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文檔簡(jiǎn)介

1、綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)1礦質(zhì)元素對(duì)植物的作用紅色的問(wèn)題見(jiàn)后附照片1、本次實(shí)驗(yàn)名稱?分為哪兩局部?誘導(dǎo)產(chǎn)生NR增強(qiáng)其活性2、NR有何特性?何謂誘導(dǎo)酶?NR為誘導(dǎo)酶,不供給硝酸根之前,不會(huì)產(chǎn)生.誘導(dǎo)酶3、針對(duì)上述特性實(shí)驗(yàn)中采取何舉措? “真空滲入法在步驟中何處表達(dá)?舉措:提前一天用硝酸鹽葉面噴施,增強(qiáng)活性表達(dá):反響時(shí),將三角瓶放在真空枯燥器中,用真空泵抽氣放氣,直至葉片 沉入瓶底4、實(shí)驗(yàn)中N所起作用?誘導(dǎo)產(chǎn)生NR增強(qiáng)其活性5、何謂磺胺比色法?亞硝態(tài)氮在酸性溶液中與對(duì)氨基苯磺酸形成重氮鹽,再與a-蔡胺定量生成紅色偶氮化合物,在520nm有最大吸收峰.6、NR活力以什么表示?步驟中何處有關(guān)鍵作用?用產(chǎn)生的亞硝態(tài)

2、氮的量表示.關(guān)鍵作用就是 21頁(yè)的考前須知.7、標(biāo)準(zhǔn)曲線操作順序如何??jī)扇巳绾闻浜??制備?biāo)準(zhǔn)溶液、制備顯色液、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線.要默契地配和,一人在做實(shí)驗(yàn) 的同時(shí),另一人要負(fù)責(zé)記錄.8、為何標(biāo)準(zhǔn)溶液用NaNO§液不用NaN標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度是多少?由于硝酸復(fù)原酶活性可由產(chǎn)生亞硝態(tài)氮的量表示,而不是用NO3表示,所以用NaNO2g示.標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度是1微克每毫升.9、標(biāo)準(zhǔn)溶液和誰(shuí)在什么條件下顯色多久?比色波長(zhǎng)是多少?在硝酸復(fù)原酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,三角瓶 30度下置于黑暗處恒溫箱、水浴 鍋等保溫30min,在520nm波長(zhǎng)下比色;硝態(tài)氮含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,常溫下放置 20min,再參加8%NaoHS7取

3、9.5ml ,搖勻冷卻至室溫,在 410nm波長(zhǎng)下比色 10、如何獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線或回歸方程?通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)溶液得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),確立好橫豎坐標(biāo)運(yùn)用電腦軟件制作.11、取樣應(yīng)注意什么?第一、儀器不能混用,嚴(yán)格根據(jù)組別及標(biāo)簽按要求使用;第二、材料葉片要用濕紗布擦拭干凈,用蒸儲(chǔ)水沖洗,濾紙或干紗布吸干12、植物材料如何凈化?采回來(lái)的材料葉片要用濕紗布擦拭干凈,用蒸儲(chǔ)水沖洗,濾紙或干紗布吸干.13、葉圓片如何獲得,需要多少個(gè)葉圓片?14、如何保證葉片等重?為何要等重?每份重量是多少?15、兩個(gè)三角瓶中為何一個(gè)參加 F20,另一個(gè)加KNQ16、三角瓶中為何放入PH7.5緩沖液?17、為何要用真空泵抽氣?使用中

4、應(yīng)注意什么?真空泵抽氣影響N02的浸出量. 預(yù)防液態(tài)水進(jìn)入泵腔18、 抽氣時(shí)有何現(xiàn)象發(fā)生?抽氣到何時(shí)何種程度為止?1由于反復(fù)抽氣放氣,溶液可滲入葉組織取代葉片空氣, 葉片便沉于溶液底部,酶促反響可以相對(duì)完全的進(jìn)行.2抽氣到葉片沉淀19、 抽氣后三角瓶置于何處?什么條件?多長(zhǎng)時(shí)間?顯色反響在黑暗處恒溫箱、水浴鍋等進(jìn)行 30分鐘20、三角瓶取出后顯色反響在何容器中進(jìn)行?為何先加磺胺,后加苯胺?21、上述溶液顯色反響時(shí)間多長(zhǎng)?波長(zhǎng)?空白?30min , 520nm 空白組一樣22、假設(shè)三角瓶取出后顯色反響不馬上進(jìn)行,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有無(wú)影響?更高還是更低?有影響,更高還是更低我也不知道,我個(gè)人覺(jué)得更低23

5、、請(qǐng)演算板書(shū)NR活性計(jì)算公式硝酸復(fù)原酶活性gg-1 - h-1 = N02-含量-N02-含量X 10/W/X t24、NR活性計(jì)算公式中t為多少?公式中X 1比何用意?0.5h ;因取反響液的十分之一做后面實(shí)驗(yàn),恩大概就這意思吧25、如何獲彳導(dǎo)NO、NO-含量?26、NO-測(cè)定中,與其反響的物質(zhì)為什么?試劑中酸的作用?27、該反響產(chǎn)物有無(wú)顏色?如何才能顯色?應(yīng)參加何物?28、該曲線操作為何與前述不同?區(qū)別在哪?比色波長(zhǎng)為多少?29、實(shí)驗(yàn)材料如何處理?稱重多少?處理:將材料用濕紗布擦拭干凈,用蒸儲(chǔ)水沖洗,濾紙吸干.稱?。好富钚詼y(cè)定稱取0.3-0.5,硝態(tài)氮含量測(cè)定準(zhǔn)確稱取2g30、用何試劑在何

6、處多少攝氏度下提???管口如何處理?酶活性測(cè)定:0.1mol/L,ph7.5磷酸緩沖液在30度水浴硝態(tài)氮含量測(cè)定:無(wú)機(jī)離子在沸水浴中處理,管口用玻璃泡封口31、提取結(jié)束為何要冷卻?定容至多少?如何保證不損失?由于要在室溫下進(jìn)行實(shí)驗(yàn),定容至25ml容量瓶,反復(fù)沖洗幾次保證不損失332、取樣品液多少?與何試劑(多少)反響?取樣品液0.1ml,與5%K楊酸一硫酸溶液0.4ml反響,再與9.5ml8%氫氧化 鈉反響33、多長(zhǎng)時(shí)間后參加多少8%NaOH液?取樣參加水楊酸硫酸后,靜止20分鐘參加34、該測(cè)定空白為什么?波長(zhǎng)為多少?進(jìn)行比照,410波長(zhǎng)35、請(qǐng)演算NG-N含量計(jì)算公式.氮含量=C*V/W36、

7、上述計(jì)算公式其中C, V W分別代表什么?硝態(tài)氮含量(mg g-1FW) = (C x V)/WC為標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算得NO3 N濃度(ug ml)V為提取樣品液總量(ml);W為樣品鮮重(g).37、以上公式中C如何獲得?C為標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算得NO3 N濃度(ug ml)綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)2植物利用光能的生理根底1、葉綠素在紅光區(qū)和藍(lán)光區(qū)都有吸收峰,能否用藍(lán)光區(qū)的吸收峰波長(zhǎng)進(jìn)行葉綠素的定量分析?為什么?不能,由于葉綠素a和葉綠素b在百分之96乙醇中最大洗手峰的波長(zhǎng)不同, 用分光光度計(jì)測(cè)定各種葉綠體色素的含量時(shí),對(duì)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)精確度要求較 高,如果波長(zhǎng)與原吸收峰波長(zhǎng)相差1nm那么葉綠素a的測(cè)定誤差為百分之

8、二,葉 綠素b為百分之十九,因此,在使用前必須嚴(yán)格種植不同葉綠素的最大吸收峰波 長(zhǎng).2、選擇80%丙酮提取葉綠體色素時(shí),葉綠素 a、葉綠素b和類胡蘿卜素的 吸收峰值分別是多少納米?663nm,645nm,470nm3、選擇96%乙醇提取葉綠體色素時(shí),葉綠素 a、葉綠素b和類胡蘿卜素的 吸收峰值分別是多少納米?665nm,649nm,470nm4、選擇不同試劑提取葉綠體色素時(shí),葉綠體色素計(jì)算公式有無(wú)不同?請(qǐng)板 書(shū)用96%乙醇提取時(shí)的三個(gè)公式.答案在26頁(yè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果處5、提取干材料中葉綠體色素一定要用 96%乙醇80%丙酮,而新鮮材料 可以用無(wú)水乙醇無(wú)水丙酮提取,為什么?混合液浸提法提取葉綠體色素6

9、、葉綠體色素提取有那幾種方法,實(shí)驗(yàn)教學(xué)中直選用其中哪一種?為什 么?水浴提取法提取葉綠體色素.應(yīng)選用水浴提取法提取葉綠體色素,由于研磨 法研磨過(guò)程中丙酮的揮發(fā),研磨后轉(zhuǎn)移勻漿時(shí)容易出現(xiàn)誤差,而混合液浸提法需 要時(shí)間充足或樣品太多7、葉綠體色素提取及測(cè)定為什么要在弱光下進(jìn)行?該提取液含有哪幾種色 素?01短.葉綠素和類胡蘿卜素8、葉綠體色素定量分析應(yīng)稱取多少植物樣品,由什么因素決定?0.20.5g由葉綠體色素提取方法決定,研磨法提取葉綠體色素樣品為0.2-0.5g ,混合液浸提法提取葉綠體色素樣品為 0.1-0.2g ,水浴提取法提取 葉綠體色素樣品為0.2-0.5g9、植物樣品放入試管后需參加

10、 96%乙醇多少毫升,在何溫度下水浴多長(zhǎng)時(shí) 問(wèn)?15ml然后放入7080攝氏度的水浴鍋中浸提,直至葉片成黃白色10、定容前植物樣品應(yīng)到達(dá)何種程度?定容至多少毫升?研磨至組織變白.定容至25毫升11、提取時(shí)參加96%乙醇的量能否改變?提取時(shí)間及浸提次數(shù)作何調(diào)整?12、葉綠體色素定量分析為何不需制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,比色時(shí)空白對(duì)照為何 物?答:1. ?2 、如果提取液為80殉酮,采用80殉酮為空白.如果用96%勺乙醇提取, 那么用96%的乙醇為空白13、用于葉綠體色素別離與定量分析所用的提取液相比擬,誰(shuí)的濃度更高?葉綠體色素別離所用的提取液濃度更高葉綠色素提取液須用丙酮溶液適當(dāng)稀釋后才可作理化性質(zhì)觀察14

11、、本實(shí)驗(yàn)中短時(shí)間內(nèi)如何制備別離所需色素溶液?用23g新鮮葉片,以80%5酮或95%S醇研磨提取過(guò)濾于三角瓶中備 用15、如何將葉綠體色素溶液涂抹至長(zhǎng)濾紙條,用何工具?涂在哪一側(cè)? 用毛細(xì)管吸取濃的葉綠體色素提取液涂抹在濾紙條一側(cè)長(zhǎng)邊16、別離過(guò)程中涂抹葉綠體色素的次數(shù)為多少次?每次均要保證什么?2030次,要保證涂抹均勻且要風(fēng)干后涂,色素要多涂抹幾次,風(fēng)干會(huì)再涂 抹第二次,細(xì)、勻、直、滾.涂抹的色素要適量,量多易發(fā)生拖尾,量少色素帶 看不清.17、長(zhǎng)濾紙條風(fēng)干后如何與圓形濾紙結(jié)合?應(yīng)注意什么?長(zhǎng)濾紙條風(fēng)干后卷成紙捻插入圓形濾紙的小孔中,使之與圓形濾紙齊平.應(yīng) 注意紙捻不能突出,圓形濾紙?jiān)谥醒氪?/p>

12、的小圓孔,其周圍必須整潔,否那么別離的 色素不是一個(gè)同心圓18、上述物件應(yīng)放入何處,其中盛有何種液體,它由哪幾種有機(jī)物根據(jù)何 種比例配制?插有紙捻的圓形濾紙平放在康維皿上,其中盛有推動(dòng)劑,按石油醴:丙酮:苯=10:2:1比例配制19、隨著時(shí)間推移,圓形濾紙上會(huì)出現(xiàn)什么變化?何時(shí)應(yīng)將圓形濾紙取出自然風(fēng)干?會(huì)出現(xiàn)被別離的各種色素同心圓環(huán);當(dāng)推動(dòng)劑擴(kuò)散至康維皿邊沿時(shí)20、何謂分配系數(shù),上述別離過(guò)程中流動(dòng)相、固定相分別指什么?分配系數(shù):在平衡狀態(tài)下組分在固定相與流動(dòng)相中的濃度之比;固定相:與長(zhǎng)濾紙條結(jié)合的96%醇;流動(dòng)相:各葉綠體色素21、請(qǐng)板書(shū)chla與KOHS應(yīng)方程式.葉綠素a+KOH母醇+皂化葉

13、綠素22、請(qǐng)表達(dá)上述皂化反響過(guò)程,簡(jiǎn)單介紹操作過(guò)程.反響過(guò)程P23倒數(shù)第二段前兩句葉綠素是一種雙竣酸葉綠酸與甲醇和 葉綠醇形成的復(fù)雜酯.在堿的作用下,發(fā)生皂化反響,生成醇甲醇與葉綠醇 和葉綠素的鹽皂化葉綠素操作過(guò)程p27 5,皂化反響23、上述反響發(fā)生后為何要先參加 3毫升苯再參加1毫升水?它們各自起 何作用?苯是有機(jī)溶劑,溶解類胡蘿卜素和葉黃素,水溶解反響生成的鹽皂化葉綠 素24、反響結(jié)束后上、下兩層分別為何溶液,各自含有哪些物質(zhì)?上層是笨溶液,溶有黃色的胡蘿卜素和葉黃素;下層是稀的乙醇溶液,溶 有皂化葉綠素a和皂化葉綠素b25、何謂葉綠素?zé)晒猬F(xiàn)象?如何觀察葉綠素?zé)晒猬F(xiàn)象?葉綠素?zé)晒猬F(xiàn)象產(chǎn)

14、生的原因是什么?葉綠素吸收光量子轉(zhuǎn)變成激發(fā)態(tài)的葉綠素分子, 很不穩(wěn)定,當(dāng)其回到基態(tài)時(shí)可發(fā)出熒光的現(xiàn)象將濃的葉綠體色素提取液放在試管內(nèi),在直射光下觀察色素溶液在透射光下及反 射光下的顏色.原因:1對(duì)著光源觀察葉綠素提取液時(shí),看到的是葉綠素的吸收光譜.由于葉 綠素提取液吸收的綠光局部最少,故用肉眼觀察到的為綠色透射光.2背光源觀察葉綠素提取液時(shí),看到的是葉綠素分子受激發(fā)后所產(chǎn)生的發(fā)射光譜.當(dāng)葉綠素分子吸收光子后,就由最穩(wěn)定的、能量最低的基態(tài)提升到一個(gè)不穩(wěn)定的、 高能 量的激發(fā)態(tài).由于激發(fā)態(tài)不穩(wěn)定,因此發(fā)射光波 此光波即為熒光,消失能量, 迅速由激發(fā)態(tài)回到基態(tài).26、為什么葉綠體色素提取液能觀察到熒

15、光現(xiàn)象而植株上的葉片看不到熒 光?熒光現(xiàn)象:是指葉綠素在透射光下為綠色,而在反射光下為紅色的現(xiàn)象,這 紅光就是葉綠素受光激發(fā)后發(fā)射的熒光.葉綠素溶液的熒光可達(dá)吸收光的10%生 右.而鮮葉的熒光程度較低,指占其吸收光的 0.11%左右.27、為什么葉綠素容易發(fā)生取代反響?在弱酸作用下,葉綠素分子中的鎂被氫離子取代生成褐色的去鎂葉綠素, 后者遇乙酸銅那么形成藍(lán)綠色的銅代葉綠素.28、取代反響中參加30%醋酸后,由何種離子取代葉綠素中何物? 參加醋酸后,氫離子取代鎂離子,形成去鎂葉綠素.29、取代反響中進(jìn)一步參加醋酸銅粉末后,是何種離子取代之前那種離 子?去鎂葉綠素易與銅離子結(jié)合,形成銅代葉綠素30

16、、反響中參加醋酸銅粉末后需作何處理,參加醋酸銅粉末的量需不需要 限制?微熱,木習(xí)習(xí)坑曰:你說(shuō)需要不需要呢它既然問(wèn)了,必須限制啊,多了多 浪費(fèi)綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)3礦質(zhì)元素對(duì)植物的作用1、脯氨酸在何條件下與何種物質(zhì)生成穩(wěn)定的紅色縮合物?脯氨酸在酸性條件下與印三酮反響生成穩(wěn)定的紅色縮合物.00002、上述紅色縮合物為何要用甲苯萃???比色波長(zhǎng)是多少nnrP由于在測(cè)定液中含有某些也能與印三酮發(fā)生反響的成分,這些成分的反響產(chǎn)物也同樣可以吸收520nm光,如果不用甲苯萃取,會(huì)導(dǎo)致 ODfi偏高,用甲苯萃 取,這些成分的反響產(chǎn)物不溶于甲苯, 所以可以降低實(shí)驗(yàn)誤差.并且甲苯對(duì)生成 穩(wěn)定的紅色縮合物可以充分溶解3、脯氨

17、酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為多少?用前稀釋多少倍,濃度為多少? 100ug每毫升,用前稀釋10倍,為10ug每毫升.4、標(biāo)準(zhǔn)曲線制作中各管參加冰乙酸、酸性西三酮分別為多少ml?分別為2ml和3ml5、上述顯色液應(yīng)在多少C水浴多長(zhǎng)時(shí)間?如何處理后用甲苯萃?。?00攝氏度40min,冷卻6、脯氨酸提取葉片重量如何確定?處理與對(duì)照需等重么? 天平稱取,不需要7、用何種試劑提取植物材料中脯氨酸?多少C水浴多長(zhǎng)時(shí)間?3%勺磺酸水楊酸溶液,100攝氏度10min8、脯氨酸提取液有無(wú)顏色?如何令其顯色?無(wú),加西三酮9、該顯色劑如何配制,如何保證其充分顯色?稱取1.25g甫三酮溶于30mL冰乙酸和20mL6M磷酸溶液中,

18、攪拌加熱低于70C溶解,冷卻后置棕色瓶中沸水浴加熱40min10、脯氨酸含量計(jì)算公式 V和A分別為多少ml?V 為 5ml A 為 2ml11、可溶性糖在何條件下生成糠醛或羥甲基糠醛化合物? 沸水浴12、上述產(chǎn)物與何種物質(zhì)作用形成藍(lán)綠色絡(luò)合物糠醛衍生物?在何波長(zhǎng)比色?慈酮試劑 625nm13、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液為何濃度?標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程稀釋至何系列濃度?200 微克每毫升;0100微克每毫升14、上述稀釋后系列濃度葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液各取多少 ml,與多少ml、何種物質(zhì)反響 顯色?一毫升;加5mllc酮試劑15、顯色過(guò)程需要在多少C水浴多長(zhǎng)時(shí)間?沸水;10min16、為什么要將顯色時(shí)間限制在一定范圍以內(nèi)?由

19、于意酮與可溶性糖反響的呈色強(qiáng)度隨時(shí)間變化,故必須在反響后立即在同 一時(shí)間內(nèi)比色17、可溶性糖提取液定容后為何要過(guò)濾?否那么對(duì)反響有何不良影響?以防有殘?jiān)?不能準(zhǔn)確測(cè)出可溶性糖的含量 由于細(xì)胞壁中的纖維素、半纖維 素等與慈酮試劑發(fā)生反響.增加了測(cè)定誤差.18、過(guò)濾后提取液1ml與5mllc酮試劑反響過(guò)程應(yīng)注意哪些問(wèn)題?由于意酮與可溶性糖反響的呈色強(qiáng)度隨時(shí)間變化,故必須在反響后立即在同 一時(shí)間內(nèi)比色.燒杯保持枯燥,充分?jǐn)嚢杈徛齾⒓?5ml濃硫酸 濃硫酸遇水會(huì)產(chǎn) 生大量的熱19、慈酮試劑如何配制、如何保存?100mg經(jīng)過(guò)純化的慈酮溶于100ml硫酸溶液76ml相對(duì)密度1.84的濃硫酸加24ml水貯藏在棕色瓶中20、可溶性糖含量計(jì)算結(jié)果為何單位?ug 每 ml21、應(yīng)用慈酮法測(cè)得的可溶性糖包括哪些?戊糖與已糖,所有寡糖類和多糖類,其中包括淀粉、纖維素等22、何謂電導(dǎo)率?為何逆境脅迫能使溶液電導(dǎo)率值增大?電導(dǎo)率是以數(shù)字表示的溶液傳導(dǎo)電流的水平.植物組織受到逆境傷害時(shí),由 于膜的功能受損或結(jié)構(gòu)破壞透性增大,細(xì)胞內(nèi)各種水溶性物質(zhì)不同程度的外滲, 將植物組織浸入無(wú)離子水中,水的電導(dǎo)率將因電解質(zhì)的外滲而加大,傷害愈重, 外滲愈多,電導(dǎo)率的增加也愈大P55實(shí)驗(yàn)根本原理23、電導(dǎo)率測(cè)定對(duì)水和容器有何要求?應(yīng)該如何保證?要求水清澈、流

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