肝功能檢查ppt課件

1、第十三章第十三章 肝功能檢驗(yàn)肝功能檢驗(yàn)n本章內(nèi)容概要：本章內(nèi)容概要：n本章教學(xué)要求：本章教學(xué)要求：第二節(jié)第二節(jié) 肝功能實(shí)驗(yàn)肝功能實(shí)驗(yàn)第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 掌握掌握: :黃疸的發(fā)活力理和各型黃疸的代謝特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室鑒別診黃疸的發(fā)活力理和各型黃疸的代謝特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室鑒別診斷要點(diǎn)；肝功能實(shí)驗(yàn)生化檢查目的的種類和重點(diǎn)工程的測定方法斷要點(diǎn)；肝功能實(shí)驗(yàn)生化檢查目的的種類和重點(diǎn)工程的測定方法及評價。及評價。 熟習(xí)熟習(xí): :肝臟的生物化學(xué)功能，膽紅素代謝；各測定工程的臨床肝臟的生物化學(xué)功能，膽紅素代謝；各測定工程的臨床意義意義 了解：肝臟的根本機(jī)構(gòu)；肝功能實(shí)驗(yàn)工程選擇的原那么。了解：肝臟的根本機(jī)構(gòu)；肝功能實(shí)驗(yàn)工

2、程選擇的原那么。 第三節(jié)第三節(jié) 肝功能實(shí)驗(yàn)選擇原那么肝功能實(shí)驗(yàn)選擇原那么第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述n肝臟構(gòu)造n肝臟的生化功能n肝臟疾病的生化改動一、肝臟構(gòu)造一、肝臟構(gòu)造一一 解剖學(xué)特點(diǎn)解剖學(xué)特點(diǎn)雙重血液供應(yīng)雙重血液供應(yīng) 腹自動脈的分枝腹自動脈的分枝- -肝動脈肝動脈 氧氧 門靜脈門靜脈 營養(yǎng)營養(yǎng) 雙重輸出管道雙重輸出管道 肝靜脈肝靜脈 代謝降解物代謝降解物 下腔靜脈下腔靜脈 膽道系統(tǒng)膽道系統(tǒng) 脂溶性物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物脂溶性物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物 體外體外 二二 肝臟的顯微構(gòu)造特點(diǎn)肝臟的顯微構(gòu)造特點(diǎn)1 1、組織構(gòu)造、組織構(gòu)造2 2、亞細(xì)胞構(gòu)造、亞細(xì)胞構(gòu)造三三 細(xì)胞的再生細(xì)胞的再生二、肝臟的生物化學(xué)功能二、

3、肝臟的生物化學(xué)功能排泄功能排泄功能物質(zhì)代謝功能物質(zhì)代謝功能生物轉(zhuǎn)化生物轉(zhuǎn)化重要生化功能重要生化功能生物轉(zhuǎn)化定義：生物轉(zhuǎn)化定義： 機(jī)體將一些內(nèi)源性和外源性非營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)展代謝機(jī)體將一些內(nèi)源性和外源性非營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)展代謝轉(zhuǎn)化，添加其極性或水溶性，有利于隨尿或膽汁排出，同轉(zhuǎn)化，添加其極性或水溶性，有利于隨尿或膽汁排出，同時也改動了它們的毒性或藥理作用。通常將這些物質(zhì)在體時也改動了它們的毒性或藥理作用。通常將這些物質(zhì)在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)變過程稱為生物轉(zhuǎn)化作用內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)變過程稱為生物轉(zhuǎn)化作用biotransformation。一排泄功能一排泄功能主要排泄對象：膽汁酸、膽紅素、氨主要排泄對象：膽汁酸、膽紅素、氨1

4、1、膽汁酸代謝、膽汁酸代謝1 1膽汁的分泌：膽汁的分泌：膽汁功能：促進(jìn)脂類的消化吸收，同時能將體內(nèi)某些代謝產(chǎn)物及生物轉(zhuǎn)化膽汁功能：促進(jìn)脂類的消化吸收，同時能將體內(nèi)某些代謝產(chǎn)物及生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物不斷地排入腸道隨糞便排出體外。產(chǎn)物不斷地排入腸道隨糞便排出體外。膽汁的來源：膽汁的來源：肝膽汁肝膽汁 膽囊膽汁膽囊膽汁 十二指腸十二指腸膽汁的成分：膽汁的成分：膽汁酸含量最多、卵磷脂、蛋白質(zhì)、脂肪酸和膽固醇膽汁酸含量最多、卵磷脂、蛋白質(zhì)、脂肪酸和膽固醇2 2膽汁酸生成及種類：膽汁酸生成及種類：初級膽汁酸肝細(xì)胞初級膽汁酸肝細(xì)胞次級膽汁酸腸道次級膽汁酸腸道3 3膽汁酸肝腸循環(huán)：膽汁酸肝腸循環(huán)：4 4膽汁酸的功能：

5、膽汁酸的功能：促進(jìn)脂類消化促進(jìn)脂類消化促進(jìn)脂類吸收促進(jìn)脂類吸收抑制膽固醇從膽汁中析出沉淀抑制膽固醇從膽汁中析出沉淀2 2、膽紅素代謝、膽紅素代謝膽色素膽色素 尿膽素原尿膽素原 糞膽素原糞膽素原尿膽素尿膽素糞膽素糞膽素膽綠素膽綠素膽紅素膽紅素未結(jié)合膽紅素未結(jié)合膽紅素( (單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)如骨髓、脾臟單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)如骨髓、脾臟) )結(jié)合膽紅素肝臟結(jié)合膽紅素肝臟膽素原膽素原膽色素膽色素(bile pigment)是體內(nèi)鐵卟啉化合物的主要是體內(nèi)鐵卟啉化合物的主要分解代謝產(chǎn)物，包括膽紅素、膽綠素、膽素原和分解代謝產(chǎn)物，包括膽紅素、膽綠素、膽素原和膽素等。膽素等。膽紅素的來源：衰老紅細(xì)胞： 80一85，

6、非血紅蛋白的血紅素蛋白質(zhì)無效造血一膽紅素的正常代謝：一膽紅素的正常代謝：膽紅素代謝表示圖膽紅素代謝表示圖生成過程生成過程 部位部位肝、脾、骨髓單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞微肝、脾、骨髓單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞微粒體與胞液中粒體與胞液中 過程過程血紅蛋白血紅蛋白血紅素珠蛋白血紅素珠蛋白氨基酸氨基酸膽紅素膽紅素 游離膽紅素的性質(zhì)游離膽紅素的性質(zhì)親脂疏水，對大腦具有毒性作用親脂疏水，對大腦具有毒性作用 膽紅素在血液的轉(zhuǎn)膽紅素在血液的轉(zhuǎn)運(yùn)運(yùn) 意義意義添加膽紅素在血漿中的溶解度，限制膽紅添加膽紅素在血漿中的溶解度，限制膽紅素自在經(jīng)過生物膜產(chǎn)生毒性作用。素自在經(jīng)過生物膜產(chǎn)生毒性作用。 競爭結(jié)合劑競爭結(jié)合劑如磺胺藥，水

7、楊酸，膽汁酸等如磺胺藥，水楊酸，膽汁酸等 運(yùn)輸方式運(yùn)輸方式膽紅素清蛋白復(fù)合體未結(jié)合膽紅素膽紅素清蛋白復(fù)合體未結(jié)合膽紅素膽紅素在肝中的膽紅素在肝中的轉(zhuǎn)變轉(zhuǎn)變攝取攝取膽紅素可以自在雙向通透肝血竇肝細(xì)膽紅素可以自在雙向通透肝血竇肝細(xì)胞膜外表進(jìn)入肝細(xì)胞胞膜外表進(jìn)入肝細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在胞漿與配體蛋白結(jié)在胞漿與配體蛋白結(jié)合合轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化 部位：滑面內(nèi)網(wǎng)質(zhì)部位：滑面內(nèi)網(wǎng)質(zhì) 反響：結(jié)合反響主要為結(jié)合物為反響：結(jié)合反響主要為結(jié)合物為UDPUDP葡萄糖醛酸，葡萄糖醛酸，UDPGAUDPGA 酶：葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶酶：葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶 產(chǎn)物：主要為雙葡萄糖醛酸膽紅素，另有少量單產(chǎn)物：主要為雙葡萄糖醛酸膽紅素，

8、另有少量單葡萄糖醛酸膽紅素、硫酸膽紅素，統(tǒng)稱為結(jié)合膽葡萄糖醛酸膽紅素、硫酸膽紅素，統(tǒng)稱為結(jié)合膽紅素紅素膽紅素在肝中的膽紅素在肝中的轉(zhuǎn)變轉(zhuǎn)變膽紅素葡糖醛酸一酯膽紅素葡糖醛酸一酯 + UDP -葡糖醛酸葡糖醛酸UDP-葡糖醛葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶酸基轉(zhuǎn)移酶膽紅素葡糖醛酸二酯膽紅素葡糖醛酸二酯 + UDP 膽紅素膽紅素 + UDP -葡糖醛酸葡糖醛酸膽紅素葡糖醛酸一酯膽紅素葡糖醛酸一酯 + UDPUDP-葡糖醛葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶酸基轉(zhuǎn)移酶 葡糖醛酸膽紅素的生成葡糖醛酸膽紅素的生成排泄排泄結(jié)合膽紅素從肝細(xì)胞毛細(xì)膽管排泄入膽汁結(jié)合膽紅素從肝細(xì)胞毛細(xì)膽管排泄入膽汁中，再隨膽汁排入腸道。中，再隨膽汁排入腸道。膽紅素

9、在肝中的轉(zhuǎn)變膽紅素在肝中的轉(zhuǎn)變膽紅素在腸道中的變化膽紅素在腸道中的變化和膽素原的腸肝循環(huán)和膽素原的腸肝循環(huán) 結(jié)合膽結(jié)合膽 紅素紅素膽素原膽素原腸腸 菌菌葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸復(fù)原復(fù)原膽素膽素氧化氧化過程過程膽素原：中膽素原，糞膽素原，膽素原：中膽素原，糞膽素原，d -d -尿膽素原尿膽素原膽膽 素：素：i - i -尿膽素，糞膽素，尿膽素，糞膽素， d - d -尿膽素尿膽素游離膽紅素游離膽紅素膽素原的腸肝循環(huán)： 在小腸下段生成的膽素原約有1020可被腸粘膜重吸收，再經(jīng)肝門靜脈入肝，重吸收入肝的膽素原大部分以原形再排入膽道，構(gòu)成腸肝循環(huán)，小部分(每日0.4mg4.0mg)經(jīng)體循環(huán)隨尿排出。血清膽

10、紅素血清膽紅素結(jié)合膽紅素：與葡萄糖醛酸結(jié)合的膽紅素稱為結(jié)合結(jié)合膽紅素：與葡萄糖醛酸結(jié)合的膽紅素稱為結(jié)合膽紅素，又稱直接膽紅素。膽紅素，又稱直接膽紅素。 未結(jié)合膽紅素：未與葡萄糖醛酸結(jié)合的膽紅素稱為未結(jié)合膽紅素：未與葡萄糖醛酸結(jié)合的膽紅素稱為未結(jié)合膽紅素，又稱間接膽紅素。未結(jié)合膽紅素，又稱間接膽紅素。 兩種膽紅素兩種膽紅素正常血清膽紅素濃度正常血清膽紅素濃度116mol/l (0.1 1mg/dl)4/5為未結(jié)合膽紅素，其他為結(jié)合膽紅素為未結(jié)合膽紅素，其他為結(jié)合膽紅素 項(xiàng)項(xiàng) 目目 未結(jié)合膽紅素未結(jié)合膽紅素 結(jié)合膽紅素結(jié)合膽紅素 別別 名名間接膽紅素，間接膽紅素，血膽紅素血膽紅素直接膽紅素，直接膽

11、紅素，肝膽紅素肝膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合與葡萄糖醛酸結(jié)合未結(jié)合未結(jié)合 結(jié)合結(jié)合與重氮試劑反應(yīng)與重氮試劑反應(yīng)慢或間接反應(yīng)慢或間接反應(yīng)迅速直接反應(yīng)迅速直接反應(yīng)水中溶解度水中溶解度小小大大經(jīng)腎隨尿排出經(jīng)腎隨尿排出不能不能能能通透細(xì)胞膜對腦的毒性通透細(xì)胞膜對腦的毒性作用作用大大無無 兩種膽紅素的區(qū)別兩種膽紅素的區(qū)別3 3、血氨代謝、血氨代謝藥物及體內(nèi)含氮物質(zhì)藥物及體內(nèi)含氮物質(zhì)如嘌呤、嘧啶等如嘌呤、嘧啶等來源來源去路相對平衡相對平衡二物質(zhì)代謝功能二物質(zhì)代謝功能1 1、營養(yǎng)物質(zhì)代謝、營養(yǎng)物質(zhì)代謝2 2、激素及維生素代謝、激素及維生素代謝 (1) (1) 在蛋白質(zhì)代謝中的作用在蛋白質(zhì)代謝中的作用 (2) (2

12、) 在氨基酸代謝中的作用在氨基酸代謝中的作用 (3) (3) 在糖代謝中的作用在糖代謝中的作用 (4) (4) 在脂代謝中的作用在脂代謝中的作用激素的滅活主要在肝臟進(jìn)展激素的滅活主要在肝臟進(jìn)展 多種維生素能在肝細(xì)胞內(nèi)儲存并進(jìn)展轉(zhuǎn)化多種維生素能在肝細(xì)胞內(nèi)儲存并進(jìn)展轉(zhuǎn)化 分分 類類肝臟正常物質(zhì)代謝功能肝臟正常物質(zhì)代謝功能糖代謝糖代謝 糖原合成糖原合成 糖原分解糖原分解 糖異生作用糖異生作用脂類代謝脂類代謝 促進(jìn)脂類的消化與吸收。促進(jìn)脂類的消化與吸收。 合成甘油三酯、磷脂、膽固醇及脂蛋白合成甘油三酯、磷脂、膽固醇及脂蛋白 甘油三酯、磷脂、膽固醇及脂蛋白的代謝場所甘油三酯、磷脂、膽固醇及脂蛋白的代謝場

13、所 產(chǎn)生酮體產(chǎn)生酮體蛋白質(zhì)代謝蛋白質(zhì)代謝合成與分泌血漿蛋白質(zhì)（除合成與分泌血漿蛋白質(zhì)（除-球蛋白）。球蛋白）。清除血漿蛋白（除清蛋白）。清除血漿蛋白（除清蛋白）。分解苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸等芳香族氨基酸分解苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸等芳香族氨基酸合成尿素合成尿素激素代謝激素代謝激素在肝臟中滅活激素在肝臟中滅活維生素代謝維生素代謝 維生素維生素A, E, KA, E, K和和B B1212的主要儲存場所的主要儲存場所 維生素維生素K K參與肝細(xì)胞內(nèi)凝血酶原及凝血因子的合成。參與肝細(xì)胞內(nèi)凝血酶原及凝血因子的合成。 將維生素將維生素D D轉(zhuǎn)化為轉(zhuǎn)化為25-25-羥維生素羥維生素D D 三肝臟的生物轉(zhuǎn)

14、化三肝臟的生物轉(zhuǎn)化n定義：定義： 生物轉(zhuǎn)化生物轉(zhuǎn)化: : 機(jī)體對許多外源性或內(nèi)源性非營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)展化學(xué)轉(zhuǎn)變，機(jī)體對許多外源性或內(nèi)源性非營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)展化學(xué)轉(zhuǎn)變，添加其水溶性添加其水溶性( (或極性或極性) )，使其易隨膽汁、尿排出，這種體內(nèi)變化過程稱，使其易隨膽汁、尿排出，這種體內(nèi)變化過程稱生物轉(zhuǎn)化生物轉(zhuǎn)化(biotransformation)(biotransformation)。 n轉(zhuǎn)化對象：轉(zhuǎn)化對象：n轉(zhuǎn)化特點(diǎn)：轉(zhuǎn)化特點(diǎn)：n生理意義：維護(hù)機(jī)體生理意義：維護(hù)機(jī)體,致癌、致畸致癌、致畸內(nèi)源性非營養(yǎng)物內(nèi)源性非營養(yǎng)物: :氨、胺、膽色素、激素氨、胺、膽色素、激素 外源性非營養(yǎng)物外源性非營養(yǎng)物: :藥物

15、、毒物、食品防腐劑、色素藥物、毒物、食品防腐劑、色素 延續(xù)性，延續(xù)性，多樣性，多樣性， 失活與活化雙重性失活與活化雙重性三、肝臟疾病的生化改動三、肝臟疾病的生化改動一膽紅素代謝妨礙黃疸一膽紅素代謝妨礙黃疸n定義定義: :n黃疸分類黃疸分類: : 黃疸黃疸和阻塞性黃疸和阻塞性黃疸 溶血性黃疸溶血性黃疸肝細(xì)胞性黃疸肝細(xì)胞性黃疸高膽紅素血癥高膽紅素血癥1 1、黃疸的概念：、黃疸的概念： 指高膽紅素血癥引起皮膚、鞏膜和粘指高膽紅素血癥引起皮膚、鞏膜和粘膜等組織黃染的景象。膜等組織黃染的景象。正常人血清膽紅素小于正常人血清膽紅素小于17.1 mol/L17.1 mol/Llmglmgd1d1，其中未結(jié)合

16、膽紅素占，其中未結(jié)合膽紅素占8080。當(dāng)膽紅素超越正常范圍，但又在當(dāng)膽紅素超越正常范圍，但又在34.2mol/L 34.2mol/L (2mg/dl(2mg/dl以內(nèi)，肉眼難于覺察，稱為隱性黃疸。以內(nèi)，肉眼難于覺察，稱為隱性黃疸。如膽紅素超越如膽紅素超越2mg2mgd1d1即為顯性黃疸。即為顯性黃疸。血清膽紅素定量（血清膽紅素定量（mol/L）尿尿 液液糞糞 便便總膽紅總膽紅素素非結(jié)合膽非結(jié)合膽紅素紅素結(jié)合膽紅結(jié)合膽紅素素尿膽原尿膽原尿膽紅素尿膽紅素顏色顏色糞膽原糞膽原健康健康人人3.4-1711.7-10.20-6.81:20(一一)(一一)黃褐色黃褐色正常正常溶血溶血性黃性黃疸疸輕度輕度或

17、或正常正常強(qiáng)（強(qiáng)（+）（一）（一）加加 深深增加增加阻塞阻塞性黃性黃疸疸輕度輕度或或正常正常（一）（一）（+）變淺或灰變淺或灰白色白色或消失或消失肝細(xì)肝細(xì)胞性胞性黃疸黃疸（+）或）或（-）（+）變淺或正變淺或正常?；蛘；蛘ＨN黃疸的鑒別三種黃疸的鑒別膽紅素代謝過程復(fù)習(xí) 溶血性黃疸時膽紅素代謝溶血性黃疸發(fā)活力制表示圖 肝性黃疸時膽紅素代謝肝細(xì)胞性黃疸發(fā)活力制表示圖 梗阻性黃疸時膽紅素代謝膽汁淤滯性黃疸發(fā)活力制表示圖二膽汁酸代謝妨礙二膽汁酸代謝妨礙1 1、膽汁酸合成妨礙、膽汁酸合成妨礙2 2、膽汁酸向腸道排出妨礙、膽汁酸向腸道排出妨礙3 3膽汁酸腸肝循環(huán)紊亂膽汁酸腸肝循環(huán)紊亂4 4膽汁瘀積病變

18、時膽汁酸代謝紊亂膽汁瘀積病變時膽汁酸代謝紊亂 總膽汁酸（酶法）總膽汁酸（酶法） 0-10 umol/L 0-10 umol/L 作空腹或餐后2h測定，后者更靈敏。膽汁酸是膽汁酸是唯一能同時反映唯一能同時反映肝合成代謝、分泌肝合成代謝、分泌狀態(tài)狀態(tài)及及肝細(xì)胞損傷肝細(xì)胞損傷三個方面的血清學(xué)指標(biāo)。三個方面的血清學(xué)指標(biāo)。對肝膽系統(tǒng)疾病診斷的對肝膽系統(tǒng)疾病診斷的靈敏度和特異性高于靈敏度和特異性高于其他指標(biāo)。其他指標(biāo)。肝細(xì)胞損害肝細(xì)胞損害：急性肝炎、慢性活動性肝炎、中：急性肝炎、慢性活動性肝炎、中毒性肝病、肝硬化、和肝癌時毒性肝病、肝硬化、和肝癌時TBATBA顯著升高，顯著升高，尤其肝硬化時，尤其肝硬化時

19、，TBATBA陽性率高于其他指標(biāo)。陽性率高于其他指標(biāo)。( (攝攝取障礙）取障礙）膽道梗阻膽道梗阻：肝內(nèi)、外梗阻：肝內(nèi)、外梗阻（分泌障礙）（分泌障礙）進(jìn)食后一過性增高進(jìn)食后一過性增高三血漿酶異常三血漿酶異常1 1肝臟合成酶類肝臟合成酶類: :膽堿脂酶、凝血因子、銅藍(lán)蛋白；膽堿脂酶、凝血因子、銅藍(lán)蛋白；2. 2. 肝細(xì)胞內(nèi)酶肝細(xì)胞內(nèi)酶: ALT: ALT、AST AST 3 3肝臟阻塞性疾病酶活性改動：肝臟阻塞性疾病酶活性改動：ALPALP、GGTGGT4 4肝硬化疾病酶活性改動：單胺氧化酶肝硬化疾病酶活性改動：單胺氧化酶MAOMAO 四血漿蛋白異常四血漿蛋白異常 第二節(jié)第二節(jié) 肝功能實(shí)驗(yàn)肝功能實(shí)

20、驗(yàn)n血清漿蛋白血清漿蛋白n測定血清酶測定測定血清酶測定n血清膽紅素測定血清膽紅素測定n血清膽汁酸測定血清膽汁酸測定n血氨測定血氨測定一、血清漿蛋白測定一、血清漿蛋白測定一總蛋白、白蛋白、及白蛋白一總蛋白、白蛋白、及白蛋白/ /球蛋白球蛋白A/GA/G比值測定比值測定 1 1總蛋白測定總蛋白測定 化學(xué)法化學(xué)法( (雙縮脲法雙縮脲法 ) )、物理法、染料結(jié)合法、電泳法、物理法、染料結(jié)合法、電泳法 染料結(jié)合法染料結(jié)合法(BCG(BCG、BCPBCP、沉淀法、沉淀法 2.2.白蛋白測定白蛋白測定 3 3A/GA/G比值比值 【參考范圍】總蛋白總蛋白 60 6080g/L 80g/L 白蛋白白蛋白 35

21、 3555g/L 55g/L 球蛋白：球蛋白：151532g/L A/G32g/L A/G比值：比值： 1.5 1.52.0/12.0/1【臨床意義】 嚴(yán)重肝病時，肝臟合成分子量小的蛋白質(zhì)才干降低，血中嚴(yán)重肝病時，肝臟合成分子量小的蛋白質(zhì)才干降低，血中白蛋白濃度減少；而免疫系統(tǒng)、單核巨噬細(xì)胞合成球蛋白添加，白蛋白濃度減少；而免疫系統(tǒng)、單核巨噬細(xì)胞合成球蛋白添加，導(dǎo)致導(dǎo)致A/GA/G比值減少。嚴(yán)重那么會出現(xiàn)比值減少。嚴(yán)重那么會出現(xiàn)A/GA/G比值小于比值小于1 1，稱為，稱為A/GA/G比值比值倒置，表示肝功能損害嚴(yán)重。倒置，表示肝功能損害嚴(yán)重。二纖維蛋白原測定二纖維蛋白原測定 凝血因子凝血因子

22、 測定方法：分為三大類測定方法：分為三大類 根據(jù)纖維蛋白原的生物學(xué)特性測定方法根據(jù)纖維蛋白原的生物學(xué)特性測定方法 根據(jù)纖維蛋白原理化性質(zhì)而建立的測定方法。根據(jù)纖維蛋白原理化性質(zhì)而建立的測定方法。 根據(jù)纖維蛋白原免疫學(xué)特點(diǎn)而建立的測定方法。根據(jù)纖維蛋白原免疫學(xué)特點(diǎn)而建立的測定方法。 【參考范圍】2.224.22g/L(熱沉淀比濁法)【臨床意義】 (1) (1) 纖維蛋白原添加：感染；無菌炎癥；其它。纖維蛋白原添加：感染；無菌炎癥；其它。(2) (2) 纖維蛋白原減少纖維蛋白原減少: : 嚴(yán)重的肝臟疾??；嚴(yán)重的肝臟疾病； 其它疾病引起纖維蛋白原減少的疾病。其它疾病引起纖維蛋白原減少的疾病。三甲胎蛋

23、白三甲胎蛋白1-fetoprotein1-fetoprotein，AFPAFP測定測定 測定方法：測定方法：【參考范圍】成人 1030g/L 400g/L作為肝癌診斷規(guī)范 【臨床意義】 酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫分析法、斑點(diǎn)免疫結(jié)合法、火箭電泳放酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫分析法、斑點(diǎn)免疫結(jié)合法、火箭電泳放射自顯影法、酶聯(lián)火箭電泳法等射自顯影法、酶聯(lián)火箭電泳法等 (1) (1) 原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌的診斷規(guī)范：血清原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌的診斷規(guī)范：血清AFPAFP測定值超越測定值超越400400g/L(400ng/ml) g/L(400ng/ml) ； (2)(2)活動性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的診

24、斷活動性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的診斷四其它四其它【臨床意義】肝豆?fàn)詈俗冃浴九R床意義】肝豆?fàn)詈俗冃訵ilsonWilson病和遺傳性色素堆積癥病和遺傳性色素堆積癥1.1.銅藍(lán)蛋白測定銅藍(lán)蛋白測定 【參考范圍】【參考范圍】 52.9 52.9167.7 IU/L167.7 IU/L【臨床意義】【臨床意義】 遺傳性血色素堆積癥鐵堆積遺傳性血色素堆積癥鐵堆積2 2轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白【原理】雙聯(lián)吡啶法【原理】雙聯(lián)吡啶法 【原理】銅藍(lán)蛋白具有氧化酶活性【原理】銅藍(lán)蛋白具有氧化酶活性 【參考范圍】【參考范圍】 TIBC 男男 5077mol/L 女女5477mol/L 轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度為轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和

25、度為33.0%35.0% 二、血清酶測定二、血清酶測定一氨基轉(zhuǎn)移酶測定一氨基轉(zhuǎn)移酶測定1 1賴氏法測定賴氏法測定ALTALT原理：原理：ALTALT催化丙氨酸催化丙氨酸(alamine)(alamine)與與-酮戊二酸酮戊二酸(-(-oxoglutarate)oxoglutarate)之間的氨基轉(zhuǎn)移反響，生成丙酮酸之間的氨基轉(zhuǎn)移反響，生成丙酮酸(pyruvate)(pyruvate)和谷氨酸和谷氨酸(glutamate)(glutamate)。 在在3737及及pH7.4pH7.4條件下反響條件下反響30min30min，以，以2 2，4-4-二硝基苯肼終止反響，并與底物二硝基苯肼終止反響，并

26、與底物-酮戊二酸和產(chǎn)物酮戊二酸和產(chǎn)物-丙酮酸的羰基生成丙酮酸的羰基生成2 2，4-4-二硝基苯腙，苯腙在堿性條件下生成二硝基苯腙，苯腙在堿性條件下生成紅棕色，與紅棕色，與505nm505nm波優(yōu)點(diǎn)讀取吸光度后計算活性。波優(yōu)點(diǎn)讀取吸光度后計算活性。 方法評價：方法評價：賴氏法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需與卡門分光法的結(jié)果對比后求出；賴氏法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需與卡門分光法的結(jié)果對比后求出；NaOHNaOH的濃度對顯色有影響；的濃度對顯色有影響；該法的反復(fù)性差。該法的反復(fù)性差。 卡門氏單位：卡門氏單位：1.0ml1.0ml血清在血清在2525，340nm340nm，反響體積，反響體積3.0ml,3.0ml,光徑光徑1.0c

27、m1.0cm時每分鐘測時每分鐘測定吸光度下降定吸光度下降0.0010.001，即耗費(fèi)，即耗費(fèi)4.82 4.82 10-4mol NADH 10-4mol NADH為一個卡門氏單位為一個卡門氏單位【參考范圍】【參考范圍】 5 52525卡門氏單位卡門氏單位 【臨床意義】【臨床意義】(2) (2) 慢性活動性肝炎或脂肪肝：慢性活動性肝炎或脂肪肝：(1) (1) 肝細(xì)胞損傷的靈敏目的肝細(xì)胞損傷的靈敏目的: :ALT輕度增高輕度增高(100200IU),或?qū)僬７秶驅(qū)僬７秶?3.3.賴氏法測定賴氏法測定ASTAST原理：原理：血清中的血清中的ASTAST可催化門冬氨酸可催化門冬氨酸(asparta

28、te)(aspartate)與與-酮戊二酸間酮戊二酸間的氨基移換，生成草酸乙酸的氨基移換，生成草酸乙酸(oxaloacetate)(oxaloacetate)和和L-L-谷氨酸。草酸谷氨酸。草酸乙酸自行脫羧轉(zhuǎn)變成為丙酮酸。反響乙酸自行脫羧轉(zhuǎn)變成為丙酮酸。反響6060分鐘后，參與分鐘后，參與2 2，4-4-二硝二硝基苯肼終止反響，并與酮酸生反響生成兩種基苯肼終止反響，并與酮酸生反響生成兩種2 2，4-4-二硝基苯腙。二硝基苯腙。在堿性條件下在堿性條件下, ,兩種苯腙的吸收光譜曲線有差別，在兩種苯腙的吸收光譜曲線有差別，在505nm505nm處差處差別最大，由草酸乙酸轉(zhuǎn)變成的丙酮酸所生成的苯腙呈色

29、強(qiáng)度顯別最大，由草酸乙酸轉(zhuǎn)變成的丙酮酸所生成的苯腙呈色強(qiáng)度顯著大于著大于-酮戊二酸苯腙。據(jù)此可用比色法測定酮戊二酸苯腙。據(jù)此可用比色法測定ASTAST活性?；钚?。 方法評價：方法評價：賴氏法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需與卡門分光法的結(jié)果對比后求出；賴氏法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需與卡門分光法的結(jié)果對比后求出；該法的反復(fù)性差：負(fù)干擾景象該法的反復(fù)性差：負(fù)干擾景象 【參考范圍】【參考范圍】 8 82828卡門氏單位卡門氏單位 【臨床意義】【臨床意義】肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎：血清肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎：血清ASTAST也可輕度增高。也可輕度增高。 心肌梗死：血清中心肌梗死：血清中ASTAST活性增高活性增高 各種肝病病人：血

30、清各種肝病病人：血清ASTAST的升高的升高 ( (二二)ALP)ALP測定測定 n化學(xué)法化學(xué)法n延續(xù)監(jiān)測法：延續(xù)監(jiān)測法：鮑氏法鮑氏法金氏法金氏法皮氏法皮氏法、金氏法測定、金氏法測定ALPALP 原理：原理：ALPALP在堿性環(huán)境中作用于磷酸苯二鈉，使之水解釋放出酚在堿性環(huán)境中作用于磷酸苯二鈉，使之水解釋放出酚和磷酸。酚在堿性溶液中與和磷酸。酚在堿性溶液中與4 4氨基安替比林作用，經(jīng)鐵氰化氨基安替比林作用，經(jīng)鐵氰化鉀氧化構(gòu)成紅色醌類化合物，根據(jù)紅色深淺確定鉀氧化構(gòu)成紅色醌類化合物，根據(jù)紅色深淺確定ALPALP的活力。的活力。 (2) (2) 方法評價：方法評價： 磷酸苯二鈉比色法與更早的磷酸苯

31、二鈉比色法與更早的-甘油磷酸鈉法相比具有較大的甘油磷酸鈉法相比具有較大的優(yōu)點(diǎn)，如水解速度快，保溫時間較短、靈敏度較高、顯色穩(wěn)定、優(yōu)點(diǎn)，如水解速度快，保溫時間較短、靈敏度較高、顯色穩(wěn)定、不需去蛋白、操作簡單、快速。但與磷酸對硝基酚延續(xù)監(jiān)測法不需去蛋白、操作簡單、快速。但與磷酸對硝基酚延續(xù)監(jiān)測法相比，準(zhǔn)確度、精細(xì)度較低；操作比較繁瑣相比，準(zhǔn)確度、精細(xì)度較低；操作比較繁瑣, ,，靈敏度低。，靈敏度低。【參考范圍】【參考范圍】 成人：成人：3 313 13 單位單位 ，兒童：，兒童：5 52828單位單位 ALPALP金氏單位定義是金氏單位定義是100ml100ml血清，血清，3737與底物保溫與底物

32、保溫1515分鐘，產(chǎn)生分鐘，產(chǎn)生1mg1mg酚為酚為1 1個金氏單位。個金氏單位。ALPALP主要用于診斷肝膽和骨骼疾病主要用于診斷肝膽和骨骼疾病 【臨床意義】【臨床意義】 ( (三三)GGT)GGT測定法測定法 化學(xué)法重氮反響比色法和延續(xù)監(jiān)測法。化學(xué)法重氮反響比色法和延續(xù)監(jiān)測法。 1. 1. 重氮反響比色法測定重氮反響比色法測定GGTGGT原理：原理： 【參考范圍】【參考范圍】 男性男性 3 3 17 U/L17 U/L； 女性女性 2 2 13 U/L13 U/L2.2.延續(xù)監(jiān)測法測定延續(xù)監(jiān)測法測定GGTGGT(1) (1) 原理：原理： (2) (2) 方法評價：方法評價： (2) (2

33、) 方法評價：方法評價：重氮比色法活性單位：重氮比色法活性單位：100ml血清在血清在37下反響下反響1hr,生成生成0.5mol的的-苯胺為苯胺為1個個GGT活性單位。活性單位。男性：男性：111150 U/L50 U/L；( (以以-谷氨酰谷氨酰-3-3-羧基羧基-4-4-硝基苯胺為底物硝基苯胺為底物) )女性：女性：7 732 U/L 32 U/L 男性：男性： 40U/L 40U/L；女性：；女性：30U/L(30U/L(以以-谷氨酰谷氨酰-4-4-硝基苯胺為底物硝基苯胺為底物) )【參考范圍】【參考范圍】( (四四)MAO)MAO測定測定 原理原理: : MAOMAO主要作用于主要作

34、用于CH2-NH2CH2-NH2基團(tuán)，在氧參與下，氧化脫氨生成基團(tuán)，在氧參與下，氧化脫氨生成相應(yīng)的卞醛、氨及過氧化氫。以芐氨偶氮相應(yīng)的卞醛、氨及過氧化氫。以芐氨偶氮-萘酚為底物萘酚為底物, ,在在O2O2和和H20H20參與下，參與下，MAOMAO催化生成芐醛偶氮催化生成芐醛偶氮-萘酚、氨及過氧化萘酚、氨及過氧化氫，用環(huán)己烷抽提后進(jìn)展比色測定。氫，用環(huán)己烷抽提后進(jìn)展比色測定。(2) (2) 方法評價：方法評價： 【單位定義】：【單位定義】：1ml1ml血清與底物在血清與底物在3737孵育孵育6060分鐘，催化單胺氧化產(chǎn)生分鐘，催化單胺氧化產(chǎn)生1nmol1nmol芐醛偶氮芐醛偶氮-萘萘酚為酚為1

35、 1 個個MAOMAO單位。單位。【參考范圍】【參考范圍】 12 1240 U/ml (1240 U/ml (121031034040103 U/L)103 U/L)?！九R床意義】：肝硬化時，肝纖維化景象非常活潑，【臨床意義】：肝硬化時，肝纖維化景象非?；顫?，MAOMAO活性明顯升高?；钚悦黠@升高。 三、血清膽紅素測定三、血清膽紅素測定重氮鹽法重氮鹽法膽紅素氧化酶膽紅素氧化酶(bilirubin oxidase,BOD)(bilirubin oxidase,BOD)法法高效液相色譜法高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)(hig

36、h performance liquid chromatography,HPLC)、導(dǎo)數(shù)分光光度法導(dǎo)數(shù)分光光度法直接分光光度計法直接分光光度計法 測測定定方方法法1 1重氮鹽改良重氮鹽改良J-G(Jendrassik and Grof method,J-G)J-G(Jendrassik and Grof method,J-G)法法(1) (1) 原理原理: : 血清中結(jié)合膽紅素與重氮鹽反響生成偶氮膽紅素；同樣條件下，游離膽紅素血清中結(jié)合膽紅素與重氮鹽反響生成偶氮膽紅素；同樣條件下，游離膽紅素需求在加速劑作用下，使游離膽紅素分子內(nèi)的次級鍵斷裂，極性上升并與重氮試需求在加速劑作用下，使游離膽紅素分

37、子內(nèi)的次級鍵斷裂，極性上升并與重氮試劑反響。反響完成后參與終止試劑，繼而參與堿性酒石酸鉀鈉使紫色偶氮試劑轉(zhuǎn)劑反響。反響完成后參與終止試劑，繼而參與堿性酒石酸鉀鈉使紫色偶氮試劑轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色，波長變?yōu)樗{(lán)色，波長600nm600nm下比色分析，求出血樣中總膽紅素的含量。下比色分析，求出血樣中總膽紅素的含量。 (2) (2) 方法評價：方法評價： 引薦的常規(guī)方法，其方法的線性范圍較寬，在引薦的常規(guī)方法，其方法的線性范圍較寬，在342342mol/L(200mg/L)mol/L(200mg/L)濃度濃度下有較好的準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性，高濃度時準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性降低。因此，建議濃度過下有較好的準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性，高濃度時

38、準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性降低。因此，建議濃度過高時減少血樣用量測定。高時減少血樣用量測定。 【臨床意義】【臨床意義】 【參考范圍】【參考范圍】 黃疸的鑒別診斷黃疸的鑒別診斷 總膽紅素總膽紅素: 5.1: 5.119.0mol/L(0.319.0mol/L(0.31.1mg/dL)1.1mg/dL) 直接膽紅素直接膽紅素: 1.71: 1.716.8mol/L (0.16.8mol/L (0.10.4mg/dL)0.4mg/dL)2 2膽紅素膽紅素BODBOD測定法測定法(1) (1) 原理原理: : BOD BOD在不同在不同pHpH條件下催化不同組份的膽紅素氧化生成膽綠素，條件下催化不同組份的膽紅素氧

39、化生成膽綠素，膽綠素與氧進(jìn)展非酶促反響轉(zhuǎn)變?yōu)榈仙衔?，膽紅素的最大膽綠素與氧進(jìn)展非酶促反響轉(zhuǎn)變?yōu)榈仙衔铮懠t素的最大吸收峰在吸收峰在450nm 450nm 附近。隨著膽紅素被氧化附近。隨著膽紅素被氧化,450nm,450nm下降，下降程度下降，下降程度與膽紅素濃度成正比。；在與膽紅素濃度成正比。；在pH8.0pH8.0條件下條件下, ,未結(jié)合膽紅素及結(jié)合膽未結(jié)合膽紅素及結(jié)合膽紅素均被氧化，用于測定總膽紅素紅素均被氧化，用于測定總膽紅素, ,在在pH=4.5pH=4.5的酸性條件下，的酸性條件下，BODBOD僅能催化結(jié)合膽紅素和大部分僅能催化結(jié)合膽紅素和大部分膽紅素，而游離膽紅素不被氧

40、化，膽紅素，而游離膽紅素不被氧化，測定其含量代表結(jié)合膽紅素。測定其含量代表結(jié)合膽紅素。(2) (2) 方法評價：方法評價： BODBOD法測定總膽紅素的準(zhǔn)確性、精細(xì)度比改良法測定總膽紅素的準(zhǔn)確性、精細(xì)度比改良J-GJ-G法好法好 【參考范圍】【參考范圍】血清總膽紅素：血清總膽紅素： 10.26 10.264.104.10mol/L mol/L 血清結(jié)合膽紅素：血清結(jié)合膽紅素： 2.57 2.572.56 2.56 mol/L mol/L 膽紅素膽紅素mol/L =mol/L =膽紅素膽紅素mg/L X 17.1mg/L X 17.1【臨床意義】【臨床意義】見重氮比色法見重氮比色法四、血清膽汁酸

41、測定四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法高效液相色譜法放射免疫分析法放射免疫分析法酶免疫分析法酶免疫分析法比色分析測定法比色分析測定法 測測定定方方法法(1) (1) 酶比色法測定原理酶比色法測定原理 3-HSD3-HSD膽汁酸膽汁酸 + NAD+ 3- + NAD+ 3-氧氧-5-5類固醇類固醇+ NADH + NADH 1 1 NADH + NBT NADH + NBT 甲甲jiejie藍(lán)色化合物藍(lán)色化合物 =540nm =540nm 2 2 3-3-氧氧-5-5類固醇類固醇 + NAD+ 3- + NAD+ 3-氧氧-5-5類固醇類固醇 + NADH + NADH 3 3黃遞酶黃遞酶4-DH

42、4-DHu酶比色法酶比色法 由于膽汁酸在血中含量低，方法檢測的靈敏度達(dá)不到要求，經(jīng)過添加由于膽汁酸在血中含量低，方法檢測的靈敏度達(dá)不到要求，經(jīng)過添加3-3-氧氧-5-5-類固醇脫氫酶類固醇脫氫酶( (4-DH)4-DH)，膽汁酸經(jīng)，膽汁酸經(jīng)3-HSD3-HSD催化的產(chǎn)物催化的產(chǎn)物3-3-氧代膽酸在氧代膽酸在4-DH4-DH作用下再作用下再次脫氫，加大了次脫氫，加大了NADHNADH的生成量，提高了反響的檢測才干見反響式的生成量，提高了反響的檢測才干見反響式1 1、2 2、3 3。但。但以上兩種方法都存在一個缺陷：生成的藍(lán)色產(chǎn)物是一種染料，易于附著管壁，難于清以上兩種方法都存在一個缺陷：生成的藍(lán)

43、色產(chǎn)物是一種染料，易于附著管壁，難于清洗或堵塞管道。洗或堵塞管道。酶循環(huán)法測定原理為：酶循環(huán)法測定原理為：NAD+NAD+ Thio-NAD Thio-NAD Thio-NADH Thio-NADH 膽汁酸膽汁酸3-3-氧代膽汁酸氧代膽汁酸NADHNADH3-HSD(2) (2) 酶比色測定法評價：酶比色測定法評價： 快速、簡便、準(zhǔn)確、可靠和適用的優(yōu)點(diǎn)。它即可以手工操作快速、簡便、準(zhǔn)確、可靠和適用的優(yōu)點(diǎn)。它即可以手工操作、也可以在自動化儀器上進(jìn)展。但試劑價貴、不易堅(jiān)持。對酶量、也可以在自動化儀器上進(jìn)展。但試劑價貴、不易堅(jiān)持。對酶量的要求嚴(yán)厲，以保證酶促反響在零級反響下進(jìn)展，酶量缺乏易產(chǎn)的要求嚴(yán)

44、厲，以保證酶促反響在零級反響下進(jìn)展，酶量缺乏易產(chǎn)生誤差。此外，規(guī)范品的制備非常重要。常采用甘氨膽酸溶入小生誤差。此外，規(guī)范品的制備非常重要。常采用甘氨膽酸溶入小牛血清中制成凍干品。牛血清中制成凍干品。 【參考范圍】【參考范圍】 1 1 7 7 mol/Lmol/L( (成人空腹血清總膽汁酸成人空腹血清總膽汁酸) )【臨床意義】【臨床意義】 任何引起肝細(xì)胞損傷的病理過程都能夠引起血中膽汁酸升高任何引起肝細(xì)胞損傷的病理過程都能夠引起血中膽汁酸升高可見于各種類型的肝病、肝硬化、脂肪肝，也見于急慢性膽道阻可見于各種類型的肝病、肝硬化、脂肪肝，也見于急慢性膽道阻塞。其中空腹膽汁酸測定是一種敏感、特異性強(qiáng)并相對簡單的肝塞。其中空腹膽汁酸測定是一種敏感、特異性強(qiáng)并相對簡單的肝功能實(shí)驗(yàn)，是目前公認(rèn)最敏感的肝功能實(shí)驗(yàn)之一。特別適用于可功能實(shí)驗(yàn)，是目前公認(rèn)最敏感的肝功能實(shí)驗(yàn)之一。特別適用于可疑有肝病但其它生