果蔬有機(jī)酸含量測(cè)定

1、果蔬有機(jī)酸含量的測(cè)定植物材料中含有豐富的有機(jī)酸，如蘋果酸、檸檬酸、琥珀酸、酒石酸、草酸等。利用酸 堿滴定法測(cè)定果蔬中的可滴定酸含量，可以從風(fēng)味及營養(yǎng)的角度衡量其品質(zhì)。重點(diǎn)：堿式滴定管的調(diào)零、體積讀數(shù)，容量瓶、移液管的正確使用；鄰苯二甲酸氫 鉀及有機(jī)酸樣品的正確稱?。ú顪p法）；有效數(shù)字的取舍及確定。難點(diǎn)：滴定終點(diǎn)的判斷及掌握。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)強(qiáng)堿滴定弱酸的基本原理及指示劑的選擇。2. 掌握NaOH的配制和標(biāo)定方法以及基準(zhǔn)物質(zhì)的選擇。二、實(shí)驗(yàn)原理1. 大多數(shù)有機(jī)酸是弱酸，如果某有機(jī)酸易溶于水，解離常數(shù)Ka>>10-7，用標(biāo)準(zhǔn)堿溶液可直接測(cè)其含量，反應(yīng)產(chǎn)物為強(qiáng)堿弱酸鹽。 滴定突躍范

2、圍在弱堿性內(nèi)，可選用酚酞指示劑，滴 定溶液由無色變?yōu)槲⒓t色即為終點(diǎn)。2. NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液是采用間接配制法配制的，因此必須用基準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定其準(zhǔn)確濃度。鄰苯二甲酸氫鉀（KHC 8H4O4），它易制得純品，在空氣中不吸水，容易保存，摩爾質(zhì)量較大， 是一種較好的基準(zhǔn)物質(zhì)，標(biāo)定反應(yīng)如下：cook+ NaOHCOOKCOONa+ H20反應(yīng)產(chǎn)物為二元弱堿， 在水溶液中顯微堿性， 可選用酚酞作指示劑。鄰苯二甲酸氫鉀通常在105-110 C下干燥2h后備用，干燥溫度過高，則脫水成為鄰苯二甲酸酐。3. 在一定溫度下，用蒸餾水或乙醇將植物材料中的有機(jī)酸浸提出來，用堿溶液滴定浸 出液，即可計(jì)算出樣品的可滴定酸含量。

3、果實(shí)中的有機(jī)酸含量如柑橘類可換算成檸檬酸、葡萄可換算成酒石酸，蘋果類可換算成蘋果酸表示。二、儀器設(shè)備1. 天平 2. 250 mL三角瓶 3.勻漿機(jī)（或研缽）4.恒溫水浴鍋5低速離心機(jī)（或漏斗）6. 50mL離心管（或定性濾紙）7.堿式滴定管8. 100 mL容量瓶 9.25mL移液管三、試劑1. 0.05 mol _ “NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液：在天平上取約 0.5g固體NaOH （可用干燥小燒杯稱?。?另用大量筒量取250mL去離子水（無CO?）,倒少量水入裝有 NaOH固體的小燒杯中，攪拌 使NaOH溶解后將其倒入試劑瓶中；再將大量筒中剩余的水倒入試劑瓶中，混勻。以鄰苯二甲酸氫鉀 （分析純）標(biāo)

4、定其濃度：用萬分之一的天平稱取干燥過的鄰苯二甲酸 氫鉀0.1250 g 0.1500 g 3份，分別置250 mL三角瓶中，用80 mL無CO2水溶解，加酚酞 指示劑23滴，用所配NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色 （大約15mL左右）。依下式計(jì)算NaOH 的準(zhǔn)確濃度，求3份樣品的平均值，結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后4位。WM =M V*0.2043式中 M NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol - L -）;W鄰苯二甲酸氫鉀的重量（g）;V 滴定時(shí)所消耗 NaOH溶液的體積（mL）;0.2043 每毫摩爾鄰苯二甲酸氫鉀的重量（ g）。2. 1%酚酞指示劑：稱取 1 g酚酞，溶解于100 m L 70%90%乙醇中

5、。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1. 將新鮮組織用勻漿機(jī)勻漿，稱取勻漿5g于50mL離心管中，將35mL左右蒸餾水加入50mL離心管，于80C恒溫水浴中浸提 30 min，其間不斷搖勻?；蚍Q取新鮮組織5g,至于研缽中迅速研成糊狀，用50mL蒸餾水洗入250mL三角瓶中，加適量蒸餾水，于 80C恒溫水浴中浸提 30 min，其間不斷攪拌。2. 冷卻后6000 r min -離心1015 min，上清液用蒸餾水定容到 100 mL （如材料為勻漿處理，且溶液色澤不影響滴定終點(diǎn)判斷，亦可不離心冷卻后直接定容到100 mL ）?；蜻^濾，殘?jiān)?015 mL蒸餾水沖洗23次，合并濾液，定容至 100mL。3. 取試液3份

6、，每份25 mL，分別置250 mL三角瓶中，各滴入酚酞指示劑 23滴。用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈微紅色，30秒不褪色，即為終點(diǎn)。記錄NaOH的用量。4. 結(jié)果計(jì)算一亠 V1*V*N*K*a 總酸度= V2*W *100%式中 V1 樣品提取液總體積（mL）;V2滴定時(shí)所取濾液體積（mL）;V 滴定時(shí)所消耗NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（mL ）; N NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol L ）；K 將總酸換算為特定有機(jī)酸的系數(shù)：蘋果酸0.067、檸檬酸0.064、酒石酸 0.075、乳酸 0.090、草酸 0.045a 樣品滴定前的稀釋倍數(shù)；W樣品鮮重（g）五、數(shù)據(jù)記錄表格結(jié)果計(jì)算： 三 平均值宀”亠宀消耗NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（mL）NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定樣品總酸度測(cè)定六、注意事項(xiàng)1. 如樣品中有機(jī)酸含量過高，應(yīng)在滴定前適當(dāng)稀釋，計(jì)算時(shí)將稀釋倍數(shù)帶入公式。2. 如果試液顏色較深，影響滴定終點(diǎn)的觀察，應(yīng)采用電位滴定法。3. 一般果蔬中含酸量較少，利用 0.1mol/L NaOH溶液進(jìn)行滴定時(shí)，NaOH所消耗的體積較少，容易引起誤差。實(shí)操中，可以將NaOH適當(dāng)稀釋后使用。例如用 0.05mol/L 甚至0.01mol/L的NaOH溶液進(jìn)行滴定。七、作業(yè)與思考1. 園藝產(chǎn)品中的主要有機(jī)酸有哪些？計(jì)算時(shí)如何選擇折算系數(shù)？