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文檔簡介
1、生物科技行業(yè)) 分子生物 學試題及答案 (整理版 )分子生物學試題及答案壹、名詞解釋1 cDNA 和 cccDNA :cDNA 是由 mRNA 通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈 DNA ;cccDNA 是游 離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形 DNA 。2 標準折疊單位 :蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)單元 螺旋和 折疊通過各種連接多肽能夠組成特殊 幾何排列的結(jié)構(gòu)塊,此種確定的折疊類型通常稱為超二級結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級結(jié)構(gòu)都能夠 用這些折疊類型,乃至他們的組合型來予以描述,因此又將其稱為標準折疊單位。3 CAP :環(huán)腺苷酸( cAMP )受體蛋白 CRP ( cAMPreceptorprotein ),cAMP 和 CR
2、P結(jié) 合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白 CAP ( cAMPactivatedprotein )4 回文序列 : DNA 片段上的壹段所具有的反向互補序列,常是限制性酶切位點。5 micRNA :互補干擾 RNA 或稱反義 RNA ,和 mRNA 序列互補, 可抑制 mRNA 的翻譯。6 核酶:具有催化活性的 RNA ,在 RNA 的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7模體 :蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓撲結(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8 信號肽:在蛋白質(zhì)合成過程中 N端有 1536 個氨基酸殘基的肽段,引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9 弱化子 :在操縱區(qū)和結(jié)構(gòu)基因之間的壹段能夠終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列
3、。10 魔斑:當細菌生長過程中,遇到氨基酸全面缺乏時,細菌將會產(chǎn)生壹個應(yīng)急反應(yīng),停止 全部基因的表達。 產(chǎn)生這壹應(yīng)急反應(yīng)的信號是鳥苷四磷酸 (ppGpp) 和鳥苷五磷酸 ( pppGpp )。 PpGpp 和 pppGpp 的作用不只是壹個或幾個操縱子,而是影響壹大批,所以稱他們是超級 調(diào)控子或稱為魔斑。11 上游啟動子元件 :是指對啟動子的活性起到壹種調(diào)節(jié)作用的DNA 序列,-10 區(qū)的 TATA、-35 區(qū)的 TGACA 及增強子,弱化子等。12 DNA 探針:是帶有標記的壹段已知序列 DNA ,用以檢測未知序列、篩選目的基因等方 面廣泛應(yīng)用。13SD 序列:是核糖體和 mRNA 結(jié)合序列
4、,對翻譯起到調(diào)控作用。14 單克隆抗體 :只針對單壹抗原決定簇起作用的抗體。15 考斯質(zhì)粒 :是經(jīng)過人工構(gòu)建的壹種外源 DNA 載體,保留噬菌體倆端的 COS 區(qū),和質(zhì) 粒連接構(gòu)成。16 藍-白斑篩選 :含 LacZ 基因(編碼 半乳糖苷酶)該酶能分解生色底物X-gal(5- 溴-4-氯-3- 吲哚 -D- 半乳糖苷 )產(chǎn)生藍色,從而使菌株變藍。當外源DNA 插入后, LacZ 基因不能表達,菌株呈白色,以此來篩選重組細菌。稱之為藍-白斑篩選。17 順式作用元件 :在 DNA 中壹段特殊的堿基序列,對基因的表達起到調(diào)控作用的基因元件。18 Klenow 酶:DNA 聚合酶 I 大片段,只是從
5、DNA 聚合酶 I 全酶中去除了 5' 3'外 切酶活性19 錨定 PCR :用于擴增已知壹端序列的目的DNA 。在未知序列壹端加上壹段多聚 dG 的尾巴,然后分別用多聚 dC 和已知的序列作為引物進行 PCR 擴增。20 融合蛋白 :真核蛋白的基因和外源基因連接,同時表達翻譯出的原基因蛋白和外源蛋白 結(jié)合在壹起所組成的蛋白質(zhì)。二、填空1 DNA 的物理圖譜是 DNA 分子的( 限制性內(nèi)切酶酶解 )片段的排列順序。2 RNA 酶的剪切分為( 自體催化 )、(異體催化 )倆種類型。3 原核生物中有三種起始因子分別是( IF-1 )、(IF-2 )和( IF-3 )。4 蛋白質(zhì)的跨
6、膜需要( 信號肽 )的引導(dǎo),蛋白伴侶的作用是(輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的 蛋白質(zhì))。5 啟動子中的元件通常能夠分為倆種:核心啟動子元件 )和( 上游啟動子元件 )。6 分子生物學的研究內(nèi)容主要包含( 結(jié)構(gòu)分子生物學 )、(基因表達和調(diào)控 )、(DNA 重組技 術(shù))三部分。7 證明 DNA 是遺傳物質(zhì)的倆個關(guān)鍵性實驗是( 肺炎球菌感染小鼠 )、(T2 噬菌體感染大腸 桿菌 )這倆個實驗中主要的論點證據(jù)是: (生物體吸收的外源 DNA 改變了其遺傳潛能 )。8 hnRNA 和 mRNA 之間的差別主要有倆點: ( hnRNA 在轉(zhuǎn)變?yōu)?mRNA 的過程中經(jīng)過剪 接,)、( mRNA 的 5末端被加上
7、壹個 m7pGppp 帽子,在 mRNA3末端多了壹個多聚腺苷酸 (polyA) 尾巴 )。9 蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點是( 亞基對 DNA 的利用來說是壹種經(jīng)濟的方法 )、( 能夠減少 蛋白質(zhì)合成過程中隨機的錯誤對蛋白質(zhì)活性的影響)、( 活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉 )。10 蛋白質(zhì)折疊機制首先成核理論的主要內(nèi)容包括(成核)、(結(jié)構(gòu)充實 )、(最后重排 )。11 半乳糖對細菌有雙重作用;壹方面(能夠作為碳源供細胞生長 );另壹方面( 它又是細胞壁的成分 )。所以需要壹個不依賴于 cAMP CRP 的啟動子 S2 進行本底水平的永久型合 成;同時需要壹個依賴于 cAMP CRP的啟動子
8、 S1對高水平合成進行調(diào)節(jié)。 有G 時轉(zhuǎn)錄從 ( S2 )開始,無 G 時轉(zhuǎn)錄從( S1)開始。12 DNA 重組技術(shù)也稱為( 基因克隆 )或( 分子克隆 )。最終目的是( 把壹個生物體中的遺 傳信息 DNA 轉(zhuǎn)入另壹個生物體 )。典型的 DNA 重組實驗通常包含以下幾個步驟: 提取供體生物的目的基因(或稱外源基因) ,酶接連接到另壹 DNA 分子上(克隆載體) , 形成壹個新的重組 DNA 分子。 將這個重組 DNA 分子轉(zhuǎn)入受體細胞且在受體細胞中復(fù)制保存,這個過程稱為轉(zhuǎn)化。 對那些吸收了重組 DNA 的受體細胞進行篩選和鑒定。 對含有重組 DNA 的細胞進行大量培養(yǎng),檢測外援基因是否表達。
9、13 、質(zhì)粒的復(fù)制類型有倆種:受到宿主細胞蛋白質(zhì)合成的嚴格控制的稱為(嚴緊型質(zhì)粒 ),不受宿主細胞蛋白質(zhì)合成的嚴格控制稱為( 松弛型質(zhì)粒 )。14 PCR 的反應(yīng)體系要具有以下條件:a、被分離的目的基因倆條鏈各壹端序列相互補的 DNA 引物(約 20 個堿基左右) 。b 、具有熱穩(wěn)定性的酶如: TagDNA 聚合酶。c 、 dNTPd 、作為模板的目的 DNA 序列15 PCR的基本反應(yīng)過程包括: (變性)、(退火)、(延伸 )三個階段。16 、轉(zhuǎn)基因動物的基本過程通常包括: 將克隆的外源基因?qū)氲揭紓€受精卵或胚胎干細胞的細胞核中; 接種后的受精卵或胚胎干細胞移植到雌性的子宮; 完成胚胎發(fā)育,
10、生長為后代且?guī)в型庠椿颍?利用這些能產(chǎn)生外源蛋白的動物作為種畜,培育新的純合系。17 雜交瘤細胞系的產(chǎn)生是由( 脾 B)細胞和( 骨髓瘤)細胞雜交產(chǎn)生的,由于( 脾細胞 ) 能夠利用次黃嘌呤, (骨細胞)提供細胞分裂功能,所以能在 HAT 培養(yǎng)基中生長。18 隨著研究的深入第壹代抗體稱為( 多克隆抗體 )、第二代( 單克隆抗體 )、第三代( 基因 工程抗體 )。19 目前對昆蟲病毒的基因工程改造主要集中于桿狀病毒,表當下引入(外源毒蛋白基因 );(擾亂昆蟲正常生活周期的基因 );( 對病毒基因進行修飾 )。20 哺乳類 RNA 聚合酶啟動子中常見的元件TATA、GC、CAAT 所對應(yīng)的反式作
11、用蛋白 因子分別是( TFIID )、( SP-1 )和( CTF/NF1 )。21 RNA 聚合酶的基本轉(zhuǎn)錄因子有、 TF-A、TF-B、TFII-D、TF-E 他們的結(jié)合順序 是:(D、A、B、E)。其中 TFII-D 的功能是( 和 TATA 盒結(jié)合 )。22 和 DNA 結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子大多以二聚體形式起作用,轉(zhuǎn)錄因子和DNA 結(jié)合的功能域常見有以下幾種( 螺旋-轉(zhuǎn)角 -螺旋 )、(鋅指模體 )、(堿性 -亮氨酸拉鏈模體 )。23 限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是(在對稱軸 5' 側(cè)切割產(chǎn)生 5' 粘端)、(在對稱軸 3'側(cè)切割產(chǎn)生 3' 粘端)(在
12、對稱軸處切割產(chǎn)生平段 )。24質(zhì)粒 DNA 具有三種不同的構(gòu)型分別是: ( SC構(gòu)型)、(oc 構(gòu)型)、(L 構(gòu)型)。在電泳中 最前面的是( SC 構(gòu)型 )。25 外源基因表達系統(tǒng),主要有( 大腸桿菌 )、(酵母)、(昆蟲)和( 哺乳類細胞表 )。26 轉(zhuǎn)基因動物常用的方法有: (逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法 )、(DNA 顯微注射法 )、(胚胎干細胞法 )。 三、簡答1 分別說出 5 種之上 RNA 的功能?轉(zhuǎn)運 RNAtRNA 轉(zhuǎn)運氨基酸; 核蛋白體 RNArRNA 核蛋白體組成成; 信使 RNAmRNA 蛋白 質(zhì)合成模板;不均壹核 RNAhnRNA 成熟 mRNA 的前體;小核 RNAsnRNA 參
13、和 hnRNA 的剪接;小胞漿 RNAscRNA/7SL-RNA 蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號識別體的組成成分; 反義 RNAanRNA/micRNA 對基因的表達起調(diào)節(jié)作用;核酶 RibozymeRNA 有酶活性的 RNA2 原核生物和真核生物啟動子的主要差別?原核生物TTGACA-TATAAT 起始位點-35-10 真核生物增強子 -GC-CAATTATAA 5mGpp 起始位點-110-70-253 對天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表當下哪些方面? 天然質(zhì)粒往往存在著缺陷,因而不適合用作基因工程的載體,必須對之進行改造構(gòu)建: a 、加入合適的選擇標記基因,如倆個之上,易于用作選擇,通常是抗生素基因
14、。b 、增加或減少合適的酶切位點,便于重組。 c、縮短長度,切去不必要的片段,提高導(dǎo)入效率,增加裝載量。d 、改變復(fù)制子,變嚴緊為松弛,變少拷貝為多拷貝。 e、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件4 舉例說明差示篩選組織特異 cDNA 的方法? 制備倆種細胞群體,目的基因在其中壹種細胞中表達或高表達,在另壹種細胞中不表達或低 表達,然后通過雜交對比找到目的基因。例如:在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中, 腫瘤細胞會呈現(xiàn)和正常細胞表達水平不同的 mRNA ,因此, 能夠通過差示雜交篩選出和腫瘤相關(guān)的基因。 也可利用誘導(dǎo)的方法, 篩選出誘導(dǎo)表達的基因。5 雜交瘤細胞系的產(chǎn)生和篩選?脾 B 細胞 + 骨髓瘤
15、細胞,加聚乙二醇( PEG )促進細胞融合, HAT 培養(yǎng)基中培養(yǎng)(內(nèi)含次黃 嘌呤、氨基蝶呤、 T)生長出來的脾 B- 骨髓瘤融合細胞繼續(xù)擴大培養(yǎng)。細胞融合物中包含:脾- 脾融合細胞:不能生長,脾細胞不能體外培養(yǎng)。骨- 骨融合細胞: 不能利用次黃嘌呤, 但可通過第二途徑利用葉酸仍原酶合成嘌呤。 氨基蝶呤 對葉酸仍原酶有抑制作用,因此不能生長。骨- 脾融合細胞:在 HAT 中能生長,脾細胞能夠利用次黃嘌呤,骨細胞提供細胞分裂功能。6 、利用雙脫氧末端終止法( Sanger 法)測定 DNA 壹級結(jié)構(gòu)的原理和方法? 原理是采用核苷酸鏈終止劑 2 ,3 ,- 雙脫氧核苷酸終止 DNA 的延長。由于它
16、缺少形成 3/5/ 磷酸二脂鍵所需要的 3-OH ,壹旦參入到 DNA 鏈中, 此 DNA 鏈就不能進壹步延長。 根據(jù)堿 基配對原則,每當 DNA 聚合酶需要 dNMP 參入到正常延長的 DNA 鏈中時,就有倆種可能 性,壹是參入 ddNTP ,結(jié)果導(dǎo)致脫氧核苷酸鏈延長的終止; 二是參入 dNTP ,使 DNA 鏈仍可繼 續(xù)延長,直至參入下壹個 ddNTP 。根據(jù)這壹方法, 就可得到壹組以 ddNTP 結(jié)尾的長短不壹 的 DNA 片段。方法是分成四組分別為 ddAMP 、ddGMP 、 ddCMP 、ddTMP 反應(yīng)后,聚丙烯酰胺凝膠電 泳按泳帶可讀出 DNA 序列。7 、激活蛋白( CAP
17、)對轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用?環(huán)腺苷酸( cAMP )受體蛋白 CRP( cAMPreceptorprotein),cAMP 和 CRP 結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白 CAP( cAMPactivatedprotein )。當大腸桿菌生長在缺乏葡萄糖的培養(yǎng) 基中時, CAP 合成量增加, CAP 具有激活乳糖( Lac )等啟動子的功能。壹些依賴于 CRP 的啟動子缺乏壹般啟動子所具有的典型的 -35 區(qū)序列特征( TTGACA )。因此 RNA 聚合酶難 以和其結(jié)合。CAP 的存在(功能) :能顯著提高酶和啟動子結(jié)合常數(shù)。主要表現(xiàn)以下二方面: CAP 通過改變啟動子的構(gòu)象以及和酶的相互作用幫助酶分
18、子正確定向,以便和 -10 區(qū)結(jié)合,起到取代 -35 區(qū)功能的作用。 CAP 仍能抑制 RNA 聚合酶和 DNA 中其它位點的結(jié)合,從而提高和其特定啟動子結(jié)合的 概率。8 、典型的 DNA 重組實驗通常包括哪些步驟? a 、提取供體生物的目的基因(或稱外源基因) ,酶接連接到另壹 DNA 分子上(克隆載體) 形成壹個新的重組 DNA 分子。b 、將這個重組 DNA 分子轉(zhuǎn)入受體細胞且在受體細胞中復(fù)制保存,這個過程稱為轉(zhuǎn)化。c 、對那些吸收了重組 DNA 的受體細胞進行篩選和鑒定。d 、對含有重組 DNA 的細胞進行大量培養(yǎng),檢測外援基因是否表達。9 、基因文庫的構(gòu)建對重組子的篩選舉出 3 種方
19、法且簡述過程。 抗生素抗性篩選、抗性的插入失活、蘭 - 白斑篩選或 PCR 篩選、差式篩選、 DNA 探針 多數(shù)克隆載體均帶有抗生素抗性基因(抗氨芐青霉素、四環(huán)素) 。當質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌中后, 該菌便獲得抗性,沒有轉(zhuǎn)入的不具有抗性。但不能區(qū)分是否已重組。 在含有倆個抗性基因的載體中,如果外源 DNA 片段插入其中壹個基因且導(dǎo)致該基因失活, 就可用倆個分別含不同藥物的平板對照篩選陽性重組子。如 pUC 質(zhì)粒含 LacZ 基因(編碼 半乳糖苷酶)該酶能分解生色底物 X-gal(5- 溴-4- 氯-3- 吲哚 -D- 半乳糖苷 )產(chǎn)生藍色,從而 使菌株變藍。 當外源 DNA 插入后, LacZ 基因
20、不能表達, 菌株呈白色, 以此來篩選重組細菌。10 、說明通過胚胎干細胞獲得轉(zhuǎn)基因動物的基本過程?胚胎干細胞( embryonicstemcell,ES ):是胚胎發(fā)育期的胚細胞,能夠人工培養(yǎng)增殖且具有 分化成其它類型細胞的功能。ES 細胞的培養(yǎng):分離胚泡的內(nèi)層細胞團進行培養(yǎng)。 ES 在無飼養(yǎng)層中培養(yǎng)時會分化為肌細胞、 N 細胞等多種功 能細胞,在含有成纖維細胞中培養(yǎng)時 ES 將保持分化功能。能夠?qū)?ES 進行基因操作,不影響它的分化功能能夠定點整合,解決了隨機整合的問題。向 胚胎干細胞導(dǎo)入外源基因,然后植入到待孕雌鼠子宮,發(fā)育成幼鼠,雜交獲得純合鼠。 蛋白質(zhì)的生物合成 (壹)名詞解釋1 翻譯
21、 (translation) :以 mRNA 為模板,氨酰 -tRNA 為原料直接供體,在多種蛋白質(zhì)因 子和酶的參和下,在核糖體上將 mRNA 分子上的核苷酸順序表達為有特定氨基酸順序的蛋 白質(zhì)的過程。2 密碼子 (codon) : mRNA 中堿基順序和蛋白質(zhì)中氨基酸順序的對應(yīng)關(guān)系是通過密碼實現(xiàn) 的, mRNA 中每三個相鄰的堿基決定壹個氨基酸,這三個相鄰的堿基稱為壹個密碼子。3 密碼的簡且性 (degeneracy) :個氨基酸具有倆個之上密碼子的現(xiàn)象。4 同義密碼子 (synonymcodon) :為同種氨基酸編碼的各個密碼子,稱為同義密碼了。5 變偶假說 (wobblehypothes
22、is) :指反密碼子的前倆個堿基 (3 '- 端 ) 按照標準和密碼子的 前倆個堿基 (5'- 端)配對,而反密碼子中的第三個堿墓則有某種程度的變動,使其有可能和 幾種不同的堿基配對。6 移碼突變 (frame-shiftmutation) :在 mRNA 中,若插入或刪去壹個核苷酸,就會使讀 碼發(fā)錯誤,稱為移碼,由于移碼而造成的突變、稱移碼突變。7 ,同功受體 (isoacceptor) :轉(zhuǎn)運同壹種氨基酸的幾種 tRNA 稱為同功受體。8 反密碼子 (anticodon) :指 tRNA 反密碼子環(huán)中的三個核苷酸的序列,在蛋白質(zhì)合成過 程中通過堿基配對,識別且結(jié)合到 mRN
23、A 的特殊密碼上。9 多核糖體 (polysome) : mRNA 同時和若干個核糖體結(jié)合形成的念珠狀結(jié)構(gòu),稱為多核 糖體。(二)問答題1 參和蛋白質(zhì)生物合成體系的組分有哪些 ?它們具有什么功能 ? mRNA :蛋白質(zhì)合成的模板; tRNA :蛋白質(zhì)合成的氨基酸運載工具;核糖體:蛋白 質(zhì)合成的場所;輔助因子: (a)起始因子 - 參和蛋白質(zhì)合成起始復(fù)合物形成; (b)延長因 子 - 肽鏈的延伸作用; (c) 釋放因子壹 - 終止肽鏈合成且從核糖體上釋放出來。2 遺傳密碼是如何破譯的 ?提示:三個突破性工作 (1)體外翻譯系統(tǒng)的建立; (2) 核糖體結(jié)合技術(shù); (3) 核酸的人工合成。3 遺傳密
24、碼有什么特點 ?(1) 密碼無標點:從起始密碼始到終止密碼止,需連續(xù)閱讀,不可中斷。增加或刪除某個 核苷酸會發(fā)生移碼突變。(2) 密碼不重疊:組成壹個密碼的三個核苷酸只代表壹個氨基酸,只使用壹次,不重疊使用。(3) 密碼的簡且性:在密碼子表中,除 Met 、Trp 各對應(yīng)壹個密碼外,其余氨基酸均有倆個之 上的密碼,對保持生物遺傳的穩(wěn)定性具有重要意義。(4) 變偶假說:密碼的專壹性主要由頭倆位堿基決定,第三位堿基重要性不大,因此在和反密 碼子的相互作用中具有壹定的靈活性。(5) 通用性及例外: 地球上的壹切生物都使用同壹套遺傳密碼, 但近年來已發(fā)現(xiàn)某些個別例外 現(xiàn)象,如某些哺乳動物線粒體中的 U
25、GA 不是終止密碼而是色氨酸密碼子。(6) 起始密碼子 AUG ,同時也代表 Met ,終止密碼子 UAA 、UAG、UGA 使用頻率不同。4 簡述三種 RNA 在蛋白質(zhì)生物合成中的作用。(1) mRNA :DNA 的遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄作用傳遞給 mRNA , mRNA 作為蛋白質(zhì)合成模 板,傳遞遺傳信息,指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成。(2) tRNA :蛋白質(zhì)合成中氨基酸運載工具, tRNA 的反密碼子和 mRNA 上的密碼子相互作用, 使分子中的遺傳信息轉(zhuǎn)換成蛋白質(zhì)的氨基酸順序是遺傳信息的轉(zhuǎn)換器。(3) rRNA 核糖體的組分,在形成核糖體的結(jié)構(gòu)和功能上起重要作用,它和核糖體中蛋白質(zhì)以 及其它輔助因子壹起
26、提供了翻譯過程所需的全部酶活性。5 簡述核糖體的活性中心的二位點模型及三位點模型的內(nèi)容。(1) 二位點模型 A 位:氨酰 -tRNA 進入且結(jié)合的部位; P 位:起始氨酰 -tRNA 或正在延伸的 肽基 -tRNA 結(jié)合部位,也是無載的 tRNA 從核糖體上離開的部位。 (2)三位點模型大腸桿菌 上的 70S 核糖體上除 A 位和 P 位外,仍存在第三個結(jié)合 tRNA 的位點,稱為 E 位,它特異 地結(jié)合無負載的 tRNA 及無負載的 tRNA 最后從核糖體上離開的位點。6 氨基酸在蛋白質(zhì)合成過程中是怎樣被活化的 ?催化氨基酸活化的酶稱氨酰 -tRNA 合成酶,形成氨酰 -tRNA ,反應(yīng)分倆
27、步進行:(1) 活化需 Mg2+ 和 Mn2+ ,由 ATP供能,由合成酶催化,生成氨基酸 -AMP- 酶復(fù)合物。,(2) 轉(zhuǎn)移在合成酶催化下將氨基酸從氨基酸 AMP 酶復(fù)合物上轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的 tRNA 上,形 成氨酰 -tRNA 。7 簡述蛋白質(zhì)生物合成過程。蛋白質(zhì)合成可分四個步驟,以大腸桿菌為例:(1) 氨基酸的活化:游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參和蛋白質(zhì)合成,由氨酰-tRNA 合成酶催化,消耗 1 分子 ATP,形成氨酰 -tRNA 。(2) 肽鏈合成的起始:由起始因子參和, mRNA 和 30S 小亞基、 50S 大亞基及起始甲酰甲硫 氨酰-tRNA(fMet-tRNAt) 形
28、成 70S 起始復(fù)合物,整個過程需 GTP 水解提供能量。(3) 肽鏈的延長:起始復(fù)合物形成后肽鏈即開始延長。首先氨酰 -tRNA 結(jié)合到核糖體的 A 位, 然后,由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化和 P 位的起始氨基酸或肽?;纬呻逆I, tRNAf 或空載 tRNA 仍留 在 P 位最后核糖體沿 mRNA5' 3 '方向移動壹個密碼子距離, A 位上的延長壹個氨基 酸單位的肽酰 -tRNA 轉(zhuǎn)移到 P位,全部過程需延伸因子 EF-Tu、EF-Ts,能量由 GTP 提供。(4) 肽鏈合成終止,當核糖體移至終止密碼UAA 、UAG 或 UGA 時,終止因子 RF-1 、RF-2識別終止密碼,且使肽
29、酰轉(zhuǎn)移酶活性轉(zhuǎn)為水解作用,將 P 位肽酰 -tRNA 水解,釋放肽鏈,合 成終止。8 蛋白質(zhì)合成中如何保證其翻譯的正確性提示: (1) 氨基酸和 tRNA 的專壹結(jié)合,保證了 tRNA 攜帶正確的氨基酸; (2) 攜帶氨基酸的 tRNA 對 mRNA 的識別, mRNA 上的密碼子和 tRNA 上的反密碼子的相互識別,保證了遺 傳信息準確無誤地轉(zhuǎn)譯; (3) 起始因子及延長因子的作用,起始因子保證了只有起始氨酰 -tRNA 能進入核糖體 P 位和起始密碼子結(jié)合, 延伸因子的高度專壹性, 保證了起始 tRNA 攜 帶的 fMet 不進入肽鏈內(nèi)部; (4) 核糖體三位點模型的 E位和 A 位的相互
30、影響, 能夠防止不正 確的氨酰 -tRNA 進入 A 位,從而提高翻譯的正確性; (5) 校正作用:氨酰 -tRNA 合成酶和 tRNA 的校正作用; 對占據(jù)核糖體 A 位的氨酰 -tRNA 的校對; 變異校對即基因內(nèi)校對和基因間校對 等多種校正作用能夠保證翻譯的正確。9 原核細胞和真核細胞在合成蛋白質(zhì)的起始過程有什么區(qū)別。(1)起始因子不同:原核為 IF-1 ,IF-2 ,IF-2 ,真核起始因子達十幾種。(2) 起始氨酰 -tRNA 不同:原核為 fMet-tRNAf ,真核 Met-tRNAi(3) 核糖體不同:原核為 70S核粒體,可分為30S和50S倆種亞基,真核為 80S核糖體,
31、分 40S 和 60S 倆種亞基10 蛋白質(zhì)合成后的加工修飾有哪些內(nèi)容 ?提示: (1) 水解修飾; (2)肽鍵中氨基酸殘基側(cè)鏈的修飾; (3) 二硫鍵的形成; (4)輔基的連接及 亞基的聚合。11 蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)是怎樣形成的 ? 提示:蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)是由氨基酸的順序決定的,不同的蛋白質(zhì)有不同的氨基酸順序,各 自按壹定的方式折疊而成該蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)。折疊是在自然條件下自發(fā)進行的,在生理條 件下,它是熱力學上最穩(wěn)定的形式,同時離不開環(huán)境因素對它的影響。對于具有四級結(jié)構(gòu)的 蛋白質(zhì),其亞基能夠由壹個基因編碼的相同肽鏈組成,也能夠由不同肽鏈組成,不同肽鏈能夠通過壹條肽鏈加工剪切形成,或由幾個不同
32、單順反子mRNA 翻譯,或由多順反子 mRNA翻譯合成。12 真核細胞和原核細胞核糖體組成有什么不同?如何證明核糖體是蛋白質(zhì)的合成場所?原核細胞: 70S 核糖體由 30S 和 50S 倆個亞基組成;真核細胞: 80S 核糖體由 40S 和 60S 倆個亞基組成。利用放射性同位素標記法,通過核糖體的分離證明之。13. 已知壹種突變的噬菌體蛋白是由于單個核苷酸插入引起的移碼突變的,將正常的蛋白質(zhì) 和突變體蛋白質(zhì)用胰蛋白酶消化后,進行指紋圖分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有壹個肽段的差異,測得 其基酸順序如下:正常肽段 Met-Val-Cys-Val-Arg突變體肽段 Met-Ala-Met-Arg( 1 )什么
33、核苷酸插入到什么地方導(dǎo)致了氨基酸順序的改變?(2 )推導(dǎo)出編碼正常肽段和突變體肽段的核苷酸序列.提示:有關(guān)氨基酸的簡且密碼分別為Val:GUUGUCGUAGUGArg:CGUCGCCGACGAGAAGGCys:UGUUGCAla:GCUGCCGCACGC提示: (1)在正常肽段的第壹個 Val的密碼 GUA 的G后插入了壹個 C;(2)正常肽段的核苷酸 序列為: AUGGUAUGCGU CG;突變體肽段的核苷酸序列為: AUGGCUAUGCGU 。14. 試列表比較核酸和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。核酸( Nucleicacids )蛋白質(zhì)( Proteins )DNARNA壹級結(jié)構(gòu)核苷酸序列氨基酸排列順序
34、PrimarystructureAGTTCT 或 AGUUCU的排列順序肽鍵3 ,5 ,-磷酸二酯鍵二級結(jié)構(gòu)Secondarystructure雙螺旋主要是氫鍵,堿基堆積力配對(莖 - 環(huán)結(jié)構(gòu))(同左)有規(guī)則重復(fù)的構(gòu)象( -helix , sheet ,-turn ) 氫鍵三級結(jié)構(gòu)Tertiarystructure超螺旋RNA 空間構(gòu)象壹條肽鏈的空間構(gòu) 象范德華力氫鍵疏 水作用鹽橋二硫鍵 等四級結(jié)構(gòu)Quaternarystructure多條肽鏈(或不同蛋白)15. 試比較原核生物和真核生物的翻譯。 原核生物和真核生物的翻譯比較如下:僅述真核生物的,原核生物和此相反。( 1).起始 Met 不需
35、甲酰化;( 2).無 SD 序列,但需要壹個掃描過程; ( 3).tRNA 先于 mRNA 和核糖體小亞基結(jié)合; (4).起始因子比較多; (5 ).只壹個終止釋放因子。(三)填空題1 蛋白質(zhì)的生物合成是以 _ mRNA 為模板,以 _ 氨酰 -tRNA _為原料直接供體,以 _ 核糖體 為合成楊所。2 生物界共有 64 個密碼子, 其中 61_ _個為氨基酸編碼, 起始密碼子為 _AUG;終止密碼子為 _ UAA _ 、_ UAG _、_ UGA _。3原核生物的起始 tRNA 以 tRNAf 表示,真核生物的起始 tRNA 以 tRNAi _ 表示,延伸中的甲硫氨酰 tRNA 以 _ tR
36、NAm _表示。4 植物細胞中蛋白質(zhì)生物合成可在 核糖體 、線粒體和葉綠體 三種細胞器內(nèi)進行。5 延長因子 T由Tu和Ts倆個亞基組成, Tu為對熱_不穩(wěn)定_蛋白質(zhì), Ts為對熱_ 穩(wěn)定 _蛋白質(zhì)。6 原核生物中的釋放因子有三種,其中 RF-1 識別終止密碼子 UAA_ 、UAG;RF-2 識別UAA_ _、 UGA_ ;真核中的釋放因子只有 RF壹種。7 氨酰-tRNA 合成酶對_氨基酸和相應(yīng)的 _tRNA_ 有高度的選擇性。8 原核細胞的起始氨基酸是_甲酰甲硫氨酸 _,起始氨酰 -tRNA 是 _甲酰甲硫氨酰-tRNA _。9 原核細胞核糖體的 小_亞基上的 _16SrRNA_ 協(xié)助辨認起
37、始密碼子。l0每形成壹個肽鍵要消耗 4個高能磷酸鍵,但在合成起始時仍需多消耗 1 個高能磷酸鍵。11 肽基轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)生物合成中的作用是催化_肽鍵形成和 _肽酰-tRNA的水解。12 肽鏈合成終止時, _終止因子 進人“ A”位,識別出 _終止密碼子 ,同時終止因子使 _肽基轉(zhuǎn)移酶 的催化作用轉(zhuǎn)變?yōu)?_水解作用 。13 原核生物的核糖體由 30S 小亞基和 50S_ 大亞基組成,真核生物核糖體由 _40S_ 小亞基和 60S大亞基組成。14. 蛋白質(zhì)中可進行磷酸化修飾的氨基酸殘基主要為 Ser、 Thr_ 、_Tyr 。(四)選擇題1 蛋白質(zhì)生物合成的方向是 ()。 從 C N 端定點雙向進
38、行從 N 端、 C 端同時進行 從 N C 端2 不能合成蛋白質(zhì)的細胞器是 ()。線粒體葉綠體 高爾基體 核糖體3 真核生物的延伸因子是 ()。EFTuEF壹 2EF-GEF壹 14 真核生物的釋放因子是 ()。RFRF壹 1RF壹2RF壹 35能和 tRNA 反密碼子中的 I 堿基配對的是 ()。 A、GC、UUU、C、A6 蛋白質(zhì)合成所需能量來自 ()。ATPGTPATP、GTP GTP7 tRNA 的作用是 ()。將壹個氨基酸連接到另壹個氨基酸上 把氨基酸帶到 mRNA 位置上 將 mRNA 接到核糖體上增加氨基酸的有效濃度8 關(guān)于核糖體的移位,敘述正確的是 ( )??蛰d tRNA 的脫
39、落發(fā)生在“ A”位上核糖體沿 mRNA 的 3' 5'方向相對移動核糖體沿 mRNA 的 5' 3'方向相對移動 核糖體在 mRNA 上壹次移動的距離相當于二個核苷酸的長度9 在蛋白質(zhì)合成中,下列哪壹步不需要消耗高能磷酸鍵()。肽基轉(zhuǎn)移酶形成肽鍵 氨酰壹 tRNA 和核糖體的“ A ,'位點結(jié)合核糖體沿 mRNA 移動 fMet tRNAf 和 mRNA 的起始密碼子結(jié)合以及和大、小亞基的結(jié)合10 在真核細胞中肽鏈合成的終止原因是 ()。已達到 mRNA 分子的盡頭具有特異的 tRNA 識別終止密碼子終止密碼子本身具有酯酶作用,可水解肽酰和 tRNA 之
40、是的酯鍵終止密碼子被終止因子 (RF) 所識別11 蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是 ( )。UAA UAU UAC UAG UGA( )12 根據(jù)擺動假說,當 tRNA 反密碼子第 1 位堿基是 I 時,能夠識別哪幾種密碼子 ACGTU13 下列哪些因子是真核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子( )。IF1 IF2 eIF2 eIF4 elF4A14 蛋白質(zhì)生物合成具有下列哪些特征 ( )。氨基酸必須活化需要消耗能量每延長壹個氨基酸必須經(jīng)過進位、轉(zhuǎn)肽、移位、稅落四 個步驟 合成肽鏈由 C 端向 N 端不斷延長 新生肽鏈需加工才能成為活性蛋白質(zhì) 15 下列哪些內(nèi)容屬于蛋白質(zhì)合成后的加工、修飾( )。切除內(nèi)含
41、子,連接外顯子 切除信號肽切除 N- 端 Met 形成二硫鍵氨的側(cè)鏈修飾16 蛋白質(zhì)生物合成過程中,下列哪些步驟需要消耗能量( )。氨基酸分子的活化 70S 起始復(fù)合物的形成氨酰 tRNA 進入核糖體 A 位 肽鍵形成 核糖體移位肽基轉(zhuǎn)移酶鳥苷三磷酸 mRNA 甲酰甲硫氨酰 -tRNA EF-Tu 、EF-Ts 、EF-G18.Shine-Dalgarno 順序 (SD- 順序 )是指 :( )在 mRNA 分子的起始碼上游 8-13 個核苷酸處的順序 在 DNA 分子上轉(zhuǎn)錄起始點前 8-13 個核苷酸處的順序 16srRNA3' 端富含嘧啶的互補順序啟動基因的順序特征之上都正確19.
42、 在研究蛋白合成中 ,可利用嘌呤霉素 ,這是因為它 :()使大小亞基解聚 使肽鏈提前釋放 抑制氨基酰 -tRNA 合成酶活性防止多核糖體形 成之上都正確20. 氨基酸活化酶: ( )活化氨基酸的氨基利用 GTP 作為活化氨基酸的能量來源催化在 tRNA 的 5'磷酸和相應(yīng)氨基酸間形成酯鍵 每壹種酶特異地作用于壹種氨基酸及相應(yīng)的 tRNA 之上都不正確(五) 是非題1 DNA 不僅決定遺傳性狀,而且仍直接表現(xiàn)遺傳性狀。(×)2 密碼子在 mRNA 上的閱讀方向為 5 ' 3'。()3 每種氨基酸都有倆種之上密碼子。(×)4 壹種 tRNA 只能識別壹種
43、密碼子。 (×)5 線粒體和葉綠體的核糖體的亞基組成和原核生物類似。( )6 大腸桿菌的核糖體的小亞基必須在大亞基存在時,才能和mRNA 結(jié)合。 (×)mRNA 結(jié)合。 ()8 在大腸桿菌中,壹種氨基酸只對應(yīng)于壹種氨酰-tRNA 合成酶。 ( )7 大腸桿菌的核糖體的大亞基必須在小亞存在時,才能和9 氨基酸活化時, 在氨酰 -tRNA 合成酶的催化下, 由 ATP 供能, 消耗個高能磷酸鍵。 (×)10 線粒體和葉綠體內(nèi)的蛋白質(zhì)生物合成起始和原核生物相同。()11 每種氨基酸只能有壹種特定的 tRNA 和之對應(yīng)。 (×)12 AUG 既可作為 fMet-
44、tRNAf 和 Met-tRNAi 的密碼子,又可作為肽鏈內(nèi)部 Met 的密碼 子。 ( )13 構(gòu)成密碼子和反密碼子的堿基都只是A、U、C、G。(×)14 核糖體大小亞基的結(jié)合和分離和 Mg2+ ,的濃度有關(guān)。 ()15 核糖體的活性中心“ A”位和“ P”位都主要在大亞基上。 (×)16.E.coli 中, DnaA 和復(fù)制起始區(qū) DNA 結(jié)合,決定復(fù)制的起始。 () 核酸的生物合成(壹)名詞解釋1 中心法則 (centraldogma) :生物體遺傳信息流動途徑。最初由 Crick(1958) 提出,經(jīng)后 人的不斷補充和修改,現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和 RNA 復(fù)制等內(nèi)容。2 半
45、保留復(fù)制 (簡稱復(fù)制 )( semiconservativereplication) :親代雙鏈 DNA 以每條鏈為 模板,按堿基配對原則各合成壹條互補鏈,這樣壹條親代 DNA 雙螺旋,形成倆條完全相同 的子代 DNA 螺旋,子代 DNA 分子中都有壹條合成的“新”鏈和壹條來自親代的舊鏈,稱 為半保留復(fù)制。3 DNA 聚合酶 (DNApolymerase) :指以脫氧核苷三磷酸為底物,按5 ' 3 '方向合成DNA 的壹類酶,反應(yīng)條件: 4 種脫氧核苷三磷酸、 Mg+ 、模板、引物。 DNA 聚合酶是多功 能酶,除具有聚合作用外,仍具有其它功能,不同 DNA 聚合酶所具有的功能
46、不同。4 解旋酶(helicase) :是壹類通過水解 ATP提供能量, 使DNA 雙螺旋倆條鏈分開的酶, 每 解開壹對堿基,水解 2 分子 ATP。5 拓撲異構(gòu)酶 (topoisomerase) :是壹類引起 DNA 拓撲異構(gòu)反應(yīng)的酶,分為倆類:類型 I 的酶能使 DNA 的壹條鏈發(fā)生斷裂和再連接,反應(yīng)無需供給能量,類型的酶能使 DNA 的 倆條鏈同時發(fā)生斷裂和再連接,當它引入超螺旋時,需要由 ATP 供給能量。6 單鏈 DNA 結(jié)合蛋白 (single-strandbindingprotein,SSB) :是壹類特異性和單鏈區(qū) DNA 結(jié)合的蛋白質(zhì)。它的功能在于穩(wěn)定 DNA 解開的單鏈,阻
47、止復(fù)性和保護單鏈部分不被核酸酶 降解。7 DNA 連接酶 (DNAligase) :是專門催化雙鏈 DNA 中缺口共價連接的酶,不能催化倆條 游離的單鏈 DNA 鏈間形成磷酸二酯鍵。反應(yīng)需要能量。8 引物酶及引發(fā)體 (primase primosome) :以 DNA 為模板,以核糖核苷酸為底物,在DNA 合成中, 催化形成 RNA 引物的酶稱為引物酶及引物體。大腸桿菌的引物酶單獨沒有活 性,只有和其它蛋白質(zhì)結(jié)合在壹起,形成壹個復(fù)合體,即引發(fā)體才有生物活性。9 復(fù)制叉 (replicationfork) :復(fù)制中的 DNA 分子,末復(fù)制的部分是親代雙螺旋,而復(fù)制 好的部分是分開的,由倆個子代雙
48、螺旋組成,復(fù)制正在進行的部分呈丫狀叫做復(fù)制叉。10 復(fù)制眼 結(jié)構(gòu) :在壹段 DNA 上,正在復(fù)制的部分形成眼狀結(jié)構(gòu)。復(fù)制眼在環(huán)狀 DNA 上形成的結(jié)構(gòu)和希臘字母 相象,所以叫 結(jié)構(gòu)。11 前導(dǎo)鏈(1eadingstrand):在 DNA 復(fù)制過程中,以親代鏈 (3 ' 5'為模板時,子代鏈的合成 (5 ' 3 ' ) 是連續(xù)的這條能連續(xù)合成的鏈稱前導(dǎo)鏈。12 岡崎片段 (Okazakifragment)、后隨鏈 (1aggingstrand) :在 DNA 復(fù)制過程中,以親代鏈 (5 ' 3 ' ) 為模板時,子代鏈的合成不能以3 ' 5
49、 '方向進行,而是按 5 ' 3 '方 向合成出許多小片段,因為是岡崎等人研究發(fā)現(xiàn),因此稱岡崎片段。由許多岡崎片段連接而 成的子代鏈稱為后隨鏈。:在 DNA 復(fù)制過程中,壹條鏈的合13 半不連續(xù)復(fù)制 (Semidiscontinuousreplication) 成是連續(xù)的,另壹條鏈的合成是不連續(xù)的,所以叫做半不連續(xù)復(fù)制。14 逆轉(zhuǎn)錄 (reversetranscription):以 RNA 為模板合成 DNA 的過程。15 逆轉(zhuǎn)錄酶 (reversetranseriptase):催化以 RNA 為模板合成 DNA 的逆轉(zhuǎn)錄過程的酶。Temin(1960) 首次從勞氏肉瘤
50、病毒中發(fā)現(xiàn)。 逆轉(zhuǎn)錄酶具有多種酶活性: 依賴 RNA 的 DNA 聚 合酶活性;依賴 DNA 的 DNA 聚合酶活性, RNA 水解酶活性, DNA 合成方向 5 ' 3 '。 合成時需要引物和模板。16 突變 (mutation) :基因組 DNA 順序上的任何壹種改變都叫做突變。 分點突變和結(jié)構(gòu)畸 變。17 點突變 (Pointmutation):是指壹個或幾個堿基對被置換 (replacement) ,這種置換又分倆種形式:轉(zhuǎn)換 (transition) 壹 - 指用壹個嘌呤堿置換另壹個嘌呤堿,壹個嘧啶堿置換另壹 個嘧啶堿;顛換 (transversion) 壹 - 指用
51、嘌呤堿置換嘧啶堿或用嘧啶堿置換嘌呤堿。18 結(jié)構(gòu)畸變 :基因中的缺口、或插入 (insertion) 或缺失 (deletion) 某些堿基造成移碼突變 使 DNA 的模板鏈失去功能。19 誘變劑 (mutagen) :使基因組發(fā)生突變的物理、化學、生物因素叫誘變劑。20 修復(fù)(repair) :除去 DNA 上的損傷, 恢復(fù) DNA 的正常結(jié)構(gòu)和功能是生物機體的壹種保 護功能。21 光裂合酶修復(fù) ( 又稱光復(fù)活 )(photoreactivation) :可見光將光裂合酶激活, 它分解 DNA 上由紫外線照射而形成的嘧啶二聚體,使它們恢復(fù)成倆個單獨的嘧啶堿。22 切除修復(fù) (excision
52、repair) :在壹系列酶的作用下,將 DNA 分子中受損傷部分切除, 以互補鏈為模板,合成出空缺的部分,使 DNA 恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)的過程。23 重組修復(fù) (recombinationrepair): DNA 在有損傷的情況下也能夠復(fù)制,復(fù)制時子代 鏈躍過損傷部位且留下缺口,通過分子間重組,從完整的另壹條母鏈上將相應(yīng)的核苷酸序列此過程稱重組修復(fù)。片段移至子鏈缺口處, 然后用再合成的多核苷酸的序列補上母鏈的空缺,24 誘導(dǎo)修復(fù)和應(yīng)急反應(yīng) (inductionrepairandSOSresponse)(SOS修復(fù) ):由于 DNA 受到損傷或復(fù)制系統(tǒng)受到抑制所誘導(dǎo)引起的壹系列復(fù)雜的應(yīng)急效應(yīng), 稱為
53、應(yīng)急反應(yīng)。 SOS 反應(yīng) 主要包括倆個方面: DNA 損傷修復(fù) (SOS 修復(fù)或稱誘導(dǎo)修復(fù) )和誘變效應(yīng)。 SOS 修復(fù)是壹種 易出差錯的修復(fù)過程,雖能修復(fù) DNA 的損傷而避免死亡。但卻帶來高的變異率。25 DNA 重組 (recombination) :DNA 重組是指在真核生物減數(shù)分裂過程中,細菌細胞 的轉(zhuǎn)化中、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中等發(fā)生的 DNA 片段的交換或插入。26 基因工程 ( 又稱基因重組技術(shù) )(gene/geneticengineering) :是將外源基因經(jīng)過剪切加 工,再插入到壹個具有自我復(fù)制能力的載體 DNA 中,將新組合的 DNA 轉(zhuǎn)移到壹個寄主細 胞中,外源基因就能夠隨著寄
54、主細胞的分裂進行繁殖,寄主細胞也借此獲得外源基因所攜帶 的新特性。27 轉(zhuǎn)錄 (transcription) :由依賴于 DNA 的 RNA 聚合酶催化,以 DNA 的壹條鏈的壹定 區(qū)段為模板,按照堿基配對原則,合成壹條和 DNA 鏈互補的 RNA 鏈的過程。28 模板鏈 (templatestrand)又稱負 (-) 鏈,反意義鏈 (antisensestrand) :轉(zhuǎn)錄過程中用作模板的這條 DNA 鏈,稱模板鏈。29 非模板鏈 (nontemplatestrand) 又稱正 (+) 鏈,編碼鏈 (codingstrand) ,有意義鏈 (sensestrand) :和模板鏈互補的那條 D
55、NA 鏈,稱非模板鏈。30 不對稱轉(zhuǎn)錄 (asymmetrictranscription):因為 RNA 的轉(zhuǎn)錄只在 DNA 的任壹條鏈上進行,所以把 RNA 的合成叫做不對稱轉(zhuǎn)錄。31 啟動子 (promoter) :DNA 鏈上能指示 RNA 轉(zhuǎn)錄起始的 DNA 序列稱啟動子。32 轉(zhuǎn)錄單位 (transcriptionunit):RNA 的轉(zhuǎn)錄只在 DNA 的壹個片段上進行,這段 DNA 序列叫轉(zhuǎn)錄單位。mRNA 加工過程中消失的33 內(nèi)含子 (intron) :真核生物基因中,不為蛋白質(zhì)編碼的、在DNA 序列,稱內(nèi)含子。34 外顯子 (exon) :真核生物基因中,在 mRNA 上出現(xiàn)
56、且代表蛋白質(zhì)的 DNA 序列,叫外 顯子。35 轉(zhuǎn)錄加工 (post-transcriptionalprocessing):細菌中很多 RNA 分子和幾乎全部真核生物的 RNA 在合成后都需要不同程度的加工, 才能形成成熟的 RNA 分子, 這個過程叫轉(zhuǎn)錄 后加工。36 核內(nèi)不均壹 RNA(hnRNA) :是真核生物細胞核內(nèi)的 mRNA 前體分子,分子量較大, 且且不均壹,含有許多內(nèi)含子。37 RNA 的復(fù)制 (RNAreplication) :某些病毒 RNA 既能夠做為模板合成病毒蛋白質(zhì)又可在 RNA 復(fù)制酶 (RNAreplicase) 的催化下,以自身 RNA 為模板,合成互補的 RNA 新鏈,合成方向 5' 3 ',這壹過程叫 RNA 復(fù)制。(二) 問答題1 試述 Meselson 和 Stahl 關(guān)于 DNA 半保留復(fù)制的證明實驗。提示:將 E coli 放入以 15NH4Cl 為唯壹氮源的培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)十幾代,使所有 DNA分子標記上 15N ;將 15N
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