江南大學(xué)微生物實驗部分試題庫及標(biāo)準答案5頁

1、江南大學(xué)微生物實驗部分試題庫及標(biāo)準答案一、名詞解釋題 1.電子顯微鏡：電子顯微鏡是利用電子波波長短,分辨力高的特點以電子流代替光學(xué)顯微鏡的光束使物體放大成象的超顯微鏡檢裝置。2.普通光學(xué)顯微鏡：用自然光或者燈光作光源鏡檢物體的顯微鏡。3.合成培養(yǎng)基：由化學(xué)成分已知的營養(yǎng)物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基。4.人工培養(yǎng)基：人工配制的供微生物生長繁殖并積累代謝產(chǎn)物的一種營養(yǎng)基質(zhì)。5.天然培養(yǎng)基：由化學(xué)成分不完全清楚的天然物質(zhì)如馬鈴薯,麩皮等配制而成的培養(yǎng)基。6.半合成培養(yǎng)基：由化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)和化學(xué)成分不完全清楚的天然物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基。7.革蘭氏染色法：革蘭氏染色是細菌的一種鑒別染色法,細菌首先用結(jié)晶

2、紫染色,再用碘液固定,然后用95%的酒精脫色,最后用蕃紅復(fù)染。凡是菌體初染的結(jié)晶紫被酒精脫去了紫色后,又被蕃紅復(fù)染成紅色的細菌稱為革蘭氏負反應(yīng)細菌；凡是菌體初染的紫色不能被酒精脫色,也不能被蕃紅復(fù)染成紅色的細菌稱為革蘭氏正反應(yīng)細菌。8.簡單染色：用單一染料使微生物細胞染上所用染料顏色的染色方法。9.稀釋平板計數(shù)法：將一定量的樣品經(jīng)十倍稀釋后,用平板培養(yǎng)最后三個稀釋度的樣品稀釋液。待菌落長出后,計數(shù)出某一稀釋度的菌落數(shù)后再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品中的含菌數(shù)。10.顯微直接計：利用血球計數(shù)板或細菌計數(shù)板在顯微鏡下測計出每小格的微生物細胞數(shù)量后,再換算出單位體積中微生物細胞總數(shù)的測數(shù)方法。二、選擇題0

3、1.革蘭氏染色的關(guān)鍵操作步驟是: A.結(jié)晶紫染色。B.碘液固定。C.酒精脫色。D.復(fù)染。 答:(C)02.放線菌印片染色的關(guān)鍵操作是: A.印片時不能移動。B.染色。C.染色后不能吸干。D.A-C。 答:(A)。03.高氏培養(yǎng)基用來培養(yǎng): A.細菌。B.霉菌。C.放線菌。D酵母菌 答:(C)。04.肉湯培養(yǎng)基用來培養(yǎng): A.酵母菌。B.霉菌。C.細菌。 D放線菌 答:(C)。05.無氮培養(yǎng)基用來培養(yǎng): A.自生固氮菌。B.硅酸鹽細菌。C.根瘤菌。D.A,B均可培養(yǎng)。 答:(D)。06.在使用顯微鏡油鏡時,為了提高分辨力,通常在鏡頭和蓋玻片之間滴加: A.二甲苯。B.水。C.香柏油。 D甲苯 答

4、:(C)。07.常用的消毒酒精濃度為: A.75%。B.50%。C.90%。 D70% 答:(A)。08.用甲醛進行空氣熏蒸消毒的用量是: A.20ml/M3 B.6ml/M3 C.1ml/M3 D 5ml/M3 答:(B)。09高壓蒸汽滅菌的工藝條件是:A.121/30min。B.115/30min。C.130/30min。 D C.160/120min。 答:(A)。10巴氏消毒的工藝條件是:A.62-63/30min B.71-72/15min C.A.B.均可 D 121/20min 答:(C)。A.要求的蓋玻片厚度。B.要求的載玻片厚度。C.鏡頭浸油的深度。D鏡頭與載玻片距離 答:(

5、A)。三、 判斷題01.無菌吸管上端塞入棉花是為了過濾口中的有菌空氣。答:(對)。02.無菌吸管上端塞入棉花的目的是為了防止菌液吸入口中。答:(錯)。03.稀釋平板測數(shù)時,放線菌計數(shù)的標(biāo)準是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個之間的稀釋度進行計數(shù)。答:(對)。04稀釋平板測數(shù)時,細菌計數(shù)的標(biāo)準是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個之間的稀釋度進行計數(shù)。答:(對)。05.稀釋平板測數(shù)時,細菌,放線菌,真菌的計數(shù)標(biāo)準是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個的稀釋度進行計數(shù)。答:(錯)。06稀釋平板測數(shù)時,真菌的計數(shù)標(biāo)準是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個的稀釋度進行計數(shù)。答:(對)。07.稀釋平板測數(shù)時,細菌、放

6、線菌、真菌的計數(shù)標(biāo)準是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個的稀釋度進行計數(shù)。答:(錯)。08.用混菌法測微生物活菌數(shù)時,每個平皿中的菌液加入量是1ml。答:(對)。09.用涂抹法測微生物活菌數(shù)時,每個平皿中的菌液加入量是0.1ml。答:(對)。10用油鏡鏡檢時應(yīng)將聚光器升至最高。答:(對)。11使用高倍鏡時,可將聚光器升至最高。答:(錯)。12.為了滿足微生物對微量元素的需要,配制培養(yǎng)基所用的水最好使用自來水。答:(對)。13.稀釋測數(shù)用的無菌水通常是由自來水滅菌而成。答:(對)。14.觀察根霉,青霉只需用低倍鏡觀察即可。答:(錯)。15.實驗室通常使用血球計數(shù)板測微生物的總菌數(shù)。答:(錯)。16

7、浸油的油鏡頭可用軟的衛(wèi)生紙擦凈。答:(錯)。17.為了節(jié)省時間,可直接在染色涂片上滴加香柏油后,直接用油鏡觀察。答:(錯)。18.使用油鏡的正確操作步驟是:1.低倍鏡觀察。2.高倍鏡觀察。3.轉(zhuǎn)出高倍鏡頭,滴加香柏油后用油鏡觀察。答:(對)。19.在擦拭顯微鏡鏡頭時,應(yīng)向一個方向擦拭。答:(對)。20.顯微鏡鏡頭的放大倍數(shù)越大,它的數(shù)值孔徑值越大,其鏡口角也越大。答:(對)。21.稀釋平板測數(shù)通常是采用十倍稀釋法。答:(對)。22.稀釋平板測數(shù)通常采用的是二倍稀釋法。答:(錯)。23.做稀釋平板測數(shù)時,只需一支吸管從頭稀釋到尾即可。答:(錯)。24.做稀釋平板測數(shù)時,每做一個稀釋度都必須更換一

8、支無菌吸管。答:(對)。25.稀釋平板測數(shù)時,無論是用混菌法,還是用涂抹法,每個平皿中的菌液加入量都是1ml。答:(錯)。26.稀釋平板測數(shù)時,無論是用混菌法,還是用涂抹法,每個平皿中的菌液加入量都是0.1ml。答:(錯)。27.實驗室做固體培養(yǎng)基時,常加1.8%的瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時,瓊脂加入量通常是0.5%。答:(對)。28.實驗室做固體培養(yǎng)基,常加2%的瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時,瓊脂加入量通常是1%。答:(錯)。 四、 填空題07.有莢膜的細菌用負染色法染色后,莢膜為無色,菌體為_紅色.08.細菌經(jīng)革蘭氏染色后,革蘭氏正反應(yīng)菌呈_紫色,革蘭氏負反應(yīng)菌呈_紅色。09.細菌經(jīng)

9、簡單染色后呈_所染染料的顏色_。10.顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)由_反光鏡,聚光鏡,物鏡,_和目鏡組成。11顯微鏡的機械部分包括_鏡座,鏡臂,載物臺,轉(zhuǎn)換器,鏡筒,推動器,粗動螺旋,微動螺旋聚光鏡升降螺旋。等九部分組成。12.高氏培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)_放線菌,其pH值為_7.5-8.0_。13.PA培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)真菌_菌,其pH值為5-6_。14.牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)_細菌,其pH值為_、7.0-7.2_。15.無氮培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)自生固氮菌。其氮源來自_空氣中的N2_。16.干熱滅菌的工藝條件是160-170/2h_。17.使用顯微鏡低倍鏡觀察時,聚光器應(yīng)該降低,使用顯微鏡高倍鏡觀察時

10、,聚光器應(yīng)該適當(dāng)升高。18.革蘭氏染色的關(guān)鍵操作是酒精脫色_。19.顯微鏡的倍數(shù)越大,焦深越小,調(diào)焦應(yīng)該越小心_。20.按培養(yǎng)基的形態(tài),可將培養(yǎng)基分為液體_,固體_,半固體_三種類型。21.配制常規(guī)培養(yǎng)基時通常用_自來_水。五、簡答題1）簡述配制培養(yǎng)基的基本原則培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖,或用于積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。所以配制培養(yǎng)基時應(yīng)注意以下原則:1、根據(jù)微生物的不同選用不同的培養(yǎng)基,以滿足微生物對營養(yǎng)物的需要。如自養(yǎng)型微生物所要求營養(yǎng)較簡單,而異養(yǎng)型微生物營養(yǎng)要求較復(fù)雜。培養(yǎng)細菌,放線菌,真菌等各有不同的培養(yǎng)基。2、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比。微生物生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì)往往

11、在適當(dāng)時才生長良好。濃度大往往會抑制微生物的生長。如糖類,各種重金屬鹽類如果濃度太高,也會影響微生物的生長。同時各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度比也應(yīng)注意,特別是C/N比。3、注意將培養(yǎng)基的pH值控制在一定范圍內(nèi)。為了防止因微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物后影響培養(yǎng)基pH值,常在其中加入磷酸鹽,碳酸鹽,以維持培養(yǎng)基pH值的相對恒定。4、同時還應(yīng)考慮培養(yǎng)基的氧化還原電位及原材料的經(jīng)濟、易購和來源廣泛的原則。2）試述配制培養(yǎng)基的基本過程及應(yīng)該注意的問題。配制培養(yǎng)基的基本過程是:1.按培養(yǎng)基的配方稱取各種藥品,用量太少的藥品應(yīng)配制成溶液后再取一定量加入。2.將各種藥品加水溶解,通常是加所需水量的一半。3.若配固體培養(yǎng)

12、基,按2%的用量稱取瓊脂,用水將瓊脂浸濕一下,用手擠去瓊脂中過多的水分,加入2的溶液中。4.加熱至瓊脂全部溶解,并補足所需的全部水量。5.用1molNaOH和1molHCL調(diào)節(jié)pH至要求值。6.用分裝器將培養(yǎng)基分裝入試管或三角瓶中,塞上棉塞并包扎,滅菌后備用。注意事項:1.配制過程中,在加熱熔化瓊脂時,要不斷攪拌,以防糊底。2.分裝時不要讓培養(yǎng)基沾染試管口或瓶口,以防培養(yǎng)過程中容易污染雜菌。 3）如何從土壤中分離得到一個微生物的純培養(yǎng)體?首先要根據(jù)分離對象選擇適宜的培養(yǎng)基。若要分離真菌應(yīng)選用馬丁-孟加拉紅選擇培養(yǎng)基；若要分離細菌應(yīng)選用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基；若要分離放線菌應(yīng)選用高氏培養(yǎng)基。土樣采回

13、來后,用常規(guī)的十倍稀釋分離法進行稀釋分離,若分離細菌,一般稀至10-8,若分離放線菌,一般稀至10-6；若分離真菌,一般稀至10-4。取最后三個稀釋度倒平板獲得單個菌落。將平板上出現(xiàn)的單菌落轉(zhuǎn)接斜面培養(yǎng),同時鏡檢菌體的純度,若不純,應(yīng)將培養(yǎng)的單菌落斜面再次進行稀釋分離。倒平板獲得單菌落,轉(zhuǎn)接斜面培養(yǎng),同時鏡檢菌體的純度。反復(fù)幾次直到得到菌體單一的單菌落方可認為是某一微生物的純培養(yǎng)體。4）簡述采用多管發(fā)酵法測定自來水大腸桿菌群的方法。采用多管發(fā)酵法測定自來水大腸桿菌群培養(yǎng)基：乳糖蛋白胨發(fā)酵管（內(nèi)有倒置小套管），三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管（瓶）（內(nèi)有倒置小套管），伊紅美藍瓊脂平板，滅菌水 儀器或其他

14、用具：載玻片，滅菌的帶玻璃塞空瓶，滅菌培養(yǎng)皿，滅菌吸管，滅菌試管等。 （一）自來水水樣的采集：先將自來水龍頭用火焰燒灼3min滅菌，再開放水龍頭使水流5min后，以滅菌三角燒瓶接取水樣，以待分析。 （二）檢查方法： 1.初(步)發(fā)酵試驗 在2個含有50ml三倍濃縮的乳糖蛋白胨發(fā)酵燒瓶中，各加入100m1水樣。在10支含有5m1三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，各加入10 m1水樣?；靹蚝?，37培養(yǎng)24h，24h未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng)至48h。 2.平板分離 經(jīng)24h培養(yǎng)后，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及48h產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管(瓶)，分別劃線接種于伊紅美藍瓊脂平板上，再于37下培養(yǎng)1824h，將符合下列特征的菌落的一小部分，

15、進行涂片，革蘭氏染色，鏡檢。深紫黑色、有金屬光澤；紫黑色、不帶或略帶金屬光澤；淡紫紅色、中心顏色較深。 3.復(fù)發(fā)酵試驗 經(jīng)涂片、染色、鏡檢后，如為革蘭氏陰性無芽胞桿菌，則挑取該菌落的另一部分,重新接種于普通濃度的乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，每管可接種來自同一初發(fā)酵管的同類型菌落1-3個,37培養(yǎng)24h，結(jié)果若產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，即證實有大腸菌群存在。5）高壓滅菌之前，為什么要排盡鍋內(nèi)冷空氣？如何檢查滅過菌的培養(yǎng)基是無菌的？答：因為如果不排盡冷空氣，在進行高壓滅菌時，壓力表顯示的壓力和溫度實際上低于鍋內(nèi)的真實溫度，達不到滅菌效果。將滅過菌的培養(yǎng)基置于培養(yǎng)箱中適當(dāng)?shù)臏囟扰囵B(yǎng)一段時間，如果滅過菌的培養(yǎng)基中無菌落出現(xiàn)，可以確定培養(yǎng)基是無菌的。6）高壓蒸汽滅菌鍋的使用流程和注意事項？答：1首先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。 2放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。 3加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個