試驗(yàn)六淀粉含量測(cè)定

1、實(shí)驗(yàn)六 （紅薯 / 馬玲薯 / 黃地瓜等淀粉塊莖類植物）中淀粉含量測(cè)定（酸水解法）綜合設(shè)計(jì)（4 學(xué)時(shí)）一、實(shí)驗(yàn)原理1 、淀粉提取，也稱為漿渣分離或分離，是淀粉加工中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，直接影響到淀粉提取率和淀粉質(zhì)量。粉碎后的物料是細(xì)小的纖維，體積大于淀粉顆粒，膨脹系數(shù)也大于淀粉顆粒，比重又輕于淀粉顆粒 , 將粉碎后的物料，以水為介質(zhì)，使淀粉和纖維分離開來(lái)。2、淀粉是食品中主要的組成部分，也是植物種子中重要的貯藏性多糖。淀粉跟稀硫酸在加熱的條件下能夠完全水解成葡萄糖、麥芽糖等還原糖。還原糖的測(cè)定是糖定量測(cè)定的基本方法。還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸及其他產(chǎn)物，3， 5-二硝基水楊酸則被還原成棕紅色的3-

2、氨基-5 硝基水楊酸。在一定范圍內(nèi)， 還原糖的量與棕紅色物質(zhì)的深淺成正比關(guān)系，利用分光光度計(jì)，在 540nm 波長(zhǎng)下測(cè)定光密度值，查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。由于淀粉完全水解成還原糖的量是成正比的，所以，也與棕紅色物質(zhì)的深淺成正比關(guān)系。二、材料、儀器與試劑（一）材料：五指山紅薯。（二）儀器：分光光度計(jì)722、小臺(tái)秤、分析天平、燒杯（100mL） 、研缽、容量瓶（100mL） 、洗瓶、漏斗、濾紙、具塞刻度試管（15mL） 、恒溫水浴、移液管（1mL, 2mL ） 。（三）試劑1 2mol/L NaOH 溶液準(zhǔn)確稱取4g NaOH 固體，溶于15 mL 蒸餾水中，并倒入50ml 容量瓶中，用蒸餾水分幾次清洗燒杯

3、并將清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度線。2 3， 5-二硝基水楊酸試劑準(zhǔn)確稱取3, 5-二硝基水楊酸1g,溶于2mol/L NaOH 溶液20mL,加入50mL蒸儲(chǔ)水，再加入 30g酒 石酸鉀鈉，待溶解后用蒸餾水定容至100mL 。蓋緊瓶塞，勿讓CO2 進(jìn)入。若溶液渾濁，可過(guò)濾后使用。3 0.1mol/L 檸檬酸緩沖液（pH5.6）A液（0.1mol/L檸檬酸）：稱取C6H8O7 ?H2O 21.01g ,用蒸儲(chǔ)水溶解并定容至 1000mL。B液（0.1mol/L檸檬酸鈉）：稱取Na3c6H5O7 ?2H20 29.41g,用蒸儲(chǔ)水溶解并定容至 1000mLA 液 110 mL 與

4、B 液 290 mL 混勻，即為0.1mol/L 檸檬酸緩沖液（pH5.6） 。4 1mg/mL 淀粉溶液稱取 0.1g 淀粉溶于0.1mol/L 檸檬酸緩沖液（pH5.6）100 mL 中。5 20%硫酸用 50mL 的量筒量取50mL 的水， 倒入 100mL 燒杯中； 再用 20mL 的量筒量取12.6mL98% 的濃硫酸，沿內(nèi)壁緩緩倒入燒杯內(nèi)的水中，邊倒邊用玻璃棒攪拌。等冷至室溫后，倒入100ml 容量瓶中，用蒸餾水分幾次清洗燒杯并將清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度線。三、操作步驟a） 淀粉的制備1 .操作步驟取一定量馬鈴薯洗滌 一磨碎一加水紗布過(guò)濾（濾渣繼續(xù)粉碎加水過(guò)濾）一

5、濾液白布過(guò)濾靜置一倒掉上層液體一加水?dāng)嚢桁o置一布氏漏斗抽濾一烘干2 .操作要點(diǎn)：1）洗滌：對(duì)生產(chǎn)淀粉的原料進(jìn)行清洗，是保證淀粉質(zhì)量的基礎(chǔ)，清洗的越干凈，淀粉的質(zhì)量就越好。2）磨碎：經(jīng)過(guò)洗滌后，送至磨碎機(jī)處理。磨碎的目的就是破壞物料的組織結(jié)構(gòu)，使微小的淀粉顆粒能夠順利地從塊根中解體分離出來(lái)。盡可能的使物料的細(xì)胞破裂，釋放出更多的游離淀粉顆粒。3）篩分：經(jīng)過(guò)磨碎后的馬鈴薯糊用紗布過(guò)濾篩分，在過(guò)濾過(guò)程中要加水洗滌，濾液為淀粉乳，濾渣再進(jìn)彳T 2次粉碎過(guò)濾。4）過(guò)濾后的淀粉乳放在水桶中靜置數(shù)小時(shí)，倒掉上層液體，加水?dāng)嚢枥^續(xù)靜置數(shù)小時(shí)。5）脫水干燥：淀粉清洗后，含水分很高，必須脫水，用布氏漏斗抽濾得到含

6、水分為45%的濕淀粉，把濕淀粉放入60c烘箱烘干即得淀粉成品。3 .淀粉得率計(jì)算稱量干燥獲得的淀粉重量，按照以下公式計(jì)算得率。淀粉得率=成品淀粉重量馬鈴薯重量b）淀粉含量的測(cè)定（一） 樣品淀粉溶液的制備準(zhǔn)確稱取0.1g樣品，溶于于100ml的容量瓶中，即配成 1mg/ml樣品淀粉溶液，并在相應(yīng)的容量瓶 上貼上標(biāo)簽。（二）淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取7支潔凈的具塞比色管，編號(hào)，按表 1內(nèi)容進(jìn)行操作：表1淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線制作操作項(xiàng)目操作項(xiàng)目12345671mg/mL標(biāo)準(zhǔn)淀粉溶液/mL01.01.41.82.22.63.020陶酸/mL2.02.02.02.02.02.02.0蒸儲(chǔ)水/mL4.03.02.62.

7、21.81.41混勻，置于80c水中水浴反應(yīng) 34min,冷卻一段時(shí)間后2mol/LNaOH 溶液 /mL1.0+21.01.01.01.01.01.03,5-二硝基水楊酸/mL4.04.04.04.04.04.04.0混勻，置沸水浴煮沸 5min,取出，冷至室溫后，以 1號(hào)為參比溶液，各試管淀粉含量/mg01.01.41.82.22.63.0A540將測(cè)定結(jié)果記錄于表 1中，以淀粉含量（mg）為橫坐標(biāo)，吸光度 A540為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（三）樣品淀粉的測(cè)定取6支潔凈的具塞比色管，編號(hào)，按表2內(nèi)容進(jìn)行操作。顯色反應(yīng)后，以0為參比溶液，于 540nm處測(cè)定吸光度 A540,將測(cè)定結(jié)果記錄于

8、表 2中。操作項(xiàng)目操作項(xiàng)目0樣品1mg/mL標(biāo)準(zhǔn)淀粉溶液/mL0220陶酸/mL2.02.0蒸儲(chǔ)水/mL4.02.0混勻，置于80c水中水浴反應(yīng) 34min,冷卻一段時(shí)間后2mol/LNaOH 溶液 /mL1+21+23,5-二硝基水楊酸/mL4.04.0混勻，置于沸水中水浴反應(yīng)5min,取出，冷至室溫后，以 0號(hào)為參比溶液，于540nm處測(cè)定各試管吸光度A540根據(jù)測(cè)定的吸光度A540,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的淀粉含量（m。，按下列公式計(jì)算各種制備馬鈴薯淀粉的含量：制備馬鈴薯淀粉的含量=淀粉含量（mg /制備馬鈴薯淀粉（m。x 100%注意事項(xiàng)1 由于本實(shí)驗(yàn)是以酸作催化劑水解淀粉的，其水解的主要特點(diǎn)是非專一性，因此為了獲得較高純度的淀粉溶液，應(yīng)盡量減少糖化時(shí)雜質(zhì)的生成, 因此選用的大米外觀要無(wú)結(jié)塊，無(wú)霉變，無(wú)異味2 大米所含雜質(zhì)越少越好，尤其應(yīng)盡量設(shè)法除去水溶性雜質(zhì)。3 在稱取樣品時(shí)要準(zhǔn)確稱量，以免造成實(shí)驗(yàn)誤差。4 水解了淀粉后，要加入碳酸鈉與試管內(nèi)，中和硫酸，否則會(huì)影響3， 5- 二硝基水楊酸與還原糖的反應(yīng)。5 由于本實(shí)驗(yàn)要用到濃硫酸配制成20%的硫酸，不論是98%的