細胞工程第六章學習教案

1、會計學1第一頁，共58頁。第1頁/共57頁第二頁，共58頁。第2頁/共57頁第三頁，共58頁。第3頁/共57頁第四頁，共58頁。第4頁/共57頁第五頁，共58頁。第5頁/共57頁第六頁，共58頁。第6頁/共57頁第七頁，共58頁。第7頁/共57頁第八頁，共58頁。方便了更換培養(yǎng)液的操作方便了更換培養(yǎng)液的操作(cozu)(cozu)，大大降低了污染，大大降低了污染的概率的概率 培養(yǎng)物可交替地接觸培養(yǎng)液和氣體環(huán)境，培養(yǎng)物可交替地接觸培養(yǎng)液和氣體環(huán)境，利于細胞利于細胞(xbo)或組織成長或組織成長 供新鮮培養(yǎng)液流入小室和舊培養(yǎng)液排出，供新鮮培養(yǎng)液流入小室和舊培養(yǎng)液排出，從而使細胞生活在不斷更新的培養(yǎng)

2、液中從而使細胞生活在不斷更新的培養(yǎng)液中 第8頁/共57頁第九頁，共58頁。3、培養(yǎng)液的發(fā)展、培養(yǎng)液的發(fā)展天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基(胎汁、血漿和血清胎汁、血漿和血清) 人工合成人工合成(rn n h chn)培養(yǎng)基（需添加血清）培養(yǎng)基（需添加血清）無血清細胞培養(yǎng)基（用激素、生長因子替代血清）無血清細胞培養(yǎng)基（用激素、生長因子替代血清） 第9頁/共57頁第十頁，共58頁。合細胞融合技術(shù)進行雜交育種。第10頁/共57頁第十一頁，共58頁。許多致畸、致癌物質(zhì)加入動物細許多致畸、致癌物質(zhì)加入動物細胞培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細胞會發(fā)生染胞培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細胞會發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目(shm)(shm)的變異的

3、變異。 第11頁/共57頁第十二頁，共58頁。第12頁/共57頁第十三頁，共58頁。第13頁/共57頁第十四頁，共58頁。第14頁/共57頁第十五頁，共58頁。第15頁/共57頁第十六頁，共58頁。第16頁/共57頁第十七頁，共58頁。第17頁/共57頁第十八頁，共58頁。第18頁/共57頁第十九頁，共58頁。第19頁/共57頁第二十頁，共58頁。1 組織塊；組織塊；2組織塊碎片；組織塊碎片；3消化；消化；4離心；離心；5原代培養(yǎng)；原代培養(yǎng)；6一一傳代培養(yǎng)；傳代培養(yǎng)；7一液氮罐保存細胞；一液氮罐保存細胞；8復蘇培養(yǎng)；復蘇培養(yǎng)；9擴大擴大(kud)培養(yǎng)培養(yǎng)；10大規(guī)模生物反應器培養(yǎng)大規(guī)模生物反應

4、器培養(yǎng)第20頁/共57頁第二十一頁，共58頁。第21頁/共57頁第二十二頁，共58頁。第22頁/共57頁第二十三頁，共58頁。第23頁/共57頁第二十四頁，共58頁。攪拌攪拌(jiobn)式生物反式生物反應器應器氣升式生物氣升式生物(shngw)反應器反應器第24頁/共57頁第二十五頁，共58頁。第25頁/共57頁第二十六頁，共58頁。1、雜交瘤細胞的篩選方法、雜交瘤細胞的篩選方法HAT培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)基篩選B淋巴細胞：淋巴細胞： HGPRT+， TK+ 存活存活(cn hu)，6-10天天骨髓瘤細胞：骨髓瘤細胞：HGPRT-， TK- 死亡死亡雜交瘤細胞：雙親性狀，雜交瘤細胞：雙親性狀， HG

5、PRT+， TK+ 存活存活(cn hu)第26頁/共57頁第二十七頁，共58頁。第27頁/共57頁第二十八頁，共58頁。3 2 旋轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)旋轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)14 中空纖維中空纖維(xinwi)培養(yǎng)培養(yǎng) 細胞細胞(xbo)工工廠培養(yǎng)廠培養(yǎng) 微載體微載體(zit)培培養(yǎng)養(yǎng)目前為細胞提供貼附表面目前為細胞提供貼附表面的培養(yǎng)基質(zhì)主要有的培養(yǎng)基質(zhì)主要有旋轉(zhuǎn)瓶旋轉(zhuǎn)瓶、中空纖維、細胞工廠和、中空纖維、細胞工廠和微載體微載體等。等。兼具懸浮培養(yǎng)和貼兼具懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)的優(yōu)點壁培養(yǎng)的優(yōu)點第28頁/共57頁第二十九頁，共58頁。第29頁/共57頁第三十頁，共58頁。三維空間三維空間(snwikngjin)，高密度生長

6、，高密度生長二維空間二維空間(kngjin)，單層生長，單層生長，生長密度低生長密度低體內(nèi)體內(nèi)體外體外第30頁/共57頁第三十一頁，共58頁。第31頁/共57頁第三十二頁，共58頁。中空纖維是細微的管中空纖維是細微的管狀結(jié)構(gòu)，管壁為極薄狀結(jié)構(gòu)，管壁為極薄的半透膜，水分子的半透膜，水分子(fnz)、小分子、小分子(fnz)營養(yǎng)物質(zhì)和氣營養(yǎng)物質(zhì)和氣體可以通過。管壁表體可以通過。管壁表面有許多海綿狀多孔面有許多海綿狀多孔結(jié)構(gòu)，細胞能在上面結(jié)構(gòu)，細胞能在上面貼壁生長。貼壁生長。第32頁/共57頁第三十三頁，共58頁。 細胞接種細胞接種(jizhng)到中空纖維的外表面，到中空纖維的外表面，而充氧的培養(yǎng)

7、液灌流到而充氧的培養(yǎng)液灌流到中空纖維的內(nèi)腔。貼附中空纖維的內(nèi)腔。貼附在外表面的細胞吸取內(nèi)在外表面的細胞吸取內(nèi)腔滲出的營養(yǎng)，迅速生腔滲出的營養(yǎng)，迅速生長繁殖。一段時間后細長繁殖。一段時間后細胞占據(jù)中空纖維外壁所胞占據(jù)中空纖維外壁所有空間，并在纖維表面有空間，并在纖維表面堆積。堆積。第33頁/共57頁第三十四頁，共58頁。第34頁/共57頁第三十五頁，共58頁。第35頁/共57頁第三十六頁，共58頁。既能滿足動物細胞的貼壁要求，又能充分利用生物反應器的內(nèi)部空間。第36頁/共57頁第三十七頁，共58頁。第37頁/共57頁第三十八頁，共58頁。知識點回顧知識點回顧(hug)第38頁/共57頁第三十九頁

8、，共58頁。第39頁/共57頁第四十頁，共58頁。第40頁/共57頁第四十一頁，共58頁。第41頁/共57頁第四十二頁，共58頁。第42頁/共57頁第四十三頁，共58頁。第43頁/共57頁第四十四頁，共58頁。將細胞和培養(yǎng)液一次性轉(zhuǎn)入生物反應器內(nèi)，培養(yǎng)將細胞和培養(yǎng)液一次性轉(zhuǎn)入生物反應器內(nèi)，培養(yǎng)過程中體積不變，不添加其他成分，待細胞增長過程中體積不變，不添加其他成分，待細胞增長(zngzhng)和產(chǎn)物形成積累到適當?shù)臅r間，一和產(chǎn)物形成積累到適當?shù)臅r間，一次性收獲細胞、產(chǎn)物、培養(yǎng)基。次性收獲細胞、產(chǎn)物、培養(yǎng)基。 將終體積將終體積1/31/2的培養(yǎng)的培養(yǎng)(piyng)液裝入反應器中，適液裝入反應器中

9、，適宜條件下接種細胞，培養(yǎng)宜條件下接種細胞，培養(yǎng)(piyng)過程中流加濃縮的過程中流加濃縮的營養(yǎng)物或培養(yǎng)營養(yǎng)物或培養(yǎng)(piyng)液，使細胞持續(xù)生長至較高密液，使細胞持續(xù)生長至較高密度、目標產(chǎn)品達到較高水平度、目標產(chǎn)品達到較高水平 在細胞增長和產(chǎn)物形成過程中，每間隔一段時間取出在細胞增長和產(chǎn)物形成過程中，每間隔一段時間取出部分培養(yǎng)物，再用新培養(yǎng)液補足到原有體積，維持反部分培養(yǎng)物，再用新培養(yǎng)液補足到原有體積，維持反應器內(nèi)總體積不變應器內(nèi)總體積不變將細胞接種于一定體積的培養(yǎng)基，細胞達最大密度將細胞接種于一定體積的培養(yǎng)基，細胞達最大密度之前，以一定速度連續(xù)添加新鮮培養(yǎng)基，同時含有之前，以一定速度連

10、續(xù)添加新鮮培養(yǎng)基，同時含有細胞的培養(yǎng)物以相同的速度連續(xù)從反應器流出，以細胞的培養(yǎng)物以相同的速度連續(xù)從反應器流出，以保持培養(yǎng)體積恒定保持培養(yǎng)體積恒定細胞和培養(yǎng)基一起加入反應器后，在細胞增長和產(chǎn)物細胞和培養(yǎng)基一起加入反應器后，在細胞增長和產(chǎn)物形成過程中，不斷將部分培養(yǎng)基取出，同時連續(xù)不斷形成過程中，不斷將部分培養(yǎng)基取出，同時連續(xù)不斷地灌注新培養(yǎng)基。取出部分培養(yǎng)基時，絕大部分細胞地灌注新培養(yǎng)基。取出部分培養(yǎng)基時，絕大部分細胞通過細胞截流裝置保留在反應器內(nèi)通過細胞截流裝置保留在反應器內(nèi) 第44頁/共57頁第四十五頁，共58頁。第45頁/共57頁第四十六頁，共58頁。 動物細胞生物反動物細胞生物反應器是

11、整個動物細胞應器是整個動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)過程的關大規(guī)模培養(yǎng)過程的關鍵設備，它為動物細鍵設備，它為動物細胞的生長代謝提供了胞的生長代謝提供了一個最優(yōu)化的環(huán)境，一個最優(yōu)化的環(huán)境，從而從而(cng r)使其在使其在生長代謝過程中產(chǎn)生生長代謝過程中產(chǎn)生出量足質(zhì)優(yōu)的所需產(chǎn)出量足質(zhì)優(yōu)的所需產(chǎn)物。物。第46頁/共57頁第四十七頁，共58頁。第47頁/共57頁第四十八頁，共58頁。第48頁/共57頁第四十九頁，共58頁。第49頁/共57頁第五十頁，共58頁。第50頁/共57頁第五十一頁，共58頁。第51頁/共57頁第五十二頁，共58頁。第52頁/共57頁第五十三頁，共58頁。第53頁/共57頁第五十四頁，共58頁。第54頁/共57頁第五十五頁，共58頁。第55頁/共57頁第五十六頁，共58頁。第56頁/共57頁第五十七頁，共58頁。NoImage內(nèi)容(nirng)總結(jié)會計學。目前，利用動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)所生產(chǎn)的生物產(chǎn)品包括酶、單克隆抗體以及多種疫苗等生物制品