山臘梅葉的黃酮及生物堿成分的薄層色譜鑒別

1、 山臘梅葉的黃酮及生物堿成分的薄層色譜鑒別 中文摘要一、目的 探討山臘梅葉的黃酮及生物堿成分的鑒別方法。二、方法 應(yīng)用薄層色譜法鑒別山臘梅葉的黃酮及生物堿成分，黃酮采用 =3%AlCl3 ( 乙醇) 溶液顯色, 生物堿采用稀碘化鉍鉀試液顯色。三、結(jié)果 供試品藥材藥材溶液與對照品藥材溶液的黃酮和生物堿成分在同一薄層板上有相同的點。四、結(jié)論 以薄層色譜方法鑒別山臘梅黃酮和生物堿成分的分離效果較好 , 且專屬性較強 ,對具體成分的提取分離有一定的參考意義。五、關(guān)鍵詞 山臘梅; 黃酮; 生物堿; 薄層色譜 ABSTRACTPurpose:To investigate the method of ide

2、ntifying chimonanthus leaves flavonoids and alkaloids.Methods:flavonoids and alkaloids application identified by TLC chimonanthus leaves, flavonoids using = 3% AlCl3 (ethanol) solution color, alkaloids with thin bismuth potassium iodide test solution color.Result:The test solution and reference medi

3、cinal herbs medicinal solution of flavonoids and alkaloids in the same plate with the same points.Conclusion:TLC method to identify the chimonanthus flavonoids and alkaloids isolated better,specificity and strong.Extraction separation of specific ingredients have some reference value. Key words:Chim

4、onanthus; flavonoids; alkaloids; TLC. 前言 山臘梅葉為臘梅科臘梅屬植物山臘梅（Chimonanthus nitens Oliv）的葉，又稱之為毛山茶、巖馬桑，亮葉臘梅、香風(fēng)茶、野臘梅1。民間使用歷史悠久，常用葉泡茶飲以防治感冒。 據(jù)記載，山臘梅還具有解表祛風(fēng)，清熱解毒；預(yù)防感冒，流行性感冒，中暑；治慢性氣管炎，胸悶的功能主治2。山臘梅葉中含有豐富的揮發(fā)油、黃酮類及生物堿類物質(zhì)3.4。對山臘梅的成分鑒別，文獻主要介紹了性狀鑒別、顯微鑒別及揮發(fā)油成分的鑒別5，本實驗運用傳統(tǒng)的薄層色譜法對山臘梅中的黃酮類及生物堿類成分進行鑒別。 正文1、 儀器及試劑1.1儀器圓

5、底燒瓶，冷凝管，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，20 cm× 10 cm 雙槽展開缸，1.2試劑95%乙醇溶液、乙酸乙酯、氯仿、濃氨水、石油醚、甲酸、苯、甲醇試劑，薄層層析硅膠G( 化學(xué)純) ,羧甲基纖維素鈉。2、 供試品及對照藥材2.1供試品 山臘梅，采摘自江西省上饒市婺源縣，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)藥中藥化學(xué)學(xué)科組舒老師鑒定為蠟梅科臘梅屬植物山臘梅（Chimonanthus）葉子。2.2對照品 對照品山臘梅干燥葉由藥房提供。3、實驗方法與結(jié)果3.1硅膠GF254薄層板的制作6 取一定量的羧甲基纖維素鈉分析純試劑，加入到定量的蒸餾水中，邊加熱邊溶解，配制成 = 0. 3 %羧甲基纖維素鈉溶液。將配制好的羧甲基

6、纖維素鈉溶液加入到盛有硅膠GF254的研缽中，順時針研磨至無氣泡。取出干燥潔凈的玻璃板，將上述硅膠液鋪在玻璃板上，盡量鋪得薄而均勻平整，晾干，放入烘箱在105溫度下活化三十分鐘待用。3.2山臘梅葉的黃酮成分的薄層色譜鑒別73.2.1黃酮成分的提取 取新鮮山臘梅葉15g，剪碎，置圓底燒瓶中，加入95%乙醇溶液，用量以沒過藥材表面為準(zhǔn)。加熱回流一小時，濾過，殘渣再加等量95%乙醇溶液，加熱回流一小時，合并濾液，置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中旋干，殘渣用蒸餾水溶解，抽濾濾過，濾液用乙酸乙酯提取兩次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，置水浴鍋上蒸干，殘渣加甲醇2ml，使其完全溶解，作為供試品溶液。另取山臘梅對照藥材5g，

7、用同法制成對照藥材溶液。3.2.2黃酮成分的薄層鑒別8 照薄層色譜法( 中國藥典2010 版一部附錄VB) 試驗,取供試品溶液和對照藥材溶液各10µl分別點于同一以 = 0. 3 % 羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 GF254 薄層板上, 以 （石油醚 乙酸乙酯 甲酸)= ( 5.5 3.5 0.1) 為展開劑,展開 ,取出, 晾干, 噴以 = 3%AlCl 3 ( 乙醇) 溶液9，105 加熱約 5min ,置紫外光燈( 365 nm) 下檢視 ,供試品色譜中, 在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上 ,顯相同顏色的熒光斑點 。3.3山臘梅葉的生物堿成分薄層色譜鑒別3.3.1生物堿成分的提取1

8、0 取新鮮山臘梅葉15g，剪碎，置圓底燒瓶中，加入濃氨水溶液725ml，密塞 ,搖勻 ,放置三十分鐘，加入氯仿溶液,用量以沒過藥材表面為準(zhǔn)， 加熱回流兩小時,濾過，殘渣再加入等量的氯仿溶液，加熱回流兩小時，合并濾液，放冷 ,分取氯仿液 （下層）,藥渣再用氯仿適量洗滌,合并氯仿液 ,用無水硫酸鈉脫水, 置水浴上蒸至約2ml，作為供試品。另取山臘梅對照藥材5g，用同法制成對照藥材溶液。3.3.2生物堿成分的薄層鑒別 照薄層色譜法( 中國藥典 2010 版一部附錄VB) 試驗 ,吸取上述兩種溶液各 10µl , 分別點于同一以 =3%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF 254 薄層板上 ,以

9、 ( 苯 乙酸乙酯 甲醇) = ( 4 3 1) 為展開劑 , 另槽用等量的濃氨溶液預(yù)平衡 15 min, 展開 ,取出 ,晾干 。噴以稀碘化鉍鉀試液,供試品色譜中, 在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上, 顯相同顏色的斑點 。4、結(jié)果與討論4.1黃酮成分的薄層圖如下 1 2 3 41、2、3、為供試品 4為對照品 圖中顯示有七個顯色點，比移值分別為：Rf1=0.2 Rf2=0.4 Rf3=0.53 Rf4=0.67 Rf5=0.73 Rf6=0.83 Rf7=14.2生物堿成分的薄層圖如下1 2 3 41、2、3為供試品 4為對照品圖中顯示有五個顯色點，比移值分別為：Rf1=0.096 Rf2=0.

10、151 Rf3=0.205 Rf4=0.260 Rf5=0.3014.3討論薄層色譜法鑒別化學(xué)成分的關(guān)鍵在于硅膠板的制作和展開劑的選擇11，本實驗鑒別黃酮和生物堿兩種成分時所用的薄層板略有不同，鑒別生物堿類成分用的薄層板在制作時加入了一定量的濃氨溶液，以減少拖尾，使顯示出的點更圓，而鑒別黃酮成分時不需要加入。關(guān)于展開劑的選擇，黃酮成分的鑒別首先嘗試了文獻中提得較多的氯仿與甲醇的各種比例，但分離效果不理想，接著嘗試了石油醚與甲酸等等一系列的組合，最終找到石油醚：乙酸乙酯：甲酸=5.5:3.5:0.1系統(tǒng)，對于分離山臘梅黃酮成分效果比較理想。生物堿成分的鑒別首先嘗試了氯仿與丙酮的各種比例，接著嘗試

11、了甲苯與氯仿等等一系列的組合，由于時間關(guān)系，目前找到的最理想的組合是苯：乙酸乙酯：甲醇=4:3:1，在此系統(tǒng)條件下能得到五個比較清楚的點，但比移值比較小，還有待改進。 參考文獻1中國藥典2010版一部.2全國中草藥匯編第三版.3 舒任庚,李莎莎,胡浩武. 山蠟梅化學(xué)成分研究J.中國藥學(xué)雜志,2010,(15):1134-1135.4張尊敬，劉忠達. 山臘梅的成分及藥理作用研究近況. 浙江中醫(yī)藥雜志2009年11月第44卷第11期.5 徐年軍,白海波,嚴(yán)小軍. 山臘梅中揮發(fā)油成分分析J.分析測試學(xué)報,2006,(01):90-93.doi:10.3969/j.issn.1004-4957.2006.01.0246中國藥典2010版一部附錄VB.7 羅勇慧.廣金錢草黃酮和生物堿成分薄層色譜鑒別的研究.廣東藥學(xué)院學(xué)報2004年12月第20卷第6期.8李廣，王清光，王義明，羅國