大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案

1、1 .概述：培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ)，直接影響微生物試驗結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基 制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。供試品微生物限度檢查中 所使用的培養(yǎng)基應進行適用性檢查。2 .驗證目的：本次驗證的目的是確認大腸埃希菌檢查用的麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基的質(zhì)量，以及其制備程序、保存條件等是否滿足微生物限度檢查用要求。3 .驗證依據(jù)：中國藥典2015年版四部“ 1106非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控 制菌檢查法”、“9203藥品微生物實驗室質(zhì)量管理指導原則”。4 .驗證項目：麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基的適用性檢查。5 .適用范圍：成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)

2、基均應進行培養(yǎng)基 適用性檢查。6 .驗證周期：除另有規(guī)定外，在實驗室中，若采用已驗證的配制和滅菌程序制備 培養(yǎng)基且過程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗可以只進行一次。如果培養(yǎng)基的制備過程未經(jīng)驗證，那么每一滅菌批培養(yǎng)基均要進行適用性檢查試驗。7 .驗證小組人員及職責:7.1驗證小組人員：小組人員職務(wù)姓名簽字所在部門職務(wù)組長質(zhì)量部質(zhì)量總監(jiān)組員質(zhì)量控制實驗室QC主任組員質(zhì)量控制實驗室微生物QC7.2 驗證人員職責及要求7.2.1 按驗證方案及相關(guān)文件實施驗證7.2.2 認真觀察并做好驗證原始記錄。7.2.3 對實施驗證的結(jié)果負責。7.3 驗證中各部門的職責7.3.1 驗證領(lǐng)導組職責7.3.

3、1.1 制訂驗證總計劃，負責全公司驗證工作的管理7.3.1.2 確定驗證項目及驗證項目負責人。7.3.1.3 負責驗證方案的批準工作。范文文件*藥業(yè)有限公司題目大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基 適用性試驗驗證方案頁碼9/8編號SOP-YZ-6302版本號B修改狀態(tài)07.3.1.4 負責驗證資料及結(jié)果的審核工作。7.3.1.5 負責驗證報告的批準工作。7.3.2 驗證項目小組職責7.3.2.1 負責驗證方案的起草工作。7.3.2.2 參與驗證方案的討論、確認工作。7.3.2.3 負責驗證方案的實施。7.3.2.4 負責驗證結(jié)果的分析、統(tǒng)計、報告工作。7.3.2.5 參與驗證結(jié)果的評價工作。7.3.3 質(zhì)量

4、部職責7.3.3.1 負責公司驗證日常管理工作。7.3.3.2 負責驗證方案的審核工作。7.3.3.3 負責驗證過程中儀器、儀表、計量器具的校驗工作。7.3.3.4 負責檢驗儀器及檢驗方法的驗證。7.3.3.5 負責驗證中各項檢測工作，提供驗證的檢驗記錄、檢驗報告，對驗證過 程中的各項檢驗工作負責。7.3.3.6 負責對驗證人員的培訓、考核工作。7.3.3.7 負責驗證資料和報告的審核工作。7.3.3.8 負責驗證文件回收、歸檔管理工作。8 .合格標準：8.2 被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應在0.5-2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小應與對照培養(yǎng)基上的菌落一致；8.3 被

5、檢液體培養(yǎng)基管與對照培養(yǎng)基管比較，試驗菌應生長良好。9 .驗證實施條件9.2 驗證方案培訓：在驗證實施前，應對參與驗證的人員進行驗證方案以及與驗本文件為受控文件，僅限湖北 *藥業(yè)有限公司內(nèi)部使用。未經(jīng)授權(quán)，不得使用、泄露或拷貝!文件*藥業(yè)有限公司題目大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基 適用性試驗驗證方案頁碼10/8編號SOP-YZ-6302版本號B修改狀態(tài)0證相關(guān)的文件進行培訓，確保相關(guān)人員掌握了驗證的相關(guān)要求與知識。9.3 微生物限度檢測室：檢驗所使用的檢測室應經(jīng)過HVA面統(tǒng)確認，并符合要求。9.4 檢驗用水：驗證過程使用的純化水其制備系統(tǒng)應經(jīng)過確認并符合要求，純化 水質(zhì)量應經(jīng)過檢驗并符合中國藥典 20

6、15年版二部的要求。9.5 檢驗儀器設(shè)備：驗證涉及的檢驗儀器（設(shè)備）與檢驗方法，應經(jīng)過技術(shù)監(jiān)督 局校驗合格或者公司確認/驗證合格。9.6 驗證菌種：驗證所使用的菌種，其種類與傳代次數(shù)應符合中國藥典的相 關(guān)要求。菌種情況見附件2:菌種確認。10 .驗證過程10.2 菌液制備取經(jīng)30-35 C培養(yǎng)18-24h的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌的新鮮培養(yǎng)物 1ml加 入9m10.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍遞增稀釋至10-6-10-8,約為0 100cfu/ml的菌懸 液備用。10.3 實驗操作10.3.1 麥康凱液體培養(yǎng)基：新鮮配制100ml/瓶的對照麥康凱液體培養(yǎng)基 5瓶， 121c滅菌15min,備

7、用。取4瓶，分別接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌各2瓶，接種菌液量0.1ml （0100cfu）;另一瓶,不接種菌作為空白對照；被檢培養(yǎng)基同法 操作。置4244C,培養(yǎng)2448h,分別觀察結(jié)果。10.3.2 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（MacQ:新鮮配制對照MacC脂培養(yǎng)基，121c滅菌 15min,冷卻至60c傾注平皿，35c培養(yǎng)箱預培8h后備用。取3個無菌MacQ脂平 板，涂布接種大腸埃希菌2皿，接種菌液0.1ml （含菌0100cfu）,另一平板不接種 菌作為空白對照，涂布均勻后于3035c倒置培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基同法操作。18h觀察 結(jié)果。本文件為受控文件，僅限湖北 *藥業(yè)有限公司桁使用。未經(jīng)授權(quán)，不

8、得使用、泄露或拷貝!文件*藥業(yè)有限公司題目大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基 適用性試驗驗證方案頁碼11/8編號SOP-YZ-6302版本號B修改狀態(tài)010.4 .檢查結(jié)果：見附件5:大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果11 .異常情況與偏差處理：當出現(xiàn)偏差時，應按偏差處理管理規(guī)程進行處理。12 .驗證結(jié)果評定、結(jié)論與建議驗證小組組長負責收集各項驗證、試驗記錄，根據(jù)驗證、試驗結(jié)果對驗證效果進行綜合評審，起草驗證報告、做出驗證結(jié)論。對驗證結(jié)果的評審應包括以下內(nèi)容：12.2 驗證試驗是否有遺漏？12.3 驗證實施過程中對驗證方案有無修改？修改原因、依據(jù)以及是否經(jīng)過批準？12.4 驗證記錄是否完整？12.5 驗

9、證試驗結(jié)果是否符合標準要求？偏差及對偏差的說明是否合理？是否需要進一步補充試驗？13 .附件13.2 附件1:驗證實施條件確認13.3 附件2:培養(yǎng)基確認13.4 附件3:菌種確認13.5 附件4:菌液濃度確定13.6 附件5:大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果13.7 附件6:驗證結(jié)果審批表附件1:設(shè)施設(shè)備驗證確認設(shè)施設(shè)備名稱驗證報告編號驗證結(jié)果實驗室HVA繇統(tǒng)純化水系統(tǒng)LDZX-40A型立式自控電熱壓力蒸PSH-500A型生化培養(yǎng)箱本文件為受控文件，僅限湖北 *藥業(yè)有限公司悔B使用。未經(jīng)授權(quán)，不得使用、泄露或拷貝!文件*藥業(yè)有限公司題目大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基 適用性試驗驗證方案頁碼12/

10、8編號SOP-YZ-6302版本號B修改狀態(tài)0303AS-2型電熱恒溫隔水式培養(yǎng)SW-CJ-1C型雙人凈化工作臺確認結(jié)論:確認人:確認日期:fe笠廣生名布卜來源批號功效期至麥康凱液體培喬基攵康磯瓊月日拈 加生麥康凱液體對照培喬基麥康凱瓊脂對照培養(yǎng)基確認結(jié)論:確認人：確認日期：附件2:培養(yǎng)基確認附件3:菌種確認fe笠產(chǎn)生名布卜來源批號功效期至大腸埃希菌CMCC(F)44 102金黃色葡萄球菌 CMCC(B) 26 003確認結(jié)論:本文件為受控文件，僅限湖北 *藥業(yè)有限公司陋B使用。未經(jīng)授權(quán)，不得使用、泄露或拷貝!文件*藥業(yè)有限公司題目大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基 適用性試驗驗證方案頁碼13/8編號SO

11、P-YZ-6302版本號B修改狀態(tài)0確認人:確認日期:附件4:菌液濃度確定10-310-410-510-610-7123123123123123金黃色皿1葡萄球菌皿2大腸皿1埃布國皿2結(jié)論:根據(jù)要求，菌數(shù)要控制在每1ml中含菌數(shù)在w 100cfu ,因此，我們確定菌液制備濃度為:檢驗人檢驗時間年 月日-年 月日復核人復核時間年 月日金黃色葡萄球菌大腸埃希菌:附件5:大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果/口加小驗證菌株測試特性觀察時間皿號被檢/口 4對照/口 4結(jié)果麥康凱液體 /口加小(42 44 c, 2448h大腸埃布國促生長能力24h12金黃色抑制能力48h3本文件為受控文件，僅限湖北 *

12、藥業(yè)有限公司樹B使用。未經(jīng)授權(quán)，不得使用、泄露或拷貝!文件*藥業(yè)有限公司題目大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基 適用性試驗驗證方案頁碼14/8編號SOP-YZ-6302版本號B修改狀態(tài)0葡萄球菌4空白48h5麥康凱瓊脂 /口加小（30 35C, 1872h大腸埃布國促生長能力 +指示特性18h12空白18h3檢驗人檢驗時間年 月 日-年 月 日復核人復核時間年 月日表6:驗證結(jié)果審批表驗證對象驗證開始日期驗證結(jié)束日期評審意見（在方框中打，）1、驗證實驗有否遺漏口遺漏口未遺漏本文件為受控文件，僅限湖北 *藥業(yè)有限公司悔B使用。未經(jīng)授權(quán)，不得使用、泄露或拷貝!G M P文件*藥業(yè)有限公司題目大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基 適用性試驗驗證方案頁碼15/8編號SOP-YZ-6302版本號B