常用培養(yǎng)基的制備

1、技能訓(xùn)練技能訓(xùn)練 常用培養(yǎng)基的制備常用培養(yǎng)基的制備 熟悉培養(yǎng)基制備的基本程序會(huì)制備常用的培養(yǎng)基 實(shí)訓(xùn)目標(biāo)高壓蒸氣滅菌器、電熱干燥箱、電爐、天平、量筒、漏斗、試管、培養(yǎng)皿、燒杯、三角燒瓶、等 儀器材料方法方法步驟步驟（一）肉湯培養(yǎng)基（一）肉湯培養(yǎng)基（二）瓊脂培養(yǎng)基（二）瓊脂培養(yǎng)基（三）半固體培養(yǎng)基（三）半固體培養(yǎng)基（四）血液瓊脂培養(yǎng)基（四）血液瓊脂培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基 方法步驟方法步驟計(jì)算稱量溶化調(diào)PH分裝滅菌無(wú)菌檢驗(yàn)備用 （一）肉湯培養(yǎng)基（一）肉湯培養(yǎng)基（二）瓊脂培養(yǎng)基（二）瓊脂培養(yǎng)基（三）半固體培養(yǎng)基（三）半固體培養(yǎng)基（四）血液瓊脂培養(yǎng)基（四）血液瓊脂培養(yǎng)基（一）肉湯培養(yǎng)基（一）肉湯培

2、養(yǎng)基1成分 牛肉膏35g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，蒸餾水1000ml。2制法 將牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉加蒸餾水后，加熱溶解。矯正pH至7.47.6，過濾分裝。置高壓蒸氣滅菌器內(nèi)，121.3滅菌20min即成。3用途 可供一般細(xì)菌生長(zhǎng)，同時(shí)也是制作一般培養(yǎng)基的基礎(chǔ)原料。供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌分離培養(yǎng)，亦可供溶血性的觀察和保存菌種。（二）固體瓊脂培養(yǎng)基（二）固體瓊脂培養(yǎng)基1計(jì)算：計(jì)算： 1000 ml蒸餾水中應(yīng)加營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉31.3g，再根據(jù)培養(yǎng)基的需要量確定營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉的用量。 營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉的量=31.315n/1000 （g） 其中： 15代表一個(gè)平板需要營(yíng)養(yǎng)瓊脂約15 ml； n代表要做的培養(yǎng)基平

3、板的數(shù)量 2稱量：稱量：用普通天平準(zhǔn)確稱量出營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉的量，用量筒量出相應(yīng)的 蒸餾水的量，要盡量準(zhǔn)確。 3溶化：溶化：將營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉和蒸餾水倒入搪瓷缸中，于電爐上加熱溶化，邊加熱邊攪拌，沸騰時(shí)立即從電爐上拿下，等泡沫消失后再放在電爐上加熱，注意不能讓瓊脂溢出，煮沸23次。 4分裝：倒平板或倒試管分裝：倒平板或倒試管若做平板培養(yǎng)基應(yīng)倒于培養(yǎng)皿中，每板約15ml左右，以剛好覆蓋平皿底為易。若做斜面培養(yǎng)基應(yīng)倒入試管中，量為試管的1/35滅菌：用高壓滅菌器滅菌滅菌：用高壓滅菌器滅菌包扎好，直立放入內(nèi)筒中，在121.3滅菌20-30min。滅菌完畢后，將平板培養(yǎng)基拿出平放于桌面，凝固前勿動(dòng)；將試管培養(yǎng)基擺

4、成斜面，凝固前勿動(dòng)。 6無(wú)菌檢驗(yàn)：無(wú)菌檢驗(yàn)： 隨機(jī)抽取幾個(gè)平板或試管培養(yǎng)基于溫箱中培養(yǎng)24小時(shí)，若無(wú)菌 生長(zhǎng)則為合格。7備用：將合格的培養(yǎng)基放入冰箱，在0-4中保存?zhèn)溆?。（三）半固體培養(yǎng)基（三）半固體培養(yǎng)基肉湯培養(yǎng)基中加入0.3%0.5%瓊脂粉制成，用于菌種的保存或觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。 （四）血液瓊脂培養(yǎng)基（四）血液瓊脂培養(yǎng)基將滅菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂冷至4550，以無(wú)菌操作，加入5%10%的無(wú)菌血液（或脫纖維血），然后傾注平皿或分裝試管制成斜面。 課后作業(yè)課后作業(yè)1.寫出實(shí)習(xí)報(bào)告；2.掌握普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的制備過程（三）半固體培養(yǎng)基（三）半固體培養(yǎng)基肉湯培養(yǎng)基中加入0.3%0.5%瓊脂粉制成，用于菌種的保存或觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。 （四）血液瓊脂培養(yǎng)基（四）血液瓊脂培養(yǎng)基將滅菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂冷至4550，以無(wú)菌操作，加入5%10