Heidenhain鐵蘇木素染色液(共3頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上 北京吉美生物技術(shù)有限公司Heidenhain鐵蘇木素染色液產(chǎn)品簡介：蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱HE染色，是病理學和組織學最常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。Heidenhain鐵蘇木素染色液以硫酸鐵銨作為氧化劑和分化劑，根據(jù)不同的分化程度可顯示不同的結(jié)構(gòu)。染色后所有成分均為黑色或深灰黑色，不同組織結(jié)構(gòu)的蘇木素著色可被Heid

2、enhain分化液以不同的速度進行褪去，黑色褪去順序依次為：線粒體、橫紋肌、核染色質(zhì)。染色原理1、 細胞核染色的原理：蘇木素為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。2、 細胞漿染色的原理：伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，細胞漿的染色與染液的pH值密切相關(guān)。當染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點（4.75.0）以下時，

3、胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合，使細胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。3、 分化作用：染色后，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進行伊紅染色，才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。4、 返藍作用：分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性

4、條件下處于藍色離子狀態(tài)，呈藍色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色，這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來不浸洗也可使細胞核返藍，但所需時間較長。產(chǎn)品組成： 編號名稱JD32213×100mlstorage試劑（A）：Heidenhain Differentiation2×100mlRT避光試劑（B）：Heidenhain鐵蘇木素染色液100mlRT避光使用說明書1份 操作步驟（僅供參考） 1、切片脫蠟至水 二甲苯作用2次，每次510min。（可選）無水乙醇作用2次，每次35 min。9

5、5%的乙醇35 min。90%的乙醇35 min。80%的乙醇35 min。自來水或蒸餾水沖洗13min。 2、染色Heidenhain Differentiation媒染1h（見注意事項1）。蒸餾水沖洗510s（見注意事項1）。Heidenhain 鐵蘇木素染色液染色1h。自來水沖洗2030 s。Heidenhain Differentiation分化或用蒸餾水1：1稀釋Heidenhain Differentiation分化，并與自來水沖洗交替進行，顯微鏡下觀察分化程度。（見注意事項2）自來水沖洗10 min。 3、脫水、透明、封固 80%乙醇1020 s。90%乙醇1020 s。95%乙

6、醇作用2次，每次12min。無水乙醇作用2次，每次23 min。二甲苯透明3次，每次23 min。中性樹脂封片。染色結(jié)果：線粒體、橫紋肌、髓磷脂、染色質(zhì)等呈灰黑色。注意事項：1、 切片脫蠟應盡量干凈。2、 系列乙醇應經(jīng)常更換新液。3、 冷凍切片染色時間盡量要短。4、 藍化液常使用0.21%氨水或Scott促藍液或0.11%碳酸埋溶液。5、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。有效期：24個月有效。相關(guān)產(chǎn)品：產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱JC2007磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無鈣鎂)JC2145ACK紅細胞裂解液(ACK Lysis Buffer)JD3016Masson三色染色液JD3134多聚甲醛溶液(4% PFA)JD3207蘇木素