細(xì)胞系的建立-文檔資料

1、12一、基本概念細(xì)胞系細(xì)胞株3二、建立細(xì)胞系（株）的檔案 建立細(xì)胞系或細(xì)胞株應(yīng)對如下幾方面加以說明： 1.培養(yǎng)細(xì)胞的來源 對擬建立的細(xì)胞系（株）應(yīng)交代細(xì)胞供體所屬物種及供體的年齡、性別、取材的器官或組織。如是腫瘤組織、應(yīng)說明臨床診斷結(jié)果、組織來源和病例號等。42.細(xì)胞生物學(xué)特征 對所培養(yǎng)細(xì)胞的生物學(xué)性狀予以說明。53.培養(yǎng)條件和方法 說明所使用的培養(yǎng)基血清，使用濃度、并說明細(xì)胞生存的適宜溫度、CO2濃度、PH值等條件。有些細(xì)胞生長還需添加的一定附加成分。6三、細(xì)胞系的鑒定 擬建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株、除說明培養(yǎng)細(xì)胞的來源外，還要對其進(jìn)行一系列的鑒定。71.檢定細(xì)胞系的純度 檢定細(xì)胞系的純度包括鑒定

2、除主類細(xì)胞外還含有哪類細(xì)胞及其所占比例多少。82.細(xì)胞系的穩(wěn)定性 細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)過程中主要指標(biāo)有無明顯變異。使用穩(wěn)定的細(xì)胞系能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、重復(fù)性。93.細(xì)胞學(xué)特征 觀察細(xì)胞系的形態(tài)和表達(dá)特征的數(shù)據(jù)及其與來源細(xì)胞的差異。104.微生物污染檢查 有無病毒、細(xì)菌、真菌、支原體等污染。115.染色體穩(wěn)定性 包括檢查染色體數(shù)、染色體分組、染色體分帶以及有無標(biāo)記染色體等內(nèi)容。126.有無細(xì)胞系（株）交叉污染 包括用同工酶譜和抗原抗體反應(yīng)等鑒定細(xì)胞系（株）的細(xì)胞特異性。13四、細(xì)胞系（株）的保藏生物學(xué)家普遍認(rèn)為，一個(gè)國家或地區(qū)擁有培養(yǎng)物的種類、數(shù)量和質(zhì)量及對培養(yǎng)物的研究、開發(fā)和利用，將對科學(xué)和經(jīng)濟(jì)的

3、發(fā)展產(chǎn)生重大影響。14 美國典型培養(yǎng)物保藏中心（Amercian Type Culture Collection,ATCC）是現(xiàn)今最大的細(xì)胞庫。 ATCC網(wǎng)址：/ATCC接納細(xì)胞必須檢測的項(xiàng)目如下：151.培養(yǎng)簡歷2.培養(yǎng)液3.凍存液4.細(xì)胞活力5.細(xì)胞形態(tài)類型166.核型7.無污染檢驗(yàn)8.物種檢測9.免疫檢測 同時(shí)提供細(xì)胞系(株)建立者和檢測者的姓名。17 中國國家專利局委托武漢大學(xué)建立的中國典型培養(yǎng)物保藏中心（China Center Type Culture Collection,CCTCC）保藏了十幾個(gè)國家的專利培養(yǎng)物1000多株，非專利培養(yǎng)物3000多株，其中包括各類微生物菌種、動、植物細(xì)胞系、病毒、單細(xì)胞藻類和質(zhì)粒等。18 CCTC