎn)便?？捎行У目刂频蚣t藥片的質(zhì)量?！娟P(guān)鍵詞】跌

2、打紅藥片；rphplc； tlc；人參皂苷rgl; 人參皂苷rbl;三七皂苷r1跌打紅藥片由三七、紅花、當(dāng)歸、川芎、白芷、土鱉 蟲6味中藥組成，具有活血止痛，的療效，臨床上用于跌打 損傷，風(fēng)濕麻木1。為控制該制劑的內(nèi)在質(zhì)量，參照文獻(xiàn) 2-4,采用異羥肟酸鐵反應(yīng)和tlc分別鑒別了白芷、紅花、 土鱉蟲藥材。參照文獻(xiàn)58采用rphplc首次同時(shí)以人 參皂苷rgl和rbl及三七皂苷r1為目標(biāo)分析物，使產(chǎn)品的 質(zhì)量得到有效的控制，保證了臨床療效。1儀器與試藥agilengt 1100高效液相色譜儀；梅特勒ag135型電子天平；跌打紅藥片（安徽濟(jì)人藥業(yè)有限公司）；人參皂苷rgl、 rbl、三七皂苷r1、紅

3、花、土鱉蟲對(duì)照藥材（中國食品藥品 檢定研究院）；乙腈（色譜純），其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2. 1異經(jīng)肪酸鐵反應(yīng)取本品細(xì)粉5 g加甲醇25 ml超 聲提取20 min,過濾，濾液蒸干，殘?jiān)右颐?5 ml加熱5 min,過濾，濃縮至1 ml，加6%鹽酸羥胺甲醇液3滴，20% 氫氧化鉀乙醇液2滴，加稀鹽酸調(diào)節(jié)ph值至4，加1%三氯 化鐵的乙醇溶液2滴，醚層交界面顯紫紅色。制劑處方中去 掉白芷，同法制備作為陰性對(duì)照液則無上述現(xiàn)象。2.2紅花取本品細(xì)粉5 g加水50 ml，超聲30 min, 濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0%丙酮溶液10 ml振搖30 min, 過濾揮至2 ml作供試品溶液。另取紅

4、花對(duì)照藥材1 g，加 80%丙酮溶液5 ml,同法制成對(duì)照藥材溶液。制劑處方中去 掉紅花，同法制備作為陰性對(duì)照液。吸取上述3種溶液各2 口1，點(diǎn)于同一 g板上，以環(huán)己烷一乙酸乙酯（5 : 2）為展 開劑，展開，取出，晾干。置氨蒸氣中熏后日光下檢視，本 品與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置顯相同的紅色斑點(diǎn)，陰性對(duì)照 無此斑點(diǎn)。2.3 土鱉蟲取本品細(xì)粉5 g加甲醇20 ml，冷浸2 h濾 過，濾液濃縮至2 ml，作供試品溶液。另取土鱉蟲對(duì)照藥材 lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。制劑處方中去掉土鱉蟲，同法制備作陰性對(duì)照。吸取上述3種溶液各4 ul，點(diǎn)于同一以 g板上，以甲苯一二氯甲烷一丙酮（5 : 5 : 0.5

5、）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以香草醛硫酸試液，在105°c烘至斑 點(diǎn)清晰，本品在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的 斑點(diǎn)，陰性溶液則無此斑點(diǎn)。2. 4色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱agilent tcc18o 流動(dòng)相：乙腈（025 min, 21%->40%），水（0 25 min, 79%-60%）；乙腈（2530 min, 21%），水（25 30 min, 79%）。色譜柱溫度：30°c。檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm。進(jìn) 樣量10 ulo2.5對(duì)照品溶液的制備分別精密稱取人參皂苷rgl、rbl 對(duì)照品10. 25 mg、10.86 mg及三七皂苷r1對(duì)照品2.

6、56 mg, 置25 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。2.6供試品溶液的制備取本品細(xì)粉1.3 g，置索氏提取 器中，加石油醚（6090°c） 三氯甲烷（1 : 1）混合溶 液200 ml,回流lh，棄去提取液，藥渣加甲醇100 ml,回 流2 h,揮干，殘?jiān)铀?0 ml溶解，加水飽和的正丁醇振 搖提取3次，合并正丁醇液，用氨試液洗滌，正丁醇液蒸干， 殘?jiān)蛹状级ㄈ?5 ml量瓶中，搖勻，即得。2.7空白試驗(yàn)按處方比例制成缺三七的陰性樣品，照 2. 4項(xiàng)下方法注入液相色譜儀，結(jié)果在人參皂苷rgl、rbl及 三七皂苷r1相同保留時(shí)間位置上均未見色譜峰，表明其他藥物不干

7、擾指標(biāo)成分的含量測(cè)定。2.8線性關(guān)系分別精密量取2. 5項(xiàng)下的對(duì)照品溶液1、 2、5、10、15、20 nl,注入色譜儀，得人參皂苷rgl、rbl、 三七皂苷r1分別在0.39487.896 ug、0. 40367. 072 pg、0.20484. 096 pg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程:y1二326. 78x1+6. 8768y2=283. 74x24.9117y3二557. 99x31.9483。2.9穩(wěn)定性精密吸取2. 6項(xiàng)下的樣品溶液10 ul，按 2.4項(xiàng)下的色譜條件，每隔2 h測(cè)量1次，公測(cè)6次，得出 人參皂苷rgl、rbl和三七皂苷r1的rsd分別為0.65%、 0.70% .

8、 0. 79%,表明選定測(cè)量成分在12 h內(nèi)保持穩(wěn)定。2.10加樣回收取同一批樣品細(xì)粉0.65 g (人參皂苷 rgl、rbl和三七皂苷r1的含量分別為2. 33 mg/片、2.23 mg/片、0.61 mg/片)平行操作取6份，分別精密加人參皂 苷 rgl、rbl 和三七皂苷 r1 對(duì)照品 5. 04 mg, 4. 83 mg, 11.32 mg,計(jì)算出人參皂苷rgl、rbl和三七皂苷r1的回收率分 別為 100. 10% (rsd二0. 72%)、99. 68% (rsd=0. 67%)、100.82%(rsd=0. 62%)。2.11樣品的含量測(cè)定取本品3批，分別依法測(cè)定，結(jié) 果每片含三

9、七以人參皂苷rgl、rbl及三七皂苷r1的和計(jì)均不少于5. 0 mg。3討論對(duì)于定性鑒別藥材的選擇不同于以往的文獻(xiàn)2, 3，我 們選擇了最近存在假劣較多的紅花和土鱉蟲，含量測(cè)定目標(biāo) 成分，采用了索氏提取，先除去一些雜質(zhì)，再用甲醇提取， 整個(gè)樣品分析過程雜質(zhì)峰較少，分離度好，精密度高，測(cè)定 結(jié)果準(zhǔn)確。參考文獻(xiàn)1 ws3_b_4028_98，中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo) 準(zhǔn).中藥成方制劑第二十分冊(cè).2 王軍喜，馬開.跌打紅藥膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.中醫(yī)研 究，2006，19 (10)： 1819.3 羅曉紅，黃慧成.跌打紅藥膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.江西 中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，17 (6)： 3536.4 胡齊堂，周向陽.hplc測(cè)定跌打紅藥片中人參皂苷 rgl的含量.藥物分析雜志，2008，27 (11)： 19241925.5 鄭耀東.薄層色譜掃描測(cè)定三七傷藥膠囊中人參皂 苷rbl、rgl含量.江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004, 16(3)： 5354.6 黎玉翠，陳志維，暴梅佳，等.hplc法測(cè)定靈芝降 糖膠囊中人參皂苷rgl、re、rbl及三七皂苷r1的含量.中 國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009, 15 (7)