發(fā)酵工藝優(yōu)化

1、發(fā)酵工藝優(yōu)化發(fā)酵工藝優(yōu)化從搖瓶試驗(yàn)到中試發(fā)酵罐試驗(yàn)的不同之處1、 消毒方式不同，搖瓶是外流蒸汽靜態(tài)加熱 (大部分是這樣的)，發(fā)酵罐是直接蒸汽動(dòng)態(tài)加熱，部分的是直接和蒸汽混合，會(huì)因此影響發(fā)酵培養(yǎng)基的質(zhì)量，體積，PH,透光率等指標(biāo)。擴(kuò)大時(shí)搖考慮2、接種方式不同，搖瓶是吸管加入，發(fā)酵罐是火焰直接接種(當(dāng)然有其他的接種方式)，要考 慮接種時(shí)的菌株損失和菌種的適應(yīng)性等。3、空氣的通氣方式不同，搖瓶是表面直接接觸。發(fā)酵罐是和空氣混合接觸，考慮二氧化碳的濃 度和氧氣的融解情況。4、蒸發(fā)量不同，搖瓶的蒸發(fā)量不好控制，濕度控制好的話，蒸發(fā)量會(huì)少。發(fā)酵罐蒸發(fā)量大，但 是可以通過(guò)補(bǔ)料解決的。5、攪拌方式不同，搖瓶是

2、搖轉(zhuǎn)方式進(jìn)行混合攪拌，對(duì)菌株的剪切力較小。發(fā)酵罐是直接機(jī)械攪 拌，注意剪切力的影響和無(wú)菌的影響。6、 PH 的控制，搖瓶一般通過(guò)碳酸鈣和間斷補(bǔ)料控制PH ,發(fā)酵可以直接流加控制 PH,比較方 便。7、 溫度控制，搖瓶是空氣直接接觸或者傳熱控制溫度，但是發(fā)酵罐是蛇罐或者夾套水降溫控制， 注意降溫和加熱的影響。8、注意染菌的控制方法不一樣，發(fā)酵罐根據(jù)染菌的周期和染菌的類型等可以采取一些必要的措 施減少損失。9、發(fā)酵罐可以取樣或者儀表時(shí)時(shí)檢測(cè)，但是搖瓶因?yàn)榱啃〔荒芊奖愕倪M(jìn)行控制和檢測(cè)。10、原材料不一樣，發(fā)酵所用原材料比較廉價(jià)而且粗曠，工藝控制和搖瓶區(qū)別很大等等 發(fā)酵工藝中補(bǔ)料的作用補(bǔ)料分批培養(yǎng)(f

3、ed batch culture 簡(jiǎn)稱 FBC)是指在分批培養(yǎng)過(guò)程中、 間歇或連續(xù)地補(bǔ)加一種或 多種成分的新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法、與傳統(tǒng)的分批集中補(bǔ)料培養(yǎng)相比、它有以下優(yōu)點(diǎn)：(1)可以避免在分批發(fā)酵中因 一次投料過(guò)多造成發(fā)酵液環(huán)境突變，造成菌絲大量生長(zhǎng)等問(wèn)題，改 善發(fā)酵液流變等性質(zhì)，使得發(fā)酵過(guò)程泡沫得以控制，節(jié)省消泡劑，并提高了裝罐系數(shù)?？梢钥刂萍?xì)胞質(zhì)量，以提高芽抱的比例，并使pH 得以穩(wěn)定。(3) 可以解除底物抑制，產(chǎn)物反饋抑制和分解阻遏。(4) 可以使 放料和補(bǔ)料”方法得以實(shí)施。該方法在發(fā)酵后期、產(chǎn)生了一定數(shù)量代謝產(chǎn)物后，在發(fā)酵液體積測(cè)量監(jiān)控下， 放出一部分發(fā)酵液， 同時(shí)連續(xù)補(bǔ)充 一一部分新

4、鮮營(yíng)養(yǎng)液，實(shí)現(xiàn)連續(xù)帶放、 既有利于提高產(chǎn)物產(chǎn)量.又可降低成本，使得發(fā)酵指數(shù)得以大幅度提高。(5) 利用 FBC 技術(shù)、 可以使菌種保持最大的生產(chǎn)力狀態(tài).隨著傳感技術(shù)以及對(duì)發(fā)酵過(guò)程動(dòng)力學(xué) 理淪深入研究、用模擬復(fù)雜的數(shù)學(xué)模型使在線方式實(shí)最優(yōu)控制成為可能。連續(xù)補(bǔ)料控制目前采用有反饋控制和無(wú)反饋控制兩種方式。有反饋控制：選擇與過(guò)程直接關(guān)系的可檢測(cè)參數(shù)作為控制指標(biāo)，例如可以測(cè)量、控制發(fā)酵液 PH、采用定量控制葡萄糖流加。穩(wěn)定PH 在次級(jí)代謝最旺盛水平。而無(wú)反饋控制FBC 是指無(wú)固定的反饋參數(shù)，以經(jīng)驗(yàn)和數(shù)學(xué)模型相結(jié)合的辦法來(lái)操作最優(yōu)化控制、從而使抗生素發(fā)酵產(chǎn)量得以大幅度提高。例如發(fā)酵過(guò)程中前體 的補(bǔ)加。由

5、此可見，要實(shí)現(xiàn)對(duì)發(fā)酵過(guò)程的有效控制，就先要解決補(bǔ)科的連續(xù)控制問(wèn)題。目前國(guó)外發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程連續(xù)補(bǔ)料采用：流量計(jì)(電磁流量計(jì)、液體質(zhì)量流量計(jì) )、小型電動(dòng)、氣動(dòng)隔膜調(diào)節(jié)閥和控制器來(lái)實(shí)現(xiàn)連續(xù)補(bǔ)料控制。菜發(fā)酵工廠在中試試驗(yàn)中還成功地運(yùn)用了電子稱 加三閥控制的自動(dòng)補(bǔ)科系統(tǒng)至于裝液量的問(wèn)題，應(yīng)該從以下幾個(gè)方面考慮：1、保持在你所需要的轉(zhuǎn)速培養(yǎng)情況下（尤其是在后期，菌絲很多時(shí)，轉(zhuǎn)速很高時(shí)），不能讓發(fā)酵液把你的塞子濕掉，容易造成染菌。2、裝液量的體積在消毒過(guò)程中，不能因?yàn)榉序v把塞子濕掉，或者跑出三角瓶，裝液量太多會(huì)出現(xiàn)這樣的情況。很容易染菌。3、根據(jù)你的菌種的情況和發(fā)酵液的粘度，需要的混勻程度等等方面也要考慮。

6、4、建議你做一個(gè)梯度試驗(yàn)（40 50 60 70 80 等）就可以找到你所需要的裝液量。關(guān)于剩余空氣的排除在滅菌完畢后（100 度左右），立刻用蓋子或者其他的用品把你的培養(yǎng)搖瓶蓋好，有時(shí)候這么點(diǎn)空氣根本對(duì)兼性厭氧發(fā)酵沒有什么影響，如果你的菌種要求很嚴(yán)的話，最好用干冰加入已經(jīng)滅菌的空搖瓶后，立刻用其他的樣品培養(yǎng)基分裝即可。當(dāng)然也可以用氮?dú)?。最好是二氧化碳。你可以再查查看是否有其他的方法，我說(shuō)的也不完全。！ ！ 消毒（滅菌）工藝的優(yōu)化1、消毒又叫滅菌，但是又很多的區(qū)別在里面（可以上網(wǎng)搜索資料參考，很多的），我們?cè)诠?一般把它稱為消毒。消毒其實(shí)又很多的學(xué)問(wèn)在里面，一個(gè)好的消毒工可以達(dá)到一年內(nèi)千分之

7、一 的染菌率，非常的厲害！ ！2、 發(fā)酵液經(jīng)過(guò)消毒會(huì)遭到很大的破壞，所以首先需要控制消毒前的PH ,而后控制消毒時(shí)的溫度和時(shí)間（非常重要，有時(shí)候?qū)Πl(fā)酵指標(biāo)又很大的影響），在VB12 發(fā)酵中，消毒的質(zhì)量可以直接影響發(fā)酵的水平，從消后的指標(biāo)就幾乎能得出放罐時(shí)的指標(biāo)。所以必須控制消毒的溫度和時(shí)間。3、消毒的方式的不同對(duì)發(fā)酵影響也很大，公司一般分實(shí)消（間斷消毒）和連消兩種，連消的發(fā) 酵液質(zhì)量較好，但是對(duì)設(shè)備儀器要求恨嚴(yán)格。實(shí)消操作簡(jiǎn)單，但是控制也不容易，對(duì)發(fā)酵噎破 壞較大，因?yàn)樗纳禍貢r(shí)間很長(zhǎng)。對(duì)設(shè)備破壞較大，（震動(dòng)和蛇罐等）。4、現(xiàn)在出現(xiàn)一種是螺旋板換熱器連續(xù)消毒，很方便也很經(jīng)濟(jì)。它的原理和連消格

8、相似，只是它 靠板式換熱，不和蒸汽直接接觸，而且它的消毒蒸汽冷凝水可以回流到原培養(yǎng)基進(jìn)口處加熱培 養(yǎng)基，可以節(jié)約成本。而且可以控制培養(yǎng)基的體積。但是對(duì)設(shè)備的要求很嚴(yán)格（為了保證無(wú)菌 要求），很少的設(shè)備公司能夠做好這樣的設(shè)備。5、 發(fā)酵的補(bǔ)料消毒可以通過(guò)調(diào)節(jié)好PH 的幾種料一起進(jìn)行消毒，節(jié)約成本，如果部分的發(fā)酵中 對(duì)幾種物料的利用安比例進(jìn)行，而且這些物料不發(fā)生任何反映，這樣消毒既可以調(diào)節(jié)濃度控制蒸發(fā)量，又可以節(jié)約能源，一舉兩得。6、部分得補(bǔ)料可以加入某種不容物質(zhì)，消毒后再分開。保證設(shè)備的干凈和無(wú)菌等，例如油里面 可以加入其他的易溶于水的物質(zhì)等，消毒后分水時(shí)可以把它分開。7、消毒在保證無(wú)菌的前體下

9、，還要考慮經(jīng)濟(jì)、對(duì)培養(yǎng)基破壞情況、操作方便（節(jié)省維修時(shí)間人 員等）、工藝改進(jìn)等等。剪切力的計(jì)算可以參考（發(fā)酵設(shè)備），一般的說(shuō)剪切力一般以攪拌葉的線速度測(cè)量，如果沒有搖瓶沒有攪拌可以參考搖瓶中最大的線速度，計(jì)算公式為：轉(zhuǎn)速*3.14*搖瓶中最大的半徑的平方。不過(guò)我覺得影響你發(fā)酵可能是胞外次級(jí)代謝物或者其他的物質(zhì)。搖瓶中的剪切力對(duì)菌種的影響很小，不過(guò)你的菌種我不是很熟悉，不過(guò)憑我的經(jīng)驗(yàn)我覺得他不是主要的因素。我考慮的 可能是氧氣對(duì)你的影響較大，可能你攪拌時(shí)破壞了菌種的生長(zhǎng)環(huán)境，導(dǎo)致他的代謝途徑改變，產(chǎn)生了其他的物質(zhì)（可能是有害物質(zhì)）導(dǎo)致了菌種的生長(zhǎng)環(huán)境改變影響了它的代謝。還有一點(diǎn)是：你的培養(yǎng)基條件

10、不是很適合菌種的生長(zhǎng)，菌種在前期創(chuàng)造了自己生長(zhǎng)條件，結(jié)果 攪拌遭到破壞所以沒有長(zhǎng)好。淺談在發(fā)酵工藝優(yōu)化中統(tǒng)計(jì)手段的重要性。1. 協(xié)同效應(yīng)與關(guān)鍵因素：優(yōu)化發(fā)酵工藝實(shí)質(zhì)是考察各個(gè)變量對(duì)優(yōu)化目標(biāo)的效應(yīng)以獲得各因素（變量）對(duì)目標(biāo)值的影響關(guān)系，進(jìn)而以此為基礎(chǔ)確定最優(yōu)操作條件。同其他學(xué)科一樣，在發(fā)酵 優(yōu)化時(shí)如果能建立各因素對(duì)目標(biāo)的數(shù)學(xué)表達(dá)函數(shù)是最為理想的。但由于發(fā)酵中微生物性質(zhì)的復(fù) 雜性（微生物內(nèi)部的代謝機(jī)理，調(diào)控機(jī)制等）及發(fā)酵環(huán)境多樣的傳遞特性（熱，質(zhì)量、動(dòng)量）， 使得要建立一個(gè)準(zhǔn)確的機(jī)理模型十分困難。因此目前常見的發(fā)酵模型多為黑箱模型，即擬合模 型（雖然隨著對(duì)微生物代謝途調(diào)控機(jī)制的了解及生化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)

11、的發(fā)展，不少成功的機(jī)理模型 也被建立并用于發(fā)酵的優(yōu)化和調(diào)控一一可參見諸多生化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)教程及研究文獻(xiàn)）。同時(shí)，更簡(jiǎn)單的單因素試驗(yàn)或稍復(fù)雜的正交試驗(yàn)也在發(fā)酵工藝優(yōu)化中得到普遍應(yīng)用。雖然針對(duì)不同的 優(yōu)化要求，優(yōu)化手段當(dāng)然可以也應(yīng)該盡量簡(jiǎn)單，但目前很多國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)研究文獻(xiàn)還頻頻采用正交 試驗(yàn)的確讓人感覺很惋惜，特別是對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理不夠重視，相關(guān)的檢驗(yàn)欠缺。因?yàn)樵?發(fā)酵時(shí)，涉及微生物性質(zhì)（種類、種齡、活力，接種量），生長(zhǎng)條件（ pH、溫度），培養(yǎng)基組 成，傳遞條件（溶氧量或轉(zhuǎn)速、攪拌速度）等多個(gè)變量，所以不僅要考察每個(gè)因素的效應(yīng)，還 應(yīng)考察是否存在不同因素的協(xié)同效應(yīng)。一般而言，存在如此多的因素，協(xié)同

12、效應(yīng)在所難免。而 要高效判別協(xié)同效應(yīng)，統(tǒng)計(jì)手段就不可不重視。此外，要高效的進(jìn)行優(yōu)化時(shí)，也應(yīng)該借助統(tǒng)計(jì) 手段確定各個(gè)因素的效應(yīng)大小，選擇重要的因素進(jìn)行重點(diǎn)考察，即抓住主要矛盾把好鋼 （精力）用在刀刃（關(guān)鍵因素）上。因此，在優(yōu)化發(fā)酵工藝時(shí)，一定要有意識(shí)的應(yīng)用統(tǒng)計(jì)手段，首先確 定關(guān)鍵因素（包括產(chǎn)生重要協(xié)同效應(yīng)的因素），而后再集中精力優(yōu)化關(guān)鍵因素。值得一提的是， 要事半功倍地實(shí)現(xiàn)優(yōu)化目標(biāo)，就應(yīng)該時(shí)刻牢記要抓住主要矛盾。2. 用統(tǒng)計(jì)手段建立數(shù)學(xué)模型：前點(diǎn)已提及要建立數(shù)學(xué)模型，但為什么要用統(tǒng)計(jì)手段建立數(shù)模 了？我們都知道盲人摸象的故事，其實(shí)優(yōu)化發(fā)酵工藝也與此類似。試想，如果我們能準(zhǔn)確地定 量了解各個(gè)因素是

13、如何影響發(fā)酵目標(biāo)的，那要進(jìn)行優(yōu)化就是個(gè)簡(jiǎn)單地求最值的問(wèn)題。之所以進(jìn) 行單因素試驗(yàn)或者正交試驗(yàn)，目的就是通過(guò)考察輸入一輸出關(guān)系建立變量一響應(yīng)間的關(guān)系。我 們?nèi)绻麅H僅通過(guò)考察幾個(gè)孤立的點(diǎn)就想得到一個(gè)系統(tǒng)的全局的關(guān)系實(shí)在有盲人摸象的危險(xiǎn)：獲 得一個(gè)局部的關(guān)系，得到一個(gè)局部的極值而非全局最值；或者獲得失真的關(guān)系，得到連極值都 不是的結(jié)果。而如果借助統(tǒng)計(jì)手段，我們可以有意識(shí)的選取一些有代表性的點(diǎn)，以獲得全局的 正確關(guān)系。比如，如果確定一個(gè)正方體的考察空間，那可以選擇八個(gè)頂點(diǎn)+一個(gè)中心點(diǎn)，還可以補(bǔ)充考察六個(gè)面上的中心點(diǎn)。如此一來(lái)，不僅對(duì)全局做到了有效考察，而且最少只用 9 個(gè)點(diǎn)就可以達(dá)到目標(biāo)，勝于無(wú)目的地

14、考察正方體的其他點(diǎn)。3. 如何事半功倍確定有效因素：如果有 12 個(gè)因素需要考察，那考慮到因素間的兩兩協(xié)同效應(yīng)， 則要另增加 12 X11 = 132 個(gè)因素。如果采用單因素試驗(yàn)或正交試驗(yàn)，試驗(yàn)將非比尋常。如果借助適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)手段，則可大大減少試驗(yàn)次數(shù)。如Plackett Burman （拼寫可能有誤）試驗(yàn)， n 次試驗(yàn)可以考察 n-1 個(gè)因素，即進(jìn)行 12 次試驗(yàn)可以考察 11 個(gè)因素。雖然 PB 有一定的缺陷，但一 般而言的確是高效而又實(shí)用的。類似的非平衡或平衡塊統(tǒng)計(jì)手段還有許多，我們可以根據(jù)需要 選擇合適的手段進(jìn)行試驗(yàn)以達(dá)到目的。4. 應(yīng)用統(tǒng)計(jì)優(yōu)化的其他好處：在建立數(shù)學(xué)模型是，選擇合適的方

15、法也對(duì)優(yōu)化過(guò)程和結(jié)果大有裨 益。借助最陡爬坡試驗(yàn)、中心點(diǎn)試驗(yàn)，相應(yīng)面方法，均勻設(shè)計(jì)等方法能讓你準(zhǔn)確、高效的完成 試驗(yàn)。借助 SAS , SPAA ,Statistics 等統(tǒng)計(jì)手段，你可以快速完成數(shù)據(jù)的分析、模型構(gòu)建及假 設(shè)檢驗(yàn)。而且這些統(tǒng)計(jì)軟件還特供了強(qiáng)大的繪圖能力，你可以看到所建模型的三維圖像，得到 直觀影響，輕松進(jìn)行最優(yōu)求解得到優(yōu)化條件。另外，最優(yōu)算法發(fā)展比較快，象基因算法，神經(jīng) 元網(wǎng)絡(luò)算法也廣為應(yīng)用。發(fā)酵工藝優(yōu)化前言：發(fā)酵工藝的優(yōu)化在發(fā)酵行業(yè)起到很大的作用，尤其是在發(fā)酵生產(chǎn)中，它是提高發(fā)酵指標(biāo)的一項(xiàng)非常，有用的技術(shù)手段.同時(shí)也是搞發(fā)酵行業(yè)的人的必備知識(shí)要求之一，借此我想通過(guò)和大家交流共

16、同提高發(fā)酵方面的知識(shí)水平 .一、發(fā)酵工藝優(yōu)化方法與思路：發(fā)酵工藝優(yōu)化的方法有很多，它們之間不是孤立的，而是相互聯(lián)系 的。在一種發(fā)酵中，往往是多種優(yōu)化方法的結(jié)合，其目的就是發(fā)酵是細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)中最早被 人們認(rèn)識(shí)和利用的。發(fā)酵技術(shù)在醫(yī)藥、輕工、食品、農(nóng)業(yè)、環(huán)保等領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，使這一技 術(shù)在國(guó)民經(jīng)濟(jì)發(fā)展中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。為了提高發(fā)酵生產(chǎn)水平，人們首先考慮的是菌 種的選育或基因工程的構(gòu)建。而實(shí)際上，發(fā)酵工藝的優(yōu)化，包括生物反應(yīng)器中的工程問(wèn)題，也 同樣非常重要。發(fā)酵環(huán)境條件的優(yōu)化是發(fā)酵過(guò)程中最基本的要求，也是最重要、最難掌握的技術(shù)指標(biāo)。溫度、pH 值、溶氧、攪拌轉(zhuǎn)速、氨離子、金屬離子、營(yíng)養(yǎng)

17、物濃度等的優(yōu)化控制，依據(jù)不同的發(fā)酵而有所不同。同時(shí)，微生物在生長(zhǎng)的不同階段、生產(chǎn)目的代謝產(chǎn)物的不同時(shí)期，對(duì)環(huán)境條件可能會(huì)有不同的要求。因此，應(yīng)該在生物反應(yīng)器內(nèi)，使溫度、pH 值、溶氧、攪拌轉(zhuǎn)速等不斷變換，始終為其提供最佳的環(huán)境條件，以提高目的產(chǎn)物的得率，在發(fā)酵放大實(shí)驗(yàn)中，一般都很注重尋找最佳的培養(yǎng)基配方和最佳的溫度、pH 值、溶氧等參數(shù)，但往往忽視了細(xì)胞代謝流的變化。例如：在溶解氧 濃度的測(cè)量與控制時(shí)，關(guān)心的是最佳氧濃度或其臨界值，而不注意細(xì)胞代謝時(shí)的攝氧率；用氨水調(diào)節(jié) pH 值時(shí)，關(guān)心的是最佳 pH 值，卻不注意添加氨水時(shí)的動(dòng)態(tài)變化及其與其他發(fā)酵過(guò)程的 參數(shù)的關(guān)系，而這些變化對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝

18、卻非常重要。注意:大家可以從以下各個(gè)方面進(jìn)行交流 .盡量能夠分類進(jìn)行敘述，我總結(jié)了以下幾累，也不是很 全,當(dāng)然從其他的方面進(jìn)行交流也可以，但是希望你注明附加說(shuō)明！二.好氧發(fā)酵1. PH 工藝的優(yōu)化2. 溶氧工藝的優(yōu)化3. 原材料工藝的優(yōu)化4.消毒（滅菌）工藝的優(yōu)化5.菌種制備工藝的優(yōu)化6.小試到中試，中試到生產(chǎn)等擴(kuò)大實(shí)驗(yàn)的工藝優(yōu)化7.成本工藝優(yōu)化8.種子罐工藝的優(yōu)化9.發(fā)酵罐工藝參數(shù)控制的優(yōu)化10. 儀表控制的工藝優(yōu)化11.環(huán)境的工藝優(yōu)化12. 染菌處理的工藝優(yōu)化13.緊急情況處理的工藝優(yōu)化 （停電停水 停氣停汽等）14. 補(bǔ)料工藝的優(yōu)化15. 倒種工藝的優(yōu)化16 發(fā)酵設(shè)備的工藝優(yōu)化17.其他

19、的工藝優(yōu)化三.厭氧工藝的優(yōu)化四. 固體發(fā)酵的工藝優(yōu)化五.其他1.PH 工藝的優(yōu)化A. 配料中的 PH 很重要，其中有配前 PH,配后 PH,消前 PH,消后 PH,接種前 PH,工藝控制 PH 等, 配前 PH,配后 PH,可以用來(lái)檢測(cè)原材料的質(zhì)量，初步估計(jì)配料的情況，如果出了錯(cuò)誤，有時(shí)候可以從 PH 中的變化看出來(lái)，能夠減少錯(cuò)誤的發(fā)生.B. 另外，每次有新的配方我們總是要用 PH 方法檢測(cè)其中的每種原材料是否會(huì)和其他的發(fā)生反應(yīng),可以互相兩兩混合，檢測(cè) PH 的變化，也可以用來(lái)作為配微量元素的檢測(cè) .C. 消前 PH 可以用來(lái)減少消毒過(guò)程對(duì)培養(yǎng)基的破壞，因?yàn)榕囵B(yǎng)基在消毒中會(huì)有 PH 的變化，在

20、不同的 PH 條件下對(duì)培養(yǎng)基破壞也不一樣 ，因此可以在消毒的時(shí)候選擇合適的PH,消毒完后可以調(diào)節(jié)過(guò)來(lái)，這樣一來(lái)可以對(duì) PH 敏感的一些原材料減少破壞，這種方法在生產(chǎn)中已經(jīng)取得了初步的成績(jī)，提局了指標(biāo).D. 工藝控制的 PH,在發(fā)酵的產(chǎn)抗期間，通過(guò)在不同的發(fā)酵時(shí)間調(diào)整不同的PH,可以減少雜質(zhì)的產(chǎn)生,同時(shí)還可以緩解溶氧，比如在頭抱發(fā)酵中，通過(guò)在后期調(diào)整 PH 可以減少 DCPC 的含量，給提取工序帶來(lái)很大的好處，E. 補(bǔ)料罐通過(guò) PH 的調(diào)節(jié)可以更好的通過(guò)流加物料而不影響發(fā)酵J 部分發(fā)酵在不同時(shí)期的 PH 有所不同，所以通過(guò)補(bǔ)料罐的調(diào)整可以對(duì)發(fā)酵指標(biāo)有所提高）F. 發(fā)酵過(guò)程中的 PH 調(diào)節(jié)可以通過(guò)

21、各種方法，不一定要添加氨水和氫氧化鈉 ，可以添加玉米槳等其他的物料來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié).G.控制放罐時(shí)的 PH 可以對(duì)后面的過(guò)濾有所影響，所以一定要控制好放罐前的PHH.繪制種子瓶和種子罐以及發(fā)酵罐等整個(gè)發(fā)酵過(guò)程的PH 生長(zhǎng)曲線，可以用來(lái)參考控制工藝，檢測(cè)無(wú)菌情況的發(fā)生.六、 A.華東理工大學(xué)的張嗣良提出了以細(xì)胞代謝流分析與控制為核心的發(fā)酵工程學(xué)”的觀點(diǎn)。他認(rèn)為，必須高度重視細(xì)胞代謝流分布變化的有關(guān)現(xiàn)象，研究細(xì)胞代謝物質(zhì)流與生物反應(yīng)器物料流變化的相關(guān)性，高度重視細(xì)胞的生長(zhǎng)變化，盡可能多地從生長(zhǎng)變化中做出有實(shí)際價(jià)值的分析， 進(jìn)一步建立細(xì)胞生長(zhǎng)變量與生物反應(yīng)器的操作變量及環(huán)境變量三者之間的關(guān)系，以便有效控制

22、細(xì)胞的代謝流，實(shí)現(xiàn)發(fā)酵過(guò)程的優(yōu)化。B. 補(bǔ)料分批發(fā)酵技術(shù)該技術(shù)可以有效地減少發(fā)酵過(guò)程中培養(yǎng)基黏度升高引起的傳質(zhì)效率降低、降解物的阻遏和底物的反饋抑制的現(xiàn)象，很好地控制代謝方向，延長(zhǎng)產(chǎn)物合成期和增加代謝物 的積累。所需營(yíng)養(yǎng)物限量的補(bǔ)加，常用來(lái)控制營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變菌種，使代謝產(chǎn)物積累到最大。氨基酸發(fā)酵中采用這種補(bǔ)料分批技術(shù)最普遍，實(shí)現(xiàn)了準(zhǔn)確的代謝調(diào)控。C. 超聲波的應(yīng)用：超聲波有很強(qiáng)的生物學(xué)效應(yīng)。可應(yīng)用于發(fā)酵過(guò)程的上、中、下游三個(gè)階段。其在發(fā)酵工藝上的應(yīng)用，可增加細(xì)胞膜的通透性和選擇性，促進(jìn)酶的變性或分泌，增強(qiáng)細(xì)胞代 謝過(guò)程，從而縮短發(fā)酵時(shí)間，改善生物反應(yīng)條件，高生物產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量.超聲波的作用機(jī)

23、制分為熱作用、空化作用和機(jī)械傳質(zhì)作用。熱作用是超聲波在介質(zhì)內(nèi)傳播過(guò)程中，能量不斷被介 質(zhì)吸收而使介質(zhì)的溫度升高的一種現(xiàn)象，可用于殺菌或使酶失活?？栈饔檬浅暡ㄔ诮橘|(zhì)中傳播時(shí)，液體中分子的平均距離隨著分子的振動(dòng)而變化。當(dāng)其超過(guò)保持液體作用的臨界分子間 距，就形成空化（空泡）?？张輧?nèi)可產(chǎn)生瞬間高溫高壓并伴有強(qiáng)大的沖擊波或射線流等，這足 以改變細(xì)胞的壁膜結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞內(nèi)外發(fā)生物質(zhì)交換。機(jī)械傳質(zhì)作用是超聲波在介質(zhì)中傳播時(shí)， 可使介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)進(jìn)入振動(dòng)狀態(tài)，加速發(fā)酵液的質(zhì)量傳遞，提高發(fā)酵過(guò)程的反應(yīng)速度。超聲波可廣 泛應(yīng)用于生物發(fā)酵工程。不同頻率和強(qiáng)度的超聲波對(duì)發(fā)酵過(guò)程的作用是不同的，使用時(shí)應(yīng)視具 體的發(fā)酵工藝

24、和使用條件進(jìn)行選擇。增加前體物的合成增加目的產(chǎn)物的前體物的合成或是直接 添加前體物，均有利于目的產(chǎn)物的大量積累。如：在氨基酸的發(fā)酵中，通常在微生物的培養(yǎng)中 加入前體，生產(chǎn)氨基酸；在花生四烯酸的發(fā)酵中，通過(guò)增加前體物或是加強(qiáng)糖代謝的途徑， 增 加其前體物的合成， 均有助于提高花生四烯酸的產(chǎn)量。 去除代謝終產(chǎn)物改變細(xì)胞膜的通透性，把屬于反饋控制因子的終產(chǎn)物迅速不斷地排出細(xì)胞外，不使終產(chǎn)物積累到可引起反饋調(diào)節(jié)的濃度，即可以預(yù)防反饋控制。七、發(fā)酵工程的優(yōu)化不是很全 ，、其主要是在兩個(gè)方面進(jìn)行優(yōu)化 ：營(yíng)養(yǎng)條件與環(huán)境條件的優(yōu)化.目前做發(fā)酵優(yōu)化沒有什么前途 ，發(fā)不了高水平的文章，應(yīng)該說(shuō)發(fā)酵工程優(yōu)化是 Tec

25、hnology，而 不是science.其主要著眼點(diǎn)在于實(shí)現(xiàn)發(fā)酵過(guò)程的高產(chǎn)量高產(chǎn)率 高生產(chǎn)強(qiáng)度的相對(duì)統(tǒng)一 .從以下幾個(gè)方面實(shí)現(xiàn)優(yōu)化技術(shù)：1 基于微生物反應(yīng)原理的培養(yǎng)環(huán)境優(yōu)化技術(shù)；2 基于微生物代謝特性的分階段培養(yǎng)技術(shù)3 基于反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和人工智能的優(yōu)化和控制技術(shù)4 基于代謝通量分析的過(guò)程優(yōu)化技術(shù)5 基于系統(tǒng)觀點(diǎn)的生物反應(yīng)系統(tǒng)優(yōu)化技術(shù)6 基于脅迫條件下微生物生理應(yīng)答特性的發(fā)酵過(guò)程優(yōu)化技術(shù)八、發(fā)酵工程包括不少內(nèi)容，工藝的優(yōu)化也有很多值得研究的地方。但是很多的理論是和生 產(chǎn)實(shí)踐相脫節(jié)的，也可以說(shuō)對(duì)某些生產(chǎn)項(xiàng)目而言是沒必要做過(guò)多的研究的（比如絕大多數(shù)的基 因工程菌），說(shuō)白了，就是看菌種好壞。另外，個(gè)人認(rèn)

26、為，發(fā)酵工藝條件的優(yōu)化，還是要結(jié)合具體的代謝產(chǎn)物和微生物來(lái)針對(duì)性研究。希望從理論和整體的角度做研究，對(duì)優(yōu)化而言是沒有效率的。這里只是從實(shí)用性角度來(lái)說(shuō)的，我并不懷疑發(fā)酵工藝的價(jià)值。發(fā)酵工程優(yōu)化是 Technology,而不是 science。但是有些事情可能不是你想象的那樣，畢竟現(xiàn)在國(guó)內(nèi)的公司和廠家主要以 Technology 為主，學(xué)校和科研單位以基礎(chǔ)理論為主，現(xiàn)在的大體情況是科研和實(shí)際的生產(chǎn)應(yīng)用有些脫鉤，搞科研的大部分對(duì)搞生產(chǎn)的知識(shí)和應(yīng)用有所缺陷，相反搞生產(chǎn)的覺得搞科研用處不大，尤其是現(xiàn)在的國(guó)內(nèi)大的公司很少有出錢搞科研（基礎(chǔ)理論研究）的，他們寧愿把大部分的錢用于工藝上的改進(jìn)，而不愿意投資搞新

27、產(chǎn)品的開發(fā)。其他方面我不是很清楚，但是在生物制藥方面中國(guó)的新產(chǎn)品開發(fā)和應(yīng)用成功的現(xiàn)在幾乎占不到國(guó)外的千分之一。根據(jù)調(diào)查（剛剛進(jìn)行的在北京進(jìn)行的國(guó)際首屆生物高級(jí)經(jīng)濟(jì)論壇報(bào)告）指出，現(xiàn)在中國(guó)的公司和科研脫鉤嚴(yán)重，搞科研的只關(guān)心發(fā)高水平文章，不關(guān)心應(yīng)用，更不關(guān)心生產(chǎn)。他們并不 了解公司真正需要什么技術(shù)，現(xiàn)在公司和科研單位（包括學(xué)校）真正聯(lián)手搞發(fā)展的很少，走形 式的很多。像國(guó)外大的公司自己出錢搞科研開發(fā)的幾乎沒有，因?yàn)榇蟛糠值墓緦幵富ㄥX去買現(xiàn)成的工藝和技術(shù)。九、至于公司和學(xué)校等科研單位合作很難的原因有很多，什么保密、付款、應(yīng)用等等，我們關(guān) 心的是我們畢業(yè)早晚要參加工作，如果搞理論和科研也好，但是大部

28、分的人員是要參加公司工 作的，所以多了解這方面的知識(shí)，尤其是理論和實(shí)踐結(jié)合的知識(shí)對(duì)我們很有用處。因?yàn)槲覀児?司近幾年招律的新學(xué)生（包括研究生和博士）對(duì)公司的生產(chǎn)和科研很不適應(yīng)，他們往往只是從 事某方面的工作，而且基礎(chǔ)的東西占有很大的比例。為了更好的畢業(yè)后融入工作人員的大家庭，出于這個(gè)目的，所以我才開這個(gè)交流，希望對(duì)將要畢業(yè)從事工作的人有所幫助，也對(duì)剛剛參加 工作的人有所啟示。大家共同學(xué)習(xí)，提高，當(dāng)然在更多的方面進(jìn)行交流更好，我們可以學(xué)習(xí)更多的知識(shí)。我再根據(jù)自己的經(jīng)驗(yàn)談?wù)劊翰蛔阒帲凑?qǐng)大家給與補(bǔ)充改正！十、溶氧工藝的優(yōu)化A.影響溶氧的條件有：溫度、通氣量、發(fā)酵液性質(zhì)、物料的性質(zhì)、補(bǔ)料的情況、壓

29、力、攪拌的 形式、設(shè)備的各種參數(shù)、菌絲本身的情況、染菌等等b. 控制好的溶氧要從各個(gè)方面分析入手， 比如說(shuō)， 在不同的周期要調(diào)整各種影響溶氧的條件順 序就不一樣，前期可以調(diào)整通氣量，罐壓然后溫度，經(jīng)攪拌等對(duì)生產(chǎn)指標(biāo)影響不大，但是在發(fā) 酵后期則要注意：如果你的軍種和產(chǎn)物的生產(chǎn)對(duì)溫度敏感的話，則需要最后調(diào)整溫度，如果對(duì) 壓力或者二氧化碳敏感的話則最后再調(diào)整壓力。其他的情況一樣。也可以通過(guò)順序調(diào)整來(lái)節(jié)省成本。c. 攪拌的形式很多，我們?cè)囘^(guò)很多的形式，根據(jù)設(shè)備的不同選型有所不同，但是必須要根據(jù)你的發(fā)酵液的性質(zhì)和電機(jī)的功率等進(jìn)行選擇。這方面在發(fā)酵設(shè)備這本書上有詳細(xì)的描述。注意一點(diǎn)是：攪拌的選擇要注意它的

30、接口和縫隙，避免染菌。d. 空氣分布器可以根據(jù)設(shè)備的情況進(jìn)行設(shè)計(jì)，保證它和物料的混合度達(dá)到最大當(dāng)然最好。不過(guò)一定要考慮它對(duì)染菌的影響。以及對(duì)其進(jìn)行清洗的方便和消毒的方便，不易杜塞等。e. 通過(guò)補(bǔ)料可以緩解溶氧，尤其是你的部料成分對(duì)發(fā)酵后其有很大影響的時(shí)候，通過(guò)合適的補(bǔ)料時(shí)間和補(bǔ)料量的控制可達(dá)到提高發(fā)酵指標(biāo)的效果。具體問(wèn)題具體分析了！f.通氣量的控制可以根據(jù)菌絲的 ph 的變化和溶氧計(jì)的測(cè)量進(jìn)行控制，同時(shí)可以根據(jù)補(bǔ)料量的多少進(jìn)行控制，這些均可以作為調(diào)整溶氧的參考依據(jù)。H一、做發(fā)酵優(yōu)化一定要有針對(duì)性，在你做一個(gè)新品種時(shí)，一定要忘記你原來(lái)品種的所有特性，把 注意力集中到你所從事的具體微生物的培養(yǎng)上來(lái)

31、！就象人才培養(yǎng)一樣要因才施教，要有感情的去對(duì)待它，微生物也是生物，在某方面同人一樣，這是我做發(fā)酵幾年的體會(huì)，對(duì)于發(fā)酵是 TECHNOLO GY 還是SCIENCE，以及前途如何均不重要，重要的是要把自己所做的事情做好 ，做精，做細(xì)，就能實(shí)現(xiàn) TECHNOLOGY 與 SCIENCE 之間的轉(zhuǎn)化，它們表象不同，本質(zhì)一樣！無(wú)論工作和試驗(yàn)都是一樣的，需要你盡心盡力去認(rèn)真的對(duì)待，只有踏踏實(shí)實(shí)認(rèn)認(rèn)真真的努力去把試驗(yàn)和工作做好，做精，做細(xì)，我覺得任何人都會(huì)有很多的收獲的。我做了好幾年的生物制藥工作，深感到做好一件工作并不是一件容易的事情，在發(fā)酵工藝改進(jìn)這方面的工作也做了很多， 有一點(diǎn)身有感觸，就是其實(shí)我們

32、做微生物試驗(yàn)不妨把自己的位置和微生物換個(gè)角度考慮，就會(huì)得到很多的啟事。舉個(gè)例子來(lái)說(shuō)吧！曾經(jīng)有位博導(dǎo)說(shuō)過(guò)，我們自己在培養(yǎng)微生物，用微生物進(jìn)行試驗(yàn)，但是我們總是把他們當(dāng)作微生物看待，當(dāng)自己試驗(yàn)品，我們不妨換個(gè)角度，如果我們和微生物一樣的話，即我們?cè)谖⑸锝嵌饶敲次覀儜?yīng)該怎樣進(jìn)行試驗(yàn)?zāi)兀?我們所用的大多數(shù)高產(chǎn)菌株幾乎大部分是 缺陷型菌株，也就是說(shuō)是病態(tài)菌株，所以我們?nèi)绻軌蛳驅(qū)Υ∪艘粯訉?duì)待他，知道他需要什么，病癥在那里，如何維持我們所需要的狀態(tài)等，就會(huì)理所當(dāng)然的得到他的配合，也就是能夠 更多的得到我們所需要的產(chǎn)物。從中我得到了很多的啟事，當(dāng)然我們不是微生物，但是我們可以從其他的角度去考慮問(wèn)題，或

33、許能夠得到意想不到的效果！ ！呵呵！十二、從搖瓶試驗(yàn)到中試發(fā)酵罐試驗(yàn)的不同之處1、 消毒方式不同，搖瓶是外流蒸汽靜態(tài)加熱 (大部分是這樣的)，發(fā)酵罐是直接蒸汽動(dòng)態(tài)加熱，部分的是直接和蒸汽混合，會(huì)因此影響發(fā)酵培養(yǎng)基的質(zhì)量，體積，PH,透光率等指標(biāo)。擴(kuò)大時(shí)搖考慮2、接種方式不同，搖瓶是吸管加入，發(fā)酵罐是火焰直接接種(當(dāng)然有其他的接種方式)，要考慮接種時(shí)的菌株損失和菌種的適應(yīng)性等。3、空氣的通氣方式不同，搖瓶是表面直接接觸。發(fā)酵罐是和空氣混合接觸，考慮二氧化碳的濃度和氧氣的融解情況。4、蒸發(fā)量不同，搖瓶的蒸發(fā)量不好控制，濕度控制好的話，蒸發(fā)量會(huì)少。發(fā)酵罐蒸發(fā)量大，但是可以通過(guò)補(bǔ)料解決的。5、攪拌方式

34、不同，搖瓶是搖轉(zhuǎn)方式進(jìn)行混合攪拌，對(duì)菌株的剪切力較小。發(fā)酵罐是直接機(jī)械攪拌，注意剪切力的影響和無(wú)菌的影響。6、 PH 的控制，搖瓶一般通過(guò)碳酸鈣和間斷補(bǔ)料控制PH ,發(fā)酵可以直接流加控制 PH,比較方便。7、 溫度控制，搖瓶是空氣直接接觸或者傳熱控制溫度，但是發(fā)酵罐是蛇罐或者夾套水降溫控制，注意降溫和加熱的影響。8、 注意染菌的控制方法不一樣，發(fā)酵罐根據(jù)染菌的周期和染菌的類型等可以采取一些必要的措施減少損失。9、 發(fā)酵罐可以取樣或者儀表時(shí)時(shí)檢測(cè)，但是搖瓶因?yàn)榱啃〔荒芊奖愕倪M(jìn)行控制和檢測(cè)。10、 原材料不一樣，發(fā)酵所用原材料比較廉價(jià)而且粗曠，工藝控制和搖瓶區(qū)別很大等等。十三、補(bǔ)料分批培養(yǎng)(fed

35、 batch culture 簡(jiǎn)稱 FBC)是指在分批培養(yǎng)過(guò)程中、 間歇或連續(xù)地補(bǔ)加 一種或多種成分的新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法、與傳統(tǒng)的分批集中補(bǔ)料培養(yǎng)相比、它有以下優(yōu)點(diǎn)：(1)可以避免在分批發(fā)酵中因 一次投料過(guò)多造成發(fā)酵液環(huán)境突變，造成菌絲大量生長(zhǎng)等問(wèn)題，改善發(fā)酵液流變等性質(zhì)，使得發(fā)酵過(guò)程泡沫得以控制，節(jié)省消泡劑，并提高了裝罐系數(shù)。(2)可以控制細(xì)胞質(zhì)量，以提高芽抱的比例，并使pH 得以穩(wěn)定。(3)可以解除底物抑制，產(chǎn)物反饋抑制和分解阻遏。(4) 可以使 放料和補(bǔ)料”方法得以實(shí)施。該方法在發(fā)酵后期、產(chǎn)生了一定數(shù)量代謝產(chǎn)物后，在發(fā)酵液體積測(cè)量監(jiān)控下，放出一部分發(fā)酵液， 同時(shí)連續(xù)補(bǔ)充 一一部分新鮮營(yíng)

36、養(yǎng)液，實(shí)現(xiàn)連續(xù)帶放、既有利于提高產(chǎn)物產(chǎn)量.又可降低成本，使得發(fā)酵指數(shù)得以大幅度提高。(5) 利用 FBC 技術(shù)、可以使菌種保持最大的生產(chǎn)力狀態(tài).隨著傳感技術(shù)以及對(duì)發(fā)酵過(guò)程動(dòng)力學(xué)理淪深入研究、用模擬復(fù)雜的數(shù)學(xué)模型使在線方式實(shí)最優(yōu)控制成為可能。十四、連續(xù)補(bǔ)料控制目前采用有反饋控制和無(wú)反饋控制兩種方式。有反饋控制：選擇與過(guò)程直接關(guān)系的可檢測(cè)參數(shù)作為控制指標(biāo)，例如可以測(cè)量、控制發(fā)酵液 PH、采用定量控制葡萄糖流加。穩(wěn)定 PH 在次級(jí)代謝最旺盛水平。 而無(wú)反饋控制 FBC 是指無(wú)固定的反饋參數(shù)， 以經(jīng)驗(yàn)和數(shù)學(xué)模 型相結(jié)合的辦法來(lái)操作最優(yōu)化控制、從而使抗生素發(fā)酵產(chǎn)量得以大幅度提高。例如發(fā)酵過(guò)程中前體的補(bǔ)加

37、。由此可見，要實(shí)現(xiàn)對(duì)發(fā)酵過(guò)程的有效控制，就先要解決補(bǔ)科的連續(xù)控制問(wèn)題。目前國(guó)外發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程連續(xù)補(bǔ)料采用：流量計(jì)（電磁流量計(jì)、液體質(zhì)量流量計(jì) ）、小型電動(dòng)、氣動(dòng)隔膜調(diào)節(jié)閥和控制器來(lái)實(shí)現(xiàn)連續(xù)補(bǔ)料控制。菜發(fā)酵工廠在中試試驗(yàn)中還成功地運(yùn)用了電子稱加三閥控制的自動(dòng)補(bǔ)科系統(tǒng)十五、消毒（滅菌）工藝的優(yōu)化1、消毒又叫滅菌，但是又很多的區(qū)別在里面（可以上網(wǎng)搜索資料參考，很多的），我們?cè)诠?一般把它稱為消毒。消毒其實(shí)又很多的學(xué)問(wèn)在里面，一個(gè)好的消毒工可以達(dá)到一年內(nèi)千分之一的染菌率，非常的厲害！ ！2、 發(fā)酵液經(jīng)過(guò)消毒會(huì)遭到很大的破壞，所以首先需要控制消毒前的PH ,而后控制消毒時(shí)的溫 度和時(shí)間（非常重要，有時(shí)候

38、對(duì)發(fā)酵指標(biāo)又很大的影響），在 VB12 發(fā)酵中，消毒的質(zhì)量可以 直接影響發(fā)酵的水平，從消后的指標(biāo)就幾乎能得出放罐時(shí)的指標(biāo)。所以必須控制消毒的溫度和時(shí)間。3、消毒的方式的不同對(duì)發(fā)酵影響也很大，公司一般分實(shí)消（間斷消毒）和連消兩種，連消的發(fā) 酵液質(zhì)量較好，但是對(duì)設(shè)備儀器要求恨嚴(yán)格。實(shí)消操作簡(jiǎn)單，但是控制也不容易，對(duì)發(fā)酵噎破壞較大，因?yàn)樗纳禍貢r(shí)間很長(zhǎng)。對(duì)設(shè)備破壞較大，（震動(dòng)和蛇罐等）。4、現(xiàn)在出現(xiàn)一種是螺旋板換熱器連續(xù)消毒，很方便也很經(jīng)濟(jì)。它的原理和連消格相似，只是它 靠板式換熱，不和蒸汽直接接觸，而且它的消毒蒸汽冷凝水可以回流到原培養(yǎng)基進(jìn)口處加熱培 養(yǎng)基，可以節(jié)約成本。而且可以控制培養(yǎng)基的體積

39、。但是對(duì)設(shè)備的要求很嚴(yán)格（為了保證無(wú)菌要求），很少的設(shè)備公司能夠做好這樣的設(shè)備。5、 發(fā)酵的補(bǔ)料消毒可以通過(guò)調(diào)節(jié)好PH 的幾種料一起進(jìn)行消毒，節(jié)約成本，如果部分的發(fā)酵中 對(duì)幾種物料的利用安比例進(jìn)行，而且這些物料不發(fā)生任何反映，這樣消毒既可以調(diào)節(jié)濃度控制蒸發(fā)量，又可以節(jié)約能源，一舉兩得。6、部分得補(bǔ)料可以加入某種不容物質(zhì)，消毒后再分開。保證設(shè)備的干凈和無(wú)菌等，例如油里面可以加入其他的易溶于水的物質(zhì)等，消毒后分水時(shí)可以把它分開。7、消毒在保證無(wú)菌的前體下，還要考慮經(jīng)濟(jì)、對(duì)培養(yǎng)基破壞情況、操作方便（節(jié)省維修時(shí)間人員等）、工藝改進(jìn)等等。十六、剪切力的計(jì)算可以參考（發(fā)酵設(shè)備），一般的說(shuō)剪切力一般以攪拌葉

40、的線速度測(cè)量，如果沒有搖瓶沒有攪拌可以參考搖瓶中最大的線速度， 計(jì)算公式為：轉(zhuǎn)速*3.14*搖瓶中最大的半徑的平方。不過(guò)我覺得影響你發(fā)酵可能是胞外次級(jí)代謝物或者其他的物質(zhì)。搖瓶中的剪切力對(duì)菌種的影響 很小，不過(guò)你的菌種我不是很熟悉，不過(guò)憑我的經(jīng)驗(yàn)我覺得他不是主要的因素。我考慮的 可能是氧氣對(duì)你的影響較大，可能你攪拌時(shí)破壞了菌種的生長(zhǎng)環(huán)境，導(dǎo)致他的代謝途徑改變，產(chǎn)生了其他的物質(zhì)（可能是有害物質(zhì)）導(dǎo)致了菌種的生長(zhǎng)環(huán)境改變影響了它的代謝。還有一點(diǎn)是：你的培養(yǎng)基條件不是很適合菌種的生長(zhǎng)，菌種在前期創(chuàng)造了自己生長(zhǎng)條件，結(jié)果 攪拌遭到破壞所以沒有長(zhǎng)好。十七、淺談在發(fā)酵工藝優(yōu)化中統(tǒng)計(jì)手段的重要性。1.協(xié)同效應(yīng)與關(guān)鍵因素：優(yōu)化發(fā)酵工藝實(shí)質(zhì)是考察各個(gè)變量對(duì)優(yōu)化目標(biāo)的效應(yīng)以獲得各因素（變量）對(duì)目標(biāo)值的影響關(guān)系，進(jìn)而以此為基礎(chǔ)確定最優(yōu)操作條件。同其他學(xué)科一樣，在發(fā)酵 優(yōu)化時(shí)如果能建立各因素對(duì)目標(biāo)的數(shù)學(xué)表達(dá)函數(shù)是最為理想的。但由于發(fā)酵中微生物性質(zhì)的復(fù) 雜性（微生物內(nèi)部的代謝機(jī)理，調(diào)控機(jī)制等）及發(fā)酵環(huán)境多樣的傳遞特性（熱，質(zhì)量、動(dòng)量）， 使得要建立一個(gè)準(zhǔn)確的機(jī)理模型十分困難。因此目前常見的發(fā)酵模型多為黑箱模型，即擬合模 型（雖然隨著對(duì)微生物代謝途調(diào)控機(jī)制的了解及生化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的發(fā)展，不少成功的機(jī)理模型 也被建立并用于發(fā)酵的優(yōu)化和調(diào)控一一可參見諸多生化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)教