清潔驗證檢驗方法驗證

1、精選文庫生產(chǎn)設(shè)備清潔后取樣方法和檢驗方法驗證方案目錄1 概述2 目的3 驗證小組成員與職責3.1 驗證小組成員3.2 驗證小組職責4. 驗證正文4.1 驗證前確認4.2 驗證方法描述4.3 驗證內(nèi)容檢測方法驗證部分綜合回收率驗證5. 偏差總結(jié)6. 再驗證情況7. 補充與修定8. 評價與結(jié)論9. 附錄精選文庫1. 概述生產(chǎn)過程中所用的生產(chǎn)設(shè)備均可能有殘留物遺留，為了最大程度的避免由于上一批次生產(chǎn)產(chǎn)品的殘留影響下一批次或其他品種，故必須對生產(chǎn)所用的設(shè)備進行清潔。清潔后要對該清洗方法進行取樣檢測殘留量。一般通常的取樣方法為棉簽擦拭法和淋洗法。2. 目的本驗證方案的目的是考察清洗驗證涉及取樣過程和所用

2、檢測方法的過程，是對人員取樣操作、殘留物轉(zhuǎn)移、測試過程的考察，考察項目最低定量限、線性、綜合回收率等。3. 驗證小組成員與職責3.1 驗證小組成員組長： xxx組員： xxx 、 xxx3.2 驗證小組職責組長：質(zhì)量副總經(jīng)理xxx ，負責批準驗證方案和驗證報告。組員：xxx ，參與驗證方案的制定， 對驗證操作過程監(jiān)督檢查， 收集驗證資料和數(shù)據(jù)，參與起草驗證方案和驗證報告。組員：xxx ，負責參與驗證方案的制定， 對所取樣品進行化驗， 收集數(shù)據(jù)并報告結(jié)果，審核驗證報告。組員： xxx ，負責審核驗證方案，審核清潔驗證方案和報告，協(xié)助驗證方案的實施，并審核驗證報告。4. 驗證正文4.1驗證前確認棉

3、花 /棉簽材質(zhì)：棉簽紫外分光光度計編號：校驗有效期接受不接受天平編號：校驗有效期接受不接受批號：4.2檢測方法描述精選文庫檢測過程結(jié)構(gòu)中含有很強的紫外吸收官能團，如雙鍵的苯環(huán)等，故可采用紫外分光光度法。1cm 比色皿，在合適的最大的吸收波長處， 以甲醇為空白， 測定樣品溶液的吸收度。根據(jù)測得的吸收度來計算樣品殘留的量。貯備液的配制取對照品約 10mg，精密稱定，置于200ml 容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，混勻，得貯備液（ 50g/ml）。計算測定時同時進行對照品的測定，根據(jù)朗伯比爾定律，按下列公式計算：A 樣C樣=× C對A 對A ：分別為樣品和貯備液的吸收度C：分別為樣品和貯

4、備液的溶液濃度4.3 驗證內(nèi)容檢測方法驗證部分為了保證清洗驗證和日常清洗結(jié)果的可靠性，故對本方案采用的紫外分析方法考察了最大吸收波長確定、最低檢測限/定量限、線性和范圍、精密度、回收率。其中線性和范圍、精密度和回收率項目考察合并在綜合回收率考察中，見 章節(jié)。最大吸收波長的確定取貯備液，以甲醇為空白，采用紫外分光光度儀，在400nm 到 190nm 范圍內(nèi)進行掃描，找出最合適的最大吸收波長，并考察溶劑是否干擾。結(jié)果：最合適的最大吸收波長為：nm，吸收圖譜見附錄3最低檢測限 /定量限采用 50 g/ml 的貯備液逐級稀釋成不同濃度的溶液測定吸收度，如25 g/ml、10 g/ml、5.0 g/ml

5、、2.5 g/ml等，直至最低定量限。檢測限以 1/3 的最低定量限計算。濃度（ g/ml）吸收度5025105.0精選文庫濃度（ g/ml）吸收度2.5最低定量限 LOQ最低檢測限 LOD線性和范圍精密稱取適量對照品，用甲醇制成5 個不同濃度溶液，作為研究溶液。5 個不同濃度的溶液及其確定依據(jù)見附錄1 描述。并以濃度 ( g/ml)為橫坐標，吸收度為縱坐標的線性關(guān)系曲線，得到的R2 應(yīng) 0.99，線性曲線見附錄 4。濃度（ g/ml）吸收度吸收曲線方程R2結(jié)論：綜合回收率驗證棉簽擦拭法綜合回收率驗證A. 試驗溶液配制精密稱取適量對照品，用甲醇制成 5 個不同濃度溶液，作為研究溶液。 5 個不

6、同濃度的溶液及其確定依據(jù)見附錄 2 描述。B. 驗證過程B1. 準備一塊平整光滑的不銹鋼板材，尺寸為30cm×30cm。在鋼板上劃出20cm×20cm的區(qū)域。將此區(qū)域分割成 5cm×5cm 的 16 個小塊。分別將約 10ml試驗溶液定量裝入噴霧器，盡量均勻地噴在20cm×20cm 的區(qū)域內(nèi)，根據(jù)實際噴出的溶液量計算單位面積上產(chǎn)品的量。精選文庫B2. 自然晾干不銹鋼板。B3. 將棉簽用無水甲醇潤濕，除去棉簽上多余的溶液，按照“擦拭法和淋洗法取樣程序 ”進行。擦拭區(qū)域選擇整個噴涂面的中心區(qū)域單位面積 (5cm×5cm)，整個擦拭采用同一根棉簽。每

7、個濃度平行試驗 3 次。B4. 取樣結(jié)束后，將棉簽分別放入25ml 的試管中，用 10ml 無水甲醇稀釋至刻度，并標注相關(guān)取樣信息。B5. 將上述 15 份樣品溶液和試驗溶液依次按照本方案中描述檢測方法進行測定。B6. 回收率計算公式回收率 (%) =實際測得值 ÷理論測得值 ×100C. 接受標準綜合回收率： 70%綜合回收率 RSD：15%D. 實驗結(jié)果棉簽擦拭法綜合回收率結(jié)果檢測溶液實對應(yīng)試驗濃度理論加入濃系列際測得值實際測得值回收率 % g/ml g/ml度 g/ml1試驗濃度 1231試驗濃度 2231試驗濃度 3231試驗濃度 4231試驗濃度 523平均回收率

8、 70%系列1試驗濃度 1231試驗濃度 2231試驗濃度 3231試驗濃度 4231試驗濃度 523精選文庫檢測溶液實對應(yīng)試驗濃度理論加入濃際測得值實際測得值回收率 % g/ml g/ml度 g/ml平均回收率 70%回收率 RSD%15%備注： 1. 檢測溶液實際測得值為經(jīng)噴灑、稀釋后得到的檢測樣品；2. 對應(yīng)試驗濃度實際測得值為由檢測得到的數(shù)值轉(zhuǎn)換至噴灑至表面上未擦拭前的濃度。E. 結(jié)論淋洗法綜合回收率驗證A. 試驗溶液配制精密稱取適量對照品，用甲醇制成 5 個不同濃度溶液，作為研究溶液。 5 個不同濃度的溶液及其確定依據(jù)見附錄 2 描述。B. 驗證過程B1. 精密吸取 1ml 試驗溶液

9、置于 50ml 圓底燒瓶中，并旋轉(zhuǎn)燒瓶使試驗溶液均勻地分布在燒瓶下部內(nèi)表面上。自然干燥或在30下溫和干燥。精選文庫B2.向燒瓶中加入 50ml 甲醇，使之延壁快速留下，同時不斷轉(zhuǎn)動燒瓶。輕微搖晃燒瓶使溶液均勻。作為測試溶液。每個濃度平行試驗3 次。B3.將上述 15 份樣品溶液和試驗溶液依次按照4.2.1.1 檢測方法 進行測定。B4.回收率計算公式回收率 (%) =實際測得值 ÷理論測得值 ×100C. 接受標準綜合回收率： 70%綜合回收率 RSD：15%D. 實驗結(jié)果淋洗法綜合回收率結(jié)果檢測溶液實對應(yīng)試驗濃度理論加入濃系列際測得值實際測得值回收率 %度 g/ml g/

10、ml g/ml1試驗濃度 1231試驗濃度 2231試驗濃度 3231試驗濃度 423試驗濃度 51精選文庫23平均回收率 70%回收率 RSD%15%E. 結(jié)論精選文庫6. 偏差總結(jié)如果出現(xiàn)偏差請詳細記錄，若沒有以N/A 表示。7 .再驗證情況如果存在下列情形之一時，須進行設(shè)備清潔程序的再驗證。? 清洗方法發(fā)生本質(zhì)性的改變時；? 設(shè)備體積、材質(zhì)等參數(shù)發(fā)生改變會影響清潔效果時；8. 修改與補充如果出現(xiàn)修訂于補充，請詳細記錄，若沒有以N/A 表示。9. 評價與結(jié)論根據(jù)獲得的驗證數(shù)據(jù)情況進行評價。10. 附錄附錄 1 線性范圍測試溶液濃度的確定附錄 2 回收率驗證測試溶液濃度的確定附錄 3 最大吸

11、收波長掃描圖附錄 4 線性和范圍關(guān)系曲線精選文庫附錄 1 線性范圍測試溶液濃度的確定本次研究線性范圍濃度點確定依據(jù)以 LOQ 濃度點為最低濃度點，最大允許殘留量（ Ld）為最高濃度點來設(shè)定線性范圍的濃度點。最低濃度點確定由于 LOQ 即為在檢測時該方法能檢測到的最低濃度， 故直接將 LOQ 濃度最為最低濃度點。最高濃度點確定采用擦拭法和淋洗法兩種方式下最大允許殘留量相對應(yīng)于可供檢測時的最高濃度點作為線性研究時的最高濃度。1. 擦拭法方式下最高濃度點確定根據(jù)“產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備清潔程序驗證方案”中計算得到的擦拭法下的最大允許殘留量，L2178.25g/ml。；在清洗后取樣檢測時溶液中濃度為為 71.3

12、g /cmd說明：在按 25cm2 擦拭后取樣后，需要用10ml 甲醇溶解后才能測定，在假定 DOND3 回收率在 100%的情況下（即被甲醇 100%提?。?，此時擦拭前的濃度至少達到178.25g/ml時方能保證置于最大允許殘留量的限度（ Ld 為2）；71.3 g /cm故在擦拭法方式下最大允許殘留量對應(yīng)的檢測時濃度為178.25g/ml。2. 淋洗法方式下最高濃度點確定根據(jù)“產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備清潔程序驗證方案” 中計算得到的淋洗法下的最大允許殘留量，最大 L d 為 109.0 gml/ ，最小 L d 為 32.9 gml/ ；該濃度即為在清洗后取樣檢測時的濃度。故在淋洗法方式下最大允許殘留

13、量對應(yīng)的檢測時濃度為109.0g/ml。本次研究線性范圍濃度點最高濃度點： 178.25g/ml最低濃度點： LOQ （如 LOQ 小于 32.9g ml/ 時，以 32.9g ml/ 為最低濃度）另外中間 3 個濃度點在范圍內(nèi)最高和最低濃度范圍內(nèi)合理均衡布置精選文庫附錄 2 回收率驗證測試溶液濃度的確定本次研究回收率濃度點確定依據(jù)以 LOQ 濃度點為最低濃度點，最大允許殘留量（ Ld）為最高濃度點來設(shè)定回收率的濃度點。擦拭法回收率測試溶液濃度的確定1. 最高濃度點最大允許殘留量（ L d）來設(shè)定根據(jù)“產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備清潔程序驗證方案”中計算得到的擦拭法下的最大允許殘留量，L2178.25g/ml

14、。；在清洗后取樣檢測時溶液中濃度為為 71.3g /cmd說明：在按 25cm2 擦拭后取樣后，需要用10ml 甲醇溶解后才能測定，在假定 3 回收率在 100%的情況下（即被甲醇 100%提?。?，此時擦拭前的濃度至少達到178.25g/ml時方能保證置于最大允許殘留量的限度（ Ld 為71.32）；g /cm由于在按本方案進行模擬擦拭法回收率研究時，需要將取研究溶液10ml 噴在20cm×20cm 的區(qū)域內(nèi)，然后在 5cm×5cm 區(qū)域內(nèi)棉簽擦拭取樣， 取樣后需要用 10ml甲醇溶解后才能測定，考慮到棉簽轉(zhuǎn)移和檢測方法的綜合回收率最低限為70%，故此時研究的溶液濃度須達到

15、4074g/ml 時方能保證在檢測時檢測濃度達到最大2允許殘留量的限度（ L d 為 71.3 g /cm；擦拭后檢測時濃度178.25g/ml）；計算如下： 178.25g/ml×（20cm×20cm）× 10ml/（ 5cm×5cm）× 10ml× 70%）=4074 g/ml2. 最低濃度點以 LOQ 濃度來設(shè)定：由于在檢測時該方法能檢測到的最低濃度為LOQ，由于在按本方案進行模擬擦拭法回收率研究時，需要將取研究溶液10ml 噴在 20cm×20cm 的區(qū)域內(nèi)，然后在5cm×5cm 區(qū)域內(nèi)棉簽擦拭取樣， 取樣

16、后需要用 10ml 甲醇溶解后才能測定， 考慮到棉簽轉(zhuǎn)移和檢測方法的綜合回收率最低限為70%，故此時研究的溶液濃度須達到23LOQ 時方能保證在檢測時檢測濃度達到最低濃度點以LOQ；計算如下： LOQ×（ 20cm×20cm）× 10ml/（5cm×5cm）× 10ml×70%）=23 LOQ精選文庫3. 故設(shè)定的濃度點為（即需要配制的取樣方法和檢驗方法回收率研究溶液濃度）:最高濃度點： 4074g/ml最低濃度點： 23 LOQ另外中間 3 個濃度點在范圍內(nèi)最高和最低濃度范圍內(nèi)合理均衡布置淋洗法回收率測試溶液濃度的確定1. 最高濃度

17、點最大允許殘留量（ L d）來設(shè)定根據(jù)“產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備清潔程序驗證方案” 中計算得到的淋洗法下的最大允許殘留量， Ld 為最小 32.9 g ml/；最大 109.0 gml/。該濃度即為在清洗后取樣檢測時的濃度。由于在按本方案進行模擬擦拭法回收率研究時，需要將取研究溶液1ml 置于 50ml圓底燒瓶中，待干后加入 50ml 甲醇溶解提取后得到的溶液才能測定，考慮到棉簽轉(zhuǎn)移和檢測方法的綜合回收率最低限為 70%，故此時研究的溶液濃度須分別達到 2350 g/ml 和 7786 g/ml時方能保證在檢測時檢測濃度達到最大允許殘留量的限度（Ld 為最小 32.9 gml/ ；最大 109.0 gml/）；計算如下： 32.9g/ml×50ml / 70%=2350g/ml109.0 g/ml× 50ml / 70%=7786 g/ml2. 最低濃度點以 LOQ 濃度來設(shè)定由于在檢測時該方法能檢測到的最低濃度為LOQ，由于在按本方案進行模擬擦拭法回收率研究時， 需要將取研究溶液 1ml 置于 50ml 圓底燒瓶中，待干后加入 5