現(xiàn)代生物技術(shù)(一)

1、1、下圖表示利用基因工程培育抗蟲棉過程的示意圖。是導(dǎo)入目的基因的受體細胞，經(jīng)培養(yǎng)、篩選獲得一株有抗蟲特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析，該植株細胞中含有一個攜帶目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是雜合子。已知幾種氨基酸的密碼子：甲硫氨酸（AUG）、甘氨酸（GGA）、絲氨酸（UCU）、酪氨酸（UAC）、精氨酸（AGA）、丙氨酸（GCU）,請根據(jù)圖結(jié)合你所學(xué)過的知識回答以下問題:（1）步驟為                  

2、       ，該過程是基因工程操作程序的核心，II包括                、四環(huán)素抗性基因、啟動子、終止子以及復(fù)制原點等。將II導(dǎo)入雙子葉植物棉花受體細胞最常用的方法是               。（2）為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因，

3、可用          擴增的方法，其原理是              。（3）過程的原理是                        

4、    。理論上，在該轉(zhuǎn)基因植物自交產(chǎn)生的F1代中，仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的              。（4）圖中合成的多肽，其前三個氨基酸的序列是                      。2、下圖表示我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基

5、因抗蟲水稻“華恢1號”主要培育流程，據(jù)圖回答：   （1）過程應(yīng)用的生物技術(shù)主要是                。   （2）殺蟲基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)設(shè)計并人工合成的，這屬于         工程技術(shù)。       （3）若限制酶切割DNA他子后

6、形成的末端為 ，則該酶識別的核苷酸序列是            。   （4）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性內(nèi)切酶作用位點），據(jù)圖分析：    人工改造時，要使抗蟲基因表達，還應(yīng)插入          。    人工改造時用限制酶處理，其目的是：第

7、一，去除質(zhì)粒上的         （基因），保證TDNA進入水稻細胞后不會引起細胞的無限分裂和生長；第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點，有利于           ；第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等。    若用限制酶1分別切割改造過的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒，分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細胞，觀察到的細胞生長的現(xiàn)象

8、是                                                  。

9、60;   （5）檢測“華恢l號”具有抗蟲性狀的方法是                       。3、下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答。 （1）能否利用人的皮膚細胞來完成過程？      。原因是      

10、;                                               。（2）過程稱為  &#

11、160;                 。（3）為使過程更易進行，可用       處理D。為了檢測大腸桿菌是否產(chǎn)生了人胰島素，可采用的方法是                   。（4）下圖為上圖

12、中質(zhì)粒B的簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復(fù)制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。將用EcoRI切割后的目的基因與質(zhì)粒用DNA連接酶進行連接，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有      種。將上述連接產(chǎn)物導(dǎo)入無任何抗藥性的大腸桿菌細胞中然后接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的大腸桿菌所含有的連接產(chǎn)物是          

13、0;                    。在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是                  。（5）若要使A在體外通過過程擴增，那么在此過程中所使用的酶是        &#

14、160;     。除酶外還需要加入引物，其作用是                                    。（6）如果用該技術(shù)將一個位于DNA一端的目的基因進行擴增，那么連續(xù)擴增4次后，只含目的

15、基因的DNA占全部DNA的比例是          。4、36.（10分）長期以來 ,香蕉生產(chǎn)遭受病害的嚴(yán)重威脅 ,制約了其發(fā)展。目前 ,隨著轉(zhuǎn)基因抗病香蕉基因工程技術(shù)的日趨成熟 ,為培育抗病香蕉品種開辟了新途徑。轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示，質(zhì)粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四種限制酶切割位點。請回答：     (1)構(gòu)建含抗病基因的表達載體A時，應(yīng)選用限制酶        

16、0;     ，對           進行切割。(2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細胞，應(yīng)使基因表達載體A中含有                ，作為標(biāo)記基因。（3）能使抗病基因在香蕉細胞中特異性表達的調(diào)控序列是：   

17、      (填字母序號)。  A啟動子   B終止子  C 復(fù)制原點   D標(biāo)記基因（4）將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ梅椒ㄓ卸喾N，圖中所示方法為               。 （5）欲檢測目的基因是否表達成功，可采用的技術(shù)          

18、60;   (填字母序號)。    A. 核酸分子雜交        B. 基因序列分析    C. 抗原-抗體雜交   D. PCR(6)利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株。香蕉組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)物質(zhì)外還必須含有               &

19、#160;    等植物激素，它們會在          （填圖中標(biāo)號）階段發(fā)揮作用，同時      （填圖中標(biāo)號）階段還需要給予一定光照。（7）從香蕉組織塊到獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉試管苗的過程中，需經(jīng)過        。(填數(shù)字)無絲分裂    有絲分裂   減數(shù)分裂   原代培養(yǎng) 

20、;  傳代培養(yǎng)     植物體細胞雜交   細胞融合     脫分化      再分化5、請回答有關(guān)下圖的問題：(1)圖甲中所示的生物工程為_。該工程是指以_作為基礎(chǔ)，通過_修飾或基因合成，對現(xiàn)有_進行改造，或制造出一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(2)圖甲中序號所示過程叫做_，該過程遵循的堿基互補配對原因不同于翻譯過程的是_(請將模板堿基寫在前)。(3)如圖乙，一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，在基因尾端還必須有2

21、_；圖中3_的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。(4)若預(yù)期蛋白質(zhì)欲通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)，則構(gòu)建基因表達載體時，圖乙中序號1代表的是_；且在圖甲中過程之前，要對精子進行篩選，保留含性染色體_的精子。(5)為獲得較多的受精卵進行研究，圖甲中過程一般用激素對供體做_處理；為提高培育成功率，進行過程之前，要對_動物做_處理。若圖甲中的卵母細胞來自從屠宰場收集的卵巢，則其在之前需進行體外培養(yǎng)到_期方能受精。(6)用_技術(shù)處理發(fā)育到_期或囊胚期的早期胚胎，可獲得同卵雙胎或多胎。若對囊胚進行處理，要注意將_均等分割。6、回答有關(guān)生物工程的問題。轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培

22、育過程如下圖所示。圖中Pst、Sma、EcoR、Apa等為限制酶，質(zhì)粒和抗病基因上的箭頭表示限制酶的切割位點。下表示四種限制酶的識別序列及酶切位點。若要獲得抗病基因，能否用限制酶Sma對圖中對應(yīng)的位點進行切割？_，說明理由_。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用Pst、Apa限制酶切割質(zhì)粒？_?？敲顾貢种葡憬队鷤M織細胞的生長。欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細胞，重組質(zhì)粒中應(yīng)同時含有_基因，作為標(biāo)記基因。利用組織培養(yǎng)技術(shù)能將香蕉組織細胞培育成植株，這是因為香蕉組織細胞具有_，圖中、依次表示香蕉組織細胞的_和_的過程。、階段是否可使用同種培養(yǎng)基？ _；理由是_。階段是否可使用不

23、添加植物激素的培養(yǎng)基？_；理由是_。7、操縱元是原核細胞基因表達調(diào)控的一種組織形式，它由啟動子、結(jié)構(gòu)基因（編碼蛋白基因）、終止子等部分組成。下圖表示大腸桿菌細胞中核糖體蛋白（RP）合成及調(diào)控過程，圖中表示相關(guān)生理過程，mRNA上的RBS是核糖體結(jié)合位點。請回答下列問題：（1）啟動子和終止子的基本組成單位是           。（2）過程進行的場所是             ，

24、RP1中有一段氨基酸序列為“一絲氨酸一組氨酸一谷氨酸一”，轉(zhuǎn)運絲氨酸、組氨酸和谷氨酸的tRNA上的反密碼子分別為AGA、GUG、CUU，則基因1中決定該氨基酸序列的模板鏈堿基序列為                         。（3）圖示表明，當(dāng)細胞中缺乏足夠的rRNA分子時，核糖體蛋白RP1能與mRNA分子上的RBS位點結(jié)合，從而導(dǎo)致mRNA 

25、;          ，終止核糖體蛋白的合成。這種調(diào)節(jié)機制既保證細胞內(nèi)rRNA與核糖體在數(shù)量上的平衡，又可以減少              。（4）大豆中的一種成分染料木黃酮因能抑制rRNA形成而成為抗癌藥物的成分，試結(jié)合題中信息分析染料木黃酮抗癌的機理：該物質(zhì)（染料木黃酮）可以抑制rRNA的形成，RPI與mRNA中RBS位點結(jié)合，    

26、;                                     (2分)。8、（現(xiàn)代生物科技專題8分）干擾素是治療癌癥的重要藥物，它必須從血中提取，每升人血只能提取0.5g，所以價格昂貴?，F(xiàn)在美國加利福尼亞州的基因公司用如下圖的

27、方式生產(chǎn)干擾素。試分析原理和優(yōu)點。（1）從人的淋巴細胞中取出干擾素基因，一般可采用用_技術(shù)進行擴增，此基因在基因工程中稱為_ 。（2）此基因與細菌的質(zhì)粒相結(jié)合要依靠_ 酶，其作用部位是_ ，然后將目的基因移植到酵母菌體內(nèi)。（3）為了明確干擾素基因在酵母菌體內(nèi)能否發(fā)揮功能作用，從分子水平看，首先要檢測其是否_。（4）科學(xué)家在培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物時，常用土壤農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒做運載體。質(zhì)粒是基因工程最常用的運載體，它具備運載體的條件:能夠在宿主細胞中_并穩(wěn)定地保存；具有多個_ ，以便與外源基因連接；具有某些_ ，便于進行篩選。9、55（12分）據(jù)統(tǒng)計2009

28、年甲型11流感在全球范圍內(nèi)致死超過12萬人。9月8日，中國衛(wèi)生部長陳竺表示，中國成為世界上第一個可以應(yīng)用甲型H1N1流感疫苗的國家。甲型H1N1流感病毒是一種RNA病毒，有多種類型，請回答下列與甲型11流感病毒有關(guān)的問題：（1）我國科研人員研制甲型H1N1流感病毒疫苗的簡要操作流程如下：圖中步驟所代表的過程是_；步驟可用_處理大腸桿菌，使其處于_；檢驗S基因是否翻譯成S蛋白的方法是_。（2）有一個制藥廠設(shè)想生產(chǎn)抗甲流的單克隆抗體，請你幫助完成制備單克隆抗體的主要步驟：用甲流病毒對小鼠進行注射，從產(chǎn)生免疫反應(yīng)小鼠的_中得到相應(yīng)的淋巴細胞；設(shè)法將鼠的_與淋巴細胞融合，再用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選

29、，得到既能_，又能_的雜交瘤細胞；對上述雜交瘤細胞，還需進行_和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞；將雜交瘤細胞在體內(nèi)或_培養(yǎng)，就可以從中提取出大量的能抗甲流的單克隆抗體了。（3）甲型H1N1流感病毒感染正常人體后能引發(fā)_；該病毒可能會通過發(fā)生_而改變傳染性。10、40. 生物選修3：現(xiàn)代生物科技專題（15分）絞股藍細胞中含有抗煙草花葉病毒（TMV）基因，可以合成一種抗TMV 蛋白，葉片對 TMV具有抗感染性。煙草是重要的經(jīng)濟作物，由于 TMV 的感染會導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的煙草，主要流程如下圖所示。（1）科學(xué)家首先從絞股藍細胞中提取

30、抗TMV基因轉(zhuǎn)錄的RNA，然后合成目的基因。圖中過程表示_，獲得的DNA必須在兩側(cè)添加_和_。（2）過程構(gòu)建的重組Ti 質(zhì)粒時，必須使用_和_兩種工具酶。（3）由圖分析，在過程構(gòu)建的重組Ti 質(zhì)粒上應(yīng)該含有卡那霉素抗性基因作為_，重組Ti 質(zhì)粒導(dǎo)入煙草體細胞的方法是_。 （4）在過程培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加_，以保證受體細胞能培養(yǎng)成再生植株。（5）過程可采取_的方法，檢測植株是否合成了抗 TMV 蛋白。在個體水平的鑒定過程中，可通過_的方法來確定植株是否具有抗性。11、 下圖表示“華恢l號”抗蟲水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：（1）殺蟲基因（crylA

31、）是根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計并人工合成的，這屬于_工程技術(shù)范疇。（2）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制酶作用位點），據(jù)圖分析：人工改造質(zhì)粒時，要使抗蟲基因能成功表達，還應(yīng)插入_。人工改造質(zhì)粒時，用限制酶處理，其目的是：第一，去除質(zhì)粒上的_（基因），保證TDNA進入水稻細胞后不會促進細胞的分裂和生長；第二，使每種限制酶在質(zhì)粒上只有單一作用位點，有利于_。第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等。若用限制酶分別切割經(jīng)過過程改造的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已

32、成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細胞，觀察到的細胞生長的情況是：在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中_，含卡那霉素的培養(yǎng)基中_。 12、【生物一現(xiàn)代生物科技專題】我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低，科研人員通過基因工程等技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)。下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖，請回答：(1)在上述工程中，鐵結(jié)合蛋白基因稱為_，獲取該基因后常用_技術(shù)進行擴增。(2)構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時，通常要用同種限制酶分別切割_和_。將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時，可以用_處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入。(3)將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時，通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得_

33、；培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是_。(4)檢測培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達到，需要檢測轉(zhuǎn)基因水稻_。13、下圖是某種動物蛋白質(zhì)工程的示意圖，請分析回答：(1)目前，蛋白質(zhì)工程中難度最大的圖中編號_所示的過程，實現(xiàn)過程的依據(jù)有_。(2)若相關(guān)蛋白質(zhì)的核酸片段是從細胞質(zhì)中獲取的，則過程包括_、_。(3)過程中對核苷酸序列有嚴(yán)格要求的工具酶是_，進行過程的目的是_。(4)為獲得較多的受精卵進行研究，過程的處理方案是_。若過程所得的卵母細胞是從卵巢中獲得的，則體外受精前的過程表示_。14、36.【生物選修3】（15分）某質(zhì)粒上有Sal I、Hind III、BamH I三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素

34、基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題：（1）從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用_技術(shù)進行擴增。將抗鹽基因?qū)霟煵菁毎麅?nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理是_。（2）如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細胞，一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能_，也不能_。（3）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應(yīng)選用_兩種酶對_進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。（4）為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進行分子雜交檢測，又要用_方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。15、綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為

35、一個監(jiān)測完整細胞和組織內(nèi)基因表達及蛋白質(zhì)位置的理想標(biāo)記。請根據(jù)圖表回答下列問題。（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是TCGA一，N端伸出的核苷酸的堿基序列是TGCA，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用的限制酶是_。過程需要的酶是_。（2）過程將基因表達載體導(dǎo)入豬胎兒成纖維細胞常用的方法是_。（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體DNA上，可采用_ 技術(shù)進行檢測。（4）用顯微鏡可觀察到用于過程的豬卵母細胞的卵黃膜和透明帶之間有_個極體。用于過程的豬胎兒成纖維細胞，一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞，原因是_。（5）由過程獲得的重組細胞培育成綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬

36、，涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)手段有_。（6）為了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若對過程得到的囊胚階段胚胎進行分割，要注意_。得到綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬（雌性）之后，可用_處理，使之超數(shù)排卵，提高其繁育能力。16、 下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖l、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：（1）一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma切割后，含有      個游離的磷酸基團。  （2）若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的Sma酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越      。

37、  （3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna切割，原因是      。  （4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH和Hind 兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止                        。  （5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后

38、的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入      酶。  （6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了             。   （7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在      的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。（8）用限制酶EcoRV、Mbol單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的D

39、NA片段長度如下圖(1 kb 即1000個堿基對)，請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點。17、【2011·南京一模 】下圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程。請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題：（1）若限制酶l的識別序列和切點是，限制酶的識別序列和切點是GATCC- 那么在過程中，應(yīng)用限制酶_                 _切割質(zhì)粒，用限制酶 _      &#

40、160;          _ 切 割抗蟲基因。過程在_        _ (體內(nèi)體外)進行。（2）將通過過程得到的大腸桿菌涂布在含有_          _ 的培養(yǎng)基h，能夠生長說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒，反之則說明沒有導(dǎo)入，該培養(yǎng)基從功能方面屬于_       

41、    _ 培養(yǎng)基。（3）重組質(zhì)粒導(dǎo)人大腸桿菌的目的是 _                  _。（4）經(jīng)篩選分析該植株細胞中含有一個攜帶抗蟲基因的DNA片段，因此可以把它看怍是雜合子。理論上該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1代中，優(yōu)具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的  _           

42、 _。（5）過程所用技術(shù)稱為_         _，從遺傳學(xué)角度來看，根本原因是根細胞具有 _          _。18、普通煙草轉(zhuǎn)入抗鹽基因培育抗鹽煙草的過程如下圖所示。已知含抗鹽基因的DNA和質(zhì)粒上均有sal、Hind、BamH酶切位點，質(zhì)粒上另有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。請回答問題：54.構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應(yīng)選用限制酶_對_進行切割，以保證它們定向連接。限制酶切斷的是DNA分子中特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的鍵，具

43、體說就是_和_之間的鍵。55.如果目的基因直接注入煙草細胞，一般會被煙草細胞_。質(zhì)粒的作用是_。56.切割后的目的基因與質(zhì)粒由_酶連接成重組質(zhì)粒。篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細菌，應(yīng)在其培養(yǎng)基中加入_，理由是_。57.煙草細胞經(jīng)_形成愈傷組織。某研究性學(xué)習(xí)小組以愈傷組織為材料進行了下列實驗：一組在培養(yǎng)基中加30%的蔗糖，另一組不加蔗糖，接種后，每組再分成兩個小組，分別在光下和黑暗中培養(yǎng)。1個月后，觀察其生長、分化情況，結(jié)果見下表：培養(yǎng)條件加蔗糖不加蔗糖光照正常生長，分化不生長，死亡黑暗只生長，不分化不生長，死亡你能得出什么結(jié)論？_。58.從個體水平鑒定抗鹽轉(zhuǎn)基因煙草是否培育成功的方法是_。19、人體細胞

44、內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的P53基因，生物技術(shù)可對此類基因的變化進行檢測。(1)目的基因的獲取方法通常包括_和_。(2)上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的P53基因的部分區(qū)域。與正常人相比，患者在該區(qū)域的堿基會發(fā)生改變，在上圖中用方框圈出發(fā)生改變的堿基對，這種變異被稱為_。(3)已知限制酶E識別序列為CCGG，若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P53基因部分區(qū)域(見上圖)，那么正常人的會被切成_個片段，而患者的則被切割成長度為_對堿基和_對堿基的兩種片段。(4)如果某人的P53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)1 70 2  20  290和460堿基對的四種片段，那么該

45、人的基因型是_(以P表示正?；?，P表示異?；?。20、 在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。右圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答：(1)基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟:目的基因的獲取、_、將目的基因?qū)胧荏w細胞、_。（2）A過程需要的酶有            和         

46、60;   。（3）要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用_處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)開態(tài)；然后將                      在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。（4）含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株要經(jīng)過C_和E_。如要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養(yǎng)基中加入_。(5)目的基因能否在棉花

47、植株體內(nèi)維持和表達其遺傳特性的關(guān)鍵是_。這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是_。（6）如果轉(zhuǎn)基因植物的花粉中含有毒蛋白，將引起的安全性問題包括_。A.生物安全     B.環(huán)境安全    C.食品安全     D.倫理道德問題（7）抗蟲基因基因能在植物體內(nèi)成功表達是因為                  

48、           。說明蘇云金桿菌和植物等生物共用                           。21、 質(zhì)粒能成功轉(zhuǎn)入植物細胞，并將質(zhì)粒上的一部分外源DNA整合到植物的DNA中。下圖表示利用質(zhì)粒進行轉(zhuǎn)化獲得抗除草劑大

49、豆的過程。請據(jù)圖分析回答：（1）過程將目的基因?qū)胭|(zhì)粒后，需要通過                 使質(zhì)粒與目的基因切口黏合。（2）整合了目的基因的重組質(zhì)粒，在組成上還含有啟動子、終止子和             。（3）過程可以采用的方法是      

50、60;         。 （4）過程運用了細胞工程中的               技術(shù)，該技術(shù)的理論依據(jù)是       ；在該技術(shù)應(yīng)用的過程中，關(guān)鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細胞進行         

51、; 和           。 （5）為了檢測通過過程獲得的幼苗是否具有抗除草劑的特性，可采用的方法是                              。   

52、 22、降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科學(xué)機構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA，過程如下圖。在此過程中發(fā)現(xiàn)，合成較長的核苷酸單鏈易產(chǎn)生缺失堿基的現(xiàn)象。分析回答下列問題：(1)Klenow酶是一種_酶，合成的雙鏈DNA有_個堿基對。(2)獲得的雙鏈DNA經(jīng)EcoR(識別序列和切割位點GAATTC)和BamH(識別序列和切割位點GGATCC)雙酶切后插入到

53、大腸桿菌質(zhì)粒中，篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌并進行DNA測序驗證。大腸桿菌是理想的受體細胞，這是因為它_。設(shè)計EcoR和BamH雙酶切的目的是_。要進行重組質(zhì)粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質(zhì)粒中含有_。(3)經(jīng)DNA測序表明，最初獲得的多個重組質(zhì)粒，均未發(fā)現(xiàn)完全正確的基因序列，最可能的原因是_。(4)上述制備該新型降鈣素，運用的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是_。23、回答下列有關(guān)微生物和生物工程的問題。 基因克隆是對分離出來的目的基因進行大量擴增的過程。經(jīng)過基因克隆，可以生產(chǎn)出大量的目的基因或在基因表達時獲得大量的蛋白質(zhì)。細菌質(zhì)粒是基因克隆的合適載體，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，某些細菌質(zhì)粒中含有兩個抗生素抗性基因氨

54、芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，而且，在四環(huán)素抗性基因中存在限制酶的單一識別序列。下圖表示利用質(zhì)粒進行基因克隆的過程，其中A-D表示物質(zhì)，I和II表示抗性基因，表示過程，其它數(shù)字表示菌落，據(jù)圖回答下列問題。  48.  寫出下列字母和編號的名稱：A：             ； D：             ；II： 

55、0;           ；49.  將A和B形成D所需的酶是_ 。過程表示                             。50.  為篩選含有物質(zhì)A的細菌，需進行細菌培養(yǎng)，先在培養(yǎng)基（一

56、）中只加入氨芐青霉素，一段時間后，培養(yǎng)基上長出的細菌菌落具有             特性。然后，用滅菌絨布從培養(yǎng)基（一）中蘸取菌種，再按到只含四環(huán)素的培養(yǎng)基（二）中培養(yǎng)。根據(jù)培養(yǎng)基（一）和（二）上的細菌生長情況，可以判斷圖中菌落_（填數(shù)字）即為篩選出的含有物質(zhì)A的細菌，原因是                 

57、;                                           （2分）。  51.  上述培養(yǎng)基從功能上屬于  &

58、#160;    培養(yǎng)基。配制培養(yǎng)基時，在各成分都溶化后分裝前，要進行的依次是            和         ，培養(yǎng)基配制后采用高壓蒸汽滅菌的原因是_。24、依據(jù)基因工程技術(shù)有關(guān)原理回答下列問題：（1）限制性內(nèi)切酶是在基因工程中用來切開DNA的酶，EcoR是大腸桿菌的R型菌株分離而來的限制性核酸內(nèi)切酶，它總是在一定的堿基序列中切斷DNA。以下的堿基序列表示的是Eco

59、R的識別序列，請用虛線在下圖中畫出EcoR的作用部位：G  A  A  T  T  CC  T  T  A  A  G  （2）基因工程操作的基本步驟是：a _， b _，c _，d _。（3）獲取目的基因途徑有_、_；（4）下圖是將人類的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖，所用的載體為質(zhì)粒A。已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒導(dǎo)入細菌B后，其上的基因能得到表達。請回答下列問題： 簡述重組質(zhì)粒的主要過程   &

60、#160;                導(dǎo)入細菌B細胞的目的基因成功表達的標(biāo)志是什么                     （5）假如預(yù)期到某種酶的功能，要設(shè)計相應(yīng)的基因，下列圖示中是     &

61、#160;          ，是                        ；25、科學(xué)家將人的胰島素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并使其成功地在大腸桿菌中得以表達。操作過程如圖，請根據(jù)圖回答問題：(1)能否用人的皮膚生發(fā)層細胞代替圖中的胰島細胞，為什么_(2)若將目

62、的基因與質(zhì)粒A結(jié)合形成重組質(zhì)粒，需要_酶的作用。(3)在導(dǎo)入過程中可能會出現(xiàn)三種情況：即將重組質(zhì)粒導(dǎo)人受體細胞、將質(zhì)粒A導(dǎo)人受體細胞、沒有任何質(zhì)粒進入細胞；如何去除沒有導(dǎo)人質(zhì)粒的大腸桿菌_，原理是_。(4)如果把已經(jīng)導(dǎo)入普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的大腸桿菌，放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，將發(fā)生的現(xiàn)象_，原理是_。26、（現(xiàn)代生物科技專題8分）干擾素是治療癌癥的重要藥物，它必須從血中提取，每升人血只能提取0.5g，所以價格昂貴?，F(xiàn)在美國加利福尼亞州的基因公司用如下圖的方式生產(chǎn)干擾素。試分析原理和優(yōu)點。（1）從人的淋巴細胞中取出干擾素基因，一般可采用用    &#

63、160;     技術(shù)進行擴增，此基因在基因工程中稱為              。（2）此基因與細菌的質(zhì)粒相結(jié)合要依靠              酶，其作用部位是            ，

64、然后將目的基因移植到酵母菌體內(nèi)。（3）為了明確干擾素基因在酵母菌體內(nèi)能否發(fā)揮功能作用，從分子水平看，首先要檢測其是否         。（4）科學(xué)家在培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物時，常用土壤農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒做運載體。質(zhì)粒是基因工程最常用的運載體，它具備運載體的條件:能夠在宿主細胞中      并穩(wěn)定地保存；具有多個           ，以便與外源基因連接；具有某些 

65、60;          ，便于進行篩選。27、（每空1分，共10分）細胞融合技術(shù)有著廣泛應(yīng)用。下圖為細胞融合的簡略過程，據(jù)圖回答相關(guān)問題   （1）若a、b分別是基因型為yyRr和YYRr兩個玉米品種的花粉，且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上?？茖W(xué)家分別將它們的花粉除去細胞壁，然后誘導(dǎo)其融合，再把這些融合細胞進行培養(yǎng)，培育出了玉米新品種。            這兩個品種的

66、花粉可用化學(xué)誘導(dǎo)劑                        誘導(dǎo)融合，共可產(chǎn)生           種基因型的融合細胞（僅考慮兩兩融合），這些融合細胞經(jīng)過脫分化形成        &#

67、160;         ，再經(jīng)培養(yǎng)可能得到新品種。            若想培育出基因型為yyRR的玉米植株，也可直接用yyRr植株的花粉培養(yǎng)，再經(jīng)過秋水仙素處理并篩選獲得，這種方法叫做                  &#

68、160; 。   （2）若a、b表示番茄和馬鈴薯兩種植物的體細胞，請據(jù)圖回答： 在“番茄馬鈴薯”的培育過程中，運用了植物細胞工程中的              技術(shù)，植物體細胞融合完成的標(biāo)志是                     

69、60;       。              a、b細胞融合之前，要用到的酶是             ，酶處理后得到             。 

70、0; （3）若a、b分別為骨髓瘤細胞和已免疫的B淋巴細胞，請據(jù)圖回答： 為了能充分發(fā)揮上述兩種細胞各自的特點，經(jīng)特殊處理，在促細胞融合因子的作用下，使兩種細胞發(fā)生融合，形成圖中的d細胞，由d細胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比較，具有                             能大量制備等特點。下列各圖表示單

71、克隆抗體制備過程的各階段圖解，請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來                   。28、人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖：（1）過程代表的是         

72、;    。（2）過程構(gòu)建A基因重組載體時，必須使用            和             兩種工具酶。（3）過程是               。（4）對健康人進行該傳染病免疫預(yù)防時，可

73、選用圖中基因工程生產(chǎn)的              所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與已知病毒進行            比較；或用圖中的                進行

74、特異性結(jié)合檢測。（5）科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的抗病基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律：將該轉(zhuǎn)基因植株與非轉(zhuǎn)基因植株雜交，其后代中抗病類型與不抗病類型的數(shù)量比為11。若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗病類型與不抗病類型的數(shù)量比為_       _。若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥作離體培養(yǎng)，則獲得的再生植株群體中抗病類植株占   %。29、（15分）I右圖為細胞融合的簡略過程圖，請回答：（1）若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已經(jīng)用         處理，除

75、去了          ；A、B到細胞C的過程中，常用的物理方法是               ，融合完成的標(biāo)志是             。（2）若A、B是動物細胞，一般取自      &

76、#160;            _ ，然后用          使其分散開來。A、B到C的過程中，常用的不同于植物細胞的手段是        _       。II.以下是通過基因工程獲得含有人生長激素基因的奶牛的過程，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進

77、行克隆(如圖所示)，請結(jié)合圖示回答下列問題：（3）如果重組細胞為貼附性細胞，則在進行原代培養(yǎng)時，會表現(xiàn)出_和_等特點。（4）圖中所示的生物技術(shù)整體被稱為核移植，它包括的具體生物技術(shù)有_、_等。（5）形成重組細胞時應(yīng)選用_期的卵母細胞，并去掉其細胞核。去掉細胞核的原因是_。（6）圖中犢牛并非是對體細胞核供體母牛l00的復(fù)制，其原因是主要有_；_。30、下圖是植物體細胞雜交過程示意圖，據(jù)圖分析回答： (1)圖中過程是，目前最常用的方法是。(2)在過程中，必須通過一定的手段進行，才能實現(xiàn)原生質(zhì)的融合。(3)和分別表示和過程。(4)這項研究可克服    

78、;              的障礙，從而培育出新的作物品種。                                  

79、                                                31、科學(xué)家利用細胞工程培育了“白

80、菜甘藍”雜種植株，如下圖所示，請根據(jù)圖回答下列問題：（1）圖C表示                   ；由D形成E的過程稱為            ，由E形成F的過程稱為            ；由

81、E形成F的過程中細胞的增殖方式為                。生產(chǎn)中可以通過調(diào)整                          控制DEF過程。（2）圖中A、B的制備，需要去除細胞壁，此時要用

82、到                     酶；從根本上講， “白菜甘藍”雜種植株性狀的出現(xiàn)是由于                      的結(jié)果。（3）“白菜甘藍”雜種植株的食用部分是葉

83、，但葉又易受昆蟲危害而影響產(chǎn)量，科學(xué)家又利用基因工程培育出帶有抗蟲基因的“白菜甘藍”植株，請你設(shè)計實驗，檢測此植株的抗蟲基因是否表達。取昆蟲幼蟲放到帶有抗蟲基因的“白菜甘藍”植株甲上，再取等量的、生活狀態(tài)基本一致的昆蟲幼蟲放在                             植株乙上。適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，

84、分別觀察                            的生活情況。若                     

85、                 ，說明甲植株的抗蟲基因未得到表達；若                               

86、;        ，說明甲植株的抗蟲基因得到表達。32、下圖為“番茄馬鈴薯”的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：(1)在“番茄馬鈴薯”的培育過程中，運用了植物細胞工程中的_技術(shù)，原理是_。(2)可用_對番茄和馬鈴薯細胞進行處理獲得原生質(zhì)體；誘導(dǎo)番茄和馬鈴薯原生質(zhì)體融合的化學(xué)試劑一般用_。(3)愈傷組織常用作誘變育種的理想材料，理由是_。(4)不同物種生物之間存在著天然的_，用傳統(tǒng)的有性雜交方法不可能得到二者的雜種后代，而體細胞雜交可以克服遠緣雜交不親和的障礙。(5)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)物質(zhì)之外，還必須含有_從而

87、促進愈傷組織的形成和再分化；而用合成培養(yǎng)基體外培養(yǎng)動物細胞時，通常需加入_等一些天然成分。33、下圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請回答下列問題(1)人的紅細胞膜表面有被稱為凝集原的特異_；從免疫學(xué)角度看，這種凝集原是_。(2)圖中細胞中1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細胞后而獲得的_細胞，這種細胞具有產(chǎn)生_的特點，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細胞，這種細胞在體外培養(yǎng)時能_，但不會產(chǎn)生抗體。(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細胞各自的特點，經(jīng)特殊處理，在促細胞融合因子的作用下，使兩種細胞發(fā)生融合，形成圖中的細胞3，這種細胞稱為_。把它在乙培養(yǎng)皿中進行培

88、養(yǎng)，則能產(chǎn)生大量的細胞群，這種方法稱為_。(4)過程的主要目的是_。通過過程或的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量_抗體。34、自然界的細胞融合產(chǎn)生有性后代，細胞工程中細胞雜交被廣泛應(yīng)用于培育雜種植株和生產(chǎn)單克隆抗體等方面。請回答：（1）若a、b分別為精子和卵細胞，則產(chǎn)生a、b的分裂方式是，a和b融合形成d細胞的過程叫做                        

89、60;       。（2）若a、b表示體細胞，則由d細胞形成雜種植株的原理是                               ，植物體細胞雜交能創(chuàng)造可育的體細胞雜種植株的原因是該技術(shù)能克服